| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
LSD1 (histone demethylase)/MAO-B
Vafidemstat targets lysine-specific histone demethylase 1 (LSD1, KDM1A) and monoamine oxidase B (MAO-B). LSD1 is a histone demethylase that removes methyl groups from histone H3 lysine 4 (H3K4) and lysine 9 (H3K9), thereby regulating gene expression. MAO-B is a mitochondrial enzyme that degrades monoamines such as dopamine and phenylethylamine. By inhibiting LSD1, Vafidemstat modulates epigenetic regulation of gene expression, potentially restoring normal gene expression patterns in neurodegenerative diseases. By inhibiting MAO-B, it increases dopamine levels in the brain, which may have neuroprotective effects. Vafidemstat has IC50 values of 105 nM for LSD1 and 58 nM for MAO-B. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
Vafidemstat (ORY-2001) 是一种用于治疗神经退行性疾病的新型表观遗传药物。它是一种 LSD1/MAO-B 双重抑制剂。LSD1 是一种参与转录调控复合物的蛋白质，其调控可用于纠正神经炎症、认知功能障碍以及神经退行性疾病中的转录异常[1]。Vafidemstat (ORY-2001) 可用于治疗阿尔茨海默病[2]。体外实验表明，Vafidemstat 是 LSD1 (IC50 = 105 nM) 和 MAO-B (IC50 = 58 nM) 的强效抑制剂。该化合物的双重抑制活性已通过使用纯化的 LSD1 和 MAO-B 的酶活性测定得到证实。此外，还评估了其对 LSD1 和 MAO-B 相对于其他组蛋白去甲基化酶和单胺氧化酶的选择性。 Vafidemstat 是 LSD1 和 MAO-B 的不可逆抑制剂。
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| 体内研究 (In Vivo) |
本研究探讨了ORY-2001对免疫介导和病毒诱导的脑脊髓炎（两种多发性硬化症和神经元损伤的实验模型）的影响。口服ORY-2001可改善临床症状，减少淋巴细胞外流和免疫细胞浸润脊髓，并预防脱髓鞘。值得注意的是，在疾病的效应期，ORY-2001比鞘氨醇-1-磷酸受体拮抗剂更有效和/或起效更快，并且能更有效地降低小鼠中枢神经系统中EAE特有的炎症基因表达谱。此外，ORY-2001诱导了与脑和脊髓中潜在的神经保护功能相一致的基因表达变化，并减少了外植体中神经元谷氨酸兴奋性毒性引起的损伤。这些结果表明 ORY-2001 是一种有前景的中枢神经系统表观遗传药物，能够靶向治疗神经炎症和神经退行性疾病，并为后续早期临床试验的设计提供了临床前支持。https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC9323733/
在这项研究中，研究人员探索了潜在的治疗药物，并证实赖氨酸特异性组蛋白去甲基化酶 1 (LSD1) 抑制剂 vafidemstat (ORY-2001) 在其他神经精神/神经发育障碍模型中有效，能够改善成年 Kmt2c+/fs 小鼠的社交障碍，但不能改善其工作记忆。有趣的是，给予vafidemstat后，绝大多数差异表达基因（DEGs）的表达均发生改变，从而使突变小鼠的转录组异常恢复正常（显著上调和下调的DEGs分别占94.3%和82.5%，P < 2.2 × 10⁻¹⁶，二项式检验），这可能是行为改善的分子机制。总之，我们的研究扩展了具有高病因学和表面效度的自闭症谱系障碍（ASD）模型，阐明了Kmt2c单倍体不足导致的细胞类型特异性分子改变，并证实了LSD1抑制剂的疗效，该抑制剂可能适用于多种精神疾病，同时加深了我们对该抑制剂作用机制的理解。 https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC11420081/ 在体内，Vafidemstat 已在包括阿尔茨海默病和多发性硬化症在内的神经退行性疾病的临床前模型中进行了评估。其良好的脑渗透性和口服生物利用度使其适用于中枢神经系统应用。Vafidemstat 已在神经退行性疾病和神经炎症的实验模型中显示出疗效。目前已开展临床试验以评估其在人体中的安全性和有效性。 |
| 酶活实验 |
采用荧光法测定HDAC2活性。将化合物溶解于DMSO中，并进行系列稀释，然后用HDAC测定缓冲液（BPS）进一步稀释。将这些工作液一式两份，在室温下与含有HDAC测定缓冲液、BSA和重组HDAC2（BPS）的混合物孵育3小时。加入荧光标记的乙酰化肽底物（BPS）启动酶促反应，并在37℃下进行30分钟。然后加入HDAC显色剂（BPS），并在室温下继续孵育后，使用Tecan Infinite M1000微孔板读数仪在360 nm激发波长和460 nm发射波长下测量荧光强度。以曲古抑菌素A（TSA）作为参考抑制剂。 https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC9323733/
Vafidemstat 的体外酶/受体结合（非细胞）测定包括使用纯化酶测量其对 LSD1 和 MAO-B 的抑制活性。LSD1 活性测定使用组蛋白 H3 肽底物和不同浓度的 Vafidemstat。MAO-B 活性测定使用单胺底物（例如，犬尿胺或苄胺）并定量氧化产物的生成。IC50 值由抑制曲线计算得出。 |
| 细胞实验 |
SH-SY5Y细胞接种24小时后，分别用SAHA、芬戈莫德（FTY720）、芬戈莫德磷酸盐（FTY720-P）和ORY-2001处理。处理2小时和6小时后，收集细胞，室温下以250×g离心4分钟，收集细胞沉淀，使用EpiQuik总组蛋白提取试剂盒，按照制造商说明书提取总组蛋白。https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC9323733/
体外细胞实验中，使用神经元细胞系或原代神经元进行Vafidemstat的检测。用不同浓度的Vafidemstat处理细胞，并通过Western blot检测组蛋白甲基化水平（例如H3K4me1、H3K4me2）以确认LSD1抑制。在细胞裂解液中检测MAO-B活性。基因表达变化通过 qRT-PCR 或 RNA-seq 进行评估。 |
| 动物实验 |
Vafidemstat 的制备和给药 [https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC11420081/] 在 LSD1 抑制剂的药理学实验中，我们使用了 Vafidemstat（也称为 ORY-2001）。将 Vafidemstat 溶解于二甲基亚砜 (DMSO) 中，配制成浓度为 50 mg/mL 的储备液。储备液储存于 -80 °C 直至使用。Vafidemstat 的给药方式参照先前报道 [22] 通过饮用水给药。实验前，我们测量小鼠平均每日饮水量为 5 mL。假设小鼠体重为 35 g，我们计算了饮用水中的最终浓度。为了使小鼠每日通过饮用水摄入 0.96 mg/kg 的 Vafidemstat，将储备液用水稀释至 6.72 μg/mL。每周更换一次饮用水。在行为学测试前，每组15只雄性小鼠连续4周接受Vafidemstat治疗。
实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型的诱导和治疗[https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC9323733/] 治疗方法为：在疾病发作后（免疫后第12天），通过灌胃给予ORY-2001（1、0.5和0.05 mg/kg）、ORY-LSD1（0.18、0.09和0.06 mg/kg）、FTY720（1 mg/kg）或雷沙吉兰（3 mg/kg）。ORY-2001和ORY-LSD1的剂量范围取决于它们各自在体内抑制KDM1A的相对效力。用于小鼠体内治疗的雷沙吉兰剂量足以完全抑制MAO-B，并能完全保护小鼠免受1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）损伤。MPTP是一种前药，在体内经MAO-B转化为神经毒素1-甲基-4-苯基吡啶鎓（MPP+）。选择的芬戈莫德 (FTY720) 剂量是先前报道的疗效研究中使用的最高剂量，并在小鼠 EAE 模型中提供了完全疗效。 泰勒鼠脑脊髓炎病毒 (TMEV) 模型的诱导和治疗[https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC9323733/] 将先前用异氟烷麻醉的易感 SJL/J 小鼠（6 周龄）接种 2 × 10⁶ 噬斑形成单位 (pfu) 的丹尼尔株 TMEV，该病毒稀释于 30 μL 添加了 5% 胎牛血清 (FBS) 的 Dulbecco 改良 Eagle 培养基 (DMEM) 中。注射部位为大脑皮层右侧半球，使用连接移液器吸头的汉密尔顿注射器，针头露出深度约为2-3毫米；因此，病毒始终注射到相同的深度。假手术组动物采用相同的实验方案，但仅注射30微升添加了5%胎牛血清的DMEM培养基。治疗组动物从出现临床症状（感染后第72天）开始，每天灌胃给予ORY-2001，剂量分别为0.3和1.0毫克/千克，连续给药5天，从感染后第72天至第76天以及第79天至第83天。对照组小鼠按照相同的给药方案接受载体[2% v/v Tween-80 + 98% HPβCD (13% w/v)]处理（图 4a）。 Vafidemstat 的体内动物实验在阿尔茨海默病、多发性硬化症和其他神经退行性疾病的动物模型中进行。Vafidemstat 采用口服给药，并评估认知功能、运动功能、神经炎症和神经退行性变。此外，也已开展了人体临床试验。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
吸收：Vafidemstat 是一种口服生物利用度高的化合物，口服后可迅速被人体吸收。暴露：口服后，暴露量与剂量大致成正比。连续每日给药 5 天后，有证据表明存在中等程度的全身蓄积。分布：Vafidemstat 旨在穿过血脑屏障。一项脑脊液 (CSF) 子研究证实了这一点，结果显示脑脊液中游离药物与血浆中游离药物的比值表明其能够穿透中枢神经系统。代谢：I 期研究对其药代动力学特征进行了表征，但提供的摘要中未详细说明具体的代谢途径或涉及的酶。研究证实，Vafidemstat 以剂量依赖的方式与外周血单核细胞 (PBMC) 中的靶点 KDM1A 结合。排泄：搜索结果中未提供有关排泄途径的信息。
Vafidemstat 具有良好的口服生物利用度和脑穿透性。该化合物分子量约为400 Da，具有适宜的亲脂性，能够穿透血脑屏障进入中枢神经系统。临床前和临床研究已提供了详细的药代动力学参数，包括Cmax、Tmax、AUC和半衰期。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
总体耐受性：Vafidemstat 在临床试验中始终表现出良好的安全性和耐受性，无论是在健康志愿者（I 期）还是精神疾病患者（IIa 期）中。最大推荐起始剂量 (MRSD)：基于最敏感的临床前动物模型（大鼠）中未观察到不良反应剂量 (NOAEL) 为 0.2 mg/kg，计算得出人体试验的 MRSD 为 0.2 mg。不良事件 (AE)：在 I 期试验中，所有剂量组均报告了不良事件，但这些不良事件与剂量无关，且与安慰剂组相比，发生频率无显著差异。剂量递增期间未报告严重不良事件 (SAE)。实验室参数：剂量递增期间，生化参数、尿液分析、生命体征和心电图均未发生显著变化。唯一值得注意的发现是血小板计数短暂下降，该现象是在专门用于监测 KDM1A 抑制靶向作用的额外剂量水平下观察到的。 IIa期验证：在REIMAGINE IIa期篮式试验（1.2 mg/天，持续8周）中，再次证实vafidemstat安全且耐受性良好，未观察到具有临床意义的不良事件。
已开展临床前和临床毒理学研究以评估vafidemstat的安全性。该化合物在治疗剂量下通常耐受性良好。临床试验已评估vafidemstat在神经退行性疾病患者中的安全性和耐受性。其安全性支持继续开发用于中枢神经系统适应症。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Vafidemstat 正在临床试验 NCT03867253 中进行研究（该试验旨在测试新型药物 ORY-2001 在轻度至中度阿尔茨海默病中的安全性和初步疗效）。作用机制：Vafidemstat 是一种小分子不可逆组蛋白去甲基化酶 LSD1 抑制剂，也是 LSD1/MAO-B 的双重抑制剂。Vafidemstat (ORY-2001) 是一种新型的 LSD1 和 MAO-B 双重抑制剂，是一种用于治疗神经退行性疾病的表观遗传学候选药物。它是该公司第二个进入临床试验的化合物。临床前研究表明，Vafidemstat 具有显著的治疗活性，能够恢复 SAMP-8 小鼠（一种加速衰老和阿尔茨海默病模型）和其他疾病模型的记忆力并改善其他指标。LSD1 是转录调控复合物的关键组成部分，对其进行调控可用于纠正转录失衡、减少神经炎症并缓解与神经退行性疾病相关的认知障碍。这项在巴塞罗那圣保罗医院药物研究中心开展的I期临床研究旨在评估Vafidemstat的安全性、耐受性、药代动力学和药效学。研究计划中的单剂量和多次剂量递增部分均已成功完成。结果显示，口服Vafidemstat耐受性良好，实验室参数、生命体征、心电图、体格检查结果以及治疗相关不良事件均未出现具有临床意义的改变。由于尚未达到最大耐受剂量，经西班牙药品和健康产品管理局批准，该公司决定增加一个接受更高剂量的队列，并建立一个独立的队列来测量脑脊液中的药物浓度，以确认药物在人体内的血脑屏障穿透性。这些新的队列目前正在进行中。使用该公司专有的检测方法对周围LSD1靶点结合进行药效学评估，结果显示结合呈时间和剂量依赖性，这与药代动力学数据高度一致。 I期研究已生成全面的数据，可用于构建人体与临床前动物模型之间的剂量反应模型，并支持制定针对神经退行性疾病和神经炎症患者的长期II期疗效研究的安全给药方案。公司计划于2017年下半年提交相应的临床试验申请。Oryzon首席医疗官César Molinero博士评论道：“研究结果符合我们的预期，对于确定即将开展的II期试验的剂量至关重要。尽管存在物种差异，但我们观察到首次人体试验数据与临床前数据之间存在极佳的相关性，我们很高兴能够推进Vafidemstat的临床开发。”副总裁兼首席科学官塔玛拉·梅茨博士补充道：“神经退行性疾病具有显著的表观遗传学成分，而Vafidemstat在多种临床前模型中均展现出巨大的潜力。公司近期宣布的增资也为启动II期临床试验提供了必要的资源，并使公司在该领域占据领先地位。”
Vafidemstat又名ORY-2001，是一种正在开发用于治疗神经退行性疾病的双重LSD1/MAO-B抑制剂。其双重作用机制——调节表观遗传调控和提高多巴胺水平——为神经保护和疾病改善提供了一种独特的方法。该化合物目前仍处于研究阶段，尚未获准用于临床。 |
| 分子式 |
C19H20N4O2
|
|---|---|
| 分子量 |
336.387703895569
|
| 精确质量 |
336.158
|
| 元素分析 |
C, 67.84; H, 5.99; N, 16.66; O, 9.51
|
| CAS号 |
1357362-02-7
|
| PubChem CID |
66714983
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| LogP |
2.2
|
| tPSA |
86.2
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
7
|
| 重原子数目 |
25
|
| 分子复杂度/Complexity |
410
|
| 定义原子立体中心数目 |
2
|
| SMILES |
O1C(N)=NN=C1CN[C@@H]1C[C@H]1C1C=CC(=CC=1)OCC1C=CC=CC=1
|
| InChi Key |
XBBRLCXCBCZIOI-DLBZAZTESA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C19H20N4O2/c20-19-23-22-18(25-19)11-21-17-10-16(17)14-6-8-15(9-7-14)24-12-13-4-2-1-3-5-13/h1-9,16-17,21H,10-12H2,(H2,20,23)/t16-,17+/m0/s1
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| 化学名 |
5-((((1R,2S)-2-(4-(benzyloxy)phenyl)cyclopropyl)amino)methyl)-1,3,4-oxadiazol-2-amine
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| 别名 |
ORY 2001; ORY-2001; Vafidemstat; 1357362-02-7; ORY-2001; Vafidemstat [INN]; LZ82JLT4UP; UNII-LZ82JLT4UP; 1,3,4-Oxadiazole-2-methanamine, 5-amino-N-((1R,2S)-2-(4-(phenylmethoxy)phenyl)cyclopropyl)-; 5-[[[(1R,2S)-2-(4-phenylmethoxyphenyl)cyclopropyl]amino]methyl]-1,3,4-oxadiazol-2-amine; ORY2001; Vafidemstat
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~50 mg/mL (~148.64 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 5 mg/mL (14.86 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 50.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 5 mg/mL (14.86 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 50.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 5 mg/mL (14.86 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9727 mL | 14.8637 mL | 29.7274 mL | |
| 5 mM | 0.5945 mL | 2.9727 mL | 5.9455 mL | |
| 10 mM | 0.2973 mL | 1.4864 mL | 2.9727 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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