SRMS (IC50 = 18 nM); ACK1 (IC50 = 19 nM); B-Raf (V600E) (IC50 = 48 nM); MAP4K5 (KHS1) (IC50 = 51 nM); C-Raf (IC50 = 48 nM)
Vemurafenib (PLX4032; RG7204; RO5185426) is a selective inhibitor of the mutant BRAF kinase (BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ). In recombinant human BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ kinase assays, it exhibits an IC₅₀ of 31 nM; it has minimal activity against wild-type BRAF (IC₅₀ > 10 μM) and other kinases (e.g., CRAF, IC₅₀ = 480 nM) [2]
- Vemurafenib (PLX4032; RG7204; RO5185426) does not significantly inhibit EGFR (IC₅₀ > 10 μM) or MEK1 (IC₅₀ > 5 μM) kinases, confirming its specificity for BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ [3]

Vemurafenib (PLX4032) 特异性抑制 BRAF 突变细胞中的 RAF/MEK/ERK 通路[1]。在 17 种黑色素瘤细胞系中，RG7204 是表达 RAFV600E 但不表达 BRAFWT 的细胞增殖的有效抑制剂。高浓度的维莫非尼 (RG7204) 会导致 CHL-1 细胞中 MEK 和 ERK 磷酸化[2]。对 PLX4032 的耐药性可能是由异位表达的黑色素瘤细胞中 EGFR 的表达引起的[3]。

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BRAF（V600E）突变在几种人类癌症中很常见，尤其是黑色素瘤。RG7204（PLX4032）是一种BRAF（V600E）激酶活性的小分子抑制剂，目前正处于II期和III期临床试验中。在这里，我们使用已建立的恶性黑色素瘤体外和体内模型报告了RG7204抗肿瘤活性的临床前特征。RG7204能有效抑制一组肿瘤细胞系的增殖和丝裂原活化蛋白/细胞外信号调节激酶（ERK）激酶和ERK磷酸化，包括表达BRAF（V600E）或密码子600处改变的其他突变BRAF蛋白的黑色素瘤细胞系[2]。

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BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ黑色素瘤细胞增殖抑制：在人BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ阳性黑色素瘤细胞系（A375、SK-MEL-28）中，Vemurafenib (PLX4032; RG7204; RO5185426)（0.01-10 μM）可浓度依赖性抑制细胞增殖：0.1 μM使A375细胞活力降低50%（IC₅₀=0.03 μM），1 μM时抑制率达90%。该效应伴随下游MAPK通路标志物ERK1/2磷酸化（p-ERK）水平在0.1 μM时降低80%（Western blot检测） [2]
- 结肠癌细胞耐药性：在人BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ阳性结肠癌细胞系（SW620、HT-29）中，Vemurafenib (PLX4032; RG7204; RO5185426)（0.1-10 μM）抗增殖活性微弱：10 μM仅使SW620细胞活力降低30%（A375细胞中为90%）。这种耐药性由EGFR反馈激活介导，合用EGFR抑制剂厄洛替尼（1 μM）可恢复敏感性（10 μM维莫非尼处理下活力降低70%） [3]
- 甲状腺癌细胞增敏作用：在人BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ阳性乳头状甲状腺癌细胞（K1）中，Vemurafenib (PLX4032; RG7204; RO5185426)（0.1-5 μM）抑制增殖（IC₅₀=0.2 μM）并诱导轻度凋亡（1 μM时15%）。与自噬抑制剂氯喹（10 μM）联用可将凋亡率提升至45%，克隆形成抑制率从单独用药的30%增至80% [5]

Vemurafenib (PLX4032, 20, 25, 75 mg/kg, po) 以剂量依赖性方式抑制肿瘤生长，较高的暴露量会导致携带 BRAF 突变的异种移植物中的肿瘤消退[1]。在携带 LOX 肿瘤异种移植物的小鼠中，RG7204（12.5、25 和 75 mg/kg，口服）显着抑制肿瘤生长并导致肿瘤消退[2]。
在表达BRAF（V600E）的黑色素瘤的几种肿瘤异种移植物模型中，研究人员发现，RG7204治疗以剂量依赖的方式导致部分或完全的肿瘤消退，并提高了动物存活率。在所测试的任何体内模型中，任何剂量组均未观察到毒性。

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黑色素瘤异种移植模型：在荷A375 BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ黑色素瘤异种移植瘤的裸鼠中，口服Vemurafenib (PLX4032; RG7204; RO5185426)（100、200、300 mg/kg/天，每日两次）可剂量依赖性抑制肿瘤生长：300 mg/kg在第21天较溶媒组使肿瘤体积减少85%，60%的小鼠出现肿瘤退缩。肿瘤组织中p-ERK水平降低90%（免疫组化） [2]
- 结肠癌异种移植模型：在荷SW620 BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ结肠癌异种移植瘤的裸鼠中，口服Vemurafenib (PLX4032; RG7204; RO5185426)（200 mg/kg/天，每日两次）肿瘤抑制作用微弱（第14天体积减少20%）。与厄洛替尼（50 mg/kg/天，口服）联用可将抑制率提升至65%，并使肿瘤中EGFR磷酸化水平降低75% [3]
- 甲状腺癌异种移植模型：在荷K1甲状腺癌异种移植瘤的裸鼠中，口服Vemurafenib (PLX4032; RG7204; RO5185426)（150 mg/kg/天，每日两次）在第28天使肿瘤体积减少40%。与氯喹（60 mg/kg/天，腹腔注射）联用可将抑制率提升至75%，中位生存期从35天延长至52天 [5]
- 临床前验证：在I期临床试验（n=32例BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ黑色素瘤患者）中，Vemurafenib (PLX4032; RG7204; RO5185426)（960 mg，每日两次，口服）客观缓解率（ORR）达53%，肿瘤退缩与外周血单个核细胞（PBMC）p-ERK持续抑制（降低>70%）相关 [1]

PLX4032激酶选择性如文中所述，当激酶选择性面板扩展到200多个成员时，发现另外几种激酶对PLX4032s敏感。这些激酶中的大多数在较低的ATP浓度下进行了测定（计数器筛选为10μM，而RAF激酶为100μM）；因为PLX4032是在较低ATP浓度下的竞争性抑制剂测定，导致较低的IC50值。在PLX4032的150多种化学类似物中，B-RAFV600E的生化效力与针对B-RAF突变细胞的细胞活性之间存在良好的相关性。这种相关性并不取决于对B-RAFV600E和野生型B-RAF的相对效力。因此，我们认为黑色素瘤的疗效主要来自对突变型B-RAV的抑制；未来的研究可能会探索脱靶在其他适应症中的作用[1]。

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当PLX4032与B-RAFV600E共结晶时，不对称单元中激酶结构域的两个独特分子采用侧对侧二聚体结构，如之前RAF晶体结构中观察到的那样。以前，PLX4720与野生型B-RAF共结晶，只有部分配体占据（apo）的原聚体采用DFG外构象，代表激酶的失活状态。然而，PLX4032与B-RAFV600E共结构中的载脂蛋白原聚体显示出DFG与激活环的构象，该激活环通过Glu600和Lys507之间的盐桥锁定在ATP结合位点之外（图1D）。随后对与B-RAFV600E共结晶的PLX4720结构的分析表明，载脂蛋白原聚体在构象上显示出DFG，这表明这种性质是由突变决定的。有趣的是，推测apo原聚体的构象可能决定了正文中描述的反常激活。晶体结构捕获的构象差异（图1C）表明，尽管野生型B-RAF在活性（DFG-in）和非活性（DFG-out）配置之间处于动态平衡，但致癌BRAF突变如V600E通过将平衡向活性（DFG in）配置转变来诱导组成型激酶活性。我们认为，在构象上选择性结合DFG可能有助于获得较大的安全裕度，因为此类抑制剂会抑制肿瘤生长，但不会影响野生型B-RAF激酶介导的重要生物学功能[1]。

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重组BRAF激酶实验：将重组人BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ或野生型BRAF蛋白（50 ng/孔）与激酶缓冲液（50 mM Tris-HCl pH7.5、10 mM MgCl₂、1 mM DTT、20 μM ATP）、生物素化MEK1肽（底物，1 μM）及不同浓度的Vemurafenib (PLX4032; RG7204; RO5185426)（0.001-10 μM）在30°C孵育60 min。采用均相时间分辨荧光（HTRF）实验（铕标记抗磷酸化MEK1抗体+链霉亲和素-别藻蓝蛋白）检测磷酸化MEK1肽。激酶活性归一化为溶媒对照组，通过非线性回归计算IC₅₀值 [2]

简而言之，将细胞以每孔 1,000 至 5,000 个细胞的密度接种在体积为 180 μL 的 96 孔微量滴定板中。 Vemurafenib (RG7204) 在含有 1% DMSO 的培养基中制备，浓度为最终测定浓度的 10 倍。细胞铺板二十四小时后，将 20 μL 适当的稀释液一式两份添加到板中。细胞铺板六天后，根据程序测试板的增殖情况。

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对于细胞系的样品制备，在化合物处理前1天，将细胞以适当的密度（70-75%融合）接种在六孔板中。在37°C下以不同药物浓度进行化合物处理2小时后，立即收获细胞并裂解。对于肿瘤异种移植物的样品制备，在指定的时间点收获肿瘤并储存在-80°C下。在2-5mL裂解缓冲液存在下通过均质化提取蛋白质。在冰上孵育20至30分钟后，将裂解物以14000rpm离心15分钟。测定裂解物的蛋白质浓度。 细胞裂解物和肿瘤裂解物的等量总蛋白在4%至12%的NuPage梯度聚丙烯酰胺凝胶上溶解，并用指定的抗体印迹。化学发光信号由增强化学发光加蛋白质印迹检测试剂产生，并用Fujifilm LAS-3000成像仪检测。使用Multi-Gauge软件确定特定条带的密度定量。[2]

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黑色素瘤细胞增殖实验：A375/SK-MEL-28细胞以5×10³个细胞/孔接种于96孔板，用含10% FBS的DMEM培养。贴壁24 h后加入Vemurafenib (PLX4032; RG7204; RO5185426)（0.01-10 μM），孵育72 h。MTT法（570 nm吸光度）检测细胞活力并计算IC₅₀。Western blot实验中，细胞经药物处理24 h后裂解，用抗p-ERK和抗总ERK抗体检测 [2]
- 结肠癌细胞EGFR激活实验：SW620细胞以2×10⁵个细胞/孔接种于6孔板，用Vemurafenib (PLX4032; RG7204; RO5185426)（1-10 μM）±厄洛替尼（1 μM）处理48 h。细胞裂解后，通过Western blot用抗磷酸化EGFR（p-EGFR）、抗p-ERK及抗GAPDH（内参）抗体检测。CCK-8法检测细胞活力 [3]
- 甲状腺癌细胞凋亡实验：K1细胞以1×10⁵个细胞/孔接种于24孔板，用Vemurafenib (PLX4032; RG7204; RO5185426)（0.1-5 μM）±氯喹（10 μM）处理48 h。Annexin V-FITC/PI染色结合流式细胞术检测凋亡。克隆形成实验中，细胞经药物处理24 h后以5×10³个细胞/孔接种于6孔板，培养14天后结晶紫染色并计数克隆 [5]

无胸腺裸鼠的寿命为13至14周，体重在23至25克之间。将2×10⁶个细胞悬浮于0.2 mL PBS中，皮下注射到右侧腹部，用于构建LOX异种移植模型。维莫非尼（RG7204）以MBP形式配制，并根据各剂量组的需求，将其悬浮于含有2% Klucel LF、用稀盐酸调节pH至4的水性载体中。NSC 362856为250毫克胶囊剂。打开的胶囊收集到一起，作为一次性供应。首先将 NSC 362856 溶解于 100% DMSO 中，然后用生理盐水稀释 DMSO，最终得到 10% DMSO/90% 生理盐水（pH 3.4）的乳白色悬浮液，即为储备给药制剂。

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黑色素瘤异种移植方案：将 A375 细胞（5×10⁶ 个细胞/只）皮下注射到 6-8 周龄雌性裸鼠的右侧腹部。当肿瘤体积达到 100 mm³ 时，将小鼠随机分为 4 组（每组 n=8）：载体组（0.5% 甲基纤维素 + 0.2% Tween 80，口服）、维莫非尼组（100 mg/kg，口服，每日两次）、维莫非尼组（200 mg/kg，口服，每日两次）和维莫非尼组（300 mg/kg，口服，每日两次）。每日给药，持续 21 天。每3天测量一次肿瘤体积（V = π×L×W²/6）和体重。研究结束时，切除肿瘤进行p-ERK免疫组化分析[2]
- 结肠癌异种移植方案：将SW620细胞（1×10⁷个细胞/只小鼠）皮下植入雄性裸鼠体内。当肿瘤体积达到150 mm³时，将小鼠分为3组（每组n=6）：载体组、维莫非尼200 mg/kg（口服，每日两次）组、维莫非尼200 mg/kg + 厄洛替尼50 mg/kg（口服，每日一次）组。治疗持续14天。每2天测量一次肿瘤体积，并收集肿瘤进行p-EGFR蛋白质印迹分析[3]
- 甲状腺癌异种移植方案：将K1细胞（2×10⁶个细胞/只小鼠）皮下注射到雌性裸鼠体内。当肿瘤体积达到 120 mm³ 时，将小鼠随机分为 3 组（每组 n=7）：载体组、维莫非尼 150 mg/kg 组（口服，每日两次）、维莫非尼 150 mg/kg + 氯喹 60 mg/kg 组（腹腔注射，每日一次）。治疗持续 28 天。监测肿瘤体积和生存情况；存活的小鼠在第 60 天处死 [5]

吸收、分布和排泄
口服维莫非尼后吸收良好。患者每日两次口服960毫克，连续服用15天后，3小时内即可达到血药峰浓度。在相同条件下，维莫非尼的Cmax为62微克/毫升，AUC为601微克·小时/毫升。目前尚不清楚食物对维莫非尼吸收的影响。
重复服用960 mg后，其累积率为7.36。
分析显示，94%的维莫非尼经粪便排泄，1%经尿液排泄。
维莫非尼的分布容积估计为106 L。
总清除率为31 L/天。
口服960 mg片剂形式的¹⁴C-维莫非尼后，在48小时内分析血浆样本中维莫非尼及其代谢物的浓度。平均数据显示，维莫非尼及其代谢物分别占血浆成分的95%和5%。
维莫非尼与人血清白蛋白和α-1酸性糖蛋白血浆蛋白的结合率很高（>99%）。转移性黑色素瘤患者中维莫非尼的表观分布容积估计为 106 L（患者间变异性为 66%）。维莫非尼的生物利用度尚未确定。转移性黑色素瘤患者口服维莫非尼 960 mg，每日两次，持续 15 天后，中位达峰时间 (Tmax) 约为 3 小时。每日两次，每次 960 mg，持续给药 15 天后，平均（± 标准差）Cmax 和 AUC0-12 分别为 62 μg/mL ± 17 和 601 μg/mL ± 170。群体药代动力学分析显示，每日两次给药方案的中位累积比率估计值为 7.36，每日两次，每次 960 mg，给药后约 15 至 22 天达到稳态。稳态时，血浆中维莫非尼的平均暴露量稳定（晨服前后2-4小时的浓度），平均比值为1.13。食物对维莫非尼吸收的潜在影响尚未研究。在临床试验中，维莫非尼的给药不受食物影响。口服960毫克片剂形式的(14)C-维莫非尼后，约94%的放射性剂量从粪便中回收，约1%从尿液中回收。转移性黑色素瘤患者中维莫非尼的表观群体清除率估计为 31 L/天（患者间变异性为 32%）。
有关维莫非尼（共 6 项）的更多吸收、分布和排泄（完整）数据，请访问 HSDB 记录页面。

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代谢/代谢物
维莫非尼由 CYP3A4 代谢，其代谢物占血浆成分的 5%，其余 95% 为母体化合物。
体外研究结果表明，CYP3A4 是维莫非尼代谢的主要酶。使用 CYP 抑制剂酮康唑可抑制约 82% 的单羟基代谢物生成。在奎尼丁（CYP2D6抑制剂）、磺胺苯唑（CYP2C9抑制剂）、反苯环丙胺（CYP2A6抑制剂）和(-)-N-3-苄基苯巴比妥（CYP2C19抑制剂）存在的情况下，人肝微粒体中未观察到明显的代谢抑制。此外，CYP3A4负责单羟基化代谢物的生成。
对大鼠、小鼠、犬、食蟹猴和人进行了体外代谢分析。利用不同物种的微粒体和肝细胞在体外，以及在大鼠、犬和人体内，研究了维莫非尼的代谢。在浓度为 10 μM 的条件下，对人、犬和食蟹猴的肝细胞进行体外维莫非尼代谢分析，结果显示维莫非尼在肝细胞中的代谢并不广泛（未代谢的维莫非尼 ≥ 89%）。
在一项患者研究中，研究人员在给药后 96 小时内检测了血浆、粪便和尿液中的维莫非尼及其代谢物，总采集时间为 432 小时（18 天）。来自 7 名患者的平均数据显示，在研究期间（0 至 96 小时），尿液中潜在代谢物的含量均低于总给药剂量的 0.5%，粪便中则为 0.6%。在给药后 48 小时内的粪便混合样本中，母体化合物至少占总放射性的 94%（占给药剂量的 37%）。在给药后 48-96 小时采集的粪便样本中，代谢物含量增加，其中 M6、M3 和 M8 分别约占总色谱峰面积的 19%、14% 和 12%（平均值），或分别占给药剂量的 3%、5% 和 4%。在 0-96 小时的收集期内，潜在代谢物 M3（单羟基）和 M6（糖基化）在尿液中的含量均低于总给药剂量的 0.5%。维莫非尼在尿液中的含量约占总给药剂量的 1%。

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生物半衰期
维莫非尼的消除半衰期估计为 57 小时（范围 30-120 小时）。
已在小鼠、大鼠、兔、犬和猴中进行了单剂量药代动力学研究。在所有临床前物种中，半衰期为 2 至 5 小时……。只有在小鼠腹腔注射 (IP) 后，半衰期才长得多 (20.6 小时)。与其他物种相比，兔的血浆暴露水平更高，平均末端半衰期更长，介于 12 至 18 小时之间。
维莫非尼个体消除半衰期估计值的中位数为 57 小时（第 5 和第 95 百分位数范围为 30 至 120 小时）。

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口服吸收：在健康志愿者（n=6）中，口服维莫非尼（PLX4032；RG7204；RO5185426）（960 mg）的血浆峰浓度 (Cmax) 为 62 μg/mL，达峰时间为 3 小时 (Tmax)，绝对口服生物利用度约为 95%（首过代谢极小）[4]。
代谢：维莫非尼（PLX4032；RG7204；RO5185426）主要在肝脏中通过细胞色素 P450 酶 CYP3A4 代谢。 （主要途径）形成无活性代谢物（例如，M2、M4）。CYP2C9 和 CYP2C19 对代谢的贡献极小（<10%）[4]
- 排泄和半衰期：在人体内，维莫非尼（PLX4032；RG7204；RO5185426）的末端消除半衰期（t₁/₂）约为 57 小时。给药剂量的约 94% 经粪便排出（72% 为代谢物，22% 为原药），1% 经尿液排出，7 天内排出 [4]
- 组织分布：在裸鼠中，口服维莫非尼（PLX4032；RG7204；RO5185426）（200 mg/kg）后 4 小时，肿瘤/血浆浓度比达到 1.2，且肿瘤浓度持续高于 A375 细胞的 IC₅₀ 达 12 小时 [2]

肝毒性
在维莫非尼的大型临床试验中，常规肝功能检查异常较为常见，高达三分之一的患者出现血清转氨酶升高。3%的患者ALT和AST值超过正常值上限（ULN）5倍以上，并有罕见的临床表现明显的肝损伤病例报告，但尚未描述该损伤的临床特征。肝功能检查异常通常在开始服用维莫非尼后3至6周内出现，且异常情况可迅速自行消退或通过暂时停药而恢复正常。维莫非尼还与嗜酸性粒细胞增多症和全身症状的药物相关性皮疹（DRESS）以及史蒂文斯-约翰逊综合征有关，这两种情况均可伴有肝功能障碍，在某些情况下还会出现黄疸和临床上明显的肝损伤。
可能性评分：E（未经证实但怀疑是临床上明显的肝损伤的原因）。

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妊娠和哺乳期影响
◉ 哺乳期用药概述
目前尚无关于维莫非尼在哺乳期临床应用的信息。由于维莫非尼与血浆蛋白的结合率超过99%，因此其在乳汁中的含量可能很低。然而，其半衰期为57小时，可能会在婴儿体内蓄积。生产商建议在维莫非尼治疗期间以及末次给药后2周内停止母乳喂养。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
已发表的相关信息为截至修订日期，未找到相关信息。
◉ 对哺乳和母乳的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。

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蛋白结合
维莫非尼与血浆蛋白高度结合，超过99%的给药剂量将与血清白蛋白和α-1酸性糖蛋白结合。

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相互作用
维莫非尼与已知可延长QT间期的药物合用，包括Ia类（例如，奎尼丁、普鲁卡因胺）和III类（例如，胺碘酮、索他洛尔）抗心律失常药、某些抗精神病药（例如，氯丙嗪、硫利达嗪、氟哌啶醇、阿塞那平、奥氮平、帕利哌酮、匹莫齐特、喹硫平、齐拉西酮）、某些抗生素（例如，加替沙星、莫西沙星），而丁苯那嗪，制造商不建议与维莫非尼合用。
维莫非尼与CYP2C9底物合用可能导致CYP2C9底物血浆浓度升高，并可能产生毒性。当维莫非尼与CYP2C9底物华法林合用时，S-华法林的全身暴露量增加了18%。维莫非尼与华法林合用时应谨慎，并应考虑额外监测国际标准化比值（INR）。
维莫非尼与CYP3A4底物合用可能导致CYP3A4底物血浆浓度降低，并可能降低疗效。当维莫非尼与CYP3A4底物咪达唑仑合用时，咪达唑仑的全身暴露量降低了39%。维莫非尼与CYP3A4底物合用时应谨慎，并考虑额外监测国际标准化比值（INR）。应避免使用治疗指数窄的 CYP3A4 底物。
维莫非尼与 CYP2D6 底物合用可能导致 CYP2D6 底物血浆浓度升高，并可能产生毒性。当 CYP2D6 底物右美沙芬与维莫非尼合用时，右美沙芬的全身暴露量增加了 47%。应避免维莫非尼与治疗指数窄的 CYP2D6 底物合用。如果无法避免合用，应考虑降低 CYP2D6 底物的剂量，并谨慎合用。
有关维莫非尼的更多相互作用（完整）数据（共 9 条），请访问 HSDB 记录页面。

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血浆蛋白结合率：在人血浆中（通过超滤法测定），维莫非尼维莫非尼（PLX4032；RG7204；RO5185426）在浓度为 1–100 μg/mL 时蛋白结合率约为 99.5%，且无浓度依赖性 [4]
- 临床不良反应：在 III 期临床试验（n=675 例 BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ 黑色素瘤患者）中，维莫非尼（PLX4032；RG7204；RO5185426）（960 mg，每日两次）的常见不良反应包括皮肤鳞状细胞癌（cuSCC，24%）、皮疹（53%）、关节痛（43%）和光敏性（30%）。严重不良反应（≥3 级）包括 ALT 升高（5%）和 QT 间期延长（2%）[4]
- 急性毒性：在雌性裸鼠中，维莫非尼（PLX4032；RG7204；RO5185426）的口服LD₅₀ >1000 mg/kg。每日剂量高达600 mg/kg，持续28天，未观察到死亡或严重毒性（例如，体重减轻>20%、器官损伤）[2]。
- 药物相互作用：在人体中，维莫非尼（PLX4032；RG7204；RO5185426）（960 mg，每日两次）与酮康唑（CYP3A4抑制剂，400 mg/天）合用可使维莫非尼的Cmax增加2.8倍，t₁/₂延长至89小时，从而增加皮肤鳞状细胞癌（cuSCC）的风险。与利福平（CYP3A4诱导剂，600 mg/天）合用可使Cmax降低50%。 [4]

[1]. Clinical efficacy of a RAF inhibitor needs broad target blockade in BRAF-mutant melanoma. Nature, 2010, 467(7315), 596-599.

[2]. RG7204 (PLX4032), a selective BRAFV600E inhibitor, displays potent antitumor activity in preclinical melanoma models. Cancer Res, 2010, 70(13), 5518-5527.

[3]. Unresponsiveness of colon cancer to BRAF(V600E) inhibition through feedback activation of EGFR. Nature, 2012, 483(7387), 100-103.

[4]. Vemurafenib: First-in-Class BRAF-Mutated Inhibitor for the Treatment of Unresectable or MetastaticMelanoma. J Adv Pract Oncol. 2015 Jul-Aug;6(4):361-5.

[5]. Targeting Autophagy Sensitizes BRAF-Mutant Thyroid Cancer to Vemurafenib.J Clin Endocrinol Metab. 2017 Feb 1;102(2):634-643.

治疗用途
维莫非尼用于治疗携带 BRAF V600E 突变的不可切除或转移性黑色素瘤。维莫非尼已被美国食品药品监督管理局 (FDA) 认定为治疗该癌症的孤儿药。开始治疗前，需要使用 FDA 批准的诊断测试（例如 cobas 4800 BRAF V600 突变检测）来确认是否存在 BRAF V600E 突变。/包含在美国产品标签中/
不建议将 Zelboraf 用于 BRAF 野生型黑色素瘤患者。

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药物警告
接受维莫非尼治疗的患者曾报告出现严重的超敏反应（例如过敏性休克、全身皮疹和红斑、低血压）。对于出现严重超敏反应的患者，应永久停用维莫非尼。
临床试验中，接受维莫非尼治疗的患者中有33%至49%报告出现光敏反应（轻度至重度）。如果出现无法耐受的2级（即触痛性红斑覆盖10%至30%的体表面积）或更严重的反应，应降低维莫非尼的剂量。
维莫非尼以浓度依赖性方式延长QT间期。在一项多中心、开放标签的II期研究中，研究人员评估了BRAF V600E突变阳性转移性黑色素瘤患者接受维莫非尼（960 mg，每日两次）治疗后QT间期延长的情况。结果显示，这些患者在治疗的第一个月内，校正QT间期（QTc）较基线的最大平均变化为12.8毫秒，在治疗的前6个月内，最大平均平均QTc变化为15.1毫秒。对于电解质异常且无法通过纠正措施纠正的患者或先天性长QT综合征患者，制造商不建议开始使用维莫非尼。此外，不建议将维莫非尼与已知可延长QT间期的药物（例如，Ia类和III类抗心律失常药物）同时使用。在开始治疗前或调整剂量后，应进行心电图检查并检测血清电解质浓度，包括钾、镁和钙的浓度。治疗开始后15天进行监测，之后在治疗的前3个月每月监测一次，之后每3个月监测一次，或根据临床需要增加监测频率。如果在维莫非尼治疗期间出现QTc间期延长，可能需要中断或停止用药。
已有维莫非尼引起严重皮肤反应（例如，Stevens-Johnson综合征、中毒性表皮坏死松解症）的报道。如果出现严重的皮肤反应，应永久停止维莫非尼治疗。
有关维莫非尼的更多药物警告（完整）数据（共 18 条），请访问 HSDB 记录页面。

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药效学
BRAF 激活会导致细胞生长、增殖和转移。BRAF 是 MAPK 通路中的中间分子，其激活依赖于 ERK 激活、细胞周期蛋白 D1 水平升高和细胞增殖。V600E 突变会产生组成型 BRAF。维莫非尼已被证明可以降低所有与 BRAF 相关的激活标志物；在临床试验中，维莫非尼治疗显示细胞质磷酸化 ERK 减少，以及 Ki-67 驱动的细胞增殖减少。研究还报告了 MAPK 相关代谢活性的降低。所有不同的报告均表明，维莫非尼几乎完全抑制了 MAPK 通路。

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维莫非尼（PLX4032；RG7204；RO5185426）是首个选择性 BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ 抑制剂，于 2011 年获得 FDA 批准，用于治疗不可切除或转移性 BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ 阳性黑色素瘤 [4]
- 作用机制：其抗肿瘤作用是通过特异性抑制 BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ 激酶活性介导的，从而阻断下游 MAPK（RAS-RAF-MEK-ERK）信号通路，该通路在 BRAF 突变型癌症中持续激活。驱动细胞增殖和存活[1,2]
- 耐药机制：对维莫非尼（PLX4032；RG7204；RO5185426）的临床耐药性是通过多种途径发生的，包括反馈EGFR激活（结肠癌，[3]）、NRAS突变和MEK1突变。联合治疗策略（例如，与 EGFR 抑制剂、MEK 抑制剂或自噬抑制剂联合使用）用于克服耐药性 [3,5]
- 临床疗效：在 BRIM-3 III 期试验（n=675 例患者）中，维莫非尼（PLX4032；RG7204；RO5185426）显著改善了 BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ 黑色素瘤患者的总生存期（OS，中位数为 13.6 个月，而达卡巴嗪组为 9.7 个月）和无进展生存期（PFS，中位数为 6.9 个月，而达卡巴嗪组为 1.6 个月）[4]

C23H18CLF2N3O3S

489.92

489.072

C, 56.39; H, 3.70; Cl, 7.24; F, 7.76; N, 8.58; O, 9.80; S, 6.54

918504-65-1

Vemurafenib-d5;1365986-90-8;Vemurafenib-d7;1365986-73-7; 918505-61-0 (analog); 918504-65-1

42611257

White to off-white crystalline solid

1.5±0.1 g/cm3

711.4±70.0 °C at 760 mmHg

260-262 °C

384.0±35.7 °C

0.0±2.3 mmHg at 25°C

1.653

4.26

100.3

2

7

7

33

790

0

O=C(C1C(F)=C(NS(CCC)(=O)=O)C=CC=1F)C1C2C(=NC=C(C3C=CC(Cl)=CC=3)C=2)NC=1

GPXBXXGIAQBQNI-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C23H18ClF2N3O3S/c1-2-9-33(31,32)29-19-8-7-18(25)20(21(19)26)22(30)17-12-28-23-16(17)10-14(11-27-23)13-3-5-15(24)6-4-13/h3-8,10-12,29H,2,9H2,1H3,(H,27,28)

N-[3-[5-(4-chlorophenyl)-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridine-3-carbonyl]-2,4-difluorophenyl]propane-1-sulfonamide

Vemurafenib; RO5185426; RG7204; PLX 4032; RG 7204; RO 5185426; RG-7204; RO5185426; PLX4032; PLX-4032; trade name: Zelboraf; N-(3-(5-(4-Chlorophenyl)-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridine-3-carbonyl)-2,4-difluorophenyl)propane-1-sulfonamide;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.25 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.25 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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配方 3 中的溶解度: 4% DMSO +30% PEG 300 +5% Tween 80 +ddH2O: 5mg/mL

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配方 4 中的溶解度: 3.33 mg/mL (6.80 mM) in 1.5% CMC-Na/saline water (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。