Calcium channel; Permeability-glycoprotein (P-gp); CYP3A4[1]
Verapamil targets the L-type calcium channel, P-glycoprotein (P-gp), and CYP3A4. As a calcium channel blocker, it inhibits the influx of calcium into cells. As a P-gp inhibitor, it binds to P-gp and inhibits its efflux function, which can reverse multidrug resistance in cancer cells. It also inhibits the cytochrome P450 enzyme CYP3A4.

EverFluor FL Verapamil (EFV)以浓度依赖的方式抑制TR-iBRB2细胞，而维拉帕米以浓度抑制的方式抑制TR-iBRB2细胞，IC50为98.0 μM [4]。

---

TR-iBRB2细胞对EverFluor FL Verapamil (EFV)摄取的功能分析[4]
在TR-iBRB2细胞中研究了EFV的摄取功能，观察到EFV的摄取量在至少10分钟内呈线性增加，初始摄取速率为65.3 ± 6.7 μL/(min·mg蛋白)（图4a）。在 4°C 下，EFV 的摄取量显著降低了 57.8%（图 4a），而在用 Li+ 或 K+ 替代 Na+ 的缓冲液实验中，EFV 的摄取量未见显著变化（图 4b）。在 TR-iBRB2 细胞中研究了细胞外和细胞内 pH 值对 EFV 摄取的影响。pH 6.4 和 8.4 时 EFV 的摄取量与 pH 7.4 时无显著差异（图 4c），而用 NH4Cl 急性处理 TR-iBRB2 细胞后，EFV 的摄取量显著降低了 34%（图 4d）。

---

TR-iBRB2 细胞对 EverFluor FL 维拉帕米 (EFV) 摄取的抑制分析[4]
体外分布分析表明 EFV 可通过内血视网膜屏障和外血视网膜屏障进行转运。特别是，已知内血视网膜屏障（BRB）滋养着三分之二的视网膜组织。因此，我们研究了几种化合物对TR-iBRB2细胞摄取依非韦伦（EFV）的抑制作用（表I）。结果表明，阳离子药物，包括地昔帕明、丙咪嗪、普萘洛尔和维拉帕米，显著抑制了EFV的摄取，抑制率超过47%。此外，阳离子药物，包括奎尼丁、吡拉明和噻吗洛尔，中度抑制了EFV的摄取，抑制率超过25%。而西咪替丁、可乐定、金刚烷胺、乙酰唑胺、胆碱、四乙铵（TEA）、1-甲基-4-苯基吡啶鎓（MPP+）、左旋肉碱、5-羟色胺和对氨基马尿酸（PAH）则未产生显著影响。此外，EFV摄取抑制分析显示，维拉帕米对EFV摄取具有浓度依赖性抑制作用，IC50为98.0 μM（图4e）。

---

目的：研究维拉帕米在血视网膜屏障（BRB）的转运。
方法：采用EverFluor FL Verapamil (EFV)作为维拉帕米的荧光探针，通过大鼠颈总动脉灌注法研究其跨BRB的转运。分别使用TR-iBRB2细胞和RPE-J细胞研究EFV在BRB内层和外层的转运。
结果：在细胞不渗透化合物信号较弱的情况下，在视网膜组织中检测到了EverFluor FL Verapamil (EFV)的信号。在TR-iBRB2细胞中，EFV的定位与溶酶体靶向剂LysoTracker® Red不同，且不受NH4Cl急性处理的影响。在RPE-J细胞中，EFV呈点状分布，但NH4Cl急性处理可减少这种分布。TR-iBRB2细胞对EFV的摄取具有温度依赖性，但与膜电位和pH无关，NH4Cl处理可显著降低EFV的摄取，而不同细胞外pH值和V-ATPase抑制剂处理则无显著影响。阳离子药物可抑制TR-iBRB2细胞对EFV的摄取，维拉帕米以浓度依赖的方式抑制EFV的摄取，IC50值为98.0 μM。结论：我们的研究结果提供了视觉证据，支持载体介导的转运在血视网膜屏障（BRB）处维拉帕米从血液到视网膜的转运中的重要性[4]。体外实验表明，维拉帕米抑制细胞外钙离子跨膜内流，并抑制P-gp和CYP3A4。此外，它还能抑制TR-iBRB2细胞，IC50值为98.0 µM。低浓度维拉帕米可刺激P-gp的基础ATPase活性，而高浓度则抑制其活性。

在心房颤动中，维拉帕米（面部注射）可用于控制房室结反应，避免房室折返性心动过速[2]。维拉帕米经前胸股静脉静脉注射。冠状动脉闭塞后45分钟内，维拉帕米（1 mg/kg）显著降低了室性心律失常（如室性心动过速（VT）、室颤（VF）和室性早搏（PVC））的发生率。缺血性心脏导致总体心律失常评分显著升高。给予1 mg/kg维拉帕米可有效抑制心血管诱发心律失常总评分的升高[5]。

---

在人们认识到维拉帕米是一种钙离子拮抗剂之前，就已经观察到了其抗心律失常作用。静脉注射维拉帕米可有效终止阵发性折返性房室心动过速，无论其是否伴有预激或仅累及房室结。它能持续减慢并调节房颤患者的心室率，通常会加重房扑患者的房室结阻滞程度，但偶尔也会诱发窦性心律恢复。口服维拉帕米可用于预防房室折返性心动过速，也可用于调节房颤患者的房室结反应。室性心动过速的良好反应极为罕见，且仅见于某些良性类型。维拉帕米是终止阵发性室上性心动过速的首选药物。[2]

---

干预措施：患者接受美托洛尔（Seloken ZOC 200 mg，每日一次）或维拉帕米（Isoptin Retard 240 mg，每日两次）治疗。研究允许使用乙酰水杨酸、血管紧张素转换酶抑制剂、降脂药和长效硝酸酯类药物。终点事件：死亡、非致命性心血管事件（包括急性心肌梗死、致残性或不稳定型心绞痛、脑血管或外周血管事件）。心理变量反映了生活质量，包括心身症状、睡眠障碍以及对整体生活满意度的评估。结果：两组患者的综合心血管事件发生率无显著差异，分别为美托洛尔组30.8%和维拉帕米组29.3%。美托洛尔组和维拉帕米组患者的总死亡率分别为5.4%和6.2%。两组患者的心血管死亡率均为4.7%。美托洛尔组和维拉帕米组患者的非致命性心血管事件发生率分别为26.1%和24.3%。两组患者的心身症状和睡眠障碍均显著改善，但改善幅度较小，且两组间无显著差异。两种药物均未改变患者的生活满意度。因副作用而退出研究的比例分别为 11.1% 和 14.6%。结论：这项长期研究表明，两种药物的耐受性良好，且在死亡率、心血管终点事件和生活质量指标方面未显示出差异。[3]

---

本研究旨在验证维拉帕米的抗心律失常特性可能与通过抑制钙离子内流来保护连接蛋白 43 (Cx43) 蛋白有关。在一项体内研究中，通过闭塞 Sprague-Dawley 大鼠的左前降支 (LAD) 冠状动脉 45 分钟诱发心肌缺血性心律失常。在缺血前，通过股静脉注射钙通道拮抗剂维拉帕米。本研究还探讨了维拉帕米对钙通道激动剂Bay K8644诱发的心律失常的影响。在一项离体研究中，离体心脏首先接受10分钟的正常灌注，然后在有或无维拉帕米的情况下进行高钙灌注。通过心电图（ECG）测量心律失常，并通过免疫组织化学和蛋白质印迹法检测Cx43蛋白。在心肌缺血前给予维拉帕米可显著降低室性心律失常的发生率和总心律失常评分，同时降低心率、平均动脉压和左心室收缩压。维拉帕米还能抑制Bay K8644和高钙灌注诱发的心律失常。庚醇（一种Cx43蛋白解偶联剂）和Gap 26（一种Cx43通道抑制剂）均可消除维拉帕米对缺血性心律失常评分的影响。免疫组织化学数据显示，维拉帕米可阻止缺血诱导的Cx43蛋白重分布和免疫染色减弱。此外，体内心肌缺血或体外高钙灌注后，通过Western blot检测发现Cx43蛋白表达降低，而维拉帕米给药后Cx43蛋白表达得以维持。我们的数据表明，维拉帕米可能通过抑制钙离子内流、抑制氧消耗并伴随Cx43蛋白的维持发挥抗心律失常作用[5]。体内实验表明，维拉帕米可扩张冠状动脉和全身动脉，并降低心肌收缩力。它在临床上对血管痉挛性（变异型）心绞痛、不稳定型心绞痛和慢性稳定型心绞痛有效。它也用于治疗高血压和心律失常。

方法：采用 EverFluor FL Verapamil (EFV) 作为维拉帕米的荧光探针，通过大鼠颈总动脉灌注法研究其跨血视网膜屏障 (BRB) 的转运。分别使用 TR-iBRB2 细胞和 RPE-J 细胞研究 EFV 在内层和外层 BRB 的转运。结果：在细胞不渗透化合物信号较弱的情况下，视网膜组织中检测到了 EFV 的信号。在 TR-iBRB2 细胞中，EFV 的定位与溶酶体示踪剂 LysoTracker® Red 不同，且不受 NH4Cl 急性处理的影响。在 RPE-J 细胞中，部分观察到 EFV 的点状分布，且这种分布在 NH4Cl 急性处理后有所减少。 TR-iBRB2 细胞对 EFV 的摄取具有温度依赖性，但与膜电位和 pH 值无关。NH4Cl 处理可显著降低 EFV 的摄取，而不同的细胞外 pH 值和 V-ATPase 抑制剂则无显著影响。阳离子药物可抑制 TR-iBRB2 细胞对 EFV 的摄取，而维拉帕米则以浓度依赖的方式抑制 EFV 的摄取，其 IC50 值为 98.0 μM[4]。
体外酶/受体结合（非细胞）试验采用表达 L 型钙通道的细胞膜制备物进行。将这些膜与放射性标记的钙通道配体（例如 [³H]维拉帕米或 [³H]DHP）以及不同浓度的维拉帕米孵育。通过竞争性置换放射性标记配体来测定结合亲和力（IC50 或 Ki）。P-gp 活性则通过外排试验进行测定。

在人们认识到维拉帕米是一种钙离子拮抗剂之前，人们就已经观察到了它的抗心律失常作用。静脉注射维拉帕米能有效终止阵发性折返性房室心动过速，无论该心动过速是否伴有预激或仅累及房室结。它能持续减慢并调节房颤患者的心室率，通常会加重房扑患者的房室结阻滞程度，但偶尔也能诱发窦性心律恢复。口服维拉帕米可用于预防房室折返性心动过速，也可用于调节房颤患者的房室结反应。对室性心动过速的良好反应极为罕见，且仅见于某些特定的良性类型。 维拉帕米是终止阵发性室上性心动过速的首选药物[2]。

---

TR-iBRB2 细胞和 RPE-J 细胞的共聚焦显微镜观察[4]
TR-iBRB2 细胞和 RPE-J 细胞分别是永生化的大鼠视网膜毛细血管内皮细胞和视网膜色素上皮细胞，用作内层和外层血视网膜屏障模型细胞系，分别以 5 × 10³ 和 7 × 10³ 个细胞/孔的密度接种于 BioCoat™ Collagen I Cellware 8 孔培养载玻片上，并在 33°C、5% CO₂/空气条件下培养。培养48小时后，通过加入含有EverFluor FL Verapamil (EFV) (1 μM) 或 LTR (TR-iBRB2 细胞为 300 nM，RPE-J 细胞为 600 nM) 的细胞外液 (ECF) 缓冲液启动摄取实验，这些浓度参考了之前的报道。在指定时间点，用冰冷的 ECF 缓冲液洗涤细胞三次以终止实验。用 4% 多聚甲醛固定细胞后，按照其他文献所述，使用 LSM700 共聚焦显微镜进行细胞观察。

---

细胞摄取研究[4]
参考之前的报道，使用 TR-iBRB2 细胞进行体外摄取分析，细胞在 33°C、5% CO2/空气条件下培养于胶原蛋白包被的 24 孔板上。摄取实验开始时，向孔中加入含有EverFluor FL Verapamil (EFV)（1 μM，200 μL）的ECF缓冲液，温度为37°C。实验结束后，用冰冷的ECF缓冲液洗涤孔板三次以终止实验。加入ECF缓冲液（200 μL/孔）后，使用超声匀浆器匀浆细胞，并用多功能酶标仪测定细胞蛋白含量和EFV的荧光强度。EFV摄取量以细胞/培养基比值（C/M）表示，计算公式见公式1。在抑制剂存在下，EverFluor FL Verapamil (EFV)的摄取量以荧光强度比值（FI比值）表示，计算公式见公式2。 2. 使用非线性最小二乘回归分析程序 MULTI 测定维拉帕米在 EverFluor FL Verapamil (EFV) 摄取中的 50% 抑制浓度 (IC50)，并将数据拟合到公式 3。在体外抑制分析中，参考我们之前关于 TR-iBRB2 细胞转运维拉帕米的报告，将抑制剂浓度设定为 500 μM。P 和 Pmax 分别代表有抑制剂和无抑制剂时的荧光强度 (FI) 比值，Pmin 代表有抑制剂时抑制剂不敏感的荧光强度 (FI) 比值。[I] 和 n 分别代表抑制剂浓度和 Hill 系数。
体外细胞实验采用心肌细胞、血管平滑肌细胞或表达 P-gp 的细胞系进行维拉帕米研究。培养细胞并用不同浓度的维拉帕米处理。使用荧光钙指示剂测量钙离子内流。评估P-gp介导的荧光底物（例如罗丹明123）外排。使用探针底物测定CYP3A4活性。

本研究旨在验证维拉帕米的抗心律失常作用可能与其通过抑制钙离子内流来维持连接蛋白43 (Cx43) 的表达有关。在体内研究中，我们通过阻断Sprague-Dawley大鼠左前降支 (LAD) 冠状动脉45分钟来诱导心肌缺血性心律失常。在缺血前，我们经股静脉注射钙通道拮抗剂维拉帕米。此外，我们还检测了维拉帕米对钙通道激动剂Bay K8644诱导的心律失常的影响。在离体研究中，我们首先对离体心脏进行10分钟的正常灌注，然后在有或无维拉帕米的情况下进行高钙灌注。通过心电图（ECG）测量心律失常，并通过免疫组织化学和蛋白质印迹法检测Cx43蛋白。在心肌缺血前给予维拉帕米可显著降低室性心律失常的发生率和总心律失常评分，同时降低心率、平均动脉压和左心室收缩压。维拉帕米还能抑制Bay K8644和高钙灌注诱导的心律失常。庚醇（一种Cx43蛋白解偶联剂）和Gap 26（一种Cx43通道抑制剂）均可消除维拉帕米对缺血性心律失常评分的影响。免疫组织化学数据显示，维拉帕米可预防缺血诱导的Cx43蛋白重分布和免疫染色减弱。此外，体内心肌缺血或体外高钙灌注后，通过蛋白质印迹法检测到Cx43蛋白表达降低，而维拉帕米给药后Cx43蛋白表达得以维持。我们的数据表明，维拉帕米可能通过抑制钙离子内流、抑制氧消耗并伴随Cx43蛋白的维持发挥抗心律失常作用[5]。

---

颈总动脉灌注分析[4]
我们改进了先前报道的原位脑灌注方法，对EverFluor FL维拉帕米（EFV）在视网膜中的体内分布进行了分析。在戊巴比妥钠（50 mg/kg）麻醉的Wistar大鼠中，用丝线结扎右侧颈外动脉。结扎右侧颈总动脉后，将聚乙烯管插入右侧颈总动脉，位置在颈外动脉分叉下方，并用丝线固定。荧光化合物的给药条件参考既往研究，这些研究均在无毒性条件下进行。将含有EverFluor FL Verapamil (EFV)（400 μg/3.5 mL）、Rho-D（4 mg/3.5 mL）或LTR（400 μg/3.5 mL）的林格-HEPES溶液（预热至37°C）通过输液泵以恒定流速（0.85 mL/min）注入翼腭动脉和颈内动脉。该流速的设定考虑了视网膜血流速度（0.7 mL/(min·g视网膜)），以避免损伤视网膜屏障结构。输注结束后，将大鼠断头处死，立即取出右眼球，浸泡于含4%多聚甲醛的磷酸盐缓冲液（PBS）中3小时，随后浸泡于含30%蔗糖的PBS中，温度为4℃。之后，将组织固定于最佳切割温度化合物（OCT）中，并使用低温恒温器制备组织切片。将组织切片贴于载玻片上，用4′,6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）和VECTASHIELD封片剂进行染色，然后按照其他文献所述方法，使用共聚焦显微镜进行观察。 EverFluor FL Verapamil (EFV) 的激发波长为 488 nm，LTR 和 Rho-D 的激发波长为 543 nm。

---

体内心律失常研究 [5]
在缺血前 10 分钟，经股静脉注射维拉帕米 (1 mg/kg)。假手术组接受相同的手术操作，但左前降支 (LAD) 下方的缝线未结扎。在另一系列实验中，使用 L 型钙通道激动剂 Bay K8644 诱发心律失常，剂量为 0.1 mg/kg，经股静脉注射。在注射 Bay K8644 前 10 分钟，给予维拉帕米 (1 mg/kg)。所有注射均在 30 秒内完成。

---

心脏分离和灌注 [5]
每颗心脏首先进行 10 分钟的基线正常灌注，然后在 37°C 下灌注 45 分钟。之后，将心脏随机分为三组：对照组（正常钙灌注）（1.5 mmol/L）、高钙组（高钙灌注）（3.3 mmol/L）和维拉帕米组（高钙加维拉帕米灌注）（3.3 mmol/L 钙 + 3 µmol/L 维拉帕米）。为了测量心律失常，在整个灌注期间持续监测心电图，并评估心律失常的发生率。

---

心电图测量和心律失常评分的确定[5]
在缺血诱发心律失常的动物模型中，或在Bay K8644、庚醇或Gap 26存在的情况下，测定了维拉帕米的抗心律失常特性。通过心电图记录比较了45分钟内心律失常的发生情况。为了分析Langendorff灌注大鼠心脏的心律失常，将正极连接到心脏，负极连接到主动脉，持续监测每只大鼠的心脏。在10分钟的基线正常灌注期后，比较了在灌注期最初45分钟内不同Ca2+浓度下心律失常的发生率。为了进行良好的定量比较，在体内心律失常评估中，将45分钟的缺血期分为15个3分钟的间隔；在体外心律失常研究中，将45分钟的灌注期也分为15个3分钟的间隔。心律失常评分的评估方法如前所述。每3分钟内室性早搏（PVC）≤10次记为0分；每3分钟内PVC 10-50次记为1分；每3分钟内PVC≥50次记为2分；每3分钟内发生1次室颤（VF）记为3分；每3分钟内发生2-5次室颤记为4分；每3分钟内发生≥5次室颤记为5分。
维拉帕米的体内动物实验是在高血压、心绞痛和心律失常的动物模型中进行的。维拉帕米可通过口服或静脉注射给药。监测血压、心率、心电图和冠状动脉血流。评估抗心律失常和抗高血压药物的疗效。

吸收、分布和排泄
口服维拉帕米的吸收率超过90%，但由于门静脉循环首过代谢后迅速发生生物转化，其生物利用度仅为20%至30%。吸收动力学参数主要取决于维拉帕米的具体制剂。速释维拉帕米在给药后1-2小时内达到血浆峰浓度（Tmax），而缓释制剂的Tmax通常在6至11小时之间。AUC和Cmax值也取决于制剂。每6小时服用一次速释维拉帕米，其血浆浓度在125至400 ng/mL之间。对于缓释制剂，R-异构体的稳态AUC_0-24h和Cmax值分别为1037 ng∙h/ml和77.8 ng/mL，而S-异构体的相应值分别为195 ng∙h/ml和16.8 ng/mL。值得注意的是，维拉帕米表现出高度立体选择性的吸收动力学——每8小时口服一次速释维拉帕米后，S-对映体相对于R-对映体的相对系统生物利用度在稳态下分别为13%和18%。给药剂量的约70%在5天内以代谢物的形式经尿液排出，≥16%经粪便排出。约3%–4%的药物以原形经尿液排出。维拉帕米R-对映体的稳态分布容积约为300 L，S-对映体的稳态分布容积约为500 L。连续治疗3周后，R-维拉帕米的全身清除率约为340 mL/min，S-维拉帕米的全身清除率约为664 mL/min。值得注意的是，单次给药和多次给药的表观口服清除率存在显著差异。单次服用维拉帕米后，R-维拉帕米的表观口服清除率约为1007 mL/min，S-维拉帕米的表观口服清除率约为5481 mL/min；连续治疗3周后，R-维拉帕米的表观口服清除率约为651 mL/min，S-维拉帕米的表观口服清除率约为2855 mL/min。
/母乳/ 维拉帕米可能存在于母乳中。
/母乳/ 维拉帕米会分泌到母乳中。每日服用 240 毫克后，母乳中维拉帕米的浓度约为母亲血清浓度的 23%。婴儿血清中维拉帕米的浓度为 2.1 ng/mL，但在停药 38 小时后降至无法检测（<1 ng/mL）。……在另一个案例中，一位母亲在测定其血清和母乳中维拉帕米浓度前四周，每天三次服用 80 毫克维拉帕米治疗高血压。母乳中维拉帕米及其代谢物去甲维拉帕米的稳态浓度分别为 25.8 ng/mL 和 8.8 ng/mL。这些值分别相当于血浆浓度的 60% 和 16%。研究人员估计，母乳喂养的婴儿摄入的维拉帕米剂量不到母亲剂量的 0.01%。在婴儿血浆中未检测到维拉帕米及其代谢物。一项研究调查了维拉帕米联合曲安奈德在20例高血压患者（年龄29-71岁）中的药代动力学和血液动力学，其中10例患者同时患有脂肪肝。这些患者每日口服一次缓释胶囊，每粒胶囊含有180 mg维拉帕米和1 mg曲安奈德，疗程7天。结果显示，在患有脂肪肝和未患脂肪肝的患者之间，维拉帕米的血浆峰浓度（Cmax）（110.5 vs 76.5 μg/L）、0-24小时血浆曲线下面积（AUC）（1260.6 vs 941.2 μg/L·h）和消除半衰期（9.8 vs 9.2 h）均无统计学差异。一项开放标签、随机、单剂量研究旨在探讨食物对盐酸维拉帕米缓释制剂（异搏定）生物利用度的影响。该研究纳入12名健康志愿者（年龄19-65岁），分别空腹或餐后服用240 mg缓释制剂，或空腹服用常规制剂。结果显示，虽然缓释维拉帕米的消除半衰期保持不变，但达峰时间延长，浓度-时间曲线下面积（AUC）为常规制剂的80%。与食物同服使达峰时间从7.3 ± 3.4小时延长至11.7 ± 6.3小时，但对缓释维拉帕米的峰浓度、半衰期或AUC影响甚微。有关维拉帕米吸收、分布和排泄的更完整数据（共21项），请访问HSDB记录页面。代谢物/代谢物：维拉帕米主要在肝脏代谢，高达80%的给药剂量通过首过代谢清除——有趣的是，这种首过代谢似乎比R-对映体更快地清除维拉帕米的S-对映体。剩余的母体药物通过细胞色素P450酶系统进行O-去甲基化、N-去烷基化和N-去甲基化，生成多种代谢物。去甲维拉帕米是维拉帕米的主要循环代谢物之一。它是维拉帕米经CYP2C8、CYP3A4和CYP3A5进行N-去甲基化代谢的产物，其心血管活性约为维拉帕米的20%。维拉帕米的另一主要代谢途径是通过CYP2C8、CYP3A4和CYP1A2进行N-去烷基化代谢，生成代谢物D-617。去甲维拉帕米和D-617均可被其他CYP同工酶进一步代谢为多种次级代谢物。CYP2D6和CYP2E1也参与维拉帕米的代谢途径，但其作用较小。维拉帕米的次级代谢途径包括通过CYP2C8、CYP2C9和CYP2C18进行O-去甲基化生成D-703，以及通过CYP2C9和CYP2C18进行O-去甲基化生成D-702。维拉帕米代谢途径中的几个步骤对特定底物的S-对映体表现出立体选择性，包括CYP3A4/5生成代谢物D-620和CYP2C8生成代谢物D-617。代谢物：主要代谢物是去甲维拉帕米，其消除半衰期与母体化合物非常相似，为4至8小时。维拉帕米主要在肝脏代谢。由于肝脏首过效应显著，正常受试者的生物利用度不超过20%至35%。已报道的代谢物有12种。主要代谢物是去甲维拉帕米；其他代谢物是各种N-和O-去烷基化代谢物。通过暴露途径消除：肾脏：给药剂量的约70%在5天内以代谢物的形式经尿液排出，其中3-4%以原形排出。粪便：摄入剂量的约16%会在5天内以代谢物的形式经粪便排出。母乳：维拉帕米可能存在于母乳中。
维拉帕米在犬体内产生以下代谢物：5-(3,4-二甲氧基苯乙基氨基)-2-(3,4-二甲氧基苯基)-2-异丙基戊腈；2-(3,4-二甲氧基苯基)-5-(n-(4-羟基-3-甲氧基苯乙基)甲基氨基)-2-异丙基戊腈和2-(3,4-二甲氧基苯基)-2-异丙基-5-甲基氨基戊腈。后者也在大鼠体内被发现。 /表格摘录/ /未指明盐类/
维拉帕米及其主要代谢物去甲维拉帕米已被证实既是CYP3A的机制抑制剂又是其底物，并且在临床上表现出非线性药代动力学特征。本研究首先在混合人肝微粒体中测定了维拉帕米和去甲维拉帕米的代谢清除率及其对CYP3A活性的影响。结果表明，维拉帕米和去甲维拉帕米的S-异构体比其R-异构体更容易代谢，并且它们对CYP3A活性的抑制具有立体选择性，S-异构体的抑制活性强于R-异构体。本研究建立了一个半生理药代动力学模型（半PBPK），该模型能够表征基于机制的自身抑制，并预测单次或多次口服给药后维拉帕米和去甲维拉帕米的立体选择性药代动力学特征。模拟结果令人满意，表明所建立的半生理药代动力学（semi-PBPK）模型能够同时预测S-维拉帕米、R-维拉帕米、S-去甲维拉帕米和R-去甲维拉帕米的药代动力学特征。此外，本研究还探讨了自身抑制对口服维拉帕米缓释片（240 mg，每日一次）38次后维拉帕米和去甲维拉帕米蓄积的影响。预测的累积倍数约为1.3～1.5倍，与观察到的1.4～2.1倍接近。最后，本研究进一步应用所建立的半生理药代动力学模型预测维拉帕米与其他三种CYP3A底物（咪达唑仑、辛伐他汀和环孢素A）之间的药物相互作用（DDI）。预测结果同样成功，表明所建立的包含自身抑制的半生理药代动力学模型在预测与CYP3A底物的药物相互作用方面具有显著优势。本研究采用电化学（EC）结合液相色谱（LC）和电喷雾电离质谱（ESI-MS）技术，对广泛使用的钙通道阻滞剂维拉帕米的生物转化途径进行了研究。氧化相I代谢在配备硼掺杂金刚石（BDD）工作电极的简易安培薄层池中进行了模拟。基于精确质量数据和额外的MS/MS实验，阐明了电化学生成的代谢物的结构。我们证明，所有钙拮抗剂最重要的代谢物，包括去甲维拉帕米（由N-去甲基化形成），都可以通过这种纯仪器技术轻松模拟。此外，一些新报道的代谢反应产物，例如卡宾醇胺或亚胺甲基化物，也能够被检测到。我们将电化学方法（EC）的结果与传统的体外研究进行了比较，后者采用大鼠和人肝微粒体（RLMs、HLMs）的孵育实验。两种方法均与EC/LC/MS数据吻合良好。因此，可以看出电化学方法非常适合模拟维拉帕米的氧化代谢。总之，本研究证实，当与现有的体外或体内方法结合使用时，EC/LC/MS 可以成为药物发现和开发的有力工具。维拉帕米对细胞色素 P450 (CYP) 3A 的机制性失活 (MBI) 及其导致的药物相互作用已在体外进行了研究，但维拉帕米对其自身代谢清除的临床已知抑制作用——即维拉帕米代谢的自身抑制——尚未在体外得到重现。本研究旨在评估凝胶包埋的大鼠肝细胞反映这种代谢自身抑制的有效性，并以肝细胞单层作为对照。尽管浓度和时间依赖性曲线相似，但在两种培养模型中观察到维拉帕米代谢自身抑制的显著差异。首先，包埋于凝胶中的肝细胞对这种抑制作用更为敏感，这可能是由于其CYP3A活性更高，可通过6β-羟基睾酮和1'-羟基咪达唑仑的生成速率来检测。此外，酮康唑和维拉帕米对CYP3A活性的抑制作用，以及酮康唑降低维拉帕米固有清除率（CL(int)）的现象，均仅在包埋于凝胶中的肝细胞中观察到。因此，CYP3A对维拉帕米代谢的自身抑制作用仅在包埋于凝胶中的肝细胞中得到证实，而在单层肝细胞中未观察到。所有这些结果表明，与单层肝细胞相比，包埋于凝胶中的肝细胞能更好地反映维拉帕米的代谢自身抑制，因此是研究药物代谢的合适模型。维拉帕米的已知代谢物包括2-(3,4-二甲氧基苯基)乙醛、去甲维拉帕米、D-702、M9 (D-703) 和 D-617。消除途径：给药剂量的约70%在5天内以代谢物的形式经尿液排出，16%或更多经粪便排出。约3%至4%的药物以原形经尿液排出。半衰期：2.8至7.4小时。单次给药速释维拉帕米的研究表明，其消除半衰期为2.8至7.4小时，重复给药可延长至4.5至12.0小时。肝功能不全患者（14～16小时）和老年患者（约20小时）的消除半衰期也延长。静脉注射维拉帕米后，分布相半衰期约为4分钟，随后进入末端消除相，半衰期为2～5小时。
本研究探讨了10例门静脉高压患者（年龄19～69岁）和6例健康受试者（年龄21～69岁）体内维拉帕米及其代谢物去甲维拉帕米的药代动力学。所有受试者均口服80 mg盐酸维拉帕米（异搏定）。对照组维拉帕米的末端消除半衰期为210小时，而患者组为1384小时。
两例患者的毒代动力学研究显示，血浆半衰期分别为7.9小时和13.2小时，全身清除率分别为425 mL/min和298 mL/min。……

---

维拉帕米（EFV）在视网膜中的体内分布分析[4]
采用颈动脉灌注法研究了EFV在视网膜中的分布。共聚焦显微镜下，从内界膜（ILM）到外丛状层（OPL）均均匀检测到EFV（绿色）信号（图1a），而Rho-D（一种细胞不渗透底物）的荧光信号较弱（数据未显示）。此外，在感光细胞外节（POS）中检测到了强烈的EFV荧光信号（图1a），在视网膜色素上皮（RPE）中部分检测到了EFV的点状信号（图1b，箭头所示）。EverFluor FL维拉帕米（EFV）的体外分布分析[4]
利用共聚焦显微镜研究了EFV在内、外血视网膜屏障（BRB）模型细胞系中的亚细胞定位。在TR-iBRB2细胞（一种体外内BRB模型细胞系）中，EFV的荧光信号分布于整个细胞，而LTR的荧光信号呈点状分布，表明EFV的亚细胞分布模式与LTR不同（图2a）。经NH4Cl急性处理后，EFV的亚细胞定位没有显著变化，而LTR的点状分布模式有所减少（图2b）。此外，在液泡H+-ATPase (V-ATPase) 抑制剂巴氟沙星A1存在的情况下，TR-iBRB2细胞对EFV的摄取没有显著变化（图2c）。[4] 在RPE-J细胞中，观察到LTR呈点状分布，经NH4Cl急性处理后，这种分布模式减弱（图3）。EFV信号以部分点状分布模式分布于整个细胞，与LTR的点状分布模式融合（图3a，箭头所示），并且这种部分点状分布模式在经NH4Cl急性处理后减弱（图3）。维拉帕米具有口服生物利用度，但首过代谢广泛。速释制剂的半衰期为3-7小时，也有缓释制剂。它由CYP3A4代谢。

毒性概述
识别和用途：维拉帕米是预防和治疗阵发性室上性心动过速的一线药物。维拉帕米已被证实可有效治疗心绞痛。维拉帕米可作为轻度至中度高血压的替代治疗方案。人体研究：维拉帕米对血管系统具有血管扩张作用。毒性通常在口服给药后 1 至 5 小时内出现。静脉注射后，症状会在数分钟内出现。主要心血管症状包括：心动过缓和房室传导阻滞（82% 的病例）、低血压和心源性休克（78% 的病例）以及心脏骤停（18% 的病例）。可能发生肺水肿。可能发生意识改变和癫痫发作，这与心输出量降低有关。可能发生恶心和呕吐。休克和高血糖可能导致代谢性酸中毒。维拉帕米是一种钙通道阻滞剂，它通过抑制钙离子进入心血管细胞来发挥作用。维拉帕米可降低钙电流强度并减缓钙通道的恢复速度。维拉帕米可降低外周血管和冠状动脉阻力，但其血管舒张作用弱于硝苯地平。相反，其心脏效应比硝苯地平更显著。在产生动脉血管舒张所需的剂量下，维拉帕米的负性变时性、负性传导性和负性肌力作用远强于硝苯地平。在中毒剂量下，维拉帕米对钙通道的抑制作用会导致三种主要效应：动脉血管舒张引起的低血压、负性肌力作用引起的心源性休克、心动过缓和房室传导阻滞。维拉帕米对高血压和心绞痛的治疗作用源于其对全身动脉和冠状动脉的血管舒张作用。维拉帕米的抗心律失常作用源于其直接作用，即延缓房室结的冲动传导。服用1克维拉帕米即可发生毒性反应。体外实验采用微核试验（MN试验）检测维拉帕米对人外周血淋巴细胞的影响。结果显示，所有处理组均导致微核频率增加。荧光原位杂交（FISH）分析表明，维拉帕米单独使用或与利托君联合使用时，其诱导非整倍体的作用强于诱导染色体断裂的作用。动物实验：维拉帕米可诱发正常犬发生心房颤动。在猪模型中，平均输注0.6 ± 0.12 mg/kg维拉帕米后观察到毒性反应，表现为平均动脉压较基线下降45%。在此剂量下，血浆中维拉帕米的平均浓度为 728.1 ± 155.4 μg/L。在猪模型中，高渗碳酸氢钠溶液逆转了严重维拉帕米中毒引起的低血压和心输出量下降。生态毒性研究：本研究探讨了长期暴露于浓度分别为 0.29、0.58 和 1.15 mg/L 的维拉帕米 60 天对尼罗罗非鱼 (Oreochromis niloticus) 肝脏的致突变性、血液学参数和氧化酶活性的影响。结果表明，暴露导致外周血细胞微核显著增加。氧化应激生物标志物（脂质过氧化和羰基蛋白）水平升高。超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx) 和谷胱甘肽 S-转移酶 (GST) 的活性也升高。在其他实验中，将鱼类暴露于亚致死浓度的维拉帕米（0.14、0.29 和 0.57 mg/L）中 15、30、45 和 60 天，导致鱼类脑和肌肉中的乙酰胆碱酯酶活性受到抑制。研究结束时，两种组织中过氧化氢酶 (CAT)、超氧化物歧化酶 (SOD) 和热休克蛋白 70 (hsp70) 的转录水平均上调。在金鱼 (Carassius auratus) 中观察到呼吸困难和平衡失调等行为改变，证实了高剂量维拉帕米引起的心血管毒性。除了对心血管系统的影响外，维拉帕米还会通过改变副白蛋白的表达影响神经系统。急性暴露于维拉帕米显著降低了鲤鱼 (Cyprinus carpio) 胚胎和幼鱼的心率。在巨型蚤（D. magna）的慢性毒性研究中，暴露于4.2 mg/L维拉帕米会对多种参数产生不利影响，包括存活率、体长、首次繁殖时间和每只雌蚤的产仔数。在24小时的短期暴露期间，维拉帕米会下调CYP4和CYP314基因的表达。在21天的长期暴露期间，维拉帕米显著降低了Vtg基因的表达水平，Vtg基因是卵生动物生殖能力的生物标志物。维拉帕米抑制电压依赖性钙通道。具体而言，它对心脏L型钙通道的影响会导致心肌收缩力和心率下降，从而降低心率和血压。维拉帕米治疗丛集性头痛的作用机制被认为与其钙通道阻滞作用有关，但目前尚不清楚具体涉及哪些通道亚型。

---

毒性数据
LD50：8 mg/kg（静脉注射，小鼠）（A308）药物相互作用
药物相互作用：蛋白结合药物
药物相互作用：β-肾上腺素能阻滞剂
药物相互作用：地高辛
药物相互作用：抗高血压药物
有关维拉帕米的更多（完整）相互作用数据（共42项），请访问HSDB记录页面。

---

非人类毒性值
小鼠腹腔注射LD50：68 mg/kg /盐酸维拉帕米/
大鼠腹腔注射LD50：67 mg/kg /盐酸维拉帕米/
大鼠口服LD50：114 mg/kg /维拉帕米盐酸盐/
小鼠静脉注射LD50：7.6 mg/kg /盐酸维拉帕米/
如需了解维拉帕米更完整的非人类毒性数据（共14项），请访问HSDB记录页面。

常见副作用包括便秘、低血压、心动过缓和房室传导阻滞。它可引起牙龈增生和外周水肿。它与CYP3A4和P-gp底物存在显著的药物相互作用。

[1]. Verapamil as a culprit of palbociclib toxicity. J Oncol Pharm Pract. 2019 Apr;25(3):743-746.

[2]. Krikler DM. Verapamil in arrhythmia. Br J Clin Pharmacol. 1986;21 Suppl 2:183S-189S.

[3]. Effects of metoprolol vs verapamil in patients with stable angina pectoris. The Angina Prognosis Study in Stockholm (APSIS). Eur Heart J. 1996 Jan;17(1):76-81.

[4]. Blood-to-Retina Transport of Fluorescence-Labeled Verapamil at the Blood-Retinal Barrier. Pharm Res. 2018 Mar 12;35(5):93.

[5]. Anti-arrhythmic effect of Verapamil is accompanied by preservation of cx43 protein in rat heart. PLoS One. 2013 Aug 12;8(8):e71567.

治疗用途
抗心律失常药物；钙通道阻滞剂；血管扩张剂。ClinicalTrials.gov 是一个注册和结果数据库，列出了全球公共和私人机构资助的人体临床研究。该网站由美国国家医学图书馆 (NLM) 和美国国立卫生研究院 (NIH) 维护。ClinicalTrials.gov 上的每条记录都包含研究方案摘要，包括：疾病或病症；干预措施（例如，正在研究的医疗产品、行为或程序）；研究的标题、描述和设计；参与要求（资格标准）；研究地点；研究地点的联系信息；以及指向其他健康网站相关信息的链接，例如 NLM 的 MedlinePlus（用于提供患者健康信息）和 PubMed（用于提供医学领域学术文章的引文和摘要）。盐酸维拉帕米已包含在数据库中。口服钙通道阻滞剂被认为是变异型心绞痛的一线治疗药物。对于不稳定性心绞痛患者，若其对β受体阻滞剂和硝酸酯类药物反应不佳、无法耐受或存在禁忌症，且无严重左心室功能障碍、肺水肿或其他禁忌症，若存在持续性或持续性心肌缺血，则建议使用非二氢吡啶类钙通道阻滞剂（例如地尔硫卓、维拉帕米）。在治疗不稳定性心绞痛或慢性稳定性心绞痛方面，维拉帕米的疗效似乎与β受体阻滞剂（例如普萘洛尔）和/或口服硝酸酯类药物相当。对于不稳定性心绞痛或慢性稳定性心绞痛，维拉帕米可以减少发作频率，降低舌下含服硝酸甘油的剂量，并提高运动耐量。 /美国产品标签包含/
维拉帕米用于快速将阵发性室上性心动过速 (PSVT) 转复为窦性心律，包括与 Wolff-Parkinson-White 综合征或 Lown-Ganong-Levine 综合征相关的心动过速；它也用于控制非预激性房扑或房颤的快速心室率。美国心脏病学会/美国心脏协会/心律学会 (ACC/AHA/HRS) 成人室上性心动过速患者管理指南推荐使用维拉帕米治疗各种室上性心动过速（例如，房扑、交界性心动过速、局灶性房性心动过速、房室结折返性心动过速 (AVNRT)）。通常情况下，静脉注射维拉帕米用于急性治疗，而口服维拉帕米用于持续治疗这些心律失常。/美国产品标签包含/
有关维拉帕米（14种类型）治疗用途的更完整数据，请访问HSDB记录页面。

---

药物警告
……如果左心室功能受损的患者同时使用维拉帕米和β受体阻滞剂，且心肌功能下降10-15%，则可能存在危险。 /未指定盐/
……维拉帕米的绝对禁忌症（急性心肌梗死、完全性房室传导阻滞、心源性休克、显性心力衰竭）……不应与β-肾上腺素能阻滞剂同时服用，或在β-肾上腺素能阻滞剂半衰期的3倍以内使用。 /未指定盐/
维拉帕米的基本生理作用可能导致严重不良反应。/未指定盐/
母亲使用通常与母乳喂养相容：维拉帕米：婴儿报告的体征或症状或对泌乳的影响：无。/摘自表6/ /未指定盐/
有关维拉帕米药物警告（共23条）的更完整数据，请访问HSDB记录页面。

---

药效学
维拉帕米是一种L型钙通道阻滞剂，具有抗心律失常、抗心绞痛和降压作用。速释维拉帕米作用持续时间相对较短，每日需服用3至4次，但也有缓释制剂，可每日一次给药。由于维拉帕米是一种负性肌力药物（即降低心肌收缩力），因此不应用于严重左心室功能障碍或肥厚型心肌病患者，因为维拉帕米引起的心肌收缩力下降可能会加重这些原有疾病的风险。

---

2-(3,4-二甲氧基苯基)-5-{[2-(3,4-二甲氧基苯基)乙基](甲基)氨基}-2-(丙基-2-基)戊酸酯是一种叔胺化合物，即3,4-二甲氧基苯乙胺，其中与氮原子相连的氢原子被甲基和4-氰基-4-(3,4-二甲氧基苯基)-5-甲基己基取代。它是一种叔胺化合物、芳香醚、聚醚和腈。维拉帕米是一种苄基烷基胺类钙通道阻滞剂，用于治疗高血压、心律失常和心绞痛。它是20世纪60年代初首个用于临床的钙通道拮抗剂。它属于非二氢吡啶类钙通道阻滞剂，该类药物包括地尔硫卓和氟桂利嗪等，但其化学结构与其他心脏活性药物无关。维拉帕米以消旋混合物的形式给药，其中包含等量的S-和R-对映异构体，二者具有不同的药理作用——S-对映异构体的效力约为R-对映异构体的20倍，但代谢速度也更快。维拉帕米是一种钙通道阻滞剂。其作用机制是作为钙通道拮抗剂、细胞色素P450 3A4抑制剂、细胞色素P450 3A抑制剂和P-糖蛋白抑制剂。维拉帕米是第一代钙通道阻滞剂，用于治疗高血压、心绞痛和室上性心律失常。维拉帕米治疗期间血清酶升高的发生率较低，临床上显著的急性肝损伤病例罕见。据报道，维拉帕米存在于五味子（Teichospora striata）和五味子（Schisandra chinensis）中，并有相关数据可供参考。根据LOTUS天然产物数据库，维拉帕米是一种苯烷基胺类钙通道阻滞剂。维拉帕米抑制细胞外钙离子跨膜流入心肌和血管平滑肌细胞，导致主要冠状动脉和全身动脉扩张，并降低心肌收缩力。该药还能抑制药物外排泵P-糖蛋白，P-糖蛋白在某些多药耐药肿瘤中过度表达，因此可能增强某些抗肿瘤药物的疗效。维拉帕米是一种小分子药物，已完成IV期临床试验（涵盖所有适应症）。它于1981年首次获批，目前有4个获批适应症和16个在研适应症。维拉帕米仅在服用过该药的个体中被检测到。维拉帕米是一种钙通道阻滞剂，属于IV类抗心律失常药物。[PubChem] 维拉帕米抑制电压依赖性钙通道。具体而言，维拉帕米作用于心脏中的L型钙通道，导致心肌收缩力下降和心率降低，从而降低心率和血压。维拉帕米治疗丛集性头痛的作用机制被认为与其钙通道阻滞作用有关，但目前尚不清楚具体涉及哪些通道亚型。[PubChem] 钙通道拮抗剂毒性极高。早期识别对于中毒治疗至关重要。钙通道拮抗剂是常用的处方药，过量服用可导致严重并发症甚至死亡。任何出现不明原因低血压和传导异常的过量服用患者都应怀疑摄入了此类药物。对于存在潜在肝肾功能障碍且正在接受治疗剂量的患者，应监测其毒性风险。(A7844)
一种IV类抗心律失常药物，属于钙通道阻滞剂类。
维拉帕米也称为异丙维拉曲和地拉可兰。它已获得美国食品药品监督管理局（FDA）批准，用于治疗心绞痛、心律失常和高血压。它在临床上广泛应用，是钙通道阻滞剂和P-gp抑制剂研究中的标准药物。

C27H38N2O4

454.61

454.283

C, 71.34; H, 8.43; N, 6.16; O, 14.08

52-53-9

Verapamil hydrochloride;152-11-4; 38321-02-7 (dexverapamil)

2520

Viscous, pale yellow oil

1.1±0.1 g/cm3

586.2±50.0 °C at 760 mmHg

25°C

308.3±30.1 °C

0.0±1.6 mmHg at 25°C

1.526

3.9

63.95

0

6

13

33

606

0

CC(C)C(CCCN(C)CCC1=CC(=C(C=C1)OC)OC)(C#N)C2=CC(=C(C=C2)OC)OC

SGTNSNPWRIOYBX-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C27H38N2O4/c1-20(2)27(19-28,22-10-12-24(31-5)26(18-22)33-7)14-8-15-29(3)16-13-21-9-11-23(30-4)25(17-21)32-6/h9-12,17-18,20H,8,13-16H2,1-7H3

2-(3,4-dimethoxyphenyl)-5-[2-(3,4-dimethoxyphenyl)ethyl-methylamino]-2-propan-2-ylpentanenitrile

NSC-135784; NSC 135784; VERAPAMIL; 52-53-9; Iproveratril; Dilacoran; Vasolan; Isoptimo; Isoptin; Verapamilo; Verapamil; Verapamilum; D-365;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~100 mg/mL (~219.97 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

---

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

---

View More

配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。