Calcium channel; Permeability-glycoprotein (P-gp); CYP3A4[1]

EverFluor FL Verapamil (EFV)以浓度依赖性方式抑制 TR-iBRB2 细胞，而 Verapamil 以浓度抑制方式抑制 TR-iBRB2 细胞，IC50 为 98.0 μM [4]。

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TR-iBRB2细胞摄取EverFluor FL Verapamil (EFV)的功能分析[4]
在TR-iBRB2细胞中研究了EFV摄取的功能，观察到EFV摄取线性增加至少10分钟，初始摄取率为65.3 ± 6.7 μL/（min·mg蛋白质）（图4a）。在4°C时，EFV摄取显著降低了57.8%（图4a），在用Li+或K+替代Na+的缓冲液进行的实验中，没有观察到EFV摄取的显著变化（图4b）。在TR-iBRB2细胞中研究了细胞外和细胞内pH值对EFV摄取的影响。在pH 6.4和8.4时，EFV的摄取与pH 7.4时没有显著差异（图4c），而用NH4Cl对TR-iBRB2细胞进行急性处理后，EFV摄取显著降低了34%（图4d）。

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EverFluor FL Verapamil (EFV)对TR-iBRB2细胞摄取的抑制分析[4]
体外分布分析表明，EFV在内外BRB转运。特别是，已知内部BRB可以滋养三分之二的视网膜组织。因此，研究了几种化合物对TR-iBRB2细胞摄取EFV的抑制作用（表I），阳离子药物，包括地昔帕明、丙咪嗪、普萘洛尔和维拉帕米，显著抑制了EFV摄取47%以上。此外，阳离子药物，包括奎尼丁、吡拉明和噻吗洛尔，适度抑制EFV摄取超过25%，而西咪替丁、可乐定、金刚烷胺、乙酰唑胺、胆碱、四乙基铵（TEA）、1-甲基-4-苯基吡啶（MPP+）、左旋肉碱、血清素和对氨基马尿酸（PAH）没有产生显著影响。此外，EFV摄取的抑制分析表明，维拉帕米对EFV摄取具有浓度依赖性抑制作用，IC50为98.0μM（图4e）。

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目的：研究维拉帕米在血视网膜屏障（BRB）处的血视网膜转运。
方法：采用EverFluor FL Verapamil (EFV)作为维拉帕米的荧光探针，通过大鼠颈总动脉输注研究其在BRB中的转运。分别用TR-iBRB2细胞和RPE-J细胞研究了EFV在内外BRB的转运。
结果：在细胞不可渗透化合物的弱信号期间，视网膜组织中检测到EverFluor FL Verapamil (EFV)的信号。在TR-iBRB2细胞中，EFV的定位不同于溶酶体运动剂LysoTracker®Red的定位，并且不会因NH4Cl的急性处理而改变。在RPE-J细胞中，部分观察到EFV的点状分布，经NH4Cl急性处理后，这种分布有所减少。TR-iBRB2细胞对EFV的摄取是温度依赖性的，与膜电位和pH无关，NH4Cl处理显著降低了EFV的吸收，而不同的细胞外pH和V-ATP酶抑制剂没有显著影响。TR-iBRB2细胞对EFV的摄取被阳离子药物抑制，维拉帕米以浓度依赖的方式抑制，IC50为98.0μM。
结论：我们的研究结果提供了视觉证据，支持载体介导的维拉帕米在BRB血视网膜转运的意义[4]。

房颤时，维拉帕米（面部）可用于控制房室结反应，避免房室折返性心动过速[2]。将维拉帕米静脉注射到前胸部区域的股静脉中。冠状动脉闭合后 45 分钟内，维拉帕米（1 mg/kg）可显着降低室性心律失常的发生率，例如室性心动过速（VT）、心室颤动（VF）和室性早搏（PVC）。缺血性心脏导致总体心律失常评分显着增加。给予 1 mg/kg 维拉帕米可有效抑制心血管诱发的心律失常总体评分的上升[5]。

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维拉帕米的抗心律失常作用是在人们意识到它是一种钙离子拮抗剂之前观察到的。静脉注射Verapamil/维拉帕米在终止阵发性往复式房室心动过速方面非常有效，无论是与预激有关还是仅涉及房室结。它持续减缓和规范房颤患者的心室反应，通常会增加房扑患者的房室结传导阻滞程度，尽管偶尔会导致窦性心律的恢复。口服可用于预防房室折返性心动过速，也可用于调节房颤患者的房室结反应。室性心动过速的有利反应是罕见的，然后在特定的良性品种中可见。维拉帕米是终止阵发性室上性心动过速的首选药物。[2]

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干预：患者接受美托洛尔（Seloken ZOC 200 mg o.d.）或Verapamil/维拉帕米（Isotin Retarded 240 b.i.d.）治疗。研究中允许使用乙酰水杨酸、ACE抑制剂、降脂药物和长效硝酸盐。 终点：死亡、非致命性心血管事件，包括急性心肌梗死、致残或不稳定型心绞痛、脑血管或外周血管事件。反映生活质量的心理变量，即心身症状、睡眠障碍和总体生活满意度评估。 结果：美托洛尔和维拉帕米治疗的患者合并心血管事件的发生率分别为30.8%和29.3%，没有差异。美托洛尔和维拉帕米治疗患者的总死亡率分别为5.4%和6.2%。两组的心血管死亡率均为4.7%。美托洛尔和维拉帕米治疗的患者中，非致死性心血管事件的发生率分别为26.1%和24.3%。两个治疗组的心身症状和睡眠障碍都得到了显著改善。变化幅度很小，不同治疗之间没有差异。两种药物的生活满意度都没有变化。因副作用而退出的比例分别为11.1%和14.6%。 结论：这项长期研究表明，这两种药物都具有良好的耐受性，对死亡率、心血管终点和生活质量指标的影响没有差异。[3]

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本研究旨在验证以下假设：Verapamil/维拉帕米的抗心律失常特性可能伴随着通过钙内流抑制来保护连接蛋白43（Cx43）蛋白。在一项体内研究中，Sprague-Dawley大鼠通过闭塞左前降支（LAD）冠状动脉45分钟诱导心肌缺血性心律失常。缺血前，将钙通道拮抗剂维拉帕米静脉注射到股静脉。还测定了维拉帕米对Bay K8644（一种钙通道激动剂）诱导的心律失常的影响。在一项离体研究中，离体心脏接受了最初10分钟的基线正常灌注，并在维拉帕米存在或不存在的情况下接受了高钙灌注。通过心电图（ECG）测量心律失常，通过免疫组织化学和蛋白质印迹测定Cx43蛋白。心肌缺血前服用维拉帕米可显著降低室性心律失常的发生率和心律失常总评分，同时降低心率、平均动脉压和左心室收缩压。维拉帕米还抑制了Bay K8644和高钙灌注引起的心律失常。异搏定对缺血性心律失常评分的影响被Cx43蛋白解偶联剂庚醇和Cx43通道抑制剂Gap 26消除。免疫组织化学数据显示，维拉帕米可以阻止缺血诱导的Cx43再分布和免疫染色减少。此外，在体内心肌缺血或离体高钙灌注后，通过蛋白质印迹法测定的Cx43蛋白表达减少，并在维拉帕米给药后得以保留。我们的数据表明，维拉帕米可能通过抑制钙内流、抑制耗氧量以及同时保护Cx43蛋白来发挥抗心律失常作用[5]。

方法：采用EverFluor FL维拉帕米（EFV）作为维拉帕米的荧光探针，通过大鼠颈总动脉输注研究其在BRB中的转运。分别用TR-iBRB2细胞和RPE-J细胞研究了EFV在内外BRB的转运。 结果：在细胞不可渗透化合物的弱信号期间，视网膜组织中检测到EFV信号。在TR-iBRB2细胞中，EFV的定位不同于溶酶体运动剂LysoTracker®Red的定位，并且不会因NH4Cl的急性处理而改变。在RPE-J细胞中，部分观察到EFV的点状分布，经NH4Cl急性处理后，这种分布有所减少。TR-iBRB2细胞对EFV的摄取是温度依赖性的，与膜电位和pH无关，NH4Cl处理显著降低了EFV的吸收，而不同的细胞外pH和V-ATP酶抑制剂没有显著影响。TR-iBRB2细胞对EFV的摄取被阳离子药物抑制，维拉帕米以浓度依赖的方式抑制，IC50为98.0μM。[4]

维拉帕米的抗心律失常作用是在人们意识到它是一种钙离子拮抗剂之前观察到的。静脉注射维拉帕米在终止阵发性往复式房室心动过速方面非常有效，无论是与预激有关还是仅涉及房室结。它持续减缓和规范房颤患者的心室反应，通常会增加房扑患者的房室结传导阻滞程度，尽管偶尔会导致窦性心律的恢复。口服可用于预防房室折返性心动过速，也可用于调节房颤患者的房室结反应。室性心动过速的有利反应是罕见的，然后在特定的良性品种中可见。维拉帕米是终止阵发性室上性心动过速的首选药物[2]。

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TR-iBRB2细胞和RPE-J细胞的共聚焦显微镜[4]
TR-iBRB2细胞和RPE-J细胞是永生化的大鼠视网膜毛细血管内皮细胞和视网膜色素上皮细胞，用作内外BRB模型细胞系，并在5℃下接种 × 103 and 7 × 103 分别在BioCoat™胶原蛋白I Cellware 8孔培养载玻片上培养细胞/孔，并在33°C、5%CO2/空气下培养。培养48小时后，通过加入细胞外液（ECF）启动摄取试验，该缓冲液含有EverFluor FL维拉帕米（EFV）（1μM）或LTR（TR-iBRB2细胞为300 nM，RPE-J细胞为600 nM），这些浓度是通过参考之前的报告来设定的。通过用冰冷的ECF缓冲液洗涤细胞三次，在指定时间终止测定。用4%多聚甲醛固定细胞后，用LSM700对细胞进行共聚焦显微镜观察，如别处所述。

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细胞摄取研究[4]
参考之前的报告，使用TR-iBRB2细胞进行了体外摄取分析，细胞在33°C、5%CO2/空气的条件下在胶原蛋白涂层的24孔板上培养。通过在37°C下加入含有EverFluor FL维拉帕米（EFV）（200μL中1μM）的ECF缓冲液开始摄取试验，并用冰冷的ECF缓冲剂洗涤孔三次终止摄取试验。加入ECF缓冲液（200μL/孔）后，在超声波均质器中均质化细胞，用多模式微孔板读数器系统测量细胞蛋白含量和EFV的荧光强度。EFV摄取通过方程式1表示为细胞与培养基（C/M）比。EverFluor FL维拉帕米（EFV）在抑制剂存在下的摄取通过方程式2表示为荧光强度比（FI比）。非线性最小二乘回归分析程序MULTI用于测定EverFluor FL Verapamil (EFV)摄取中维拉帕米的50%抑制浓度（IC50），并将数据拟合到方程3中。在体外抑制分析中，参考我们之前关于TR-iBRB2细胞转运维拉帕米的报告，将抑制剂的浓度设置为500μM，P和Pmax是有和没有抑制剂的FI比率，Pmin是有抑制剂的抑制剂不敏感FI比率。[I]和n分别是抑制剂浓度和希尔系数。

本研究旨在验证维拉帕米的抗心律失常作用可能与其通过抑制钙离子内流来维持连接蛋白43 (Cx43) 的表达有关。在体内研究中，我们通过阻断Sprague-Dawley大鼠左前降支 (LAD) 冠状动脉45分钟来诱导心肌缺血性心律失常。在缺血前，我们经股静脉注射钙通道拮抗剂维拉帕米。此外，我们还检测了维拉帕米对钙通道激动剂Bay K8644诱导的心律失常的影响。在离体研究中，我们首先对离体心脏进行10分钟的正常灌注，然后在有或无维拉帕米的情况下进行高钙灌注。通过心电图（ECG）测量心律失常，并通过免疫组织化学和蛋白质印迹法检测Cx43蛋白。在心肌缺血前给予维拉帕米可显著降低室性心律失常的发生率和总心律失常评分，同时降低心率、平均动脉压和左心室收缩压。维拉帕米还能抑制Bay K8644和高钙灌注诱导的心律失常。庚醇（一种Cx43蛋白解偶联剂）和Gap 26（一种Cx43通道抑制剂）均可消除维拉帕米对缺血性心律失常评分的影响。免疫组织化学数据显示，维拉帕米可预防缺血诱导的Cx43蛋白重分布和免疫染色减弱。此外，体内心肌缺血或体外高钙灌注后，通过蛋白质印迹法检测到Cx43蛋白表达降低，而给予维拉帕米后Cx43蛋白表达得以维持。我们的数据表明，维拉帕米可能通过抑制钙离子内流、抑制氧消耗并伴随Cx43蛋白的维持发挥抗心律失常作用[5]。

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\n\n颈总动脉灌注分析[4]
\n我们改进了先前报道的原位脑灌注方法，对EverFluor FL维拉帕米（EFV）在视网膜中的体内分布进行了分析。在戊巴比妥钠（50 mg/kg）麻醉的Wistar大鼠中，用丝线结扎右侧颈外动脉。结扎右侧颈总动脉后，将聚乙烯管插入右侧颈总动脉，位置在颈外动脉分叉下方，并用丝线固定。荧光化合物的给药条件参考既往研究，这些研究均在无毒性条件下进行。将含有EverFluor FL Verapamil (EFV)（400 μg/3.5 mL）、Rho-D（4 mg/3.5 mL）或LTR（400 μg/3.5 mL）的林格-HEPES溶液（预热至37°C）通过输液泵以恒定流速（0.85 mL/min）注入翼腭动脉和颈内动脉。该流速的设定考虑了视网膜血流速度（0.7 mL/(min·g视网膜)），以避免损伤视网膜屏障结构。输注结束后，将大鼠断头处死，立即取出右眼球，浸泡于含4%多聚甲醛的磷酸盐缓冲液（PBS）中3小时，随后浸泡于含30%蔗糖的PBS中，温度为4℃。之后，将组织固定于最佳切割温度化合物（OCT）中，并使用低温恒温器制备组织切片。将组织切片贴于载玻片上，用4′,6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）和VECTASHIELD封片剂进行染色，然后按照其他文献所述方法，使用共聚焦显微镜进行观察。 EverFluor FL Verapamil (EFV) 的激发波长为 488 nm，LTR 和 Rho-D 的激发波长为 543 nm。\n

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\n体内心律失常研究 [5]
\n\n在缺血前 10 分钟，经股静脉注射维拉帕米 (1 mg/kg)。假手术组接受相同的手术操作，但左前降支 (LAD) 下方的缝线未结扎。\n\n在另一系列实验中，使用 L 型钙通道激动剂 Bay K8644 诱发心律失常，剂量为 0.1 mg/kg，经股静脉注射。在注射 Bay K8644 前 10 分钟给予维拉帕米 (1 mg/kg)。所有注射均在 30 秒内完成。\n

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\n心脏分离和灌注 [5]
\n每颗心脏首先进行 10 分钟的基线正常灌注，然后在 37°C 下灌注 45 分钟。之后，将心脏随机分为三组：对照组（正常钙灌注）（1.5 mmol/L）、高钙组（高钙灌注）（3.3 mmol/L）和维拉帕米组（高钙加维拉帕米灌注）（3.3 mmol/L 钙 + 3 µmol/L 维拉帕米）。为了测量心律失常，在整个灌注期间持续监测心电图，并评估心律失常的发生率。\n

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\n心电图测量和心律失常评分的确定[5]
\n在缺血诱发心律失常的动物模型中，或在Bay K8644、庚醇或Gap 26存在的情况下，分别测定了维拉帕米的抗心律失常特性。通过心电图记录比较了45分钟内心律失常的发生情况。为了分析Langendorff灌注大鼠心脏的心律失常，将正极连接到心脏，负极连接到主动脉，持续监测每只大鼠的心脏。在10分钟的基线正常灌注期后，比较了在灌注期最初45分钟内不同Ca2+浓度下心律失常的发生率。为了进行良好的定量比较，在体内心律失常评估中，将45分钟的缺血期分为15个3分钟的间隔；在体外心律失常研究中，将45分钟的灌注期也分为15个3分钟的间隔。心律失常评分的评估方法如前所述。每3分钟内室性早搏（PVC）≤10次记为0分；每3分钟内PVC 10-50次记为1分；每3分钟内PVC≥50次记为2分；每3分钟内发生1次室颤（VF）记为3分；每3分钟内发生2-5次室颤记为4分；每3分钟内发生≥5次室颤记为5分。

吸收、分布和排泄
口服维拉帕米的吸收率超过90%，但由于门静脉循环首过代谢后的快速生物转化，其生物利用度仅为20%至30%。吸收动力学参数主要取决于维拉帕米的具体制剂。速释维拉帕米在给药后1-2小时内达到血浆峰浓度（即Tmax），而缓释制剂的Tmax通常在6-11小时之间。AUC和Cmax值同样取决于制剂。每6小时服用一次速释维拉帕米，其血浆浓度在125至400 ng/mL之间。对于缓释制剂，R-异构体的稳态AUC_0-24h和C_max值分别为1037 ng∙h/ml和77.8 ng/mL，S-异构体的稳态AUC_0-24h和C_max值分别为195 ng∙h/ml和16.8 ng/mL。值得注意的是，维拉帕米的吸收动力学具有高度立体选择性——每8小时口服一次速释维拉帕米后，单次给药后S-对映异构体相对于R-对映异构体的相对系统生物利用度为13%，稳态时为18%。给药剂量的约70%在5天内以代谢物的形式经尿液排出，≥16%经粪便排出。约 3%～4% 的药物以原形经尿液排出。维拉帕米的 R-对映体稳态分布容积约为 300 升，S-对映体约为 500 升。连续治疗 3 周后，R-维拉帕米的全身清除率约为 340 毫升/分钟，S-维拉帕米的全身清除率约为 664 毫升/分钟。值得注意的是，单次给药和多次给药的表观口服清除率似乎存在显著差异。单次服用维拉帕米后，R-维拉帕米的表观口服清除率约为1007 mL/min，S-维拉帕米的表观口服清除率约为5481 mL/min；连续治疗3周后，R-维拉帕米的表观口服清除率约为651 mL/min，S-维拉帕米的表观口服清除率约为2855 mL/min。
/乳汁/ 母乳：维拉帕米可能出现在母乳中。
/乳汁/ 维拉帕米会分泌到母乳中。每日服用240 mg后，母乳中的维拉帕米浓度约为母体血清浓度的23%。婴儿血清中的维拉帕米浓度为2.1 ng/mL，但在停药38小时后，无法检测到（<1 ng/mL）。……在另一例病例中，一位母亲在测定血清和乳汁中的维拉帕米浓度前4周，每天服用80 mg，每日3次，用于治疗高血压。维拉帕米及其代谢物去甲维拉帕米在乳汁中的稳态浓度分别为 25.8 ng/mL 和 8.8 ng/mL。这些值分别占血浆浓度的 60% 和 16%。研究人员估计，母乳喂养的婴儿摄入的药物剂量不到母亲剂量的 0.01%。在婴儿的血浆中未检测到维拉帕米及其代谢物。
一项研究对 20 名高血压患者（年龄 29-71 岁）进行了维拉帕米和群多普利联合用药的药代动力学和血液动力学效应研究，其中 10 名患者同时患有脂肪肝。这些患者每日一次口服含有 180 mg 维拉帕米和 1 mg 群多普利的缓释胶囊，疗程为 7 天。对于维拉帕米，脂肪肝患者和非脂肪肝患者在血药浓度峰值（Cmax）（110.5 vs 76.5 μg/L）、0-24小时血浆药时曲线下面积（AUC）（1260.6 vs 941.2 μg/L·h）和消除半衰期（9.8 vs 9.2 h）方面均无统计学意义上的差异。
一项开放标签、随机、单剂量研究旨在探讨食物对缓释（SR）盐酸维拉帕米（异搏定）生物利用度的影响。该研究纳入12名健康志愿者（年龄19-65岁），分别在空腹或进食后服用240 mg缓释制剂，并在空腹时服用常规制剂。结果显示，虽然缓释维拉帕米的消除半衰期未发生改变，但达峰时间延长，且浓度-时间曲线下面积（AUC）为常规制剂的80%。与食物同服可将达峰时间从 7.3±3.4 小时延长至 11.7±6.3 小时，但对缓释维拉帕米的峰浓度、半衰期或 AUC 值影响甚微。
有关维拉帕米（共 21 项）的更多吸收、分布和排泄（完整）数据，请访问 HSDB 记录页面。

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代谢/代谢物
维拉帕米主要在肝脏代谢，高达 80% 的给药剂量通过首过代谢清除——有趣的是，这种首过代谢似乎能更快地清除维拉帕米的 S-对映体，而不是 R-对映体。剩余的母体药物通过细胞色素 P450 酶系统进行 O-去甲基化、N-去烷基化和 N-去甲基化，生成多种不同的代谢物。去甲维拉帕米是维拉帕米的主要循环代谢产物之一，它是维拉帕米经CYP2C8、CYP3A4和CYP3A5进行N-去甲基化代谢的产物，其心血管活性约为维拉帕米的20%。维拉帕米代谢的另一主要途径是经CYP2C8、CYP3A4和CYP1A2进行N-去烷基化代谢，生成代谢产物D-617。去甲维拉帕米和D-617均可进一步经其他CYP同工酶代谢为多种次级代谢产物。CYP2D6和CYP2E1也参与了维拉帕米的代谢途径，但作用较小。维拉帕米代谢的次要途径包括：经CYP2C8、CYP2C9和CYP2C18进行O-去甲基化生成D-703，以及经CYP2C9和CYP2C18进行O-去甲基化生成D-702。维拉帕米代谢途径中的几个步骤对特定底物的S-对映体表现出立体选择性，包括CYP3A4/5生成代谢物D-620和CYP2C8生成代谢物D-617。代谢物：主要代谢物是去甲维拉帕米，其消除半衰期与母体化合物非常相似，为4至8小时。维拉帕米主要经肝脏代谢。由于肝脏首过效应显著，正常受试者的生物利用度不超过20%至35%。目前已报道的代谢物有12种。主要代谢产物是去甲维拉帕米，其他代谢产物是各种 N- 和 O-去烷基化代谢产物。通过暴露途径消除：肾脏：约 70% 的给药剂量在 5 天内以代谢产物的形式经尿液排出，其中 3-4% 以原药形式排出。粪便：约 16% 的摄入剂量在 5 天内以代谢产物的形式经粪便排出。母乳：维拉帕米可能出现在母乳中。
维拉帕米在犬体内产生的代谢产物为：5-(3,4-二甲氧基苯乙氨基)-2-(3,4-二甲氧基苯基)-2-异丙基戊腈； 2-(3,4-二甲氧基苯基)-5-(n-(4-羟基-3-甲氧基苯乙基)甲基氨基)-2-异丙基戊腈和2-(3,4-二甲氧基苯基)-2-异丙基-5-甲基氨基戊腈。后者也在大鼠体内发现。/摘自表格/ /未指定盐/
维拉帕米及其主要代谢物去甲维拉帕米被证实既是CYP3A的机制抑制剂又是底物，并且据报道在临床上具有非线性药代动力学特征。维拉帕米和去甲维拉帕米的代谢清除率及其对CYP3A活性的影响首先在混合人肝微粒体中进行了测定。结果表明，维拉帕米和去甲维拉帕米的S-异构体比R-异构体更容易被代谢，且它们对CYP3A活性的抑制作用也具有立体选择性，S-异构体的抑制作用强于R-异构体。本研究建立了一个基于半生理的药代动力学模型（半PBPK），该模型能够表征基于机制的自身抑制，并预测单次或多次口服给药后维拉帕米和去甲维拉帕米的立体选择性药代动力学特征。模拟结果良好，表明所建立的半PBPK模型能够同时预测S-维拉帕米、R-维拉帕米、S-去甲维拉帕米和R-去甲维拉帕米的药代动力学特征。此外，本研究还考察了口服维拉帕米缓释片（240 mg，每日一次）38次后，自身抑制对维拉帕米和去甲维拉帕米蓄积的影响。预测的累积倍数约为1.3-1.5倍，与观测到的1.4-2.1倍的数据接近。最后，将所建立的半PBPK模型进一步应用于预测维拉帕米与其他三种CYP3A底物（包括咪达唑仑、辛伐他汀和环孢素A）之间的药物相互作用（DDI）。预测也取得了成功，表明所建立的包含自身抑制的半PBPK模型在预测与CYP3A底物的DDI方面也具有显著优势。
采用电化学（EC）联用液相色谱（LC）和电喷雾质谱（ESI-MS）技术，研究了广泛使用的钙通道阻滞剂维拉帕米的生物转化途径。在配备硼掺杂金刚石（BDD）工作电极的简单安培薄层池中模拟了氧化I相代谢。基于精确质量数据和额外的MS/MS实验，我们阐明了电化学生成的代谢物的结构。我们证明，包括去甲维拉帕米（由N-去甲基化形成）在内的所有钙拮抗剂最重要的代谢产物，都可以通过这种纯仪器技术轻松模拟。此外，一些新报道的代谢反应产物，如卡宾醇胺或亚胺甲基化物，也变得可及。我们将电化学方法（EC）的结果与传统的体外研究进行了比较，后者通过大鼠和人肝微粒体（RLMs、HLMs）的孵育实验进行。两种方法均与EC/LC/MS的数据吻合良好。因此，可以看出，电化学方法非常适合用于模拟维拉帕米的氧化代谢。总之，本研究证实，当与已有的体外或体内方法互补应用时，EC/LC/MS 可成为药物发现和开发的有力工具。
维拉帕米对细胞色素 P450 (CYP) 3A 的机制性失活 (MBI) 及其导致的药物相互作用已在体外得到研究，但维拉帕米在临床上对其自身代谢清除的抑制作用，即维拉帕米代谢的自身抑制，尚未在体外得到重现。本文旨在评估凝胶包埋的大鼠肝细胞在反映这种代谢自身抑制方面的效用，并以肝细胞单层作为对照。尽管浓度和时间依赖性曲线相似，但两种培养模型中维拉帕米代谢的自身抑制仍表现出明显的差异。首先，凝胶包裹的肝细胞对这种抑制作用更为敏感，这可能主要归因于其较高的CYP3A活性，该活性可通过6β-羟基睾酮和1'-羟基咪达唑仑的生成速率来检测。此外，酮康唑和维拉帕米对CYP3A活性的抑制作用以及酮康唑对维拉帕米固有清除率(CL(int))的降低作用仅在凝胶包裹的肝细胞中观察到。由此可见，CYP3A参与维拉帕米代谢的自身抑制作用仅在凝胶包裹的肝细胞中得到证实，而在单层肝细胞中则未观察到。所有这些结果表明，与肝细胞单层相比，凝胶包埋的肝细胞更能反映维拉帕米的代谢自身抑制，因此可作为研究药物代谢的合适系统。
维拉帕米已知的代谢产物包括2-(3,4-二甲氧基苯基)乙醛、去甲维拉帕米、D-702、M9 (D-703) 和 D-617。
消除途径：给药剂量的约70%在5天内以代谢物的形式经尿液排出，16%或更多经粪便排出。约3%至4%的药物以原形经尿液排出。
半衰期：2.8-7.4小时

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生物半衰期
速释维拉帕米的单剂量研究表明，其消除半衰期为2.8至7.4小时，重复给药后可延长至4.5至12.0小时。肝功能不全患者（14至16小时）和老年患者（约20小时）的消除半衰期也会延长。静脉注射维拉帕米后，其分布相半衰期约为4分钟，随后进入末端消除相，半衰期为2至5小时。
本研究对10例门静脉高压患者（年龄19-69岁）和6名健康受试者（年龄21-69岁）进行了维拉帕米及其代谢物去甲维拉帕米的药代动力学研究，受试者均口服80 mg盐酸维拉帕米（异搏定）。对照组维拉帕米的末端消除相半衰期为210小时，患者组为1384小时。
对两例患者进行的毒代动力学研究显示，血浆半衰期分别为7.9小时和13.2小时，全身清除率分别为425 mL/min和298 mL/min。 ...

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EverFluor FL 维拉帕米 (EFV) 在视网膜中的体内分布分析 [4]
通过颈总动脉灌注法研究了 EFV 在视网膜中的分布。在共聚焦显微镜下，从内界膜 (ILM) 到外丛状层 (OPL) 的区域均匀检测到了 EFV（绿色）信号（图 1a），而 Rho-D（一种细胞不渗透性底物）的荧光信号较弱（数据未显示）。此外，在感光细胞外节（POS）中检测到了强烈的EFV荧光信号（图1a），在视网膜色素上皮（RPE）中部分检测到了EFV的点状信号（图1b，箭头所示）。体外EverFluor FL维拉帕米（EFV）分布分析[4]
采用共聚焦显微镜研究了EFV在内、外血视网膜屏障（BRB）模型细胞系中的亚细胞定位。在TR-iBRB2细胞（一种内BRB的体外模型细胞系）中，EFV的荧光信号遍布整个细胞，而LTR的荧光信号呈点状分布，表明EFV的亚细胞分布模式与LTR不同（图2a）。在NH4Cl急性处理的情况下，EFV的亚细胞定位未见明显变化，而LTR的点状分布模式有所减少（图2b）。此外，在液泡型H+-ATPase（V-ATPase）抑制剂巴弗洛霉素A1存在的情况下，TR-iBRB2细胞对EFV的摄取也未发生显著变化（图2c）。[4]在RPE-J细胞中，观察到LTR呈点状分布模式，且经NH4Cl急性处理后，这种分布模式有所减少（图3）。EFV信号遍布整个细胞，呈部分点状分布模式，与LTR的点状分布模式融合（图3a，箭头所示），而这种部分分布模式经NH4Cl急性处理后有所减少（图3）。

毒性概述
识别和用途：维拉帕米是预防和治疗阵发性室上性心动过速的首选药物。维拉帕米已被证明对治疗心绞痛有效。维拉帕米可作为轻度或中度高血压的替代治疗药物。人体研究：维拉帕米对血管系统具有血管扩张作用。毒性作用通常在口服后1至5小时出现。静脉注射后，症状会在几分钟内出现。主要心血管症状包括：心动过缓和房室传导阻滞（82%的病例）、低血压和心源性休克（78%的病例）、心脏骤停（18%的病例）。可能发生肺水肿。可能发生意识障碍和癫痫发作，这与心输出量低有关。可能出现恶心和呕吐。休克和高血糖可能导致代谢性酸中毒。维拉帕米是一种钙通道阻滞剂，可抑制钙离子通过钙通道进入心血管细胞。维拉帕米可降低钙电流的强度并减缓通道的恢复速度。维拉帕米可降低外周血管和冠状动脉阻力，但其血管扩张作用弱于硝苯地平。相反，其心脏效应比硝苯地平更显著。在产生动脉血管扩张所需的剂量下，维拉帕米的负性变时性、负性传导性和负性肌力作用远强于硝苯地平。在中毒剂量下，维拉帕米对钙通道的抑制作用会导致三种主要效应：动脉血管扩张引起的低血压、负性肌力作用引起的心源性休克、心动过缓和房室传导阻滞。维拉帕米对高血压和心绞痛的治疗作用源于其对全身动脉和冠状动脉的扩张作用。维拉帕米的抗心律失常作用则源于其直接作用，延缓房室结的冲动传导。服用1克维拉帕米即可出现毒性反应。体外实验采用微核试验（MN试验）对人外周血淋巴细胞进行了维拉帕米的测试。结果显示，所有治疗后微核频率均有所增加。荧光原位杂交（FISH）分析结果表明，维拉帕米单独使用或与利托君联合使用时，其致非整倍体作用大于致染色体断裂作用。动物实验：维拉帕米可诱发正常犬的房颤。在猪模型中，平均输注0.6±0.12 mg/kg维拉帕米后，出现维拉帕米毒性反应，表现为平均动脉压较基线值下降45%。该剂量产生的血浆维拉帕米平均浓度为 728.1 ± 155.4 μg/L。在猪模型中，高渗碳酸氢钠可逆转严重维拉帕米中毒引起的低血压和心输出量下降。生态毒性研究：本研究考察了长期暴露于浓度分别为 0.29、0.58 和 1.15 mg/L 的维拉帕米对尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）肝脏中致突变性、血液学参数和氧化酶活性的影响，暴露时间为 60 天。结果显示，暴露导致外周血细胞微核显著增加。氧化应激生物标志物（脂质过氧化和羰基蛋白）水平升高。超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx) 和谷胱甘肽-S-转移酶 (GST) 的活性也升高。在其他实验中，将鱼类暴露于亚致死浓度的维拉帕米（0.14、0.29 和 0.57 mg/L）15、30、45 和 60 天后，导致鱼类脑和肌肉中乙酰胆碱酯酶活性受到抑制。研究结束后，两种组织中过氧化氢酶 (CAT)、超氧化物歧化酶 (SOD) 和热休克蛋白 70 (hsp70) 的转录水平均上调。在金鱼 (Carassius auratus) 中观察到呼吸困难和身体平衡丧失等行为改变，证实了高剂量维拉帕米引起的心血管毒性。除了影响心血管系统外，维拉帕米还通过改变副白蛋白的表达对神经系统产生影响。急性暴露于维拉帕米显著降低了鲤鱼 (Cyprinus carpio) 胚胎和幼鱼的心率。在大型蚤（D. magna）慢性毒性试验中，暴露于4.2 mg/L维拉帕米后，包括存活率、体长、首次繁殖时间和每只雌性产仔数在内的多个参数均受到不利影响。在24小时短期暴露期间，维拉帕米导致CYP4和CYP314基因表达下调。在21天长期暴露期间，维拉帕米显著降低了Vtg基因的表达水平，Vtg基因是卵生动物繁殖能力的生物标志物。维拉帕米抑制电压依赖性钙通道。具体而言，它对心脏L型钙通道的影响会导致心肌收缩力和心率降低，从而降低心率和血压。维拉帕米治疗丛集性头痛的作用机制被认为与其钙通道阻滞作用有关，但目前尚不清楚具体涉及哪些通道亚型。

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毒性数据
LD50：8 mg/kg（静脉注射，小鼠）（A308）

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药物相互作用
药物相互作用：蛋白结合药物
药物相互作用：β-肾上腺素能阻滞剂
药物相互作用：地高辛
药物相互作用：降压药
有关维拉帕米的更多（完整）相互作用数据（共42项），请访问HSDB记录页面。

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非人类毒性值
小鼠腹腔注射LD50：68 mg/kg /盐酸维拉帕米/
大鼠腹腔注射LD50：67 mg/kg /盐酸维拉帕米/
大鼠LD50口服 114 mg/kg /盐酸维拉帕米/
LD50 小鼠静脉注射 7.6 mg/kg /盐酸维拉帕米/
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[1]. Verapamil as a culprit of palbociclib toxicity. J Oncol Pharm Pract. 2019 Apr;25(3):743-746.

[2]. Krikler DM. Verapamil in arrhythmia. Br J Clin Pharmacol. 1986;21 Suppl 2:183S-189S.

[3]. Effects of metoprolol vs verapamil in patients with stable angina pectoris. The Angina Prognosis Study in Stockholm (APSIS). Eur Heart J. 1996 Jan;17(1):76-81.

[4]. Blood-to-Retina Transport of Fluorescence-Labeled Verapamil at the Blood-Retinal Barrier. Pharm Res. 2018 Mar 12;35(5):93.

[5]. Anti-arrhythmic effect of Verapamil is accompanied by preservation of cx43 protein in rat heart. PLoS One. 2013 Aug 12;8(8):e71567.

治疗用途
抗心律失常药物；钙通道阻滞剂；血管扩张剂
/临床试验/ ClinicalTrials.gov 是一个注册库和结果数据库，收录了全球范围内由公共和私人机构资助的人体临床研究。该网站由美国国家医学图书馆 (NLM) 和美国国立卫生研究院 (NIH) 维护。ClinicalTrials.gov 上的每条记录都包含研究方案的摘要信息，包括：疾病或病症；干预措施（例如，正在研究的医疗产品、行为或程序）；研究的标题、描述和设计；参与要求（资格标准）；研究开展地点；研究地点的联系方式；以及其他健康网站相关信息的链接，例如 NLM 的 MedlinePlus（用于提供患者健康信息）和 PubMed（用于提供医学领域学术文章的引文和摘要）。盐酸维拉帕米已收录于数据库中。
口服钙通道阻滞剂被认为是治疗变异型心绞痛（Prinzmetal心绞痛）的首选药物。对于β受体阻滞剂和硝酸酯类药物治疗效果不佳、无法耐受或存在禁忌症，且无严重左心室功能障碍、肺水肿或其他禁忌症的不稳定型心绞痛患者，若存在持续性或持续性心肌缺血，也推荐使用非二氢吡啶类钙通道阻滞剂（例如地尔硫卓、维拉帕米）。在治疗不稳定型或慢性稳定型心绞痛方面，维拉帕米的疗效似乎与β肾上腺素能阻滞剂（例如普萘洛尔）和/或口服硝酸酯类药物相当。对于不稳定型或慢性稳定型心绞痛，维拉帕米可降低发作频率，减少舌下含服硝酸甘油的剂量，并提高患者的运动耐量。 /美国产品标签包含/
维拉帕米用于快速转复阵发性室上性心动过速（PSVT）为窦性心律，包括与Wolff-Parkinson-White综合征或Lown-Ganong-Levine综合征相关的心动过速；该药还用于控制非预激性房扑或房颤的快速心室率。美国心脏病学会/美国心脏协会/心律学会（ACC/AHA/HRS）成人室上性心动过速患者管理指南推荐使用维拉帕米治疗各种室上性心动过速（例如，房扑、交界性心动过速、局灶性房性心动过速、房室结折返性心动过速（AVNRT））。通常情况下，静脉注射维拉帕米用于急性治疗，而口服维拉帕米用于持续治疗这些心律失常。/美国产品标签包含/
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药物警告
……左心室功能受损的患者同时使用维拉帕米和β受体阻滞剂可能存在危险，如果……心肌功能下降10-15%。/未指定盐/
……维拉帕米的绝对禁忌症（急性心肌梗死、完全性房室传导阻滞、心源性休克、显性心力衰竭）……不应与β肾上腺素能阻滞剂同时注射，或在β肾上腺素能阻滞剂半衰期的3倍以内使用。 /未指定盐/
维拉帕米的基本生理作用可能导致严重不良反应。/未指定盐/
通常与母乳喂养相容的母体用药：维拉帕米：婴儿报告的体征或症状或对泌乳的影响：无。/来自表6/ /未指定盐/
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药效学
维拉帕米是一种L型钙通道阻滞剂，具有抗心律失常、抗心绞痛和抗高血压作用。速释维拉帕米的作用持续时间相对较短，需要每日服用3至4次，但也有缓释制剂，可以每日服用一次。由于维拉帕米是一种负性肌力药物（即降低心肌收缩力），因此不应在严重左心室功能障碍或肥厚型心肌病患者中使用，因为维拉帕米引起的收缩力下降可能会增加加重这些原有疾病的风险。

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2-(3,4-二甲氧基苯基)-5-{[2-(3,4-二甲氧基苯基)乙基](甲基)氨基}-2-(丙-2-基)戊腈是一种叔胺化合物，它是3,4-二甲氧基苯基乙胺，其中与氮原子相连的氢原子被甲基和4-氰基-4-(3,4-二甲氧基苯基)-5-甲基己基取代。它是一种叔胺化合物、芳香醚、聚醚和腈。
维拉帕米是一种苯烷基胺类钙通道阻滞剂，用于治疗高血压、心律失常和心绞痛，是20世纪60年代初首个投入临床应用的钙通道拮抗剂。它属于非二氢吡啶类钙通道阻滞剂，该类药物包括地尔硫卓和氟桂利嗪等，但其化学结构与其他心脏活性药物无关。维拉帕米以消旋混合物的形式给药，其中包含等量的S-和R-对映体，二者药理作用不同——S-对映体的效力约为R-对映体的20倍，但代谢速度也更快。
维拉帕米是一种钙通道阻滞剂。维拉帕米的作用机制是作为钙通道拮抗剂、细胞色素P450 3A4抑制剂、细胞色素P450 3A抑制剂和P-糖蛋白抑制剂。
维拉帕米是第一代钙通道阻滞剂，用于治疗高血压、心绞痛和室上性心律失常。维拉帕米与治疗期间血清酶升高发生率较低以及罕见的临床表现明显的急性肝损伤病例相关。
据报道，维拉帕米存在于五味子（Teichospora striata）和五味子（Schisandra chinensis）中，并有相关数据。LOTUS——天然产物数据库显示，维拉帕米是一种苯烷基胺类钙通道阻滞剂。维拉帕米抑制细胞外钙离子跨膜流入心肌和血管平滑肌细胞，导致主要冠状动脉和全身动脉扩张，并降低心肌收缩力。该药还能抑制药物外排泵P-糖蛋白，P-糖蛋白在某些多药耐药肿瘤中过度表达，因此可能提高某些抗肿瘤药物的疗效。
维拉帕米是一种小分子药物，其临床试验阶段最高为IV期（涵盖所有适应症），于1981年首次获批，目前有4项已获批适应症和16项在研适应症。
维拉帕米仅在服用过该药的个体中检测到。维拉帕米是一种钙通道阻滞剂，属于IV类抗心律失常药物。[PubChem]维拉帕米抑制电压依赖性钙通道。具体而言，维拉帕米对心脏L型钙通道的作用会导致心肌收缩力和心率减弱，从而降低心率和血压。维拉帕米治疗丛集性头痛的作用机制被认为与其钙通道阻滞作用有关，但目前尚不清楚具体涉及哪些通道亚型。[PubChem] 钙通道拮抗剂毒性较大。在中毒处理中，早期识别至关重要。钙通道拮抗剂是常用的处方药，过量服用可能导致严重的并发症和死亡。对于任何出现不明原因低血压和传导异常的过量用药患者，都应怀疑其摄入了此类药物。对于存在潜在肝肾功能障碍且正在接受治疗剂量的患者，应注意其毒性风险。(A7844)
一种IV类抗心律失常药物，属于钙通道阻滞剂。

C27H38N2O4

454.61

454.283

C, 71.34; H, 8.43; N, 6.16; O, 14.08

52-53-9

Verapamil hydrochloride;152-11-4; 38321-02-7 (dexverapamil)

2520

Viscous, pale yellow oil

1.1±0.1 g/cm3

586.2±50.0 °C at 760 mmHg

25°C

308.3±30.1 °C

0.0±1.6 mmHg at 25°C

1.526

3.9

63.95

0

6

13

33

606

0

CC(C)C(CCCN(C)CCC1=CC(=C(C=C1)OC)OC)(C#N)C2=CC(=C(C=C2)OC)OC

SGTNSNPWRIOYBX-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C27H38N2O4/c1-20(2)27(19-28,22-10-12-24(31-5)26(18-22)33-7)14-8-15-29(3)16-13-21-9-11-23(30-4)25(17-21)32-6/h9-12,17-18,20H,8,13-16H2,1-7H3

2-(3,4-dimethoxyphenyl)-5-[2-(3,4-dimethoxyphenyl)ethyl-methylamino]-2-propan-2-ylpentanenitrile

NSC-135784; NSC 135784; VERAPAMIL; 52-53-9; Iproveratril; Dilacoran; Vasolan; Isoptimo; Isoptin; Verapamilo; Verapamil; Verapamilum; D-365;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~100 mg/mL (~219.97 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。