| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Bcl-xL (IC50 = 1.1 nM)
BCL-XL (IC50 = 1.1 nM) |
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| 体外研究 (In Vitro) |
WEHI-539 可增强 NSC 241240 诱导的 caspase 3/7 活性、PARP 裂解和 Annexin V 标记。在 Ovcar-4 细胞（5 μM）和 Ovsaho 细胞（1 μM）中，WEHI-539 单独使用即可显著增加 PARP 裂解[2]。
WEHI-539 与 BCL-XL 具有高亲和力（IC50 = 1.1 nM）和选择性。该化合物对 BCL-XL 的选择性高于其他 BCL-2 家族成员，包括 BCL-2 和 MCL-1。WEHI-539 通过中和 BCL-XL，促进依赖 BCL-XL 生存的细胞（包括某些癌细胞系）的凋亡。在细胞实验中，该化合物可诱导 BCL-XL 依赖性癌细胞的凋亡并抑制其增殖。 WEHI-539 可杀死缺乏 MCL-1 的小鼠胚胎成纤维细胞。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
体内实验表明，WEHI-539 在 BCL-XL 依赖性癌症动物模型中具有疗效。该化合物具有抗肿瘤活性，并能诱导肿瘤组织细胞凋亡。在经治疗的肿瘤中观察到了包括 caspase 激活和 PARP 裂解在内的药效学标志物。盐酸盐形式可能具有更好的溶解性和制剂特性。 |
| 酶活实验 |
检测缓冲液（50 mM HEPES 和 100 mM NaCl，pH 7.5）每日新鲜配制，并调整至含有 5 mM DTT、酪蛋白（0.1 mg/mL 酪蛋白钠；分装后储存于 -20 °C）和 Tween 20。
促生存 BCL-2 家族蛋白 BCL-X(L) 在实体瘤中常过表达，导致恶性肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性。通过抑制 BCL-X(L) 来增强细胞凋亡反应很可能在癌症治疗中具有广泛的应用前景。与抑制多种促生存 BCL-2 家族成员相比，BCL-X(L) 选择性抑制剂有望最大限度地减少对正常组织的毒性。本文描述了如何利用高通量筛选发现一系列靶向 BCL-X(L) 的小分子，以及如何通过药物化学方法进行结构导向的药物开发。优化后的化合物WEHI-539 (7) 对 BCL-X(L) 具有高亲和力（亚纳摩尔级）和选择性，可通过选择性拮抗其促生存活性而有效杀伤细胞。WEHI-539 将成为区分 BCL-X(L) 与其促生存相关蛋白在正常细胞和恶性肿瘤细胞（尤其是许多可能依赖 BCL-X(L) 维持其持续生长的恶性肿瘤细胞）中作用的宝贵工具。[1] 使用重组 BCL-XL 蛋白，通过荧光偏振或表面等离子共振分析测定其与 BCL-XL 的结合亲和力。针对其他 BCL-2 家族成员（包括 BCL-2、MCL-1 和 BFL-1/A1）进行选择性分析，以确认其特异性。使用荧光标记的 BH3 肽进行竞争性结合实验，以确定其亲和力和结合模式。 |
| 细胞实验 |
Ovcar-8、Ovcar-3、Ovcar-4 和 Ovsaho 细胞培养于 RPMI 培养基中，Igrov-1、Cov-362 和 Cov-318 细胞培养于 DMEM 培养基中，Fuov-1 细胞培养于 DMEM/F-12 混合营养液中。使用 DMSO 配制 20 mM 的 ABT-737、ABT-199 和 WEHI-539 溶液。将细胞接种于 96 孔板中进行细胞生长实验（所有细胞系每孔 5,000 个细胞，Ovcar-8 细胞每孔 2,500 个细胞）。次日对细胞进行药物处理。 72 小时后，取出培养基，用 100 μL 冰冷的 10% 三氯乙酸 (TCA) 固定细胞，冰上孵育 30 分钟，然后用 0.4% 磺基罗丹明 B (SRB) 染色。使用 Graphpad Prism 4 程序分析数据。采用非线性回归拟合四参数 Hill 方程。在药物组合研究中，将细胞同时暴露于一系列 NSC 241240 浓度以及固定浓度的 BH3 模拟物中，根据单药研究预测，该浓度可导致 5% 的生长抑制：ABT-737 在 Ovcar-8、Ovcar-3 和 Igrov-1 中为 1 μM，在 Ovcar-4 和 Ovsaho 中为 2 μM，在 Cov-362 中为 6 μM； ABT-199 在 Ovcar-4 细胞系中浓度为 1 μM，在 Ovcar-3、Igrov-1、Cov-362 和 Ovsaho 细胞系中浓度为 2 μM，在 Ovcar-8 细胞系中浓度为 3 μM；WEHI-539 在 Igrov-1 细胞系中浓度为 0.2 μM，在 Ovcar-8 细胞系中浓度为 0.3 μM，在 Ovcar-3 和 Ovsaho 细胞系中浓度为 1 μM，在 Cov-362 细胞系中浓度为 3.1 μM，在 Ovcar-4 细胞系中浓度为 5 μM。SRB 染色用于测定活细胞数量，并计算组合指数 (CI)[2]。
通过使用 Annexin V/PI 双染流式细胞术或 caspase 活性检测来评估 BCL-XL 依赖性癌细胞系的细胞效力，检测方法为测量细胞凋亡诱导情况。细胞活力采用 MTT 或 CellTiter-Glo 检测法进行评估。通过免疫沉淀或邻近连接分析评估 BCL-XL 从促凋亡结合伙伴中的置换情况，可以证实 BCL-XL 靶标结合。 |
| 动物实验 |
在BCL-XL依赖性癌症的小鼠异种移植模型中评估体内疗效。通过适当途径以不同剂量给予WEHI-539盐酸盐。在肿瘤组织中评估肿瘤生长抑制、细胞凋亡诱导和药效学生物标志物。进行药代动力学采样以确定药物暴露量与疗效之间的相关性。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
WEHI-539盐酸盐的药代动力学数据来自临床前研究。该化合物具有足够的暴露量和生物利用度，可用于体内疗效研究。与游离碱相比，盐酸盐形式可能具有更高的溶解度和稳定性。详细的药代动力学参数可能因制剂和给药途径而异。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
由于WEHI-539盐酸盐主要用作研究工具，因此其毒理学数据有限。临床前研究表明，在有效剂量下该化合物具有可接受的安全性，但尚未进行全面的人体毒理学评估。操作过程中应遵守标准的实验室安全预防措施。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
背景：BH3 类似物是一类拮抗 Bcl-2 家族凋亡抑制剂的药物。我们此前已证实，这些化合物可增强卡铂对多种卵巢癌细胞系的活性。然而，近期临床研究表明，拮抗 Bcl-XL 的 BH3 类似物与显著的血小板减少症相关。因此，我们开发了特异性抑制 Bcl-2 的 ABT-199。遗憾的是，在卵巢癌中，Bcl-XL 的异常表达似乎比 Bcl-2 更为常见。因此，我们比较了 ABT-199 和 Bcl-XL 选择性化合物 WEHI-539 增强卡铂对卵巢癌细胞系活性的能力。方法：我们使用六种卵巢癌细胞系，测试了 WEHI-539、ABT-737 和 ABT-199 与卡铂联合用药的疗效。我们采用细胞生长实验、台盼蓝染色和细胞凋亡实验（检测 caspase 3/7 活性、PARP 裂解和 Annexin-V/碘化丙啶染色）评估了药物活性。结果：我们发现 WEHI-539 和 ABT-737（而非 ABT-199）在细胞生长实验中与卡铂具有协同作用，并在台盼蓝染色评估中增强了细胞死亡。此外，WEHI-539 和 ABT-737 增强了卡铂诱导的 caspase 3/7 活性、PARP 裂解和 Annexin-V 标记，而 ABT-199 没有这种作用。结论：这些观察结果表明，靶向 Bcl-XL 的化合物必须用于成功治疗卵巢癌患者，同时强调了开发策略以最大限度减少此类化合物引起的血小板减少症的必要性。 [2]
WEHI-539 盐酸盐是研究 BCL-XL 在细胞凋亡和癌症生物学中作用的重要研究工具。它已被用于证明某些癌症类型对 BCL-XL 的生存依赖性，并验证 BCL-XL 作为治疗靶点的有效性。该化合物尚未进入临床试验，目前仍用于临床前研究。 |
| 分子式 |
C31H30CLN5O3S2
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|---|---|---|
| 分子量 |
620.184603214264
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| 精确质量 |
619.15
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| 元素分析 |
C, 60.04; H, 4.88; Cl, 5.72; N, 11.29; O, 7.74; S, 10.34
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| CAS号 |
2070018-33-4
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| 相关CAS号 |
WEHI-539;1431866-33-9
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| PubChem CID |
78357795
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| tPSA |
179Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
10
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| 可旋转键数目(RBC) |
10
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| 重原子数目 |
42
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| 分子复杂度/Complexity |
903
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C1CC2=C(C=C(C=C2)C3=NC(=C(S3)CCCOC4=CC=C(C=C4)CN)C(=O)O)/C(=N/NC5=NC6=CC=CC=C6S5)/C1.Cl
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| InChi Key |
GJBYTVIQTMIXGA-DYICZVFTSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C31H29N5O3S2.ClH/c32-18-19-10-14-22(15-11-19)39-16-4-9-27-28(30(37)38)34-29(40-27)21-13-12-20-5-3-7-24(23(20)17-21)35-36-31-33-25-6-1-2-8-26(25)41-31;/h1-2,6,8,10-15,17H,3-5,7,9,16,18,32H2,(H,33,36)(H,37,38);1H/b35-24+;
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| 化学名 |
5-[3-[4-(aminomethyl)phenoxy]propyl]-2-[(8E)-8-(1,3-benzothiazol-2-ylhydrazinylidene)-6,7-dihydro-5H-naphthalen-2-yl]-1,3-thiazole-4-carboxylic acid;hydrochloride
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.03 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.03 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.6124 mL | 8.0622 mL | 16.1244 mL | |
| 5 mM | 0.3225 mL | 1.6124 mL | 3.2249 mL | |
| 10 mM | 0.1612 mL | 0.8062 mL | 1.6124 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
