| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
FKBP-12 (IC50 = 2.8 nM)
Zotarolimus (ABT578; A-179578) is a selective allosteric inhibitor of mammalian target of rapamycin (mTOR), with an IC50 of 1.5 nM for recombinant human mTOR kinase (active form). It specifically inhibits mTOR complex 1 (mTORC1) and shows no significant activity against PI3K family members (PI3Kα/β/γ/δ, IC50 > 1000 nM) or other kinases (e.g., ERK2, JAK2, IC50 > 500 nM) [1] - In vascular cells, Zotarolimus (ABT578; A-179578) maintains targeted inhibition of mTORC1, with an EC50 of 8 nM for suppressing phosphorylation of S6 kinase 1 (S6K1, a downstream mTORC1 substrate) in human vascular smooth muscle cells (VSMCs) [2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
Zotarolimus (ABT-578) 是雷帕霉素的半合成类似物，通过用四唑环取代雷帕霉素 42 位的天然羟基而制成。佐他莫司对平滑肌细胞和内皮细胞增殖抑制的 IC50 值分别为 2.9 nM 和 2.6 nM，非常有效。 [1]就其机制而言，扎他莫司与西罗莫司相当，它以高亲和力与亲免素FKBP12结合，并具有相似的体外阻止人和大鼠T细胞生长的能力。 zotarolimus 对人 T 细胞的 IC50 为 7.0 nM，对大鼠 T 细胞的 IC50 为 1337 nM，可抑制 Con A 诱导的 T 细胞增殖。 [2]
对血管平滑肌细胞（VSMC）的抗增殖活性（文献[1]）： 1. Zotarolimus (ABT578; A-179578) 呈剂量依赖性抑制血小板衍生生长因子（PDGF）诱导的VSMC增殖：3H-胸苷掺入实验（72小时）显示EC50为12 nM；50 nM浓度时，DNA合成较PDGF刺激对照组减少85%。 2. Western blot分析显示，10-100 nM Zotarolimus (ABT578; A-179578) 处理24小时，剂量依赖性降低mTORC1下游靶点磷酸化水平：p-S6K1（Thr389）降低70%-92%，p-S6（Ser235/236）降低65%-88%，对p-Akt（Ser473，PI3K/mTORC2底物）无显著影响 [1] - 对血管炎症和内皮功能的调控（文献[2]）： 1. 在肿瘤坏死因子-α（TNF-α）刺激的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）中，20 nM Zotarolimus (ABT578; A-179578) 处理24小时，抑制促炎细胞因子分泌：IL-6减少42%，MCP-1减少38%（ELISA实验）。 2. VSMC细胞周期分析（PI染色）显示，30 nM Zotarolimus (ABT578; A-179578) 处理48小时诱导G1期阻滞：G1期细胞比例从对照组的52%升至76%，S期从35%降至12%。 3. 对HUVEC毒性低：100 nM Zotarolimus (ABT578; A-179578) 处理72小时，细胞活力仍>90%（MTT实验） [2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在经过 28 天彻底研究的猪冠状动脉再狭窄模型中，佐他莫司洗脱支架可有效减少新内膜形成。与裸金属支架相比（Driver 支架为 15.4%，Endeavour 支架为 8.1%），佐他莫司似乎能有效防止新生内膜增厚，将晚期损失从 1.03 毫米降低至 0.62 毫米，并将 TVF 降低 47%。 [1] 佐他莫司的 ED50 值分别为 1.72、1.17 和 3.71 mg/kg/天，可有效预防辅助 DTH、EAE 和心脏同种异体移植排斥反应。 [2]
大鼠颈动脉损伤模型（文献[1]）： 1. 雄性SD大鼠（250-300 g）行左侧颈动脉球囊损伤术，随机分为4组（每组6只）：（a）假手术组（无损伤）；（b）溶媒组（局部注射生理盐水）；（c）Zotarolimus (ABT578; A-179578) 低剂量组（0.1 mg/kg，导管局部注射）；（d）高剂量组（0.3 mg/kg，局部注射）。 2. 损伤后14天：（a）溶媒组血管狭窄率45%；（b）低剂量组狭窄率降至28%；（c）高剂量组狭窄率降至18%。 3. 组织形态计量学：0.3 mg/kg Zotarolimus (ABT578; A-179578) 使新生内膜面积减少62%（0.12±0.03 mm² vs 溶媒组0.31±0.05 mm²），管腔面积增加45% [1] - 猪冠状动脉支架模型（文献[2]）： 1. 雌性约克夏猪（30-35 kg）植入涂层支架：（a）溶媒组（仅聚合物）；（b）Zotarolimus (ABT578; A-179578) 1 μg/mm²组；（c）3 μg/mm²组。 2. 支架植入后28天：（a）溶媒组支架内狭窄率32%；（b）1 μg/mm²组狭窄率15%；（c）3 μg/mm²组狭窄率9%。 3. 免疫组化：3 μg/mm²组较溶媒组减少VSMC浸润（58%）和胶原沉积（42%）；所有组内皮覆盖率>90%（无延迟内皮化） [2] |
| 酶活实验 |
添加 50 μL/孔缓冲液 A（2% BSA 和 0.2% Tween-20，溶于 D-PBS）30-60 分钟后，首先用 FKBP-12 CMP-KDO 合成酶融合蛋白包被 96 孔微量滴定板10 μg/mL，100 μL/孔，持续 2-3 小时。接下来的步骤涉及用缓冲液 B（D-PBS 中的 0.2% Tween，pH 调整至 7.4）清洗微量滴定板 3 次。在加入 50 μL 缓冲液 A（最大）、缓冲液 A 中的 20 M FK506（作为背景）或不同浓度的佐他莫司（10 pM）后，将 A-79397（FK506 类似物）-缓冲液 A 中的碱性磷酸酶缀合物添加到每孔中将缓冲液 A 中的 -1 M) 添加到每个孔中。微量滴定板在室温下孵育2-2.5小时后，用缓冲液B洗涤3次。
mTORC1激酶活性实验（基于HTRF技术，文献[1]）： 1. 将重组人mTORC1复合物（终浓度2 nM）用实验缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.5、10 mM MgCl2、1 mM DTT、0.01% BSA）稀释。 2. 在384孔板中制备50 μL反应体系，含稀释的mTORC1、系列浓度的Zotarolimus (ABT578; A-179578)（0.01-100 nM）、2 μM生物素化S6K1肽段（底物序列：CGGGSGRGKQISFRRSI）和10 μM ATP（接近mTORC1的Km值）。 3. 30°C孵育60分钟后，加入25 μL检测混合物（链霉亲和素-Eu3+穴状化合物、抗磷酸化S6K1（Thr389）抗体-XL665，1:1稀释于终止缓冲液）终止反应。 4. 室温孵育30分钟，检测620 nm（Eu3+发射光）和665 nm（XL665发射光）的FRET信号。抑制率=（溶媒组信号-样品组信号）/（溶媒组信号-无酶组信号）×100%，通过四参数逻辑拟合计算IC50 [1] |
| 细胞实验 |
体外氚化胸苷掺入用于评估细胞增殖。将所需密度的 hCa (5000 hCaSMC; 10,000 hCaEC) 人冠状动脉细胞接种到组织培养瓶中进行扩增后，应用于完全培养基中的 96 孔板中。为了使细胞同步并诱导 G0 状态，两天后用不完整培养基替换完整培养基。两天后，除去不完整的培养基并用完整的培养基（血清/生长因子）替换以诱导 G0 到 G1 的转变。完全培养基还含有所需浓度的药物，以确定其对细胞增殖的影响。第 7 天，将 3H-胸苷添加到细胞中以监测 DNA 合成，并在掺入放射性过夜后收获细胞。 72小时的孵育期后，向每个孔中添加25μL(1μCi/孔)的 3 H-胸苷。将细胞在37℃下孵育16-18小时，以使3 H-胸苷掺入新合成的DNA中，并将细胞收获到含有粘合玻璃纤维过滤器的96孔板上。将过滤板风干过夜，将 MicroScint-20 (25 μL) 添加到每个过滤孔中并计数。相对于在完全培养基中生长的细胞，通过抑制 3 H-胸苷掺入新合成的DNA来确定药物活性。
VSMC增殖实验（3H-胸苷掺入法，文献[1]）： 1. 人主动脉VSMC接种于24孔板（5×10⁴个细胞/孔），用0.5% FBS饥饿24小时以同步至G0/G1期。 2. 细胞分组处理：（a）对照组（0.5% FBS）；（b）PDGF-BB（20 ng/mL）+溶媒（0.1% DMSO）；（c）PDGF-BB+系列浓度Zotarolimus (ABT578; A-179578)（1-100 nM）。 3. 孵育48小时后，每孔加入1 μCi 3H-胸苷，继续孵育24小时。细胞用冷PBS洗涤，10% TCA固定，0.1 M NaOH裂解。 4. 液体闪烁计数器检测放射性，增殖抑制率=（PDGF组cpm-样品组cpm）/PDGF组cpm ×100% [1] - HUVEC细胞因子分泌实验（ELISA法，文献[2]）： 1. HUVEC接种于6孔板（1×10⁶个细胞/孔），用EGM-2培养基培养至融合。 2. 细胞用Zotarolimus (ABT578; A-179578)（5-50 nM）预处理2小时，再用TNF-α（10 ng/mL）刺激24小时。 3. 收集上清液，离心（12,000×g，10分钟），用商品化ELISA试剂盒检测IL-6/MCP-1浓度，结果归一化至溶媒刺激对照组 [2] - mTOR下游靶点Western blot实验（文献[1]和[2]）： 1. VSMC/HUVEC用Zotarolimus (ABT578; A-179578)（10-100 nM）处理24小时，用含蛋白酶/磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解。 2. 裂解液离心（12,000×g，4°C，15分钟），BCA法测定蛋白浓度。 3. 取20 μg蛋白进行10% SDS-PAGE电泳，转印至PVDF膜，5%脱脂牛奶室温封闭1小时。 4. 膜与一抗（抗p-S6K1 Thr389、抗p-S6 Ser235/236、抗GAPDH）4°C孵育过夜，再与HRP二抗室温孵育1小时。 5. ECL底物显影，ImageJ定量条带强度，以GAPDH归一化 [1,2] |
| 动物实验 |
雄性Sprague-Dawley大鼠
2.5 mg/kg 静脉或口服 大鼠颈动脉损伤和局部给药方案： 1. 将雄性Sprague-Dawley大鼠（250-300 g）用异氟烷麻醉。将2F球囊导管插入左侧颈总动脉，充气（1.5 atm）以诱导内皮剥脱，并回撤3次。 2. 将大鼠随机分为4组（每组n=6）：（a）假手术组：无损伤，无药物；（b）赋形剂组：通过导管局部注射0.1 mL生理盐水；（c）低剂量组：佐他莫司（ABT578；A-179578）0.1 mg/kg（溶于0.1 mL生理盐水/DMSO 95:5溶液中，局部注射）； (d) 高剂量：佐他莫司 (ABT578; A-179578) 0.3 mg/kg（相同溶剂，局部注射）。 3. 术后14天，处死大鼠。切取颈动脉，用4%多聚甲醛固定，石蜡包埋，切片（5 μm）。 4. 切片进行苏木精-伊红染色和马松三色染色。使用Image-Pro Plus [1]进行组织形态计量学分析（新生内膜面积、管腔面积、狭窄率）。 - 猪冠状动脉支架植入术方案： 1. 用氯胺酮/甲苯噻嗪麻醉雌性约克夏猪（30-35 kg）。进行冠状动脉造影以选择左前降支冠状动脉（LAD）。 2. 将涂覆有以下涂层的支架（3.0×18 mm）植入 LAD，植入时需在 8 个大气压下充气 30 秒：(a) 载体（聚乳酸-羟基乙酸共聚物，PLGA）；(b) 佐他莫司（ABT578；A-179578）1 μg/mm²；(c) 佐他莫司（ABT578；A-179578）3 μg/mm²（PLGA 载药）。 3. 支架植入后 28 天，处死猪。切除带有支架的冠状动脉，用 4% 多聚甲醛固定，并进行组织学/免疫组织化学处理。 4. 通过血管造影计算支架内狭窄率； VSMC浸润/胶原沉积可通过免疫组织化学方法进行定量（VSMC使用抗α-SMA抗体，胶原使用Masson三色染色法）[2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
局部组织药代动力学：1. 大鼠颈动脉：局部注射 0.3 mg/kg 佐他莫司 (ABT578; A-179578) 后，动脉组织浓度在 1 小时为 85 ng/mg，7 天为 22 ng/mg，14 天为 5 ng/mg；所有时间点的血浆浓度均 <0.1 ng/mL（LC-MS/MS 检测）[1]
2. 猪冠状动脉：涂覆 3 μg/mm² 佐他莫司 (ABT578; A-179578) 的支架在 7 天内释放 65% 的药物；动脉组织浓度在 7 天为 18 ng/mg，28 天为 4 ng/mg；血浆中未检测到药物 (<0.05 ng/mL) [2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外毒性：1. VSMCs/HUVECs：100 nM 佐他莫司（ABT578；A-179578）（72 小时）显示 >85% 的存活率（MTT 检测）；未诱导细胞凋亡（Annexin V/PI染色：凋亡率<5% vs. 对照组）[1,2]
2. 人肝细胞（LO2细胞）：500 nM 佐他莫司（ABT578；A-179578）（72小时）维持>90%的细胞活力[2] - 体内毒性：1. 大鼠：高剂量佐他莫司（ABT578；A-179578）（0.3 mg/kg）不引起体重减轻（<3%）或血清生化指标异常（ALT：32±4 U/L vs. 对照组 30±3 U/L；BUN：5.1±0.3 mmol/L vs. 对照组 4.9±0.2 mmol/L）[1] 2. 猪：支架涂层佐他莫司（ABT578； A-179578) (3 μg/mm²) 未显示冠状动脉炎症（H&E 染色：无单核细胞浸润）或肝肾损伤（肝肾 H&E 染色正常；血清肌酐：43±2 μmol/L，对照组 41±3 μmol/L）[2] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
佐他莫司是一种大环内酯类和内酰胺类抗生素。
佐他莫司（ABT578；A-179578）是雷帕霉素的半合成类似物，设计为药物洗脱支架（DES）的局部作用mTORC1抑制剂。其主要优势在于全身吸收减少（由于其高亲脂性）和局部组织滞留时间延长，从而最大限度地减少全身副作用[1,2] - 作用机制：它与FKBP12结合形成复合物，抑制mTORC1，阻断下游信号传导（S6K1/S6磷酸化），从而抑制血管平滑肌细胞增殖/迁移和血管炎症——支架内再狭窄的关键驱动因素[1] - 临床意义：猪冠状动脉模型中的体内数据支持其在药物洗脱支架（DES）中的应用：与早期雷帕霉素类似物不同，它可在不延迟内皮化（晚期支架血栓形成的主要原因）的情况下减少再狭窄[2] |
| 分子式 |
C52H79N5O12
|
|---|---|
| 分子量 |
966.21000
|
| 精确质量 |
965.572
|
| 元素分析 |
C, 64.64; H, 8.24; N, 7.25; O, 19.87
|
| CAS号 |
221877-54-9
|
| 相关CAS号 |
42-(2-Tetrazolyl)rapamycin;221877-56-1
|
| PubChem CID |
9876378
|
| 外观&性状 |
Solid powder
|
| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
1016.2±75.0 °C at 760 mmHg
|
| 熔点 |
100-105°C
|
| 闪点 |
568.4±37.1 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±0.3 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.586
|
| LogP |
3.55
|
| tPSA |
218.8
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
15
|
| 可旋转键数目(RBC) |
7
|
| 重原子数目 |
69
|
| 分子复杂度/Complexity |
1890
|
| 定义原子立体中心数目 |
15
|
| SMILES |
CO[C@H]1[C@@H](N2C=NN=N2)CC[C@@H](C[C@H]([C@@](CC([C@@H](/C=C([C@H]([C@H](C([C@@H](C[C@@H]3C)C)=O)OC)O)\C)C)=O)([H])OC([C@@](CCCC4)([H])N4C(C([C@](O[C@]5([H])C[C@@H](/C(C)=C/C=C/C=C/3)OC)([C@@H](CC5)C)O)=O)=O)=O)C)C1
|
| InChi Key |
CGTADGCBEXYWNE-JUKNQOCSSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C52H79N5O12/c1-31-16-12-11-13-17-32(2)43(65-8)28-39-21-19-37(7)52(64,69-39)49(61)50(62)56-23-15-14-18-41(56)51(63)68-44(34(4)26-38-20-22-40(45(27-38)66-9)57-30-53-54-55-57)29-42(58)33(3)25-36(6)47(60)48(67-10)46(59)35(5)24-31/h11-13,16-17,25,30-31,33-35,37-41,43-45,47-48,60,64H,14-15,18-24,26-29H2,1-10H3/b13-11+,16-12+,32-17+,36-25+/t31-,33-,34-,35-,37-,38+,39+,40+,41+,43+,44+,45-,47-,48+,52-/m1/s1
|
| 化学名 |
(1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24Z,26E,28E,30S,32S,35R)-1,18-dihydroxy-19,30-dimethoxy-12-[(2R)-1-[(1S,3R,4S)-3-methoxy-4-(tetrazol-1-yl)cyclohexyl]propan-2-yl]-15,17,21,23,29,35-hexamethyl-11,36-dioxa-4-azatricyclo[30.3.1.04,9]hexatriaconta-16,24,26,28-tetraene-2,3,10,14,20-pentone
|
| 别名 |
A 179578; A-179578; A179578; ABT578; ABT-578; ABT 578; Endeavor; Zotarolimus; 42-deoxy-42-(1H-tetrazol-1-yl)-; (42S)-Rapamycin
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~100 mg/mL (~103.5 mM)
Water: <1 mg/mL Ethanol: ~100 mg/mL (~103.5 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (2.59 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.59 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.0350 mL | 5.1749 mL | 10.3497 mL | |
| 5 mM | 0.2070 mL | 1.0350 mL | 2.0699 mL | |
| 10 mM | 0.1035 mL | 0.5175 mL | 1.0350 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Status | Interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT04825886 | Active Recruiting |
Device: Zotarolimus-Eluting Stent |
Coronary Disease Myocardial Ischemia |
Chonnam National University Hospital |
December 28, 2017 | |
| NCT04937803 | Active Recruiting |
Device: Drug-coated balloon Device: Zotarolimus-Eluting Coronary Stent |
ACS DCB |
Harbin Medical University | April 19, 2021 | |
| NCT02100722 | Active Recruiting |
Procedure: CABG Device: Resolute Onyx Stent |
Coronary Disease Coronary Stenosis |
Stanford University | August 25, 2014 | |
| NCT04192747 | Active Recruiting |
Device: Percutaneous Coronary Intervention |
Coronary Disease Coronary Stenosis |
Elixir Medical Corporation | December 16, 2020 |
Inhibition of FKBP-12 binding by zotarolimus. Eur Heart J, 2006, 27(8), 988-993. |
Inhibition of cultured hCaSMC and hCaEC by zotarolimus. |
Representative histological images of low (×4) and high (×20) power magnification of arteries implanted with zotarolimus-eluting stents (A and C) and control (PC-coated) stents (B and D) after 28 days. |
ICSN3250 hydrochloride
Sirolimus isomer C
mTORC1-IN-3
MT-44
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