7,3',4'-Tri-O-methylluteolin

别名: 3’4’7-三甲氧基-5-羟基黄酮;5-羟基-7,3',4'-三甲氧基黄酮;7,3',4'-三-O-甲基毛地黄黄酮;7,3’,4’-三-O-甲基毛地黄黄酮;7,3',4'-三-O-甲基木黄;4'-三-O-甲基木犀草素
目录号: V31059 纯度: ≥98%
7,3',4'-Tri-O-methylluteolin (5-Hydroxy-3',4',7-trimethoxyflavone) 是一种黄酮类化合物,可以抑制炎症介质、NO、PGE2 和促炎细胞因子的释放。
7,3',4'-Tri-O-methylluteolin CAS号: 29080-58-8
产品类别: New2
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
7,3',4'-Tri-O-methylluteolin (5-Hydroxy-3',4',7-trimethoxyflavone) 是一种黄酮类化合物,可以抑制炎症介质、NO、PGE2 和促炎细胞因子的释放。对 LPS 诱导的巨噬细胞系具有有效的抗炎作用。 7,3',4'-Tri-O-甲基木犀草素显着降低诱导型一氧化氮合酶和环氧合酶-2 的 mRNA 表达。
生物活性&实验参考方法
靶点
- Nitric oxide (NO) production (IC50 = 25.6 ± 1.8 μM) [1]
- Nuclear factor-κB (NF-κB) p65 [1]
- Mitogen-activated protein kinases (MAPKs): ERK1/2, JNK, p38 [1]
- Inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase-2 (COX-2) [1]
- Tumor necrosis factor-α (TNF-α), interleukin-6 (IL-6) [1]
体外研究 (In Vitro)
- 7,3',4'-三-O-甲基木犀草素(7,3',4'-Tri-O-methylluteolin,化学结构为5-羟基-3′,4′,7-三甲氧基黄酮)在RAW 264.7巨噬细胞中对LPS诱导的NO生成具有剂量依赖性抑制活性,IC50值为25.6 ± 1.8 μM。50 μM浓度下,NO生成量较LPS模型组抑制78.3 ± 3.2%[1]
- 它显著降低LPS诱导的促炎细胞因子分泌:50 μM浓度下,TNF-α水平降低67.5 ± 4.1%,IL-6水平降低72.8 ± 3.8%[1]
- 该化合物在蛋白和mRNA水平均下调LPS诱导的iNOS和COX-2表达。50 μM浓度下,iNOS蛋白表达降低69.2 ± 3.5%,COX-2蛋白表达降低71.6 ± 3.3%;iNOS mRNA表达降低65.4 ± 4.0%,COX-2 mRNA表达降低68.9 ± 3.7%[1]
- 它抑制LPS诱导的NF-κB p65核转移,50 μM浓度下p65核组分含量降低58.7 ± 3.6%[1]
- 7,3',4'-三-O-甲基木犀草素抑制LPS诱导的MAPKs磷酸化,50 μM浓度下ERK1/2、JNK、p38磷酸化水平分别降低52.3 ± 3.4%、56.8 ± 3.9%和60.1 ± 4.2%[1]
- 浓度高达100 μM时,该化合物对RAW 264.7巨噬细胞无显著细胞毒性,细胞活力维持在90%以上[1]
- 计算机模拟(in silico)分子对接分析显示,该化合物与NF-κB p65的结合能为-7.8 kcal/mol,与COX-2的结合能为-8.2 kcal/mol,可直接结合靶点活性位点[1]
酶活实验
- NO生成检测:RAW 264.7巨噬细胞接种于96孔板,用7,3',4'-三-O-甲基木犀草素(12.5、25、50 μM)预处理1小时,再用LPS刺激24小时。收集上清液与Griess试剂混合,室温孵育15分钟,540 nm波长下测定吸光度定量NO水平,根据量效曲线计算IC50值[1]
- 促炎细胞因子检测:细胞按上述方法处理后收集上清液,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)按标准流程定量TNF-α和IL-6浓度[1]
- 蛋白表达Western blot检测:细胞用化合物(25、50 μM)预处理1小时,LPS刺激24小时(检测iNOS/COX-2)或30分钟(检测MAPKs/NF-κB p65)。裂解细胞,分离核组分与细胞质组分(检测p65),通过SDS-PAGE分离蛋白并转移至膜上,加入特异性抗体孵育,光密度法定量条带强度[1]
- mRNA表达RT-PCR检测:提取处理后细胞的总RNA,逆转录为cDNA。用iNOS、COX-2、TNF-α、IL-6及内参基因GAPDH的特异性引物进行PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳分析扩增产物,定量条带强度[1]
- 计算机模拟分子对接:构建化合物的三维结构并进行能量最小化,从蛋白质数据库获取靶点(NF-κB p65、COX-2)的晶体结构。使用相应软件进行对接分析,通过结合能、氢键及疏水相互作用评估结合亲和力[1]
细胞实验
- 细胞活力检测:RAW 264.7巨噬细胞以每孔5×10³个接种于96孔板,过夜孵育。加入7,3',4'-三-O-甲基木犀草素(12.5、25、50、100 μM),培养24小时。加入细胞活力检测试剂孵育4小时,570 nm波长下测定吸光度评估细胞毒性[1]
- 炎症反应检测:细胞以每孔2×10⁵个接种于6孔板,贴壁过夜。用化合物(12.5、25、50 μM)预处理1小时,再用LPS刺激24小时(检测细胞因子/NO)或特定时间点(检测蛋白/mRNA)。收集样本(上清液、细胞、RNA)用于后续实验[1]
参考文献

[1]. Protective effect of 5-hydroxy-3′,4′,7-trimethoxyflavone against inflammation induced by lipopolysaccharide in RAW 264.7 macrophage: in vitro study and in silico validation. Medicinal Chemistry Research, 2016,25(9), 1754–1767.

其他信息
据报道,5-羟基-3',4',7-三甲氧基黄酮存在于达乌里藜芦(Veratrum dahuricum)、胡鼠尾草(Salvia euphratica)以及其他有相关数据的生物体中。
- 7,3',4'-三-O-甲基木犀草素是一种黄酮类化合物,其化学结构为5-羟基-3',4',7-三甲氧基黄酮[1]
- 其抗炎机制涉及抑制NF-κB信号通路(阻断p65核转位)和MAPK通路(抑制ERK1/2、JNK、p38磷酸化),从而下调促炎细胞因子(TNF-α、IL-6)和酶(iNOS、COX-2)的表达[1]
- 计算机模拟验证证实其与关键炎症靶点(NF-κB p65、COX-2)具有良好的结合亲和力,支持其抗炎作用。体外抗炎活性[1]
- 该化合物显示出作为天然抗炎剂的潜力,因为它能有效抑制LPS诱导的巨噬细胞炎症,且无明显的细胞毒性[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C18H16O6
分子量
328.3160
精确质量
328.094
CAS号
29080-58-8
PubChem CID
5272653
外观&性状
White to yellow solid powder
密度
1.3±0.1 g/cm3
沸点
536.3±50.0 °C at 760 mmHg
闪点
197.0±23.6 °C
蒸汽压
0.0±1.5 mmHg at 25°C
折射率
1.606
LogP
3.22
tPSA
78.13
氢键供体(HBD)数目
1
氢键受体(HBA)数目
6
可旋转键数目(RBC)
4
重原子数目
24
分子复杂度/Complexity
490
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
HIXDQWDOVZUNNA-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C18H16O6/c1-21-11-7-12(19)18-13(20)9-15(24-17(18)8-11)10-4-5-14(22-2)16(6-10)23-3/h4-9,19H,1-3H3
化学名
2-(3,4-dimethoxyphenyl)-5-hydroxy-7-methoxychromen-4-one
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~20 mg/mL (~60.92 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: 2 mg/mL (6.09 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 悬浮液;超声助溶。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 20.0mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20%SBE-β-CD生理盐水中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.0458 mL 15.2290 mL 30.4581 mL
5 mM 0.6092 mL 3.0458 mL 6.0916 mL
10 mM 0.3046 mL 1.5229 mL 3.0458 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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