| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 靶点 |
TLR4/toll-like receptor 4
Monophosphoryl Lipid A is a Toll-like receptor 4 agonist. It binds to and activates TLR4 on antigen-presenting cells such as dendritic cells and macrophages. [1] It may also act directly on T cells, likely through TLR2 and/or TLR4 expressed on these cells. [2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
树突状细胞暴露于 100 μg/mL 单磷酰脂质 A 两小时，检测 NF-κB 激活并控制 TLR2 [2]。单磷酰脂质 A（5~100 μg/mL，24 小时；树突状细胞）诱导人 IL-12 产生[2]。当单磷酰脂质A从0.1μg增加到1μg时，成熟BMDC的比例同样增加[1]。单磷酰脂质 A 的作用可上调树突状细胞表面标志物。脂质 A 单磷酸化可改善 T 细胞反应。单磷酰脂质 A（CD4 T 细胞）的增加会刺激已激活的 T 细胞的钙离子 [2]。
- 掺入脂质体中的MPLA以剂量依赖性方式诱导骨髓来源树突状细胞成熟。当BMDC与含有递增量的MPLA的vacosome共培养时，成熟BMDC的百分比增加，在剂量超过1 μg时达到平台期。[1] - 含有MPLA和癌细胞膜的vacosome在72小时内显著促进BMDC成熟，在72小时观察到最高的成熟百分比（82.4% CD86+，80.8% CD80+），与单独的MPLA@Lip或癌细胞膜相比。[1] - Vacosome处理的BMDC和脾细胞在体外显示出增强的抗4T1细胞能力，比用简单混合的MPLA和癌细胞膜处理的免疫细胞更有效地降低4T1细胞活力。[1] - MPLA诱导人单核细胞来源的DC上HLA-DR、CD80、CD86、CD40和CD83的上调，尽管供体间的诱导效果存在异质性。较低剂量无效。[2] - MPLA诱导人DC产生显著的IL-12 p40，尽管水平低于LPS诱导的水平。IL-12生物活性通过PBMC培养物中IFN-γ的诱导得到证实，该诱导可被抗IL-12中和抗体阻断。[2] - MPLA在DC中诱导NF-κB核转位和激活，与LPS相似。它还调节TLR表达：TLR2 mRNA上调，而TLR4表达不受影响。[2] - MPLA在DC中诱导细胞内钙动员，而类似剂量的LPS则没有。[2] - 与LPS相比，MPLA在DC中诱导更快的ERK1/2磷酸化动力学，而p38磷酸化动力学相似。用PD98059预处理可增强MPLA诱导的IL-12产生，表明ERK激活负调控IL-12。[2] - MPLA增加CD4 T细胞系中的细胞内钙。当与抗CD3/抗CD28刺激结合时，MPLA进一步增强钙动员。[2] - MPLA单独不会诱导静息T细胞上的CD40L表达。然而，它显著增加了抗CD3诱导的CD40L表达。[2] - 高剂量的MPLA以不依赖于可溶性CD14的方式激活DC，因为抗CD14抗体不能阻断MPLA诱导的IL-12产生，而它们抑制了LPS诱导的IL-12。[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
据证实，所生产的单磷酸酯电位计 A 可以激活 APC 并增强小鼠 Th1 和 Th2 碘伏免疫反应的发展 [2]。
- 用含有MPLA和4T1癌细胞膜的vacosome免疫三次的BALB/c小鼠，在第28天血清中IL-12p70、TNF-α和IFN-γ水平显著高于用生理盐水、单独癌细胞膜或单独MPLA@Lip处理的小鼠。[1] - 在4T1肿瘤挑战模型中，预先用vacosome免疫的小鼠肿瘤生长受到显著抑制，肿瘤体积远小于其他组。[1] - Vacosome免疫的小鼠显示出延长的生存期，在挑战后50天仍有50%的小鼠存活，而其他组为0%。[1] - 来自vacosome免疫小鼠的肿瘤的流式细胞术分析显示，与其他组相比，CD8+ CTL的百分比最高，Treg的百分比最低。[1] - 来自vacosome免疫小鼠的脾脏显示，与其他组相比，效应记忆T细胞的百分比最高。[1] |
| 细胞实验 |
蛋白质印迹分析[2]
细胞类型：树突状细胞 测试浓度： 100 μg/ml 孵育时间： 2 hrs（小时） 实验结果：诱导 NF-κB 激活并调节 TLR2。 - BMDC成熟实验：将来自BALB/c小鼠的骨髓来源树突状细胞与各种制剂共培养24、48或72小时。然后用抗体染色细胞并通过流式细胞术分析。成熟度定义为表达CD80和CD86的CD11c+细胞的百分比。[1] - 体外杀伤实验：BMDC首先与不同制剂孵育3天以诱导成熟。然后将这些BMDC与脾细胞共培养另外3天。最后，将活化的免疫细胞与4T1靶细胞共培养24小时。使用细胞活力测定法评估4T1细胞活力。[1] - DC分离和培养：通过贴壁法从PBMC中分离人单核细胞，并用GM-CSF和IL-4培养6天以产生未成熟DC。然后用MPLA、LPS或培养基刺激DC。收集上清液进行IL-12 p40 ELISA。收获细胞用于表面标志物的流式细胞术分析。[2] - IL-12生物活性测定：将用MPLA或LPS处理的DC的上清液加入到PBMC培养物中48小时。通过ELISA测量PBMC上清液中的IFN-γ。为了确认IL-12依赖性，向平行培养物中加入抗IL-12中和抗体或同种型对照。[2] - 钙动员测定：用Fluo-3 AM染料加载DC或T细胞。用MPLA、LPS或抗CD3/抗CD28刺激细胞。随时间通过流式细胞术监测荧光。使用公式计算细胞内钙浓度。[2] - CD40L表达测定：在有或没有MPLA的情况下，用板结合的抗CD3抗体刺激纯化的CD4+ T细胞16小时。固定细胞，透化，并用抗CD40L抗体染色，然后通过流式细胞术分析。平行样品进行CD40L mRNA的RT-PCR分析。[2] |
| 动物实验 |
免疫接种和肿瘤攻击（Vacosome 研究）：雌性 BALB/c 小鼠（年龄未指定）每隔 7 天皮下注射三次不同配方的免疫制剂：生理盐水、癌细胞膜（1.6 mg）、MPLA@Lip（1 μg MPLA 脂质体）或 Vacosome（含 1 μg MPLA 和 1.6 mg 癌细胞膜的脂质体）。最后一次免疫接种三天后（肿瘤阶段第 0 天），小鼠皮下注射 4T1 细胞（数量未指定）进行攻击。每 2-3 天使用游标卡尺监测肿瘤生长情况。肿瘤体积计算公式为（长 × 宽²）/ 2。当肿瘤体积超过标准或进行生存分析（最长 50 天）时，对小鼠实施安乐死。分别于第 7、14 和 28 天采集血液样本，采用细胞因子微球阵列法进行细胞因子分析（IL-12p70、TNF-α、IFN-γ、IL-6）。在攻毒后第 14 天，处死部分小鼠；收集肿瘤和脾脏进行流式细胞术分析（CTL、Treg、TCM、TEM）。收集主要器官（心脏、肝脏、肾脏）进行 H&E 染色以评估毒性。[1]
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| 参考文献 |
| 分子式 |
C96H184N3O22P
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|---|---|
| 分子量 |
1763.5008
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| 精确质量 |
1762.31
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| 元素分析 |
C, 65.38; H, 10.52; N, 2.38; O, 19.96; P, 1.76
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| CAS号 |
1246298-63-4
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| 相关CAS号 |
960324-04-3;
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| PubChem CID |
134687617
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| tPSA |
363
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| 氢键供体(HBD)数目 |
9
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| 氢键受体(HBA)数目 |
22
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| 可旋转键数目(RBC) |
88
|
| 重原子数目 |
122
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| 分子复杂度/Complexity |
2550
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| 定义原子立体中心数目 |
14
|
| SMILES |
CCCCCCCCCCCCCC(=O)O[C@H](CCCCCCCCCCC)CC(=O)N[C@@H]1[C@H]([C@@H]([C@H](O[C@H]1OC[C@@H]2[C@H]([C@@H]([C@H]([C@H](O2)O)NC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)O)OC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)O)O)CO)OP(=O)(O)[O-])OC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC.[NH4+]
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| InChi Key |
UPAZUDUZKTYFBG-HNPUZVNISA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C96H181N2O22P.H3N/c1-7-13-19-25-31-37-39-45-51-57-63-69-85(104)114-79(67-61-55-49-43-35-29-23-17-11-5)73-84(103)98-90-94(119-88(107)74-80(68-62-56-50-44-36-30-24-18-12-6)115-86(105)70-64-58-52-46-40-38-32-26-20-14-8-2)92(120-121(110,111)112)81(75-99)117-96(90)113-76-82-91(108)93(118-87(106)72-78(101)66-60-54-48-42-34-28-22-16-10-4)89(95(109)116-82)97-83(102)71-77(100)65-59-53-47-41-33-27-21-15-9-3;/h77-82,89-96,99-101,108-109H,7-76H2,1-6H3,(H,97,102)(H,98,103)(H2,110,111,112);1H3/t77-,78-,79-,80-,81-,82-,89-,90-,91-,92-,93-,94-,95+,96-;/m1./s1
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| 化学名 |
azanium;[(2R,3S,4R,5R,6R)-6-[[(2R,3S,4R,5R,6S)-3,6-dihydroxy-5-[[(3R)-3-hydroxytetradecanoyl]amino]-4-[(3R)-3-hydroxytetradecanoyl]oxyoxan-2-yl]methoxy]-2-(hydroxymethyl)-5-[[(3R)-3-tetradecanoyloxytetradecanoyl]amino]-4-[(3R)-3-tetradecanoyloxytetradecanoyl]oxyoxan-3-yl] hydrogen phosphate
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| 别名 |
A1O9D5VN5D; LAPRETOLIMOD AMMONIUM; RefChem:1088361; 1246298-63-4; Monophosphoryl lipid A (synthetic);
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~25 mg/mL (~14.18 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (1.42 mM) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.5671 mL | 2.8353 mL | 5.6705 mL | |
| 5 mM | 0.1134 mL | 0.5671 mL | 1.1341 mL | |
| 10 mM | 0.0567 mL | 0.2835 mL | 0.5671 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
TLR7/8 agonist 13
L07-2
GNE-5152
3A-MPLA ammonium
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COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
