| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 靶点 |
TLR4/toll-like receptor 4
Monophosphoryl Lipid A is a Toll-like receptor 4 agonist. It binds to and activates TLR4 on antigen-presenting cells such as dendritic cells and macrophages. [1] It may also act directly on T cells, likely through TLR2 and/or TLR4 expressed on these cells. [2] Monophosphoryl lipid A targets Toll-like receptor 4 (TLR4), a pattern recognition receptor that recognizes bacterial lipopolysaccharide (LPS). By binding to TLR4, MPLA activates the innate immune system, leading to the production of pro-inflammatory cytokines and the upregulation of co-stimulatory molecules on antigen-presenting cells. This activation enhances the adaptive immune response, making MPLA an effective vaccine adjuvant. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
树突状细胞暴露于 100 μg/mL 的单磷酰脂质 A 两小时后，可检测到 NF-κB 激活并调控 TLR2 [2]。单磷酰脂质 A（5~100 μg/mL，24 小时；树突状细胞）可诱导人 IL-12 的产生 [2]。当单磷酰脂质 A 的浓度从 0.1 μg 增加到 1 μg 时，成熟骨髓来源树突状细胞 (BMDC) 的比例也随之增加 [1]。单磷酰脂质 A 的作用可上调树突状细胞表面标志物。脂质 A 的单磷酸化可增强 T 细胞反应。单磷酰脂质 A（CD4 T 细胞）的增加可刺激已激活 T 细胞的钙离子释放 [2]。单磷酰脂质 A 是一种 Toll 样受体 4 激动剂。它可与抗原呈递细胞（如树突状细胞和巨噬细胞）上的 TLR4 结合并激活 TLR4。 [1]
它也可能直接作用于T细胞，很可能是通过这些细胞上表达的TLR2和/或TLR4。[2] 在体外，单磷酰脂质A是一种强效的免疫细胞激活剂。它能激活抗原呈递细胞（APC），例如树突状细胞和巨噬细胞，从而促进它们的成熟和促炎细胞因子的产生。其活性通常通过测量TNF-α、IL-6和IL-12等细胞因子的产生，或通过测量CD80和CD86等共刺激分子的上调来评估。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
研究表明，所制备的单磷酸酯电位计 A 可激活 APC 并增强小鼠体内 Th1 和 Th2 碘化物免疫反应的发展 [2]。
- 用含有 MPLA 和 4T1 癌细胞膜的囊泡体免疫三次的 BALB/c 小鼠，在第 28 天时血清中 IL-12p70 (33.5 ± 6.5 pg/mL)、TNF-α (49.9 ± 7.8 pg/mL) 和 IFN-γ (55.9 ± 10.3 pg/mL) 的水平显著高于用生理盐水、单独癌细胞膜或单独 MPLA@Lip 处理的小鼠。 [1] - 在4T1肿瘤攻击模型中，与生理盐水组（1725.3 ± 1158.2 mm³）、癌细胞膜组（1488.0 ± 1107.4 mm³）或MPLA@Lip组（747.4 ± 454.7 mm³）相比，预先接种vacosome的小鼠在攻击后第21天肿瘤生长显著受到抑制（76.0 ± 63.9 mm³）。[1] - 接种vacosome的小鼠生存期延长，攻击后50天仍有50%的小鼠存活，而其他组的存活率为0%。 [1] - 流式细胞术分析显示，与其它组相比，经血管体免疫的小鼠肿瘤中CD8+ CTL细胞比例最高（39.4 ± 5.4%），Treg细胞比例最低（38.9 ± 6.7%）。[1] - 与接受癌细胞膜（38.8 ± 4.4%）、MPLA@Lip（49.5 ± 5.4%）或生理盐水（27.8 ± 6.0%）治疗的小鼠相比，经血管体免疫的小鼠脾脏中效应记忆T细胞（TEM：70.4 ± 6.0%）的比例最高。[1] 在体内，单磷酰脂质A被广泛用作疫苗佐剂，以增强Th1和Th2特异性免疫反应。它已被证明可以改善T细胞反应。它在传染病、癌症和免疫疗法研究的预防性和治疗性疫苗制剂中具有重要价值。其作为辅助药物的疗效已在众多临床前和临床研究中得到证实。 |
| 酶活实验 |
单磷酰脂质A的活性可通过体外细胞实验进行评估。将免疫细胞（如树突状细胞或巨噬细胞）用不同浓度的MPLA处理，并通过ELISA检测促炎细胞因子（例如TNF-α、IL-6）的产生。共刺激分子（例如CD80、CD86）的上调则通过流式细胞术进行评估。
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| 细胞实验 |
Western Blot 分析[2]
细胞类型： 树突状细胞 测试浓度： 100 μg/ml 孵育时间： 2 小时 实验结果： 诱导 NF-κB 激活并调节 TLR2。 - BMDC 成熟实验（Vacosome 研究）： 将 BALB/c 小鼠的骨髓来源树突状细胞与各种制剂（生理盐水、脂质对照、MPLA@Lip、癌细胞膜、vacosome）培养 24、48 或 72 小时。然后用抗 CD11c、抗 CD80 和抗 CD86 抗体对细胞进行染色，并通过流式细胞术进行分析。成熟度定义为表达 CD80 和 CD86 的 CD11c+ 细胞的百分比。[1] - 体外杀伤实验： 首先将 BMDC 与不同配方孵育 3 天以诱导成熟。然后将这些 BMDC 与脾细胞共培养 3 天。最后，将活化的免疫细胞与 4T1 靶细胞共培养 24 小时。使用细胞活力检测（可能是 MTT 或类似方法）评估 4T1 细胞的活力。[1] - DC 的分离和培养（MPLA 机制研究）： 通过贴壁法从 PBMC 中分离人单核细胞，并用 GM-CSF 和 IL-4 培养 6 天以生成未成熟的 DC。随后，用MPLA（5、50或100 μg/mL）、LPS（1 μg/mL）或培养基单独刺激DC细胞24小时。收集上清液用于IL-12 p40 ELISA检测。收集细胞用于流式细胞术分析表面标志物（HLA-DR、CD80、CD86、CD40、CD83）。[2] - IL-12生物活性测定：将用MPLA或LPS处理的DC细胞上清液加入PBMC培养物中，培养48小时。用ELISA检测PBMC上清液中的IFN-γ。为验证IL-12依赖性，向平行培养物中加入抗IL-12中和抗体或同型对照抗体（20 μg/mL）。 [2] - 钙动员测定：在普朗尼克酸和磺吡酮存在下，用 Fluo-3 AM 染料加载树突状细胞 (DC) 或 T 细胞。用 MPLA（DC 为 50 μg/mL；T 细胞为 10 μg/mL）、LPS 或抗 CD3/抗 CD28 抗体（用于 T 细胞）刺激细胞。通过流式细胞术监测荧光强度随时间的变化。使用以下公式计算细胞内钙离子浓度：[Ca²⁺]i = Kd(F - Fmin)/(Fmax - F)，其中 Fluo-3 的 Kd = 400 nM。 [2] - CD40L 表达检测： 将纯化的 CD4+ T 细胞在有或无 MPLA (10 μg/mL) 的情况下，用包被于培养板上的抗 CD3 抗体 (10 μg/mL) 刺激 16 小时。细胞经固定、透化处理后，用 PE 标记的抗 CD40L 抗体或同型对照抗体染色，然后进行流式细胞术分析。平行样本用于 CD40L mRNA 的 RT-PCR 分析。[2] 单磷酰脂质 A 的细胞活性在免疫细胞（如树突状细胞、巨噬细胞和 B 细胞）中进行评估。用 MPLA 处理细胞，并评估其对细胞活化、成熟和细胞因子产生的影响。通过测量 MHC 分子和共刺激标志物的上调来证实其增强抗原呈递的能力。 |
| 动物实验 |
免疫接种和肿瘤攻击（Vacosome 研究）：雌性 BALB/c 小鼠（年龄未指定）每隔 7 天皮下注射三次不同配方的免疫制剂：生理盐水、癌细胞膜（1.6 mg）、MPLA@Lip（1 μg MPLA 脂质体）或 Vacosome（含 1 μg MPLA 和 1.6 mg 癌细胞膜的脂质体）。最后一次免疫接种三天后（肿瘤阶段第 0 天），小鼠皮下注射 4T1 细胞（数量未指定）进行攻击。每 2-3 天使用游标卡尺监测肿瘤生长情况。肿瘤体积计算公式为（长 × 宽²）/ 2。当肿瘤体积超过标准或进行生存分析（最长 50 天）时，对小鼠实施安乐死。分别于第 7、14 和 28 天采集血液样本，采用细胞因子微球阵列法进行细胞因子分析（IL-12p70、TNF-α、IFN-γ、IL-6）。攻毒后第 14 天，处死部分小鼠；采集肿瘤和脾脏进行流式细胞术分析（CTL、Treg、TCM、TEM）。采集主要器官（心脏、肝脏、肾脏）进行 H&E 染色以评估毒性。[1]
在动物研究中，单磷酰脂质 A 通常作为疫苗制剂的一部分，通过皮下或肌肉注射给药。通过测量抗原特异性抗体滴度和 T 细胞反应来评估其增强对共同给药抗原的免疫反应的能力。其作为佐剂的安全性和有效性已在临床前和临床环境中得到广泛研究。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
单磷酰脂质A是一种复杂的脂质分子，分子量约为1730.44 g/mol，化学式为C96H181N2O21P。它来源于非致病性沙门氏菌的细胞壁。通常以粉末形式储存于-20°C。其溶解性和稳定性对于将其配制成疫苗佐剂至关重要。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外生物相容性：含有MPLA的血管体在培养1-3天后对骨髓来源树突状细胞(BMDC)无毒性，细胞活力与阴性对照组相似。仅阳性对照组（1% Triton X-100）显著降低了细胞活力。[1]
- 体内安全性：用血管体免疫的小鼠在28天内体重增长正常，与生理盐水处理的小鼠相当。第28天对心脏、肝脏和肾脏进行H&E染色，未见明显的炎症细胞浸润、组织肿胀、粘连或增生，表明无心脏毒性、肝毒性或肾毒性。[1] 单磷酰脂质A的毒性特征源于其作为TLR4激动剂的作用机制。它是脂质A的脱毒衍生物，毒性低于LPS，同时保留了其免疫刺激特性。大量临床研究已证实其作为疫苗佐剂的安全性。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
单磷酰脂质A (MPLA) 是源自非致病性沙门氏菌细胞壁脂多糖的脱毒衍生物。它保留了免疫刺激特性，但与脂多糖 (LPS) 相比，毒性显著降低。[1][2] 由于 MPLA 能够结合并激活 TLR4，增强细胞介导的免疫反应，因此已被用于疟疾、HIV-1 和 B 型脑膜炎球菌疾病的人体疫苗试验。[1] 由于其疏水性，MPLA 需要配制成脂质体等递送系统才能有效递送。在 vacosome 研究中，MPLA 与癌细胞膜抗原一起被包裹在脂质体中。 [1] - MPLA可通过激活抗原呈递细胞(APC)发挥佐剂作用，但单独使用MPLA不足以启动癌症特异性适应性免疫，必须与肿瘤抗原共同递送。[1] - 将MPLA和癌细胞膜抗原结合于脂质体中的vacosome平台展现出作为预防性癌症疫苗的临床转化潜力。该平台合成工艺简便，原料易得，且MPLA已获得FDA批准作为佐剂。[1] - MPLA通过双重作用增强T细胞反应：高剂量时，它诱导树突状细胞(DC)成熟；低剂量时，它直接作用于T细胞，在T细胞受体(TCR)激活后增加钙动员并上调CD40L表达，从而向DC提供共刺激信号。 [2]
- 经MPLA处理的人类树突状细胞(DC)诱导的混合Th1/Th2细胞表型可能最有利于体液免疫应答，但在某些应用中可能需要与其他佐剂（例如QS21）联合使用，以增强Th1应答和CTL活化。[2] 单磷酰脂质A (MPLA，CAS：1246298-63-4) 是一种成熟且广泛使用的疫苗佐剂。它能够激活TLR4并增强Th1和Th2免疫应答，使其成为疫苗开发和免疫治疗研究的重要工具。它是多种FDA批准疫苗的关键成分，并且一直是广泛研究的对象。 |
| 分子式 |
C96H184N3O22P
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|---|---|
| 分子量 |
1763.5008
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| 精确质量 |
1762.31
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| 元素分析 |
C, 65.38; H, 10.52; N, 2.38; O, 19.96; P, 1.76
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| CAS号 |
1246298-63-4
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| 相关CAS号 |
960324-04-3;
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| PubChem CID |
134687617
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| tPSA |
363
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| 氢键供体(HBD)数目 |
9
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| 氢键受体(HBA)数目 |
22
|
| 可旋转键数目(RBC) |
88
|
| 重原子数目 |
122
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| 分子复杂度/Complexity |
2550
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| 定义原子立体中心数目 |
14
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| SMILES |
CCCCCCCCCCCCCC(=O)O[C@H](CCCCCCCCCCC)CC(=O)N[C@@H]1[C@H]([C@@H]([C@H](O[C@H]1OC[C@@H]2[C@H]([C@@H]([C@H]([C@H](O2)O)NC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)O)OC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)O)O)CO)OP(=O)(O)[O-])OC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC.[NH4+]
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| InChi Key |
UPAZUDUZKTYFBG-HNPUZVNISA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C96H181N2O22P.H3N/c1-7-13-19-25-31-37-39-45-51-57-63-69-85(104)114-79(67-61-55-49-43-35-29-23-17-11-5)73-84(103)98-90-94(119-88(107)74-80(68-62-56-50-44-36-30-24-18-12-6)115-86(105)70-64-58-52-46-40-38-32-26-20-14-8-2)92(120-121(110,111)112)81(75-99)117-96(90)113-76-82-91(108)93(118-87(106)72-78(101)66-60-54-48-42-34-28-22-16-10-4)89(95(109)116-82)97-83(102)71-77(100)65-59-53-47-41-33-27-21-15-9-3;/h77-82,89-96,99-101,108-109H,7-76H2,1-6H3,(H,97,102)(H,98,103)(H2,110,111,112);1H3/t77-,78-,79-,80-,81-,82-,89-,90-,91-,92-,93-,94-,95+,96-;/m1./s1
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| 化学名 |
azanium;[(2R,3S,4R,5R,6R)-6-[[(2R,3S,4R,5R,6S)-3,6-dihydroxy-5-[[(3R)-3-hydroxytetradecanoyl]amino]-4-[(3R)-3-hydroxytetradecanoyl]oxyoxan-2-yl]methoxy]-2-(hydroxymethyl)-5-[[(3R)-3-tetradecanoyloxytetradecanoyl]amino]-4-[(3R)-3-tetradecanoyloxytetradecanoyl]oxyoxan-3-yl] hydrogen phosphate
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| 别名 |
A1O9D5VN5D; LAPRETOLIMOD AMMONIUM; RefChem:1088361; 1246298-63-4; Monophosphoryl lipid A (synthetic);
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~25 mg/mL (~14.18 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (1.42 mM) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.5671 mL | 2.8353 mL | 5.6705 mL | |
| 5 mM | 0.1134 mL | 0.5671 mL | 1.1341 mL | |
| 10 mM | 0.0567 mL | 0.2835 mL | 0.5671 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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463611831
