| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
Monophosphoryl Lipid A is a Toll-like receptor 4 agonist. It binds to and activates TLR4 on antigen-presenting cells such as dendritic cells and macrophages. [1]
It may also act directly on T cells, likely through TLR2 and/or TLR4 expressed on these cells. [2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
- 掺入脂质体中的MPLA以剂量依赖性方式诱导骨髓来源树突状细胞成熟。当BMDC与含有递增量的MPLA的vacosome共培养时，成熟BMDC的百分比增加，在剂量超过1 μg时达到平台期。[1]
- 含有MPLA和癌细胞膜的vacosome在72小时内显著促进BMDC成熟，在72小时观察到最高的成熟百分比（82.4% CD86+，80.8% CD80+），与单独的MPLA@Lip或癌细胞膜相比。[1] - Vacosome处理的BMDC和脾细胞在体外显示出增强的抗4T1细胞能力，比用简单混合的MPLA和癌细胞膜处理的免疫细胞更有效地降低4T1细胞活力。[1] - MPLA诱导人单核细胞来源的DC上HLA-DR、CD80、CD86、CD40和CD83的上调，尽管供体间的诱导效果存在异质性。较低剂量无效。[2] - MPLA诱导人DC产生显著的IL-12 p40，尽管水平低于LPS诱导的水平。IL-12生物活性通过PBMC培养物中IFN-γ的诱导得到证实，该诱导可被抗IL-12中和抗体阻断。[2] - MPLA在DC中诱导NF-κB核转位和激活，与LPS相似。它还调节TLR表达：TLR2 mRNA上调，而TLR4表达不受影响。[2] - MPLA在DC中诱导细胞内钙动员，而类似剂量的LPS则没有。[2] - 与LPS相比，MPLA在DC中诱导更快的ERK1/2磷酸化动力学，而p38磷酸化动力学相似。用PD98059预处理可增强MPLA诱导的IL-12产生，表明ERK激活负调控IL-12。[2] - MPLA增加CD4 T细胞系中的细胞内钙。当与抗CD3/抗CD28刺激结合时，MPLA进一步增强钙动员。[2] - MPLA单独不会诱导静息T细胞上的CD40L表达。然而，它显著增加了抗CD3诱导的CD40L表达。[2] - 高剂量的MPLA以不依赖于可溶性CD14的方式激活DC，因为抗CD14抗体不能阻断MPLA诱导的IL-12产生，而它们抑制了LPS诱导的IL-12。[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
- 掺入脂质体中的MPLA以剂量依赖性方式诱导骨髓来源树突状细胞成熟。当BMDC与含有递增量的MPLA的vacosome共培养时，成熟BMDC的百分比增加，在剂量超过1 μg时达到平台期。[1]
- 含有MPLA和癌细胞膜的vacosome在72小时内显著促进BMDC成熟，在72小时观察到最高的成熟百分比（82.4% CD86+，80.8% CD80+），与单独的MPLA@Lip或癌细胞膜相比。[1] - Vacosome处理的BMDC和脾细胞在体外显示出增强的抗4T1细胞能力，比用简单混合的MPLA和癌细胞膜处理的免疫细胞更有效地降低4T1细胞活力。[1] - MPLA诱导人单核细胞来源的DC上HLA-DR、CD80、CD86、CD40和CD83的上调，尽管供体间的诱导效果存在异质性。较低剂量无效。[2] - MPLA诱导人DC产生显著的IL-12 p40，尽管水平低于LPS诱导的水平。IL-12生物活性通过PBMC培养物中IFN-γ的诱导得到证实，该诱导可被抗IL-12中和抗体阻断。[2] - MPLA在DC中诱导NF-κB核转位和激活，与LPS相似。它还调节TLR表达：TLR2 mRNA上调，而TLR4表达不受影响。[2] - MPLA在DC中诱导细胞内钙动员，而类似剂量的LPS则没有。[2] - 与LPS相比，MPLA在DC中诱导更快的ERK1/2磷酸化动力学，而p38磷酸化动力学相似。用PD98059预处理可增强MPLA诱导的IL-12产生，表明ERK激活负调控IL-12。[2] - MPLA增加CD4 T细胞系中的细胞内钙。当与抗CD3/抗CD28刺激结合时，MPLA进一步增强钙动员。[2] - MPLA单独不会诱导静息T细胞上的CD40L表达。然而，它显著增加了抗CD3诱导的CD40L表达。[2] - 高剂量的MPLA以不依赖于可溶性CD14的方式激活DC，因为抗CD14抗体不能阻断MPLA诱导的IL-12产生，而它们抑制了LPS诱导的IL-12。[2] |
| 细胞实验 |
- BMDC成熟实验：将来自BALB/c小鼠的骨髓来源树突状细胞与各种制剂共培养24、48或72小时。然后用抗体染色细胞并通过流式细胞术分析。成熟度定义为表达CD80和CD86的CD11c+细胞的百分比。[1]
- 体外杀伤实验：BMDC首先与不同制剂孵育3天以诱导成熟。然后将这些BMDC与脾细胞共培养另外3天。最后，将活化的免疫细胞与4T1靶细胞共培养24小时。使用细胞活力测定法评估4T1细胞活力。[1] - DC分离和培养：通过贴壁法从PBMC中分离人单核细胞，并用GM-CSF和IL-4培养6天以产生未成熟DC。然后用MPLA、LPS或培养基刺激DC。收集上清液进行IL-12 p40 ELISA。收获细胞用于表面标志物的流式细胞术分析。[2] - IL-12生物活性测定：将用MPLA或LPS处理的DC的上清液加入到PBMC培养物中48小时。通过ELISA测量PBMC上清液中的IFN-γ。为了确认IL-12依赖性，向平行培养物中加入抗IL-12中和抗体或同种型对照。[2] - 钙动员测定：用Fluo-3 AM染料加载DC或T细胞。用MPLA、LPS或抗CD3/抗CD28刺激细胞。随时间通过流式细胞术监测荧光。使用公式计算细胞内钙浓度。[2] - CD40L表达测定：在有或没有MPLA的情况下，用板结合的抗CD3抗体刺激纯化的CD4+ T细胞16小时。固定细胞，透化，并用抗CD40L抗体染色，然后通过流式细胞术分析。平行样品进行CD40L mRNA的RT-PCR分析。[2] |
| 动物实验 |
BMDC成熟度测定（Vacosome研究）： 将BALB/c小鼠的骨髓来源树突状细胞与不同配方（生理盐水、脂质对照、MPLA@Lip、癌细胞膜、vacosome）培养24、48或72小时。然后用抗CD11c、抗CD80和抗CD86抗体对细胞进行染色，并通过流式细胞术进行分析。成熟度定义为表达CD80和CD86的CD11c+细胞的百分比。[1]
- 体外杀伤实验： 首先将BMDC与不同配方孵育3天以诱导成熟。然后将这些BMDC与脾细胞共培养3天。最后，将活化的免疫细胞与4T1靶细胞共培养24小时。采用细胞活力检测法（可能是 MTT 或类似方法）评估 4T1 细胞的活力。[1] - DC 分离和培养（MPLA 机制研究）： 通过贴壁法从外周血单核细胞 (PBMC) 中分离人单核细胞，并在 GM-CSF 和 IL-4 的培养基中培养 6 天以生成未成熟的 DC。然后用 MPLA（5、50 或 100 μg/mL）、LPS (1 μg/mL) 或培养基单独刺激 DC 24 小时。收集上清液用于 IL-12 p40 ELISA 检测。收集细胞用于流式细胞术分析表面标志物（HLA-DR、CD80、CD86、CD40、CD83）。 [2] - IL-12 生物活性测定： 将经 MPLA 或 LPS 处理的 DC 上清液加入 PBMC 培养物中培养 48 小时。采用 ELISA 法测定 PBMC 上清液中的 IFN-γ 水平。为确认 IL-12 依赖性，向平行培养物中加入抗 IL-12 中和抗体或同型对照抗体（20 μg/mL）。[2] - 钙动员测定： 在普朗尼克酸和磺吡酮存在下，用 Fluo-3 AM 染料加载 DC 或 T 细胞。用 MPLA（DC 为 50 μg/mL；T 细胞为 10 μg/mL）、LPS 或抗 CD3/抗 CD28 抗体（用于 T 细胞）刺激细胞。通过流式细胞术监测荧光强度随时间的变化。细胞内钙离子浓度采用以下公式计算：[Ca²⁺]i = Kd(F - Fmin)/(Fmax - F)，其中 Fluo-3 的 Kd 值为 400 nM。[2] - CD40L 表达检测： 将纯化的 CD4+ T 细胞与包被于培养板上的抗 CD3 抗体 (10 μg/mL) 在有或无 MPLA (10 μg/mL) 的情况下刺激 16 小时。细胞经固定、透化处理后，用 PE 标记的抗 CD40L 抗体或同型对照抗体染色，然后进行流式细胞术分析。同时，另取平行样品进行 CD40L mRNA 的 RT-PCR 分析。[2] |
| 参考文献 |
| 分子式 |
C96H181N2O22P
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|---|---|
| 分子量 |
1746.44
|
| 精确质量 |
1745.284362
|
| CAS号 |
960324-04-3
|
| 相关CAS号 |
Monophosphoryl lipid A;1246298-63-4;Monophosphoryl lipid A Triethylamine
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| PubChem CID |
131846121
|
| 外观&性状 |
Typically exists as solids at room temperature
|
| LogP |
28.6
|
| tPSA |
359 Ų
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
9
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
22
|
| 可旋转键数目(RBC) |
88
|
| 重原子数目 |
121
|
| 分子复杂度/Complexity |
2550
|
| 定义原子立体中心数目 |
14
|
| SMILES |
N([C@H]1[C@@H](O[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H]1OC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](NC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](OC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H]1O)C(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC
|
| InChi Key |
JSNQJZJCKAFSHT-OPYGSFAOSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C96H181N2O22P/c1-7-13-19-25-31-37-39-45-51-57-63-69-85(104)114-79(67-61-55-49-43-35-29-23-17-11-5)73-84(103)98-90-94(119-88(107)74-80(68-62-56-50-44-36-30-24-18-12-6)115-86(105)70-64-58-52-46-40-38-32-26-20-14-8-2)92(120-121(110,111)112)81(75-99)117-96(90)113-76-82-91(108)93(118-87(106)72-78(101)66-60-54-48-42-34-28-22-16-10-4)89(95(109)116-82)97-83(102)71-77(100)65-59-53-47-41-33-27-21-15-9-3/h77-82,89-96,99-101,108-109H,7-76H2,1-6H3,(H,97,102)(H,98,103)(H2,110,111,112)/t77-,78-,79-,80-,81-,82-,89-,90-,91-,92-,93-,94-,95+,96-/m1/s1
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| 化学名 |
[(2S,3R,4R,5S,6R)-2,5-dihydroxy-6-[[(2R,3R,4R,5S,6R)-6-(hydroxymethyl)-5-phosphonooxy-3-[[(3R)-3-tetradecanoyloxytetradecanoyl]amino]-4-[(3R)-3-tetradecanoyloxytetradecanoyl]oxyoxan-2-yl]oxymethyl]-3-[[(3R)-3-hydroxytetradecanoyl]amino]oxan-4-yl] (3R)-3-hydroxytetradecanoate
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| 别名 |
Glucopyranosyl lipid A free acid; Lapretolimod; Lapretolimod [INN]; 960324-04-3; 6CY69F2AH3; UNII-6CY69F2AH3;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.5726 mL | 2.8630 mL | 5.7259 mL | |
| 5 mM | 0.1145 mL | 0.5726 mL | 1.1452 mL | |
| 10 mM | 0.0573 mL | 0.2863 mL | 0.5726 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
TLR7/8 agonist 13
L07-2
GNE-5152
3A-MPLA ammonium
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