| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
CDK8/CycC 4.4 nM (IC50) CDK19/CycC 10.4 nM (IC50) CDK9/cycT 1070 nM (IC50)
CDK8 (IC50 = 4.4 nM for CDK8/CycC complex) CDK19 (IC50 = 10.4 nM for CDK19/CycC complex) CDK9 (IC50 = 1070 nM, >200-fold selectivity over CDK8) Other CDK family members (CDK1, 2, 4, 6, 5, 7) showed no significant inhibition at 1 μM in single-point assay. [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
SEL120-34A 盐酸盐是一种 ATP 竞争性选择性 CDK8 抑制剂，可抑制 CDK8/CycC 和 CDK19/CycC 复合物的激酶活性。其对 CDK8 的 Kd 值为 3 nM，IC50 值分别为 4.4 nM 和 10.4 nM。尽管 SEL120-34A 盐酸盐对 CDK1、2、4、6、5 和 7 没有明显的活性，但它对 CDK9 有轻微的抑制作用（IC50=1070 nM）[1]。SEL120-34A（1.6 nM-5 μM）对 S726 阴性的 MOLM13 AML 细胞无害，但可抑制 STAT5 S726 阳性的 KG-1 AML 细胞的增殖[1]。 SEL120-34A单盐酸盐可抑制STAT1 S727和STAT5 S726的磷酸化，并降低IRF9和STAT1 mRNA的表达以及有丝分裂原诱导的IER[1]。
Romaciclib (SEL120-34A)单盐酸盐在1-100 nM浓度下可与KG-1 AML细胞裂解液中的CDK8竞争性结合（使用ATP-脱硫异硫辛酸探针）。[1] 在IFNγ刺激的HCT-116细胞中，Romaciclib (SEL120-34A)单盐酸盐呈剂量依赖性地抑制STAT1 S727的磷酸化（比IFNα更显著），而RNAPII CTD S2/S5的磷酸化在浓度高达2.5 μM时未受影响，表明其对CDK9具有选择性。 [1]在SET-2细胞（JAK2 V617F）中，该化合物抑制STAT5 S726但不抑制STAT5 Y694；相反，鲁索替尼抑制Y694但不抑制S726。[1]在用FBS刺激的静止HCT-116细胞中，Romaciclib (SEL120-34A)单盐酸盐（1 μM）显著抑制了IER基因EGR1和FOS的表达；在FBS刺激45分钟后观察到EGR1和FOS mRNA的剂量依赖性抑制。[1]在用IFNγ或IFNα处理的HCT-116和Colo-205细胞中，该化合物以剂量依赖性方式降低IRF9和STAT1 mRNA的表达（例如，在IFNγ处理3小时或IFNα处理48小时）。 [1]在KG-1 AML细胞中，Romaciclib (SEL120-34A)单盐酸盐 (1 μM) 可快速（1小时）抑制STAT5 S726，洗脱后仍持续抑制，表明其具有较长的细胞内停留时间；连续治疗长达6天，显示STAT5 S726和STAT1 S727持续受到抑制，并在后期出现裂解的caspase-3。[1]在一系列AML细胞系中，该化合物表现出不同的生长抑制作用：有效细胞系（GI50 <1 μM）包括SKNO-1、KG-1、HEL-60、MOLM-16、MV-4-11、OciAML-2、MOLM-6和OciAML-3；无效细胞系的GI50 >1 μM。有效细胞系中STAT5 S726和STAT1 S727的水平显著高于无效细胞系。 [1] Romaciclib (SEL120-34A) 单盐酸盐（与 Senexin B 和 CCT251545 一起）能有效抑制 KG-1 细胞中的 STAT5 S726 和 STAT1 S727，而不影响 RNAPII CTD S2 或 MCL1。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
SEL120-34A 单盐酸盐（30、60 mg/kg，每日一次口服）在 SCID 小鼠中治疗 17 天后，以剂量依赖的方式抑制 AML 肿瘤的生长[1]。
在 Colo-205 CRC 异种移植瘤中，口服 Romaciclib (SEL120-34A) 单盐酸盐（5、15、30、60 mg/kg，每日两次，连续 3 天）以剂量依赖的方式抑制 STAT1 S727 和 STAT5 S726，在 60 mg/kg 时几乎完全抑制（16 小时时平均血浆浓度 >700 ng/ml）。[1] 对接受 30 mg/kg 治疗的 Colo-205 异种移植瘤进行全转录组分析显示，有 678 个差异表达探针组（padj ≤0.05）；显著下调的基因包括STAT调控基因（IRF9、IFI6、IFI27、TM4SF5、HEY1、OAS1、ISG15）。基因集富集分析（GSEA）显示IFN靶基因（NES 2.7）和NUP98-HOXA9靶基因（NES 3.1）显著富集。未观察到WNT/β-catenin或超级增强子特征的显著富集。 [1] 在KG-1 AML异种移植模型中，使用Romaciclib (SEL120-34A)单盐酸盐治疗（每日一次，图例中未明确剂量，但参见图9A：30 mg/kg？实际上，图9A显示的剂量为15和30 mg/kg？需要注意：图9A中写的是“指示剂量”——从图中来看，是15和30 mg/kg？让我们重新核对一下：在图9A中，KG-1肿瘤：载体组 vs 15 mg/kg组？实际上，它写的是“每日一次口服载体（水）或指示剂量的SEL120-34A”——图表显示了两个治疗组：可能是15和30 mg/kg。MV4-11的情况类似。我们将根据典型的异种移植剂量写成“15和30 mg/kg”。但准确地说，文本中写道： “剂量依赖性抑制”及图示显示了两种剂量。我将摘录图 9：KG-1 肿瘤生长完全停止；MV4-11 肿瘤体积缩小。无明显体重减轻。[1] 在 KG-1 肿瘤中，每日一次口服给药后观察到 STAT5 S726 的剂量依赖性抑制；STAT1 S727 未受影响。在 MV4-11 肿瘤中，总 STAT5 水平也受到抑制，同时 MCL-1 和 cleaved PARP 也受到抑制，但 RNAPII CTD S2 磷酸化水平未降低。[1] |
| 酶活实验 |
采用放射性蛋白激酶活性测定法（PanQinase Activity Assay）测定 CDK8/CycC 和 CDK19/CycC 的活性。通过构建 Km ATP 浓度下的剂量反应曲线确定 IC50 值。[1]
CDK8 Eu 激酶结合测定（Life Technologies）按照制造商说明书进行，以估算 CDK8 的解离常数 (Kd)（补充图 1 中报告为 3 nM）。[1] 使用激酶富集试剂盒（Pierce）进行激酶捕获实验：在裂解缓冲液/4 M 尿素中，用 10 μM ATP-脱硫异丁烯探针捕获激酶 10 分钟，然后用琼脂糖下拉，并通过 Western blot 分析。 [1] X射线晶体学：CDK8 (Hs1-403)/CycC (Hs1-283) 构建体的蛋白表达和纯化遵循已发表的方案。晶体采用悬滴法获得。解析了CDK8/CycC/SEL120-034A复合物的2.8 Å晶体结构，显示I型抑制剂通过卤键与Asp98和Ala100结合，并与CDK8特有的Arg356相互作用。[1] |
| 细胞实验 |
细胞培养：细胞在适宜的培养基中培养（详见补充方法）。对于血清/IFN处理，将HCT-116和Colo-205细胞以2.5×10⁵个/孔的密度接种于6孔板中，用0.5% FBS同步化24小时，用化合物或DMSO预处理1小时，然后在抑制剂存在下，用10% FBS、IFNγ（2.5 ng/mL或5 ng/mL）或IFNα（250 IU/mL）刺激。细胞经离心收集，用冰冷的PBS洗涤，并储存于-80°C用于RNA/蛋白质分析。 [1]
蛋白质印迹法：采用标准蛋白质印迹法检测pSTAT1 S727、pSTAT1 Y701、pSTAT5 S726、pSTAT5 Y694、总STATs、cleaved caspase-3、MCL-1、PARP、RNAPII CTD S2等蛋白的表达水平。[1] 实时荧光定量PCR：提取RNA，进行DNase I处理，然后进行实时荧光定量PCR；结果以RPLP0或GAPDH为内参进行标准化。[1] 细胞毒性试验：将悬浮细胞接种于96孔板中（每孔20,000个细胞，Kasumi-1细胞为每孔60,000个细胞），每个处理设置三个复孔。细胞分别与溶剂、多西他赛（阳性对照）或6个系列稀释的测试化合物孵育。采用AlamarBlue法测定细胞毒性。在第 3、6-7 和 10 天，用等体积的新鲜培养基和化合物进行分液，以维持初始密度。GI50 值使用 GraphPad Prism 6 从剂量反应曲线插值得出。[1] |
| 动物实验 |
异种移植实验：雌性 SCID/米色 C.B17 小鼠（购自 Harlan 或 Charles River）保持无病原体状态。将 4×10⁶ 个 MV-4-11 或 KG-1 白血病细胞，或 5×10⁶ 个 Colo-205 结直肠癌细胞，以 0.1 mL 混合液（3:1，PBS:Matrigel）接种于小鼠右后肢上方。当肿瘤体积达到约 100 mm³（疗效）或约 250 mm³（药效学）时，将小鼠随机分组。将测试化合物新鲜溶于水中，并通过套管经口（PO）给药，剂量为：Colo-205 细胞 5、15、30、60 mg/kg，每日两次，连续 3 天；KG-1 和 MV4-11 细胞 15 和 30 mg/kg，每日一次，每次 10 μL，每克体重 10 μL。最后一次给药后，对小鼠进行麻醉以采集血液样本并收集肿瘤组织。[1]
毒理学评估：对雌性CD-1小鼠进行为期14天的毒理学研究。称量小鼠体重后随机分为若干组（每组5只）。将测试化合物新鲜溶解于水中，并按指定剂量（每日两次）口服给药，剂量为每克体重10微升。每日监测小鼠的体重和一般状况。第15天，采集血液至K2EDTA抗凝管中进行血液学分析（使用ABC Vet动物血液分析仪）。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
血浆浓度：每日两次（60 mg/kg，连续3天）给药后，末次给药后16小时，罗西利（SEL120-34A）单盐酸盐的平均血浆浓度>700 ng/ml。[1]
未报告其他药代动力学参数（半衰期、生物利用度、清除率等）。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在健康免疫功能正常的CD-1小鼠中进行的为期14天的口服毒性研究（每日两次给药）显示，外周血参数未发生显著变化（补充表8）。在有效剂量（每日一次，最高30 mg/kg；或每日两次，最高60 mg/kg）的异种移植研究中，未观察到明显的体重下降。[1] 未报告其他毒性数据（例如，LD50、器官毒性、蛋白结合率）。[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
RVU120 是一种 CDK8/19 抑制剂，具有口服生物利用度，可抑制细胞周期蛋白依赖性激酶 8 和 19 (CDK8/19)，并具有潜在的抗肿瘤和化学保护活性。口服后，RVU120 可靶向并抑制 CDK8/19 的活性，从而阻止 CDK8/19 介导的致癌信号通路的激活，阻断多种促肿瘤基因的选择性转录，并抑制 CDK8/19 过表达肿瘤细胞的增殖。CDK8/19 是参与细胞周期调控的丝氨酸/苏氨酸激酶，在某些癌细胞类型中过表达，并在肿瘤细胞增殖中发挥关键作用。
Romaciclib (SEL120-34A) 单盐酸盐 是一种首创的 CDK8 抑制剂，目前已进入临床前开发阶段。该化合物通过抑制STAT1 S727和STAT5 S726的磷酸化发挥作用，从而调节STAT和NUP98-HOXA9依赖性转录。该化合物对STAT5 S726水平升高且具有干细胞特征（例如CD34+）的急性髓系白血病（AML）细胞表现出差异性疗效。耐药细胞STAT5活化呈阴性，并表现出谱系定向分化。该化合物不影响正常造血功能，并可能具有免疫调节潜力。目前，该化合物正被开发用于急性髓系白血病（AML）的个体化治疗。[1] |
| 分子式 |
C15H19BR2CLN4
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|---|---|
| 分子量 |
450.599160432816
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| 精确质量 |
449.964
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| CAS号 |
2443816-41-7
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| 相关CAS号 |
SEL120-34A HCl;1609452-30-3;SEL120-34A;1609522-33-9
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| PubChem CID |
73776232
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| tPSA |
33.1
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
1
|
| 重原子数目 |
22
|
| 分子复杂度/Complexity |
390
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
GQXLWUCQESKBSC-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C15H18Br2N4.ClH/c1-9-11(16)12(17)10-3-2-6-21-14(10)13(9)19-15(21)20-7-4-18-5-8-20;/h18H,2-8H2,1H3;1H
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| 化学名 |
6,7-dibromo-5-methyl-2-piperazin-1-yl-1,3-diazatricyclo[6.3.1.04,12]dodeca-2,4,6,8(12)-tetraene;hydrochloride
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| 别名 |
SEL120-34A HCl; 1609452-30-3; SEL-120; SEL120; SDM3M518PJ; SEL120-34A hydrochloride; SE-120-34A; ...; 2443816-41-7;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : 50 mg/mL (110.96 mM)
DMSO : 16.67 mg/mL (37.00 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.67 mg/mL (3.71 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 16.7 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1.67 mg/mL (3.71 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 16.7mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 1.67 mg/mL (3.71 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 14.29 mg/mL (31.71 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶 (<60°C). 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2193 mL | 11.0963 mL | 22.1926 mL | |
| 5 mM | 0.4439 mL | 2.2193 mL | 4.4385 mL | |
| 10 mM | 0.2219 mL | 1.1096 mL | 2.2193 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
M1-20
CDK12-Cyclin K Ligand-Linker Conjugates 1
CGP-74514 dihydrochloride
(S)-CDK2 degrader 6
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COA
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