| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
P2X7 receptor – IC50 = 321 ± 20 nM (rat P2X7, calcium influx assay); selective over other P2X and P2Y receptors (P2X1, P2X2a, P2X2b, P2X4, P2Y1, P2Y2) at concentrations up to 100 μM; weak or no activity at 75 different G-protein-coupled receptors, enzymes, transporters, and ion channels (ED50 > 5 μM) [1][2][3][4]
A-438079 targets the P2X7 receptor, an ATP-gated ion channel that plays a key role in inflammation and pain. By competitively antagonizing this receptor, it blocks the influx of calcium ions and suppresses the downstream signaling pathways, including the release of proinflammatory cytokines such as interleukin-1β. It is selective for P2X7 over P2X2, P2X3, and P2X4. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验：A-438079 可阻断 BzATP (10 μM) 诱导的稳定表达大鼠 P2X7 受体的 1321N1 细胞内钙离子浓度变化，IC50 值为 321 ± 20 nM。浓度高达 100 μM 时，A-438079 对其他多种 P2X 和 P2Y 受体（P2X1、P2X2a、P2X2b、P2X4、P2Y1、P2Y2）介导的激动剂诱导的细胞内钙离子浓度变化无显著影响。[1]
在 SNL 大鼠 L4/L5 背根神经节的非神经元细胞（可能是卫星胶质细胞）的全细胞电压钳记录中，A-438079 (1 μM) 显著降低了 BzATP (30 μM) 产生的电流。 A-438079 (1 μM) 显示出降低 100 μM BzATP 诱发电流的趋势，但这种降低并不显著。[1] 在小鼠腹腔巨噬细胞中，A-438079 (0.3-3 μM) 呈剂量依赖性地降低了 BzATP (3 mM) 刺激后 IL-1β 的释放量。在 3 μM 浓度下，A-438079 抑制了 IL-1β 释放 75.6%（与溶剂对照组相比，P < 0.01）。[4] A-438079 抑制了 BzATP (10 μM) 诱导的表达稳定大鼠 P2X7 受体的 1321N1 细胞内钙离子浓度的波动，IC50 为 321 nM。在浓度高达 100 μM 时，438079 同样对 P2X7 受体具有选择性 [1]。 体外实验表明，A-438079 具有强效的 P2X7 受体拮抗活性。它能抑制 BzATP 诱导的表达人 P2X7 受体的细胞中钙离子内流的变化，pIC50 值为 6.9。通过抑制 P2X7 受体的激活，它能抑制包括白细胞介素-1β 在内的促炎细胞因子的释放。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
体内实验：在神经病理性疼痛大鼠模型（脊神经结扎、慢性压迫性损伤、长春新碱诱导的神经病变）中，全身性腹腔注射A-438079（10-300 μmol/kg）可产生剂量依赖性的抗痛觉过敏作用。在脊神经结扎模型中，ED50值约为76 μmol/kg（腹腔注射）；在慢性压迫性损伤模型中约为100 μmol/kg（腹腔注射）；在长春新碱模型中约为200 μmol/kg（腹腔注射）。[1] 在福尔马林模型中，A-438079（100-300 μmol/kg，腹腔注射）显著降低了第二阶段的伤害性防御行为，其ED50值约为102 μmol/kg（腹腔注射）。 [1]
在脊髓结扎（SNL）大鼠中进行的体内电生理实验表明：A-438079（80 μmol/kg，静脉注射）可降低hmWDR和mWDR神经元的von Frey刺激（10 g）诱发活动、LT神经元的刷触诱发活动、NS、hmWDR和mWDR神经元的捏掐诱发放电，以及NS和hmWDR神经元的热刺激（50°C）反应。A-438079还显著降低了SNL大鼠（而非假手术组大鼠）所有四类脊髓神经元（hmWDR、mWDR、NS、LT）的自发放电。这些作用通常在注射后5分钟内出现，并持续35分钟。 [1] 在新生儿癫痫持续状态模型（P10 大鼠，杏仁核内注射红藻氨酸）中，A-438079（5 和 15 mg/kg，腹腔注射，在注射红藻氨酸后 60 分钟给药）可降低癫痫发作的严重程度（脑电图振幅、总功率、尖峰计数）。A-438079（5 mg/kg）可减少海马神经元损伤（FJB 染色减少 80-90%，TUNEL 染色）和 IL-1β 水平。更高剂量（50 mg/kg）的效果较差（呈 U 型剂量反应）。 [2] 在帕金森病的 6-OHDA 大鼠模型中，A-438079（30 mg/kg，腹腔注射，分别在 6-OHDA 给药前后 60 分钟给药）部分但显著地抑制了 6-OHDA 诱导的纹状体多巴胺耗竭（损伤侧多巴胺中位数百分比：31.3% vs 生理盐水组的 23.4%，P=0.016）。然而，它并未阻止黑质中多巴胺能神经元的丢失。[3] 在环磷酰胺诱导的出血性膀胱炎小鼠模型中，A-438079（50-200 μmol/kg，腹腔注射）呈剂量依赖性地降低了伤害性行为评分、水肿、出血、膀胱湿重、髓过氧化物酶 (MPO) 活性、巨噬细胞迁移（F4/80 染色）以及 IL-1β 和 TNF-α 水平。 50 和 100 μmol/kg 剂量可降低出血评分，而 200 μmol/kg 剂量则无此效果。A-438079 (100 μmol/kg) 还可降低大脑皮层和腰段脊髓中 c-Fos 的表达。[4] 在神经病理性疼痛大鼠中，438079 (80 μmol/kg，静脉注射) 可降低多种脊髓神经元（包括疼痛神经元和非伤害性神经元）的诱发活性。在脊髓神经结扎 (SNL) 和慢性压迫性损伤 (CCI) 模型中，438079 (100 和 300 μmol/kg，腹腔注射) 可显著提高缩足阈值。[1] 惊厥开始 60 分钟后，腹腔注射 A-438079 (5 和 15 mg/kg) 可减少海马神经元死亡并减轻癫痫发作的严重程度。与相同剂量（25 mg/kg）的苯巴比妥相比，438079 表现出更佳的神经保护作用[2]。438079 可在一定程度上显著抑制 6-OHDA 引起的纹状体多巴胺储备耗竭[3]。在 HC 模型中，438079 预处理可降低伤害性行为评分[4]。体内研究表明，A-438079 在多种临床前模型中均有效。它通过抑制 p450 同工酶来保护肝脏免受对乙酰氨基酚引起的损伤。它可降低癫痫持续状态期间的脑电图和临床癫痫发作严重程度，并减少癫痫发作引起的新皮层神经元死亡。此外，它在大鼠模型中也显示出强效的镇痛活性。 |
| 酶活实验 |
酶活性测定：钙离子内流 FLIPR 测定：将稳定表达大鼠 P2X7 受体的 1321N1 细胞接种于聚赖氨酸包被的黑色 96 孔板中，并用 Fluo-4 染料染色。用 DPBS 洗涤细胞。A-438079 的浓度以 10⁻¹⁰ 至 10⁻⁴ M 的 11 个半对数浓度进行测试。加入激动剂（大鼠 P2X7 受体的 EC₇₀ 浓度为 10 μM 的 BzATP）后，记录细胞内 Ca²⁺ 浓度的变化，持续 3 分钟。对于拮抗剂活性测定，在加入激动剂前加入 A-438079，并收集 3 分钟的荧光数据。pIC₅₀ 值由对平均数据（n=17，重复实验）进行单曲线拟合得出。 [1]
非神经元背根神经节细胞的体外电生理研究：将脊髓结扎（SNL）大鼠的L4/L5背根神经节通过酶消化（0.1%胶原酶，然后胶原酶/分散酶）进行解离。解离后48小时内，在室温下进行全细胞电压钳记录。移液管溶液成分（mM）：NaCl 154，EGTA 10，Hepes 5，pH 7.2；外液成分（mM）：NaCl 147，KCl 2，CaCl₂ 0.3，Hepes 10，葡萄糖 12，pH 7.4。电极电阻为2-4 MΩ。在-60 mV的钳制电位下记录P2X电流。使用灌流系统施加A-438079（1 μM）和BzATP（30-100 μM）。 [1] 巨噬细胞IL-1β释放：通过腹腔灌洗收集静息驻留巨噬细胞，接种于培养皿中，并用LPS（3 μg/ml）预处理2小时。随后加入A-438079（0.3-3 μM），30分钟后加入BzATP（3 mM）进行刺激。BzATP刺激30分钟后收集上清液，并用ELISA法检测IL-1β含量。[4] A-438079的体外受体结合试验采用竞争性结合实验，使用表达人P2X7受体的细胞膜。将该化合物与放射性标记的配体（如[3H]-A-438079或[3H]-BzATP）孵育。测量放射性配体的置换量以确定结合亲和力（Ki）。 |
| 细胞实验 |
细胞实验：稳定表达大鼠 P2X7、人 P2X4、P2X2a、P2X2b、P2X7、P2Y1 和 P2Y2 受体的 1321N1 人星形胶质瘤细胞培养于含 10% FBS 和适当选择抗生素的 DMEM 培养基中。钙离子内流实验中，将细胞以每孔 5 × 10⁶ 个细胞的密度接种于聚赖氨酸包被的黑色 96 孔板中。[1]
小鼠腹腔巨噬细胞：通过用含 5% FCS 的 RPMI 1640 培养基灌洗腹腔收集驻留巨噬细胞。将细胞以每孔 2 × 10⁶ 个细胞的密度接种，使其贴壁 2 小时，洗去未贴壁细胞，并过夜培养。在加入 A-438079 前 2 小时，用 LPS (3 μg/ml) 预处理细胞。 [4] 大鼠背根神经节（DRG）非神经元细胞：将脊髓结扎（SNL）大鼠的L4/L5 DRG通过酶消化解离，并接种于经PEI处理的24孔板中，培养基为添加了10%胎牛血清（FBS）、50 mM神经生长因子（NGF）、2 mM谷氨酰胺和100 U/ml青霉素-链霉素的DMEM培养基。解离后48小时内进行全细胞电压钳记录。[1] A-438079的体外细胞功能分析采用表达人P2X7受体的细胞，并用钙敏感染料标记。用P2X7激动剂（如BzATP）刺激后，观察到细胞内钙离子浓度升高。测量拮抗剂抑制这种钙离子内流的能力，并计算pIC50值。 |
| 动物实验 |
动物实验方案：神经性疼痛模型（SNL、CCI、长春新碱）：雄性Sprague-Dawley大鼠（250-400 g）接受L5/L6脊神经结扎术、坐骨神经慢性压迫损伤或长春新碱灌注（通过渗透泵以30 μg/kg/天的速度输注）。术后2周，腹腔注射A-438079（10-300 μmol/kg），并使用von Frey纤维丝测量触觉异常性疼痛。[1]
福尔马林模型：大鼠右后爪背侧注射5%福尔马林溶液（50 μl）。腹腔注射A-438079（100-300 μmol/kg），并在第二阶段记录伤害性反应。 [1] 体内电生理：SNL组或假手术组大鼠先用戊巴比妥麻醉，然后用丙泊酚静脉输注（8-12 mg/kg/h）维持麻醉。行椎板切除术，切除T12-L3椎体节段。使用铂铱微电极记录脊髓神经元的细胞外活动。在7分钟内静脉注射A-438079（80 μmol/kg）或溶剂。刺激包括von Frey刺激（10 g）、刷触、夹捏（Bulldog Serrefine钳）和热刺激（50℃水）。[1] 新生儿癫痫持续状态模型：P10大鼠幼崽接受杏仁核内注射红藻氨酸（2 μg溶于0.2 μl）。在KA注射后60分钟，腹腔注射A-438079（0.5、5、15、50 mg/kg）。记录脑电图2小时。72小时后处死大鼠进行组织学分析。[2] 6-OHDA帕金森病模型：雄性Sprague-Dawley大鼠接受单侧黑质内注射6-OHDA（0.2 μg/4 μl）。在6-OHDA注射前60分钟和注射后60分钟，腹腔注射A-438079（30 mg/kg）。4周后处死大鼠，通过高效液相色谱法（HPLC）测定纹状体多巴胺（DA）含量，并进行酪氨酸羟化酶（TH）免疫组织化学染色。[3] 环磷酰胺诱导的出血性膀胱炎模型：瑞士小鼠或C57/BL6小鼠接受环磷酰胺（300 mg/kg，腹腔注射）。在环磷酰胺给药前30分钟和给药后4小时（用于行为学实验），或单次给药30分钟（用于细胞因子实验），分别给予A-438079（50、100、200 μmol/kg，腹腔注射）或美司钠（60 mg/kg）。6小时后收集膀胱组织，用于大体评估、组织学、免疫组织化学（F4/80、P2X7R、c-Fos）、髓过氧化物酶（MPO）活性和细胞因子ELISA检测。[4] A-438079的体内动物实验已在癫痫持续状态、疼痛和肝损伤模型中进行。在癫痫持续状态模型中，给予该化合物后，通过脑电图（EEG）测量癫痫发作的严重程度。在疼痛模型中，使用von Frey试验或热板试验评估其镇痛作用。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在大鼠中，A-438079（10 μmol/kg）显示出中等的血浆清除率（CLp = 1.6 L/h/kg）、中等的生物利用度（F = 19%，腹腔注射）和中等的血浆消除半衰期（T₁/₂ = 1.02 h，腹腔注射）。10 μmol/kg（腹腔注射）时的Cmax和Tmax分别为0.45 μg/ml和0.25 h。30分钟时，A-438079（10 μmol/kg）的平均血浆和脑组织浓度分别为0.2 ± 0.8 μg/ml和0.56 ± 0.2 μg/g，脑/血浆浓度比约为2:1。大鼠血浆蛋白结合率为84%。 [1] 在出生后第10天（P10）的大鼠幼崽中，腹腔注射A-438079（5 mg/kg）10分钟后血浆浓度达到约2.3 μg/ml，随后迅速下降。脑组织中的药物浓度也呈现相同的变化趋势，在最早的检测时间点（10分钟）达到峰值，并迅速下降。[2] A-438079的分子式为C13H9Cl2N5，分子量为306.15 g/mol（游离碱）。它通常以盐酸盐的形式使用，盐酸盐的分子量为342.61 g/mol。它可溶于DMSO和水。为了长期稳定性，通常以粉末形式储存在-20°C下。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在最高测试剂量（300 μmol/kg，腹腔注射）下，A-438079 对大鼠转棒试验表现无影响。[1]
在出生后第10天（P10）的大鼠幼崽中，单独使用 A-438079（5 或 50 mg/kg）不会促进脑细胞死亡。[2] 在瑞士小鼠中，A-438079（100 μmol/kg）在旷场试验中未引起直立、行走或一般探索行为的显著变化。[4] 由于 A-438079 是一种研究用化合物，其毒理学数据有限。它不适用于人体。尚未有全面的毒性研究报告。应遵循处理化学试剂的标准安全预防措施。其 P2X7 受体拮抗作用提示其可能具有显著的免疫调节作用。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
A-438079（3-((5-(2,3-二氯苯基)-1H-四唑-1-基)甲基吡啶；分子量 342.6）是一种选择性竞争性 P2X7 受体拮抗剂，全身给药后可迅速进入中枢神经系统。它已被用于证实 P2X7 受体在神经性疼痛、炎症性疼痛、癫痫持续状态、帕金森病和出血性膀胱炎中的作用。电生理学研究表明，它能降低神经性疼痛大鼠脊髓神经元的诱发和自发放电。在某些模型（例如新生儿癫痫持续状态）中，A-438079 的剂量反应曲线呈 U 形，高剂量（50 mg/kg）的疗效低于中等剂量（5-15 mg/kg）。[1][2][3][4]
A-438079 是一种研究性化合物，尚未获得临床批准。它是研究 P2X7 受体的宝贵工具。 P2X7受体生物学及其在炎症、疼痛和神经退行性疾病中的作用。本研究用于药物研发项目，探索P2X7拮抗剂在治疗疼痛、神经炎症和免疫相关疾病方面的治疗潜力。 |
| 分子式 |
C13H10CL3N5
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|---|---|
| 分子量 |
342.6110
|
| 精确质量 |
341
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| CAS号 |
899507-36-9
|
| 相关CAS号 |
A 438079 hydrochloride;899431-18-6
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| PubChem CID |
11673921
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| LogP |
3.892
|
| tPSA |
56.49
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
20
|
| 分子复杂度/Complexity |
319
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
MBTJFFMIPPMRGR-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C13H9Cl2N5.ClH/c14-11-5-1-4-10(12(11)15)13-17-18-19-20(13)8-9-3-2-6-16-7-9;/h1-7H,8H2;1H
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| 化学名 |
3-[[5-(2,3-dichlorophenyl)tetrazol-1-yl]methyl]pyridine;hydrochloride
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| 别名 |
A-438079; A438079; A 438079; 3-{[5-(2,3-dichlorophenyl)-1H-1,2,3,4-tetrazol-1-yl]methyl}pyridine; 3-((5-(2,3-dichlorophenyl)-1H-1,2,3,4-tetrazol-1-yl)methyl)pyridine;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~326.64 mM)
H2O : ~0.2 mg/mL (~0.65 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.17 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.17 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9188 mL | 14.5939 mL | 29.1877 mL | |
| 5 mM | 0.5838 mL | 2.9188 mL | 5.8375 mL | |
| 10 mM | 0.2919 mL | 1.4594 mL | 2.9188 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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