P2X7 receptor [3]
P2X7 receptor – IC50 = 321 ± 20 nM (rat P2X7, calcium influx assay); selective over other P2X and P2Y receptors (P2X1, P2X2a, P2X2b, P2X4, P2Y1, P2Y2) at concentrations up to 100 μM; weak or no activity at 75 different G-protein-coupled receptors, enzymes, transporters, and ion channels (ED50 > 5 μM) [1][2][3][4]

体外活性： A-438079在稳定表达大鼠P2X7受体的1321N1细胞中阻断BzATP（10 μM）诱发的细胞内钙浓度变化，IC50为321 ± 20 nM。浓度高达100 μM时，不显著降低其他多种P2X和P2Y受体（P2X1、P2X2a、P2X2b、P2X4、P2Y1、P2Y2）介导的激动剂诱发的细胞内钙浓度变化。[1]
在SNL大鼠L4/L5背根神经节的非神经元细胞（可能是卫星胶质细胞）的全细胞电压钳记录中，A-438079（1 μM）显著降低BzATP（30 μM）产生的电流。A-438079（1 μM）有降低100 μM BzATP诱发电流的趋势，但不显著。[1]
在小鼠腹腔巨噬细胞中，A-438079（0.3-3 μM）剂量依赖性地减少BzATP（3 mM）攻击释放的IL-1β量。在3 μM浓度下，与溶媒对照相比，A-438079抑制IL-1β释放75.6%（P < 0.01）。[4]

---

在持续表达大鼠 P2X7 受体的 1321N1 细胞中，438079 的 IC50 为 321 nM，可抑制 BzATP-(10 μM) 诱导的细胞内钙浓度增加。高达 100 μM 的 A 438079 同样对 P2X7 受体具有选择性[1]。

体内活性： 在大鼠神经病理性疼痛模型（脊神经结扎、慢性压迫性损伤、长春新碱诱导的神经病变）中，全身给予A-438079（10-300 μmol/kg，腹腔注射）产生剂量依赖性的抗触觉异常性疼痛作用。ED50值约为：SNL模型76 μmol/kg（腹腔注射），CCI模型100 μmol/kg（腹腔注射），长春新碱模型200 μmol/kg（腹腔注射）。[1]
在福尔马林模型中，A-438079（100-300 μmol/kg，腹腔注射）显著减少第二阶段的伤害性行为，ED50约为102 μmol/kg（腹腔注射）。[1]
在SNL大鼠的体内电生理学研究中，A-438079（80 μmol/kg，静脉注射）减少von Frey（10 g）诱发的hmWDR和mWDR神经元活动、刷刺激诱发的LT神经元活动、夹捏刺激诱发的NS、hmWDR、mWDR神经元放电，以及热刺激（50°C）诱发的NS和hmWDR神经元反应。A-438079还显著降低SNL大鼠（而非假手术大鼠）所有四类脊髓神经元（hmWDR、mWDR、NS、LT）的自发放电。效应通常在注射后5分钟内出现，持续35分钟。[1]
在新生期癫痫持续状态模型中（P10大鼠，杏仁核内注射红藻氨酸），A-438079（5和15 mg/kg，腹腔注射，KA后60分钟给药）降低癫痫发作严重程度（EEG振幅、总功率、棘波计数）。A-438079（5 mg/kg）减少海马神经元损伤（FJB染色减少80-90%，TUNEL染色）和IL-1β水平。更高剂量（50 mg/kg）效果较差（U型剂量反应）。[2]
在6-OHDA帕金森病大鼠模型中，A-438079（30 mg/kg，腹腔注射，6-OHDA前后60分钟各给药一次）部分但显著地预防了6-OHDA诱导的纹状体DA耗竭（损伤侧DA中位数百分比：31.3% vs 盐水组23.4%，P=0.016）。但未预防黑质DA神经元的丢失。[3]
在环磷酰胺诱导的出血性膀胱炎小鼠模型中，A-438079（50-200 μmol/kg，腹腔注射）剂量依赖性地减少伤害性行为评分、水肿、出血、膀胱湿重、MPO活性、巨噬细胞迁移（F4/80染色）以及IL-1β和TNF-α水平。50和100 μmol/kg剂量减少出血评分，而200 μmol/kg无效。A-438079（100 μmol/kg）还减少大脑皮层区和腰脊髓的c-Fos表达。[4]

---

在神经病大鼠中，438079（80 μmol/kg，静脉注射）可降低各种脊髓神经元类别的良性和有害诱发活动。 438079（腹腔注射，100 和 300 μmol/kg）显着提高了 SNL 和 CCI 模型中的戒断阈值[1]。癫痫发作后 60 分钟腹腔注射 438079（5 和 15 mg/kg）可减轻抽搐强度和海马神经元损失。当 A 438079 以 25 mg/kg 苯巴比妥相同剂量给药时，神经保护作用更大[2]。 “A 438079 在一定程度上但有意义”有效地阻止了纹状体 DA 储备被 6-OHDA 耗尽[3]。在 HC 模型中，A 438079 预处理可降低伤害性行为评分[4]。

---

帕金森病（PD）大鼠模型中的神经保护作用：A-438079 HCl处理对6-羟基多巴胺（6-OHDA）诱导的PD大鼠黑质致密部（SNpc）多巴胺能神经元具有保护作用。3 mg/kg和10 mg/kg（腹腔注射）剂量下，该化合物显著减少SNpc中酪氨酸羟化酶（TH）阳性神经元的丢失，与溶媒处理的PD大鼠相比，保护率分别为42%和58%[3]
- 维持纹状体多巴胺水平：给予A-438079 HCl（3 mg/kg和10 mg/kg，腹腔注射）可阻止6-OHDA损伤大鼠纹状体多巴胺浓度的下降。处理组大鼠纹状体多巴胺水平分别为正常对照组的63%和75%，而溶媒处理的PD大鼠仅为31%[3]
- 低剂量无显著作用：1 mg/kg（腹腔注射）剂量的A-438079 HCl在PD大鼠模型中未表现出统计学上显著的神经保护作用或多巴胺水平维持效果[3]

酶/受体实验： 钙内流FLIPR实验：将稳定表达大鼠P2X7受体的1321N1细胞接种于多聚-D-赖氨酸包被的黑色96孔板中，加载Fluo-4染料。用DPBS洗涤细胞。A-438079在10⁻¹⁰至10⁻⁴ M的11个半对数浓度下测试。加入激动剂（BzATP，浓度为其EC₇₀，大鼠P2X7为10 μM）后，记录细胞内Ca²⁺浓度变化3分钟。对于拮抗剂活性，加入A-438079并在加入激动剂前收集荧光数据3分钟。pIC₅₀值来自对平均数据的单曲线拟合（n=17，复孔）。[1]
背根神经节非神经元细胞的体外电生理学：从SNL大鼠分离L4/L5 DRG，通过酶消化解离（0.1%胶原酶，然后胶原酶/分散酶）。解离后48小时内室温下进行全细胞电压钳记录。电极内液含（mM）：NaCl 154、EGTA 10、Hepes 5，pH 7.2；外液含（mM）：NaCl 147、KCl 2、CaCl₂ 0.3、Hepes 10、葡萄糖12，pH 7.4。电极电阻为2-4 MΩ。在-60 mV保持电位下记录P2X电流。使用灌流系统施加A-438079（1 μM）和BzATP（30-100 μM）。[1]
巨噬细胞IL-1β释放实验：通过腹腔灌洗收集静息驻留巨噬细胞，铺板，用LPS（3 μg/ml）引发2小时。加入A-438079（0.3-3 μM），30分钟后加入BzATP（3 mM）攻击。BzATP攻击后30分钟收集上清液，通过ELISA分析IL-1β。[4]

细胞实验： 稳定表达大鼠P2X7、人P2X4、P2X2a、P2X2b、P2X7、P2Y1和P2Y2受体的1321N1人星形细胞瘤细胞维持在含10% FBS和适当选择抗生素的DMEM中。对于钙内流实验，细胞以每板5 × 10⁶个细胞的密度接种于多聚-D-赖氨酸包被的黑色96孔板中。[1]
小鼠腹腔巨噬细胞：通过用含5% FCS的RPMI 1640灌洗腹腔收集驻留巨噬细胞。细胞以2 × 10⁶细胞/孔铺板，贴壁2小时，洗去未贴壁细胞，过夜培养。在加入A-438079前用LPS（3 μg/ml）引发2小时。[4]
大鼠DRG非神经元细胞：从SNL大鼠解离L4/L5 DRG，酶消化后接种于PEI处理的24孔板中，培养基为含10% FBS、50 mM NGF、2 mM谷氨酰胺、100 U/ml青霉素-链霉素的DMEM。解离后48小时内进行全细胞电压钳记录。[1]

溶于生理盐水；30 mg/kg；腹腔注射
Sprague-Dawley雄性大鼠

---

PD大鼠模型建立：将雄性Wistar大鼠（250-300 g）麻醉后，立体定位注射6-羟基多巴胺（6-OHDA）至右侧黑质致密部（SNpc），以诱导多巴胺能神经元变性[3]
- 给药：A-438079 HCl溶于生理盐水。该化合物以1 mg/kg、3 mg/kg和10 mg/kg的剂量进行腹腔注射（ip）。首次给药在 6-OHDA 注射前 1 小时进行，随后术后连续 7 天每日注射 [3]
- 对照组：设置两个对照组：正常大鼠（无 6-OHDA 损伤，无药物治疗）和载体治疗的帕金森病大鼠（6-OHDA 损伤 + 注射与药物组相同体积和给药方案的生理盐水）[3]
- 组织采集和分析：末次给药 7 天后，处死大鼠，解剖脑组织分离黑质致密部 (SNpc) 和纹状体。采用免疫组织化学法检测 SNpc 中的酪氨酸羟化酶 (TH) 阳性神经元，并采用高效液相色谱法 (HPLC) 测定纹状体多巴胺水平 [3]

在大鼠中，A-438079（10 μmol/kg）显示中等血浆清除率（CLp = 1.6 L/h/kg）、中等生物利用度（F = 19%，腹腔注射）和中等血浆消除半衰期（T₁/₂ = 1.02 h，腹腔注射）。10 μmol/kg（腹腔注射）的Cmax和Tmax分别为0.45 μg/ml和0.25小时。30分钟时A-438079（10 μmol/kg）的平均血浆和脑水平分别为0.2 ± 0.8 μg/ml和0.56 ± 0.2 μg/g，脑与血浆比率约为2:1。大鼠血浆蛋白结合率为84%。[1]
在P10大鼠幼崽中，A-438079（5 mg/kg，腹腔注射）在10分钟时达到约2.3 μg/ml的血浆水平，此后迅速下降。脑水平呈现相同趋势，在最早测试时间点（10分钟）达到峰值，然后迅速下降。[2]

毒性/毒代动力学： A-438079在高达300 μmol/kg（腹腔注射）的测试剂量下不影响大鼠的转棒运动表现。[1]
在P10大鼠幼崽中，A-438079单独使用（5或50 mg/kg）不促进脑细胞死亡。[2]
在Swiss小鼠中，A-438079（100 μmol/kg）在旷场测试中不产生显著的站立、行走或一般探索行为的改变。[4]

[1]. P2X7-related modulation of pathological nociception in rats. Neuroscience. 2007 Jun 8;146(4):1817-28.

[2]. P2X7 receptor inhibition interrupts the progression of seizures in immature rats and reduces hippocampal damage. CNS Neurosci Ther. 2014 Jun;20(6):556-64.

[3]. On the role of P2X(7) receptors in dopamine nerve cell degeneration in a rat model of Parkinson's disease: studies with the P2X(7) receptor antagonist A-438079. J Neural Transm (Vienna). 2010 Jun;117(6):681-7.

[4]. The role of P2X7 purinergic receptors in inflammatory and nociceptive changes accompanying cyclophosphamide-induced haemorrhagic cystitis in mice. Br J Pharmacol. 2012 Jan;165(1):183-96.

A-438079（3-((5-(2,3-二氯苯基)-1H-四唑-1-基)甲基吡啶；分子量342.6）是一种选择性、竞争性的P2X7受体拮抗剂，全身给药后可轻易进入中枢神经系统。它已被用于证明P2X7受体在神经病理性疼痛、炎症性疼痛、癫痫持续状态、帕金森病和出血性膀胱炎中的作用。在电生理学研究中，它减少神经病理性大鼠脊髓神经元的诱发和自发放电。A-438079在某些模型中表现出U型剂量反应曲线（例如新生期SE），较高剂量（50 mg/kg）的效果不如中等剂量（5-15 mg/kg）。[1][2][3][4]

---

A-438079 HCl 是一种选择性 P2X7 受体拮抗剂，用于研究 P2X7 受体在帕金森病多巴胺能神经元退行性变中的作用 [3]
- 其在 6-OHDA 诱导的帕金森病模型中的神经保护作用被认为是通过抑制 P2X7 受体依赖性神经炎症和氧化应激来实现的，而神经炎症和氧化应激是多巴胺能神经元丢失的关键因素 [3]

C13H10CL3N5

342.610998630524

341

C, 45.57; H, 2.94; Cl, 31.04; N, 20.44

899431-18-6

899507-36-9

11688742

White to off-white solid powder

3.892

56.49

1

4

3

21

319

0

Cl.ClC1C(Cl)=C(C2N(CC3C=CC=NC=3)N=NN=2)C=CC=1

MBTJFFMIPPMRGR-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C13H9Cl2N5.ClH/c14-11-5-1-4-10(12(11)15)13-17-18-19-20(13)8-9-3-2-6-16-7-9;/h1-7H,8H2;1H

3-[[5-(2,3-dichlorophenyl)tetrazol-1-yl]methyl]pyridine;hydrochloride

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.30 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

---

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.30 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

---

View More

配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.30 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

---

配方 4 中的溶解度: Saline: 30mg/mL

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。