| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg | |||
| Other Sizes |
| 靶点 |
Adavivint (SM04690) has no effect on the SV40 luciferase reporter and is a strong carboxyl Wnt signaling activator with an EC50 of 19.5 nM as determined by high-field TCF/LEF reporter on SW480 porous media. Human mesenchymal stem cells (hMSC) aggregated at an EC50 of 10 nM. Adavivint (30 nM) shields chondrocytes from further damage [1].
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| 体外研究 (In Vitro) |
Adavivint (SM04690) 对 SV40 荧光素酶报告基因没有影响，是一种强羧基 Wnt 信号传导激活剂，通过高场 TCF/LEF 报告基因在 SW480 多孔介质上测定，EC50 为 19.5 nM。人间充质干细胞 (hMSC) 聚集的 EC50 为 10 nM。 Adavivint (30 nM) 可保护软骨细胞免受进一步损伤 [1]。
SM04690 能有效抑制 SW480 结肠癌细胞（具有组成性活跃的Wnt信号）和人骨髓间充质干细胞（hMSCs）中的经典Wnt信号通路。表现为Wnt靶基因（ASCL1, LEF1, TCF7L2, TCF7, C-MYC, AXIN2）的mRNA和蛋白表达水平呈剂量依赖性下降。在TCF/LEF报告基因检测中，其效力比几种其他已知的Wnt通路抑制剂（FH535, IWR-1, ICG001, iCRT14, KY02111, CX-4945）强约150-500倍。[1] 用 SM04690（EC50 = 10 nM）处理hMSCs 5天，可诱导早期软骨形成凝聚，与DMSO对照相比，Rhodamine B染色集落增加超过40倍。[1] 在单层或3D pellet培养条件下，用SM04690（30 nM）处理hMSCs 21天，可诱导其分化为成熟软骨细胞。证据包括Alcian Blue、Safranin O、II型胶原、聚集蛋白聚糖、TIMP1和CD44等标志物染色增强，以及硫酸化糖胺聚糖（GAG）含量显著增加。基因表达分析证实了软骨细胞相关基因（SOX9, COMP, 聚集蛋白聚糖, COL2A1, TGFβ1, TIMP1, CD44, COL10A1）的上调和成骨细胞/肌腱谱系标志物（COL1A1, BGLAP, ALPL, BMP4, RUNX2）的下调。[1] SM04690（30 nM）在体外能保护细胞因子（TNFα/制瘤素M或IL-1β）刺激的软骨细胞和hMSCs免于分解代谢性破坏。它能显著抑制细胞因子诱导的基质降解酶（MMP-1, MMP-3, MMP-13, IHH）上调，减少GAGs的分泌，并降低一氧化氮（NO）的产生。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在有效的十字韧带撕裂和部分内侧半月板切除骨关节炎 (ACLT + pMMx OA) 小鼠中，Adavivint (0.3 μg) 可改善软骨愈合和保护 [1]。
在大鼠前交叉韧带切断加内侧半月板部分切除（ACLT+pMMx）诱导的骨关节炎（OA）模型中，于术后1周单次关节腔内注射SM04690（0.3 µg），在12-13周后评估显示能促进软骨修复和保护。与载体对照组相比，治疗动物表现出关节软骨厚度显著增加、软骨表面更光滑、Safranin O染色（指示蛋白聚糖含量）更强烈。[1] 采用国际骨关节炎研究学会（OARSI）评分系统进行的盲法组织学评估显示，在治疗后12周，SM04690治疗组的OARSI评分显著降低（改善）。[1] SM04690治疗后3周，血清中软骨合成生物标志物PIIANP水平显著升高。治疗后5周，循环中软骨降解生物标志物COMP水平显著降低。[1] 对治疗大鼠（注射后4周）软骨的基因表达分析显示，与载体组相比，软骨形成标志物（Col2a1, 聚集蛋白聚糖, COMP）的表达增加，而分解代谢蛋白酶（MMP1, MMP3, MMP13, ADAMTS5）的表达显著降低。肥大标志物Col10a1未观察到显著变化。[1] 免疫组织化学显示，在注射后12周，SM04690治疗组大鼠软骨浅层中Doublecortin（Dcx）阳性关节软骨细胞数量显著增加。[1] 对OA模型软骨的基因表达分析证实了SM04690在体内对Wnt通路的调节作用，显示Wnt通路基因（如GSK3β, Dvl1, Wnt3a, TCF7, Axin2, β-catenin）表达下降，而Wnt抑制基因（如DKK1, WIF1）表达增加。在关节软骨细胞中也观察到β-catenin的核定位减少。[1] |
| 细胞实验 |
TCF/LEF报告基因检测: 使用稳定转导了TCF/LEF-荧光素酶慢病毒报告基因的SW480结肠癌细胞进行高通量筛选。将细胞接种在384孔板中（每孔3000个细胞），使用含1%胎牛血清的培养基培养。使用声学分配器将化合物库中的化合物转移到板中。孵育48小时后，使用荧光素酶底物和酶标仪测量荧光强度。初筛命中化合物使用表达SV40驱动荧光素酶报告基因的SW480细胞进行反筛选，以排除非特异性化合物。SM04690被鉴定出来，并使用S型剂量反应曲线拟合确定其EC50。[1]
软骨形成分化实验（早期凝聚）: 将人骨髓间充质干细胞（hMSCs）以每孔20,000个细胞的密度接种在96孔板中，使用不完全软骨细胞分化培养基培养。用SM04690或对照化合物（TGFβ3，其他Wnt抑制剂）处理细胞。5天后，固定细胞，用1 µg/mL Rhodamine B染色，并进行成像。使用自动化成像系统对Rhodamine B染色集落（软骨形成结节）的数量进行量化。[1] 软骨形成分化实验（成熟 - 单层/3D）: 对于单层分化，将hMSCs以每孔40,000个细胞的密度接种在48孔板中，使用不完全软骨细胞分化培养基培养，并用SM04690或DMSO处理。每5天更换一次培养基，共21天。然后固定细胞，对特定蛋白（如II型胶原、聚集蛋白聚糖）进行免疫染色，或用Alcian Blue、Safranin O或甲苯胺蓝染色。对于3D pellet培养，将150,000个hMSCs分装到锥形管中，离心形成细胞团，在悬浮状态下用SM04690处理21天，期间更换培养基。然后对细胞团进行组织学处理（Safranin O染色）或消化后使用二甲基亚甲基蓝（DMMB）法测定硫酸化GAG含量。[1] 软骨分解代谢实验: 首先使用TGFβ3将hMSCs分化为软骨细胞，培养21天。随后，在存在或不存在SM04690的情况下，用分解代谢细胞因子（TNFα [20 ng/mL] + 制瘤素M [10 ng/mL] 或 IL-1β [10 ng/mL]）处理所得软骨细胞72小时。收集条件培养基和细胞层。使用DMMB法测定培养基中分泌的糖胺聚糖（GAGs），并相对于细胞内GAG含量进行标准化。使用Griess试剂法测定培养基中的一氧化氮（NO）。通过定量实时PCR（qRT-PCR）分析分解代谢酶（MMP1, MMP3, MMP13, IHH）的基因表达。[1] |
| 动物实验 |
Osteoarthritis Model Induction and Drug Efficacy Study: Male Sprague-Dawley rats (10 weeks old) underwent surgical induction of osteoarthritis via severing of the anterior cruciate, medial collateral, and medial meniscotibial ligaments (ACLT+pMMx). One week after surgery, rats were randomized and received a single intra-articular (IA) injection into the knee joint of either SM04690 (0.3 µg in 50 µL volume) or vehicle control (n=12 per group). Thirteen weeks post-surgery (12 weeks post-treatment), knee joints were harvested, fixed in formalin, decalcified, embedded in paraffin, and sectioned. Frontal sections (5 µm thick) were stained with Safranin O/Fast Green for histological evaluation (OARSI scoring, cartilage thickness, staining intensity). Serum was collected at weeks 3, 4, and 6 post-treatment for biomarker analysis (PIIANP, COMP). [1]
Gene Expression Analysis in OA Model: In a separate study with a similar design, rats underwent ACLT+pMMx surgery and received a single IA injection of SM04690 (0.3 µg) or vehicle one week later (n=12 per group). At 5 weeks post-surgery (4 weeks post-treatment), articular cartilage was isolated from the knee joints for RNA extraction and subsequent qRT-PCR analysis of chondrocyte markers and protease genes. [1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
Following a single intra-articular injection of SM04690 (0.3 µg) into the knee joint of Sprague-Dawley rats, the drug demonstrated a sustained local residence time within the knee joint tissues (cartilage and bone), remaining detectable for over 180 days.
Systemic exposure was minimal, with plasma drug levels below the lower limit of quantification (10 nM) at all measured time points. [1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
In the rat studies, no obvious adverse effects (such as weight loss, significant joint swelling, or signs of pain or distress) were observed following a single intra-articular injection of SM04690 (0.3 µg). [1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Lorecivivint is under investigation in clinical trial NCT03246399 (A Study of the Safety, Tolerability, and Pharmacokinetics of SM04690 Injectable Suspension Following Single Intradiscal Injection in Subjects With Degenerative Disc Disease).
SM04690 (Adavivint) is being developed as a potential disease-modifying osteoarthritis drug (DMOAD). Its proposed dual mechanism of action involves inhibiting the Wnt pathway to: 1) induce chondrogenesis (differentiation of mesenchymal stem cells into functional chondrocytes) to regenerate cartilage, and 2) protect existing cartilage by inhibiting the production of catabolic proteases (MMPs, ADAMTS) and reducing matrix breakdown. [1] The study suggests that SM04690 represents a novel therapeutic approach targeting resident stem cells within the joint to promote repair, contrasting with strategies focused solely on inhibiting inflammatory cytokines or matrix-degrading enzymes. [1] |
| 分子式 |
C29H24FN7O
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|---|---|---|
| 分子量 |
505.56
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| 精确质量 |
505.202
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| 元素分析 |
C, 68.90; H, 4.79; F, 3.76; N, 19.39; O, 3.16
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| CAS号 |
1467093-03-3
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| 相关CAS号 |
1467093-03-3;Adavivint HCl;
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| PubChem CID |
135565709
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| 外观&性状 |
Light yellow to gray solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.713
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| LogP |
5.39
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| tPSA |
112
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
38
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| 分子复杂度/Complexity |
816
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
FC1=CC=CC(=C1)C1=CN=CC2=C1N=C(C1C3C=C(C=CC=3NN=1)C1C=NC=C(C=1)NC(CC(C)C)=O)N2
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| InChi Key |
AQDWDWAYVBQMAM-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C29H24FN7O/c1-16(2)8-26(38)33-21-10-19(12-31-13-21)17-6-7-24-22(11-17)28(37-36-24)29-34-25-15-32-14-23(27(25)35-29)18-4-3-5-20(30)9-18/h3-7,9-16H,8H2,1-2H3,(H,33,38)(H,34,35)(H,36,37)
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| 化学名 |
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.95 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.95 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.95 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.9780 mL | 9.8900 mL | 19.7800 mL | |
| 5 mM | 0.3956 mL | 1.9780 mL | 3.9560 mL | |
| 10 mM | 0.1978 mL | 0.9890 mL | 1.9780 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Osteoarthritis Cartilage.2018 Jan;26(1):18-27. |
Osteoarthritis Cartilage.2018 Jan;26(1):18-27. |
Osteoarthritis Cartilage.2018 Jan;26(1):18-27. |
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