| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Adavivint (SM04690) has no effect on the SV40 luciferase reporter and is a strong carboxyl Wnt signaling activator with an EC50 of 19.5 nM as determined by high-field TCF/LEF reporter on SW480 porous media. Human mesenchymal stem cells (hMSC) aggregated at an EC50 of 10 nM. Adavivint (30 nM) shields chondrocytes from further damage [1].
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| 体外研究 (In Vitro) |
Adavivint (SM04690) 对 SV40 荧光素酶报告基因没有影响，是一种强羧基 Wnt 信号传导激活剂，通过高场 TCF/LEF 报告基因在 SW480 多孔介质上测定，EC50 为 19.5 nM。人间充质干细胞 (hMSC) 聚集的 EC50 为 10 nM。 Adavivint (30 nM) 可保护软骨细胞免受进一步损伤 [1]。
SM04690 能有效抑制 SW480 结肠癌细胞（具有组成性活跃的Wnt信号）和人骨髓间充质干细胞（hMSCs）中的经典Wnt信号通路。表现为Wnt靶基因（ASCL1, LEF1, TCF7L2, TCF7, C-MYC, AXIN2）的mRNA和蛋白表达水平呈剂量依赖性下降。在TCF/LEF报告基因检测中，其效力比几种其他已知的Wnt通路抑制剂（FH535, IWR-1, ICG001, iCRT14, KY02111, CX-4945）强约150-500倍。[1] 用 SM04690（EC50 = 10 nM）处理hMSCs 5天，可诱导早期软骨形成凝聚，与DMSO对照相比，Rhodamine B染色集落增加超过40倍。[1] 在单层或3D pellet培养条件下，用SM04690（30 nM）处理hMSCs 21天，可诱导其分化为成熟软骨细胞。证据包括Alcian Blue、Safranin O、II型胶原、聚集蛋白聚糖、TIMP1和CD44等标志物染色增强，以及硫酸化糖胺聚糖（GAG）含量显著增加。基因表达分析证实了软骨细胞相关基因（SOX9, COMP, 聚集蛋白聚糖, COL2A1, TGFβ1, TIMP1, CD44, COL10A1）的上调和成骨细胞/肌腱谱系标志物（COL1A1, BGLAP, ALPL, BMP4, RUNX2）的下调。[1] SM04690（30 nM）在体外能保护细胞因子（TNFα/制瘤素M或IL-1β）刺激的软骨细胞和hMSCs免于分解代谢性破坏。它能显著抑制细胞因子诱导的基质降解酶（MMP-1, MMP-3, MMP-13, IHH）上调，减少GAGs的分泌，并降低一氧化氮（NO）的产生。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在有效的十字韧带撕裂和部分内侧半月板切除骨关节炎 (ACLT + pMMx OA) 小鼠中，Adavivint (0.3 μg) 可改善软骨愈合和保护 [1]。
在大鼠前交叉韧带切断加内侧半月板部分切除（ACLT+pMMx）诱导的骨关节炎（OA）模型中，于术后1周单次关节腔内注射SM04690（0.3 µg），在12-13周后评估显示能促进软骨修复和保护。与载体对照组相比，治疗动物表现出关节软骨厚度显著增加、软骨表面更光滑、Safranin O染色（指示蛋白聚糖含量）更强烈。[1] 采用国际骨关节炎研究学会（OARSI）评分系统进行的盲法组织学评估显示，在治疗后12周，SM04690治疗组的OARSI评分显著降低（改善）。[1] SM04690治疗后3周，血清中软骨合成生物标志物PIIANP水平显著升高。治疗后5周，循环中软骨降解生物标志物COMP水平显著降低。[1] 对治疗大鼠（注射后4周）软骨的基因表达分析显示，与载体组相比，软骨形成标志物（Col2a1, 聚集蛋白聚糖, COMP）的表达增加，而分解代谢蛋白酶（MMP1, MMP3, MMP13, ADAMTS5）的表达显著降低。肥大标志物Col10a1未观察到显著变化。[1] 免疫组织化学显示，在注射后12周，SM04690治疗组大鼠软骨浅层中Doublecortin（Dcx）阳性关节软骨细胞数量显著增加。[1] 对OA模型软骨的基因表达分析证实了SM04690在体内对Wnt通路的调节作用，显示Wnt通路基因（如GSK3β, Dvl1, Wnt3a, TCF7, Axin2, β-catenin）表达下降，而Wnt抑制基因（如DKK1, WIF1）表达增加。在关节软骨细胞中也观察到β-catenin的核定位减少。[1] |
| 细胞实验 |
TCF/LEF报告基因检测: 使用稳定转导了TCF/LEF-荧光素酶慢病毒报告基因的SW480结肠癌细胞进行高通量筛选。将细胞接种在384孔板中（每孔3000个细胞），使用含1%胎牛血清的培养基培养。使用声学分配器将化合物库中的化合物转移到板中。孵育48小时后，使用荧光素酶底物和酶标仪测量荧光强度。初筛命中化合物使用表达SV40驱动荧光素酶报告基因的SW480细胞进行反筛选，以排除非特异性化合物。SM04690被鉴定出来，并使用S型剂量反应曲线拟合确定其EC50。[1]
软骨形成分化实验（早期凝聚）: 将人骨髓间充质干细胞（hMSCs）以每孔20,000个细胞的密度接种在96孔板中，使用不完全软骨细胞分化培养基培养。用SM04690或对照化合物（TGFβ3，其他Wnt抑制剂）处理细胞。5天后，固定细胞，用1 µg/mL Rhodamine B染色，并进行成像。使用自动化成像系统对Rhodamine B染色集落（软骨形成结节）的数量进行量化。[1] 软骨形成分化实验（成熟 - 单层/3D）: 对于单层分化，将hMSCs以每孔40,000个细胞的密度接种在48孔板中，使用不完全软骨细胞分化培养基培养，并用SM04690或DMSO处理。每5天更换一次培养基，共21天。然后固定细胞，对特定蛋白（如II型胶原、聚集蛋白聚糖）进行免疫染色，或用Alcian Blue、Safranin O或甲苯胺蓝染色。对于3D pellet培养，将150,000个hMSCs分装到锥形管中，离心形成细胞团，在悬浮状态下用SM04690处理21天，期间更换培养基。然后对细胞团进行组织学处理（Safranin O染色）或消化后使用二甲基亚甲基蓝（DMMB）法测定硫酸化GAG含量。[1] 软骨分解代谢实验: 首先使用TGFβ3将hMSCs分化为软骨细胞，培养21天。随后，在存在或不存在SM04690的情况下，用分解代谢细胞因子（TNFα [20 ng/mL] + 制瘤素M [10 ng/mL] 或 IL-1β [10 ng/mL]）处理所得软骨细胞72小时。收集条件培养基和细胞层。使用DMMB法测定培养基中分泌的糖胺聚糖（GAGs），并相对于细胞内GAG含量进行标准化。使用Griess试剂法测定培养基中的一氧化氮（NO）。通过定量实时PCR（qRT-PCR）分析分解代谢酶（MMP1, MMP3, MMP13, IHH）的基因表达。[1] |
| 动物实验 |
骨关节炎模型诱导及药物疗效研究：10周龄雄性Sprague-Dawley大鼠接受前交叉韧带、内侧副韧带和内侧半月板胫骨韧带切断术（ACLT+pMMx）诱导骨关节炎。术后一周，将大鼠随机分组，每组12只，分别在膝关节内单次注射SM04690（0.3 µg，50 µL）或溶剂对照。术后13周（治疗后12周），取出膝关节，用福尔马林固定，脱钙，石蜡包埋，切片。将冠状切片（5 µm厚）用番红O/固绿染色，用于组织学评估（OARSI评分、软骨厚度、染色强度）。分别于治疗后第3、4和6周采集血清进行生物标志物分析（PIIANP、COMP）。[1]
OA模型中的基因表达分析：在另一项设计相似的研究中，大鼠接受ACLT+pMMx手术，并在术后一周接受单次关节内注射SM04690（0.3 µg）或载体（每组n=12）。术后5周（治疗后4周），从膝关节分离关节软骨，提取RNA，并进行后续的qRT-PCR分析，检测软骨细胞标志物和蛋白酶基因。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在Sprague-Dawley大鼠膝关节内单次注射SM04690（0.3 µg）后，该药物在膝关节组织（软骨和骨）中表现出持久的局部滞留时间，且在180天以上仍可检测到。全身暴露量极低，在所有检测时间点，血浆药物浓度均低于定量下限（10 nM）。[1]
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在大鼠研究中，单次关节内注射SM04690（0.3 µg）后，未观察到明显的副作用（例如体重减轻、明显的关节肿胀或疼痛或不适症状）。[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Lorecivivint 正在临床试验 NCT03246399（一项研究 SM04690 注射混悬液单次椎间盘内注射治疗退行性椎间盘疾病患者的安全性、耐受性和药代动力学的研究）中进行研究。
SM04690（Adavivint） 正在开发成为一种潜在的疾病修饰性骨关节炎药物 (DMOAD)。其提出的双重作用机制涉及抑制 Wnt 信号通路，从而：1) 诱导软骨生成（间充质干细胞分化为功能性软骨细胞）以再生软骨；2) 通过抑制分解代谢蛋白酶（MMPs、ADAMTS）的产生和减少基质分解来保护现有软骨。 [1] 该研究表明，SM04690代表了一种新型治疗方法，它靶向关节内的固有干细胞以促进修复，这与仅抑制炎症细胞因子或基质降解酶的策略形成对比。[1] |
| 分子式 |
C29H24FN7O
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|---|---|---|
| 分子量 |
505.56
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| 精确质量 |
505.202
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| 元素分析 |
C, 68.90; H, 4.79; F, 3.76; N, 19.39; O, 3.16
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| CAS号 |
1467093-03-3
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| 相关CAS号 |
1467093-03-3;Adavivint HCl;
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| PubChem CID |
135565709
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| 外观&性状 |
Light yellow to gray solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.713
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| LogP |
5.39
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| tPSA |
112
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
38
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| 分子复杂度/Complexity |
816
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
FC1=CC=CC(=C1)C1=CN=CC2=C1N=C(C1C3C=C(C=CC=3NN=1)C1C=NC=C(C=1)NC(CC(C)C)=O)N2
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| InChi Key |
AQDWDWAYVBQMAM-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C29H24FN7O/c1-16(2)8-26(38)33-21-10-19(12-31-13-21)17-6-7-24-22(11-17)28(37-36-24)29-34-25-15-32-14-23(27(25)35-29)18-4-3-5-20(30)9-18/h3-7,9-16H,8H2,1-2H3,(H,33,38)(H,34,35)(H,36,37)
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| 化学名 |
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.95 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.95 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.95 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.9780 mL | 9.8900 mL | 19.7800 mL | |
| 5 mM | 0.3956 mL | 1.9780 mL | 3.9560 mL | |
| 10 mM | 0.1978 mL | 0.9890 mL | 1.9780 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Osteoarthritis Cartilage.2018 Jan;26(1):18-27. |
Osteoarthritis Cartilage.2018 Jan;26(1):18-27. |
Osteoarthritis Cartilage.2018 Jan;26(1):18-27. |
hsBCL9CT-24
Cardiogenol C HCl
PNU-74654
HLY78
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