Integrin CD11b/CD18
CD11b/CD18 (Integrin αMβ2, Mac-1). The biochemical half-maximal effective concentration (EC50) for ADH-503 is 4 μM in cell-based assays. [1]

ADH-503（(Z)-白细胞黏附素-1胆碱；4 μM；8天）可降低CD11b+单核细胞、粒细胞、嗜酸性粒细胞和巨噬细胞亚群的数量以及肿瘤浸润CD11b+细胞的总数[1]。

---

ADH-503与CD11b结合，减少髓系细胞向胰腺导管腺癌（PDAC）组织的募集[1]。
为了克服既往研究中CD11b阻断剂的剂量限制，我们开发了一种小分子激动剂ADH-503，其结合可使CD11b部分激活。ADH-503可直接改变PDAC激活的巨噬细胞的细胞因子谱。

---

ADH-503可直接改变PDAC激活的巨噬细胞的细胞因子谱。在用胰腺导管腺癌（PDAC）条件培养基处理的骨髓来源巨噬细胞中，ADH-503 在 6 小时内改变了超过 8000 种 RNA 的表达（2 倍变化）。它降低了参与 IL-1 信号通路和替代激活标志物（Arg1、YM1、Retnla）的基因表达，同时上调了 I 型干扰素（IFNα1、IFNβ）和 T 细胞募集因子（CXCL9、CXCL10、CXCL11）的表达。它还下调了 TGFβ1、IL1α 和 IL1β 的表达。在体内，ADH-503 治疗减少了肿瘤浸润的 CD11b+ 细胞、单核细胞、粒细胞、嗜酸性粒细胞和巨噬细胞的数量。剩余的巨噬细胞显示出更高的 MHC I、MHC II、CD80 和 CD86 表达，表明其抗原呈递能力增强。对经治疗小鼠的肿瘤相关巨噬细胞 (TAM) 进行基因表达谱分析显示，免疫抑制基因（IL6、TGFβ、精氨酸酶-1、IL10）表达降低，而 CXCL10 表达升高。ADH-503 可增加肿瘤浸润的 CD8+ 细胞毒性 T 淋巴细胞 (CTL) 和 CD4+ 效应 T 细胞的数量，促进其增殖 (Ki67+) 和活化 (CD44HiCD62Lneg)。此外，ADH-503 还可增加 PD1+Eomes+High 和 Tim3High/PD1High CTL 的数量，并减少 FOXP3+ 调节性 T 细胞的数量。ADH-503 可增加 CK19+ 胰腺导管腺癌 (PDAC) 细胞附近（<5 μm）的 CD8+ T 细胞的数量。ADH-503 还可增加肿瘤及其引流淋巴结中卵清蛋白 (OVA) 特异性葡聚糖阳性 CD8+ T 细胞的数量。该化合物可减少肿瘤浸润的 CD11b+ cDC2 和单核细胞来源的树突状细胞，但显著增加 CD103+ cDC1 及其 MHC-I/II 表达。该化合物对体外 PDAC 细胞的生长没有直接影响。[1]

降低肿瘤负荷可提高总体生存率。ADH-503（(Z)-白细胞黏附素-1胆碱；灌胃给药；30、60或120 mg/kg；每日两次，持续60天）可延缓肿瘤进展，从而导致时间点分析和治疗效果的显著差异[1]。ADH-503（灌胃给药；30、100 mg/kg；每日两次；第1天和第5天）在100 mg/kg和100 mg/kg剂量下的AUC_0-t30分别为6950 ng·h/mL和13962 ng·h/mL。其最高浓度分别为1716 ng/mL和2594 ng/mL。平均半衰期分别为 4.68 小时和 3.95 小时。

---

ADH-503 治疗可诱导肿瘤内 CD103+ cDC 的积累 [1]
由于肿瘤内 T 细胞数量和增殖增加，我们探究了这些效应是否由 DC 的变化驱动。正如预期，基于 CD11b 的表达，我们观察到 ADH-503 治疗 12 天后，肿瘤浸润的 CD11b+ cDC2 和单核细胞来源的 DC 数量减少（图 4H 和 S4D）。相反，在 ADH-503 治疗的小鼠中，肿瘤浸润的 CD103+ cDC1（CD11b 表达水平极低）的数量以及 MHC-I 和 MHC-II 的表达均显著增加（图 4H）。这些数据表明，ADH-503 可减少潜在耐受性和/或 CD4+ T 细胞启动的树突状细胞 (DC) 的数量，同时增强 CD103+ cDC1 的交叉呈递能力。使用 Zbtb46gfp/+ 报告基因小鼠证实了这些 cDC 群的身份（图 S1D）。为了确定 cDC1 的变化是否是 ADH-503 处理小鼠中观察到的 CTL 反应增强所必需的，我们使用了缺乏功能性 cDC1 的 BATF3−/− 小鼠。与野生型对照组相比，ADH-503 处理对 BATF3 缺陷小鼠的 T 细胞浸润没有影响（图 4I）。综上所述，这些结果表明，ADH-503 对髓系细胞的重编程驱动了 cDC1 的浸润和功能，从而增强了抗肿瘤 T 细胞反应。

---

ADH-503 可抑制原位模型和 KPC 基因工程小鼠模型 (GEMM) 中的肿瘤生长并提高生存率 [1]
为了确定 CD11b 激动剂对肿瘤进展的影响，我们评估了三种同源原位 PDAC 模型和 KPC GEMM（图 5A-D）。在所有模型中，ADH-503 均延缓了肿瘤进展，导致时间点分析中肿瘤负荷显著降低，并提高了总生存期（图 5C 和 D）。重要的是，ADH-503 对体外 PDAC 细胞的生长没有直接影响（图 S5A）。为了进一步证实 ADH-503 对 CD11b 的特异性，我们使用了 CD11b 敲除（ITGAM 敲除）小鼠，发现与野生型小鼠不同，CD11b 敲除小鼠的肿瘤生长情况与野生型小鼠相似，且不受治疗影响（图 5E）。

---

ADH-503 在原位 PDAC 模型（KP2、KI、KP2-OVA）和 KPC 基因工程小鼠模型中抑制了肿瘤生长并提高了生存率。它延缓了肿瘤进展，降低了肿瘤负荷，并提高了总体生存率。在 KPC 基因工程小鼠模型中，它降低了肿瘤分级和胶原密度，并增加了 PDAC 细胞中 cleaved caspase-3（凋亡标志物）的表达。 ADH-503增强了化疗（吉西他滨+紫杉醇）的疗效，使疾病控制率超过90%，延长了生存期，并降低了肝转移率（从载体组的80%降至ADH-503组的12.5%，联合治疗组为0%）。它还提高了放射治疗（4Gy x 5）的疗效，导致肿瘤显著消退。ADH-503使胰腺导管腺癌（PDAC）肿瘤对免疫检查点抑制剂疗法产生反应。与抗PD-1抗体联合治疗可显著缩小肿瘤，在第21-30天达到完全消退，生存期超过120天，并对再次治疗产生耐药性。与抗41BB（CD137激动剂）联合治疗也诱导了显著的肿瘤消退和长期生存。在KPC基因工程小鼠模型中，ADH-503联合抗PD-1/抗CTLA-4/吉西他滨（PCG）显著提高了生存率和CD8+ T细胞浸润。在头对头比较中，ADH-503联合抗PD-1与CCR2抑制剂（PF-04136309）联合抗PD-1疗效相当，且优于CSF1中和或粒细胞清除（抗Ly6G）联合抗PD-1。[1] 该化合物增强了CD11b/CD18依赖性细胞黏附，并降低了趋化性和跨内皮迁移。在硫代乙醇酸盐诱导的小鼠腹膜炎模型中，它减少了白细胞募集。在大鼠动脉球囊损伤模型中，它减少了新生内膜增厚和巨噬细胞浸润。在抗肾小球基底膜肾炎小鼠模型中，它能减少中性粒细胞浸润和蛋白尿，疗效优于拮抗剂 M1/70。在斑马鱼尾鳍损伤模型中，它能减少中性粒细胞聚集，且移除后其作用可逆。[2]

白细胞黏附素-1（Leukadherin-1，简称LA1）是一种新型的特异性补体受体3（CR3）和白细胞表面整合素CD11b/CD18激动剂，它能增强白细胞与配体和血管内皮的黏附，从而减少白细胞跨内皮迁移和向损伤部位的浸润。补体受体3（CR3，CD11b/CD18）是一种多功能受体，主要表达于髓系细胞和自然杀伤（NK）细胞。白细胞黏附素-1（LA1）不调节信号转导和转录激活因子（STAT）-4的磷酸化。白细胞黏附素-1调节TLR-2和TLR-7/8诱导的单核细胞细胞因子分泌。利用整合素激动剂LA1靶向白细胞迁移，有助于预防肺部炎症，并在高氧条件下保护肺泡和血管结构。因此，靶向整合素介导的白细胞募集和炎症可能为预防和治疗早产儿支气管肺发育不良（BPD）提供一种新的策略。

---

αA结构域配体结合试验[2]
将MaxiSorp 96孔板用纤维蛋白原（每孔1 μg）在10 mM磷酸盐缓冲液（PBS，pH 7.4）中包被过夜，然后用1% BSA的PBS溶液封闭。将纯化的GST标签αA结构域（每孔50 μl，浓度为5 μg/ml）与固定化的纤维蛋白原在基于TBS的检测缓冲液（TBS含0.1% BSA、1 mM MgCl₂、1 mM CaCl₂和0.05% Tween 20）（TBS-Ca/Mg缓冲液）中于室温孵育1小时。同时，将αA结构域加入到微孔板的未包被孔中，以估算每个孔中可捕获和检测到的最大蛋白量，用于数据标准化。用TBS-Ca/Mg缓冲液洗涤孔板两次以去除未结合的αA结构域。随后，用辣根过氧化物酶标记的抗GST抗体（GE，1:2000稀释）孵育1小时，测定结合的蛋白量。用TBS-Ca/Mg缓冲液洗涤孔板两次以去除未结合的抗体。根据制造商的方案，使用 3,3′,5,5′-四甲基联苯胺 (TMB) 底物试剂盒检测结合蛋白。使用 SpectraMax M5 分光光度计读取吸光度值。吸光度值经过归一化处理，使输入 αA 结构域孔的平均吸光度设定为 100%，结果以野生型 αA 结构域总输入量的百分比表示。所有实验均在三个复孔中进行，所示数据来自至少三个独立实验中的一个。

---

未指定。然而，与相关化合物（白细胞黏附素）的结合研究表明，它们与 CD11b/CD18 的配体结合 αA 结构域结合。[2]

利用补体 iC3b 包被的绵羊红细胞 (EiC3bs) 进行吞噬作用测定 [2]
按照先前描述的方法制备并用于补体 iC3b 包被的绵羊红细胞进行吞噬作用测定。将包被的红细胞 (EiC3bs) 稀释至浓度为 1.5 × 10⁷ 至 6 × 10⁷ 个细胞/毫升。将K562 CD11b/CD18细胞用TBS缓冲液洗涤两次，并重悬至1 × 10⁶/ml。取40 μl（4 × 10⁴个细胞）悬浮液与EiC3bs（1.2 × 10⁶个细胞）在100 μl总体积中于37°C孵育25分钟。孵育体系中分别加入1 mM CaCl₂和MgCl₂（在有或无50至100 μM白细胞黏附素-1 (LA1)、LA2或LA3的情况下）、1 mM MnCl₂或10 mM EDTA。通过相差显微镜观察玫瑰花结的形成（多个红细胞(EiC3bs)与单个K562细胞的结合）来检测结合情况，具体方法如前所述。评分时，仅将与≥3个EiC3bs结合的K562细胞计为阳性，并在每种条件下于多个视野中检查>200个细胞。结合结果以直方图形式呈现，显示视野中所有显示玫瑰花结的细胞百分比，代表三次重复实验的平均值±标准误差（SEM）；所示数据来自至少三个独立实验之一。

---

细胞活力检测[2]
细胞活力检测使用市售试剂盒进行。简而言之，将1×10⁴个K562 CD11b/CD18细胞或野生型B6中性粒细胞与递增量的指定化合物在96孔板的每个孔中孵育，并在孵育4小时（中性粒细胞）或24小时（K562细胞）后，根据制造商的说明，使用MTS试剂测定活细胞数量。使用 SpectraMaxM5 分光光度计读取检测板。数据代表至少两次独立实验的结果。

---

蛋白质印迹分析[2]
将 K562 CD11b/CD18 细胞与白细胞黏附素-1 (LA1)、LA2 或 LA3 (15 μM) 或纤维蛋白原 (200 μg) 在无血清培养基中于 37°C 孵育 1 小时。细胞裂解液经 10% SDS-PAGE 凝胶电泳分离后，按照既定方案转移至聚偏二氟乙烯膜上。将膜与 1:1000 稀释的抗磷酸化细胞外信号调节激酶 1/2 (ERK1/2) (Thr202/Tyr204) 抗体孵育，用 Reblot 温和剥离液剥离，然后依次与抗总 ERK1/2 抗体和抗甘油醛-3-磷酸脱氢酶 (GAPDH) 抗体孵育，并按照制造商的说明进行显色。所呈现的数据代表至少三次独立实验的结果。

---

细胞黏附实验：使用表达 CD11b/CD18 的 K562 细胞。将细胞在配体包被的孔中与 ADH-503 于 37°C 孵育 10 分钟。通过倒置培养板 30 分钟去除未黏附的细胞。对黏附细胞进行定量。EC50 为 4 μM。 [1] 将骨髓来源的巨噬细胞用 PDAC 条件培养基（含或不含 ADH-503）处理 7 小时，然后进行 RNA-seq 和 Q-PCR 分析。[1] 对于微珠标记，用 PE 偶联的微球标记血细胞。组织样本经流式细胞术处理。[1] 对于趋化性实验（相关化合物 LA1），将中性粒细胞置于带有 fMLP 梯度的 Zigmond 小室中，并记录其迁移情况。[2] 对于跨内皮迁移实验（相关化合物 LA1），THP-1 细胞穿过经 TNF-α 激活的 HUVEC 层，向 MCP-1 梯度迁移。[2]

动物/疾病模型： KPC 小鼠 [p48-CRE/Lox-stop-Lox(LSL)-KrasG12D/p53flox/flox][1]
剂量： 30、60 或 120 mg/kg
给药途径： 口服（po）；60 天
实验结果： 延缓肿瘤进展，在时间点分析中显著降低肿瘤负荷，并提高总体生存率。

---

动物/疾病模型： 雄性大鼠[1]
剂量： 30、100 mg/kg（药代动力学/PK/PK 分析）
给药途径： 口服（po），每日两次；第 1 天和第 5 天的结果：30 mg 和 100 mg 的平均半衰期分别为 4.68 和 3.95 小时（小时），最大浓度分别为 1716 和 2594 ng/mL，血浆中的 AUC0-t 分别为 6950 和 13962 ng·h/mL/kg。

---

在动物实验中，ADH-503 的给药剂量为 30、60 或 120 mg/kg，当剂量不是 60 mg/kg 时，会在正文中注明。 ADH-503 的制剂为含 0.5% 羧甲基纤维素和 0.1% Tween-80 的无菌水溶液，每日两次（BID）灌胃给药。

---

ADH-503 的制剂为含 0.5% 羧甲基纤维素和 0.1% Tween-80 的无菌水溶液。每日两次（BID）灌胃给药，剂量为 30、60 或 120 mg/kg（通常为 60 mg/kg）。[1] 在药代动力学研究中，ADH-503 经口给予大鼠和 C57/B6 小鼠。[1] 在腹膜炎研究（相关化合物 LA1）中，化合物在硫代乙醇酸盐注射前 30 分钟经静脉或腹腔注射给药。 [2] 对于球囊损伤模型（相关化合物 LA1），在损伤前 30 分钟肌注化合物，然后每隔一天注射一次，持续 3 周。[2] 对于抗肾小球基底膜肾炎模型（相关化合物 LA1），在诱导前 2 小时开始，每天腹腔注射化合物。[2] 对于斑马鱼研究（相关化合物 LA1），将幼鱼浸入化合物溶液中。[2]

在大鼠中，ADH503 以 30 和 100 mg/kg 剂量给药后的平均半衰期分别为 4.68 小时和 3.95 小时，血浆 Cmax 和 AUC0-t 分别为 1716 和 2594 ng/mL 以及 6950 和 13962 ng·h/mL。在大鼠中重复给药并增加剂量后，这些参数相似（图 2C、S2C-E）。在 C57/B6 小鼠中也观察到了类似的药代动力学特征（图 S2D）。[1] 在大鼠中，口服 30 mg/kg 剂量的 ADH-503 后，平均半衰期为 4.68 小时；100 mg/kg 剂量时，平均半衰期为 3.95 小时。血浆中Cmax分别为1716 ng/mL（30 mg/kg）和2594 ng/mL（100 mg/kg）。AUC0-t分别为6950 ng·h/mL（30 mg/kg）和13962 ng·h/mL（100 mg/kg）。重复给药显示出相似的参数。在C57/B6小鼠中也观察到了类似的药代动力学特征。[1] 对于相关化合物LA1（白细胞黏附素-1），未提供具体的药代动力学数据，但已知其为可口服给药的小分子，且在从循环中清除后作用可逆。[2]

研究表明，ADH503 耐受性良好，大鼠单次给药或连续给药 28 天（剂量高达 1500 mg/kg/d）后，以及犬单次给药或连续给药 28 天（剂量高达 1359 mg/kg/d）后，均未观察到不良反应或毒性。ADH503 给药不会导致死亡、临床症状或体重变化，且该化合物耐受性良好。[1]

[1]. Agonism of CD11b reprograms innate immunity to sensitize pancreatic cancer to immunotherapies. Sci Transl Med. 2019 Jul 3;11(499).

[2]. Small molecule-mediated activation of the integrin CD11b/CD18 reduces inflammatory disease. Sci Signal. 2011;4(189):ra57.

CD11b激动剂GB1275是一种小分子CD11b（整合素α-M；ITGAM；整合素α-M链）激动剂，具有高口服生物利用度和潜在的免疫调节活性。给药后，GB1275靶向并结合CD11b，从而激活CD11b。这导致CD11b介导的信号传导，促进促炎性巨噬细胞极化，同时抑制免疫抑制性巨噬细胞极化。这减少了肿瘤微环境（TME）中肿瘤相关巨噬细胞（TAM）和髓源性抑制细胞（MDSC）的浸润，促进抗肿瘤免疫反应，诱导细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的产生，并抑制肿瘤生长。 CD11b是整合素家族细胞黏附受体的成员，在免疫系统细胞上高表达，作为免疫抑制的负调控因子，能够激活先天性抗肿瘤免疫。免疫检查点疗法虽然彻底改变了癌症治疗，但并非所有类型的肿瘤都能从中获益。胰腺导管腺癌（PDAC）是一种高度致命的恶性肿瘤，对免疫疗法的反应非常有限。PDAC组织中广泛的免疫抑制性髓系细胞浸润被认为是免疫疗法耐药的主要机制。在临床前研究中，同时靶向单核细胞或粒细胞迁移或巨噬细胞存活的策略，与免疫检查点疗法联合应用，已显示出令人鼓舞的前景，这些研究成果已转化为正在进行的胰腺癌和其他类型癌症的临床试验。然而，未靶向的单核细胞、粒细胞和/或组织驻留巨噬细胞的代偿机制可能会限制此类策略的疗效。 CD11b/CD18是整合素分子，在这些髓系细胞亚群的细胞表面高表达，并在炎症组织中的细胞迁移和功能中发挥重要作用。本文证明，小分子激动剂（ADH-503）对CD11b的部分激活可导致肿瘤相关巨噬细胞的重极化、肿瘤浸润的免疫抑制性髓系细胞数量减少以及树突状细胞反应增强。这些效应反过来增强了抗肿瘤T细胞免疫，并使免疫检查点抑制剂能够在先前无反应的胰腺导管腺癌（PDAC）模型中发挥治疗作用。这些数据表明，CD11b的分子激动作用可以重编程免疫抑制性髓系细胞反应，并有可能克服当前临床策略在克服免疫治疗耐药性方面的局限性。 [1]

---

ADH-503是一种CD11b小分子激动剂，可通过重编程先天免疫来增强胰腺癌对免疫疗法的敏感性。它靶向多种髓系细胞（单核细胞、粒细胞、巨噬细胞），以克服免疫检查点阻断疗法的耐药性。目前，ADH-503正按计划进行I期单药临床试验。在胰腺导管腺癌（PDAC）模型中，ADH-503与抗PD-1或抗41BB联合使用可实现肿瘤完全消退并产生长期免疫记忆。[1] 相关化合物LA1（白细胞黏附素-1）是一种小分子激动剂，可与CD11b/CD18的αA结构域结合，增强细胞黏附并抑制细胞迁移，并在炎症性疾病模型中显示出疗效。[2]

C27H28N2O5S2

524.651624679565

524.143

C, 61.81; H, 5.38; N, 5.34; O, 15.25; S, 12.22

2055362-74-6

Leukadherin-1;344897-95-6;(Z)-Leukadherin-1;2055362-72-4; 2055362-74-6 (choline)

145711124

Brown to reddish brown solid powder

151

1

7

6

36

721

0

S1C(N(C(/C/1=C/C1=CC=C(C2C=CC(C(=O)[O-])=CC=2)O1)=O)CC1C=CC=CC=1)=S.OCC[N+](C)(C)C

GOWDQYRMBCOOJR-JHMJKTBASA-M

InChI=1S/C22H15NO4S2.C5H14NO/c24-20-19(29-22(28)23(20)13-14-4-2-1-3-5-14)12-17-10-11-18(27-17)15-6-8-16(9-7-15)21(25)261-6(2,3)4-5-7/h1-12H,13H2,(H,25,26)7H,4-5H2,1-3H3/q+1/p-1/b19-12-

2-hydroxy-N,N,N-trimethylethan-1-aminium (Z)-4-(5-((3-benzyl-4-oxo-2-thioxothiazolidin-5-ylidene)methyl)furan-2-yl)benzoate

ADH-503 choline; ADH-503; ADH 503; ADH503; Leukadherin-1 choline; 2-Hydroxy-N,N,N-trimethylethan-1-aminium (Z)-4-(5-((3-benzyl-4-oxo-2-thioxothiazolidin-5-ylidene)methyl)furan-2-yl)benzoate; THN3VQ67CA; UNII-THN3VQ67CA; 4-[5-[(Z)-(3-benzyl-4-oxo-2-sulfanylidene-1,3-thiazolidin-5-ylidene)methyl]furan-2-yl]benzoate;2-hydroxyethyl(trimethyl)azanium; LA1

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

MEthanol : ~100 mg/mL (~190.60 mM)
DMSO : ~21.43 mg/mL (~40.85 mM)
Ethanol : ~3.33 mg/mL (~6.35 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.14 mg/mL (4.08 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 21.4mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

---

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.14 mg/mL (4.08 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 21.4 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

---

View More

配方 3 中的溶解度: 2.08 mg/mL (3.96 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。