| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 25mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 体外研究 (In Vitro) |
Alisol B 对多种癌细胞系（包括 Hep3B, HepG2, HeLa, SK-BR-3, MDA-MB-231, MCF-7, PC3, C666-1）表现出细胞毒性作用，处理48小时的IC₅₀值大约在20至49 μmol/L之间。其活性强于alisol A和alisol A 24-acetate，与alisol B 23-acetate相当[3]。
Alisol B 处理可诱导自噬，证据包括在多种细胞系（如MCF-7）中GFP-LC3斑点增加；通过透射电子显微镜观察到双膜自噬体的形成；以及在溶酶体蛋白酶抑制剂存在下LC3-I向LC3-II的转化增强，表明自噬流增加[3]。 Alisol B 处理导致MCF-7细胞发生时间依赖性的G₁期细胞周期阻滞，并伴随细胞周期抑制剂p27的积累[3]。 Alisol B 诱导细胞凋亡，证据包括处理48小时后MCF-7细胞Annexin V/7-AAD阳性染色（早期和晚期凋亡）增加，以及聚ADP核糖聚合酶 (PARP) 的切割[3]。 Alisol B 诱导的自噬是通过钙动员介导的，导致CaMKK-AMPK-mTOR通路激活。抑制CaMKK（使用STO-609）或螯合细胞内钙（使用BAPTA/AM）可减弱AMPK磷酸化和GFP-LC3斑点的形成[3]。 Alisol B 引发内质网（ER）应激和未折叠蛋白反应（UPR），特异性激活了PERK-elF2α-ATF4-CHOP/GRP78和ATF6信号通路，但未激活IRE1-XBP1剪接通路，这通过蛋白质印迹、报告基因检测和RT-PCR分析得到证实[3]。 自噬的基因缺陷（使用ATG7缺陷型小鼠胚胎成纤维细胞）增加了细胞对 Alisol B 诱导死亡的敏感性，表明在此背景下自噬扮演了一种促生存反应的角色[3]。 |
|---|---|
| 酶活实验 |
使用从雌兔后腿骨骼肌肌浆网（SR）膜（富含SERCA1A亚型）纯化的Ca²⁺ ATP酶评估Alisol B对SERCA泵的抑制活性。ATP酶活性通过酶偶联法测定，该系统涉及丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶，将ATP水解与NADH氧化偶联，通过分光光度法监测。通过将酶与不同浓度的Alisol B孵育来生成抑制曲线[3]。
使用猪脑微囊膜评估Alisol B对SERCA2B亚型的作用。由于这些膜中Ca²⁺ ATP酶活性较低，采用更灵敏的磷酸释放法来测量Ca²⁺依赖的ATP水解速率。将微囊膜与不同浓度的Alisol B孵育，并对释放的无机磷酸盐进行定量[3]。 |
| 细胞实验 |
采用GFP-LC3报告基因检测法筛选自噬诱导剂。将MCF-7细胞瞬时转染GFP-LC3质粒。转染后，用测试化合物或对照物（如他莫昔芬）处理细胞。通过荧光显微镜计数显示点状GFP-LC3荧光的细胞百分比来量化自噬诱导[3]。
采用MTT法测定细胞毒性。将细胞接种于培养板，用系列稀释的Alisol B处理指定时间（如48小时），然后加入MTT试剂孵育。溶解形成的甲臜晶体，测量吸光度，以确定相对于未处理对照的细胞活力。根据剂量反应曲线计算IC₅₀值[3]。 通过透射电子显微镜观察自噬结构。用戊二醛固定经Alisol B处理的细胞，锇酸后固定，树脂包埋并切片。超薄切片用醋酸铀和柠檬酸铅染色，在电子显微镜下观察以识别双膜自噬体和自溶酶体[3]。 通过流式细胞术分析细胞周期分布和凋亡。对于细胞周期分析，细胞被固定，用RNase处理，碘化丙啶染色，并分析DNA含量。对于凋亡检测，细胞用Annexin V和7-AAD染色，并进行分析以区分活细胞、早期凋亡、晚期凋亡和坏死细胞群[3]。 使用蛋白质印迹分析检测蛋白表达和磷酸化。裂解细胞，通过SDS-PAGE分离蛋白，转膜，并用特异性一抗（如抗LC3、p-AMPK、p-eIF2α、CHOP、PARP、β-actin的抗体）进行孵育。使用相应的二抗和化学发光法检测信号[3]。 为了评估钙的作用，细胞在用Alisol B处理前，先用细胞内钙螯合剂BAPTA/AM或CaMKK抑制剂STO-609进行预处理，然后分析自噬标志物（GFP-LC3斑点）或细胞活力[3]。 为了从药理学和遗传学角度研究自噬的作用，细胞在用Alisol B处理前，先用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）预处理，或用靶向beclin1的小干扰RNA转染，或比较野生型与ATG7缺陷型成纤维细胞，然后进行活力或死亡检测[3]。 通过多种方法评估UPR通路激活：通过蛋白质印迹检测PERK、eIF2α磷酸化及下游蛋白（ATF4、CHOP、GRP78）；通过荧光素酶报告基因检测ATF6转录活性；通过RT-PCR分析XBP1 mRNA的剪接作为IRE1激活的读数[3]。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
Alisol B 是一种三萜类化合物。
据报道，Alisma、Alisma lanceolatum 和其他一些有相关数据的生物体中均含有 Alisol B。 Alismo B 是一种原甾烷型三萜类化合物，是从泽泻（Alisma orientale）的根茎中分离得到的，泽泻是一种传统中药[3]。 本研究将 Alismo B 鉴定为一种新型的自噬诱导天然产物。其作用机制涉及抑制 SERCA 泵，从而导致钙稳态紊乱。这种扰动随后激活两种平行的细胞反应：1）通过CaMKK-AMPK-mTOR信号通路介导的促生存自噬通路；2）内质网应激/UPR（特别是PERK和ATF6分支），最终导致细胞凋亡[3]。 该研究表明，Alisol B选择性激活某些UPR通路（PERK/ATF6而非IRE1）的独特特性可能有利于促进细胞凋亡而非存活。该研究提出Alisol B可作为进一步开发的候选药物，可能采用类似于其他SERCA抑制剂（如thapsigargin）的前药策略[3]。 |
| 分子式 |
C30H48O4
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|---|---|
| 分子量 |
472.6997
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| 精确质量 |
472.355
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| CAS号 |
18649-93-9
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| 相关CAS号 |
Alisol B 23-acetate;26575-95-1
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| PubChem CID |
15558620
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.1±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
567.1±50.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
181.2±23.6 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±3.5 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.560
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| LogP |
4.37
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| tPSA |
70.06
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
34
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| 分子复杂度/Complexity |
917
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| 定义原子立体中心数目 |
9
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| SMILES |
C[C@H](C[C@@H]([C@@H]1C(O1)(C)C)O)C2=C3C[C@@H]([C@H]4[C@]5(CCC(=O)C([C@@H]5CC[C@@]4([C@]3(CC2)C)C)(C)C)C)O
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| InChi Key |
GBJKHDVRXAVITG-UNPOXIGHSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C30H48O4/c1-17(15-21(32)25-27(4,5)34-25)18-9-13-29(7)19(18)16-20(31)24-28(6)12-11-23(33)26(2,3)22(28)10-14-30(24,29)8/h17,20-22,24-25,31-32H,9-16H2,1-8H3/t17-,20+,21+,22+,24+,25-,28+,29+,30+/m1/s1
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| 化学名 |
(5R,8S,9S,10S,11S,14R)-17-[(2R,4S)-4-[(2R)-3,3-dimethyloxiran-2-yl]-4-hydroxybutan-2-yl]-11-hydroxy-4,4,8,10,14-pentamethyl-1,2,5,6,7,9,11,12,15,16-decahydrocyclopenta[a]phenanthren-3-one
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~211.55 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (5.29 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.29 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.29 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1155 mL | 10.5775 mL | 21.1551 mL | |
| 5 mM | 0.4231 mL | 2.1155 mL | 4.2310 mL | |
| 10 mM | 0.2116 mL | 1.0578 mL | 2.1155 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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