hypoxia-inducible factor-α1 (HIF-α1); p53
Amifostine targets normal tissues to protect them from the toxic effects of chemotherapy and radiotherapy. After dephosphorylation to WR-1065, the active metabolite scavenges free radicals and binds to reactive metabolites of chemotherapeutic agents. WR-1065 also enhances DNA repair. The selective protection of normal tissues is achieved because normal tissues have higher levels of alkaline phosphatase and lower levels of vascularization compared to tumor tissues.

氨磷汀（0.78125-100 μM，24 小时）在 100 μM 浓度下可显著降低 H9c2 细胞凋亡，并以剂量依赖的方式减少叔丁基过氧化氢 (TBHP) 诱导的细胞损伤 [5]。体外研究表明，氨磷汀能够保护正常细胞免受化疗药物和辐射的细胞毒性作用。该化合物脱磷酸化后生成 WR-1065，后者可清除自由基并与活性代谢物结合。WR-1065 还能增强正常细胞的 DNA 修复。氨磷汀在多种体外模型中均表现出有效的细胞保护作用。

氨磷汀（静脉注射，400 mg/kg，4 小时）对雄性 C57BL/6 小鼠的心肌缺血/再灌注损伤具有保护作用[5]。
体内临床研究表明，氨磷汀可减轻化疗和放疗的毒性作用。它能降低顺铂引起的肾毒性和放射引起的口干症的发生率和严重程度。氨磷汀在化疗或放疗前静脉给药。该化合物的细胞保护作用呈剂量依赖性。

我们使用比H2O2更稳定的化学物质TBHP来诱导氧化应激。为了测量H9c2细胞中的活性氧（ROS），将细胞与10 μmol/L的ROS敏感染料2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）在37°C下孵育20分钟。使用流式细胞仪（BD Biosciences，美国加利福尼亚州圣何塞）检测ROS，并使用BD FACS软件进行定量。上述实验重复三次。使用JC-1染色法测量线粒体膜电位（ΔΨm）；将细胞接种于培养皿中。处理后，将培养皿在37°C下用JC-1染色液（5 mg/ml）孵育20分钟。随后，用JC-1染色缓冲液洗涤染色后的细胞两次。图像由共聚焦激光扫描显微镜拍摄。[5]
氨磷汀的体外酶活性测定通常包括测量碱性磷酸酶的活性，该酶可将氨磷汀转化为其活性代谢物WR-1065。将该酶与氨磷汀孵育，并测量WR-1065的生成量。可以评估各种抑制剂或调节剂对氨磷汀转化的影响。

将H9c2细胞以每孔5000个细胞的浓度接种于96孔板中。细胞先用不同浓度的氨磷汀（0.78125、1.5625、3.125、6.25、12.5、25、50和100 μM）预处理30分钟，然后用叔丁基过氧化氢（TBHP）处理12小时。采用MTT法评估活细胞数量。简而言之，向每个孔中加入MTT染料溶液，孵育4小时。通过测定490 nm处的吸光度来测量活细胞数量。为保证结果的一致性，MTT实验重复三次。[5]
氨磷汀的体外细胞研究通常涉及培养的正常细胞和癌细胞。在有或无化疗药物或辐射的情况下，用不同浓度的氨磷汀或WR-1065处理细胞。采用 MTT 或类似方法评估细胞活力。通过测量 γ-H2AX 灶或彗星试验评估 DNA 损伤。评估正常细胞相对于癌细胞的选择性保护作用。

动物/疾病模型：雄性C57BL/6小鼠心肌缺血/再灌注损伤[5]：400 mg/kg
给药途径：静脉注射；4小时
实验结果：减轻心肌细胞凋亡并减少缺血/再灌注诱导的活性氧（ROS）生成。显著降低裂解型caspase 3和Bax的表达，同时增强SOD1、SOD2和Bcl2的表达。SOD活性显著升高，MDA水平降低。
氨磷汀的体内动物研究通常在啮齿动物模型中进行，以评估其细胞保护作用。该化合物在化疗或放疗前静脉给药。本研究评估了氨磷汀对化疗引起的肾毒性、骨髓抑制及其他毒性的影响。同时，也评估了该化合物对放射性口干及其他放射性毒性的影响。通过测定血浆和组织中氨磷汀和WR-1065的浓度，开展了药代动力学研究。

吸收、分布和排泄
静脉注射150 mg/m²乙醇后，10秒内母体药物及其两种代谢物的肾脏排泄量较低。给药后1小时内，母体药物、硫醇和二硫化物的平均肾脏排泄量分别为给药剂量的0.69%、2.64%和2.22%。静脉注射后5至8分钟，可在骨髓细胞中检测到活性游离硫醇代谢物的浓度。目前尚不清楚氨磷汀或其代谢物是否会分布到乳汁中。该药物主要通过快速代谢和组织吸收消除。
……大鼠单次皮下注射氨磷汀的研究表明，药物在正常组织或肿瘤组织中均未蓄积，肿瘤中 WR-1065 的峰浓度略高于……治疗期间的定量限……
本研究旨在探讨细胞保护剂氨磷汀（Ethyol®；WR 2721）及其主要代谢物（WR 1065 和二硫化物）在两项卡铂或顺铂联合氨磷汀的 I 期临床试验患者体内的药代动力学。患者接受单次或三次氨磷汀给药（740 或 910 mg/m²）。单次或首次给药在化疗前 15 分钟内通过静脉输注给药。其余两次输注分别在化疗后 2 小时和 4 小时进行。氨磷汀从血浆中迅速清除，至少部分原因是其快速转化为WR 1065。观察到双相下降，最终半衰期为0.8小时。从血浆中清除的活性代谢物WR 1065的最终半衰期为7.3 ± 3.6小时。WR 1065的初始半衰期较短可归因于其在组织中的快速吸收和二硫化物的形成。二硫化物的最终半衰期为8.4至13.4小时，且在治疗后至少24小时内均可检测到。它们可能作为WR 1065的交换池。在多次给药方案中，氨磷汀的峰浓度在每次15分钟输注结束时并未累积。对于 WR 1065，观察到峰值浓度呈上升趋势 [C1,max：47.5 ± 11.9 μM，C2,max：79.0 ± 13.2 μM，C3,max：84.8 ± 15.1 μM，(n = 6)]，而二硫键峰值浓度则略有下降 [C1,max：184.2 ± 12.6 μM，C2,max：175.0 ± 23.7 μM，C3,max：166.0 ± 17.2 μM，(n = 6)]。后者的发现可能提示二硫键的形成已达到饱和，或者 WR 1065 的吸收或消除发生了改变，导致重复给药氨磷汀后血浆和组织中 WR 1065 的浓度升高。

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代谢/代谢物
氨磷汀在组织中经碱性磷酸酶快速脱磷酸化为活性游离硫醇代谢物，后者进一步转化为活性较低的二硫键代谢物。
氨磷汀在组织中经碱性磷酸酶快速脱磷酸化为活性游离硫醇代谢物，后者进一步转化为活性较低的二硫键代谢物。
静脉输注氨磷汀（剂量为740至910 mg/m²体表面积，输注时间为15分钟）或快速静脉注射氨磷汀（剂量为150 mg/m²体表面积，输注时间为10秒）后一小时内，尿液中未检测到未代谢的氨磷汀。氨磷汀、二硫键代谢物和硫醇代谢物分别仅占剂量的0.69%、2.22%和2.64%。本研究探讨了放射防护化合物WR-2721（氨磷汀；S-2-(3-氨基丙基氨基)乙基硫代磷酸酯）在Balb/c小鼠体内的代谢情况。已知放射防护需要将母体药物在培养细胞中转化为其游离硫醇代谢物WR-1065。由于WR-1065的代谢物可能参与其防护作用，且硫醇是代谢活性很高的分子，因此我们采用电化学检测-高效液相色谱法（EC-HPLC）研究了WR-2721的代谢情况。本研究的主要发现如下：1）WR-2721从血液中迅速清除。给药30分钟后，母体药物的血药浓度较5分钟时观察到的峰值下降了10倍。2）WR-1065迅速出现在正常组织的过氯酸（PCA）可溶性组分中。给药10分钟后，肝脏和肾脏中WR-1065的最高浓度分别为965和2195 μmol/kg；30分钟时，心脏和小肠中WR-1065的最高浓度分别为739和410 μmol/kg。3）在两种实验性肿瘤的PCA可溶性组分中，WR-1065的累积速率低于其他组织。

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生物半衰期
8分钟

约8分钟；给药6分钟后，血浆中残留的氨磷汀不足10%。
本研究探讨了细胞保护剂氨磷汀（Ethyol®；WR 2721）及其主要代谢物（WR 1065和二硫化物）在两项卡铂或顺铂联合氨磷汀的I期临床试验参与者体内的药代动力学。患者接受单次或三次剂量的氨磷汀（740 或 910 mg/m²）。单次或首次给药在化疗前 15 分钟内通过静脉输注给药。其余两次输注分别在化疗后 2 小时和 4 小时进行。氨磷汀从血浆中迅速清除，这至少部分归因于其快速转化为 WR 1065。观察到双相下降，最终半衰期为 0.8 小时。活性代谢物 WR 1065 从血浆中清除的最终半衰期为 7.3 ± 3.6 小时。WR 1065 的初始半衰期较短可归因于其在组织中的快速吸收和二硫化物的形成。二硫化物的最终半衰期为 8.4–13.4 小时，并且在治疗后至少 24 小时内均可检测到。它们可能作为 WR 1065 的交换池。
氨磷汀是一种特性明确的药物，具有已确定的药代动力学特性。静脉注射后，它迅速从血浆中清除，并在组织中脱磷酸化为 WR-1065。WR-1065 的半衰期比氨磷汀长。口服氨磷汀后不被吸收。该化合物主要以代谢物的形式经尿液排出。

大鼠（腹腔注射）：LD50：418 mg/kg
大鼠（肌肉注射）：LD50：396 mg/kg
小鼠（口服）：LD50：842 mg/kg
小鼠（腹腔注射）：LD50：321 mg/kg
小鼠（静脉注射）：LD50：557 mg/kg
小鼠（肌肉注射）：LD50：514 mg/kg
犬（静脉注射）：LD50：279 mg/kg

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相互作用
在用γ-磷酸酶（γ-fos）处理前30分钟重复口服褪黑素和抗坏血酸（200 mg/kg）可降低其累积毒性。在这些条件下，琥珀酸（100 mg/kg）无效。单独使用γ-磷酸盐或γ-磷酸盐联合褪黑素、抗坏血酸和琥珀酸治疗的动物，其50%死亡的累积时间分别为3.08天、4.29天、4.06天和2.97天。PMID：15455115
氨磷汀可能引起暂时性低血压；服用氨磷汀前24小时应停用抗高血压药物或其他可能引起低血压的药物；正在接受无法停用的抗高血压治疗的患者不应服用氨磷汀。

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解毒剂和紧急处理
立即采取急救措施：确保已进行充分的去污处理。如果患者停止呼吸，立即开始人工呼吸，最好使用按需呼吸机、球囊面罩或简易呼吸面罩，并遵循培训指导。必要时进行心肺复苏。立即用清水冲洗受污染的眼睛。不要催吐。如果发生呕吐，将患者向前倾斜或置于左侧卧位（如果可能，头部向下），以保持呼吸道通畅并防止误吸。保持患者镇静并维持正常体温。立即就医。/A类和B类中毒/
基本治疗：保持呼吸道通畅（必要时使用口咽或鼻咽通气道）。必要时进行吸痰。观察呼吸衰竭的迹象，必要时进行辅助通气。通过无创通气面罩以每分钟10至15升的流速给予氧气。监测肺水肿并根据需要进行治疗……监测休克并根据需要进行治疗……预判癫痫发作并根据需要进行治疗……如果眼睛受到污染，立即用水冲洗。在转运过程中，持续用0.9%生理盐水冲洗每只眼睛……不要使用催吐剂。如果误服，漱口并用5 mL/kg兑200 mL水稀释，前提是患者能够吞咽、有强烈的咽反射且没有流涎……去污后，用干燥的无菌敷料覆盖皮肤烧伤……/A类和B类毒物/
高级治疗：对于意识状态改变、严重肺水肿或严重呼吸窘迫的患者，考虑进行口咽或鼻咽气管插管以控制气道。使用球囊面罩进行正压通气可能有效。考虑对肺水肿进行药物治疗……考虑使用β受体激动剂（例如沙丁胺醇）治疗严重支气管痉挛……监测心律，必要时治疗心律失常……开始静脉输注5%葡萄糖溶液（SRP：保持静脉通路通畅，最低流速）。如果出现低血容量的迹象，则使用0.9%生理盐水或乳酸林格氏液。对于伴有低血容量迹象的低血压患者，应谨慎输液。注意液体过量的迹象……使用地西泮或劳拉西泮治疗癫痫发作……使用盐酸普罗米卡因辅助眼部冲洗……/毒素A和B/

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毒性数据
大鼠（腹腔注射）：LD50：418 mg/kg
大鼠（肌肉注射）：LD50：396 mg/kg
小鼠（口服）：LD50：842 mg/kg
小鼠（腹腔注射）：LD50：321 mg/kg
小鼠（静脉注射）：LD50：557 mg/kg
小鼠（肌肉注射）：LD50：514 mg/kg
犬（静脉注射）：LD50：279 mg/kg

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相互作用
重复口服褪黑素在用γ-磷酸酶（γ-fos）治疗前30分钟给予抗坏血酸（200 mg/kg）可降低其累积毒性。在此条件下，琥珀酸（100 mg/kg）无效。接受γ-磷酸酶单药治疗或联合褪黑素、抗坏血酸和琥珀酸治疗的动物中，50%死亡的累积时间分别为3.08天、4.29天、4.06天和2.97天。氨磷汀可能暂时引起低血压；服用氨磷汀前24小时应停用抗高血压药物或其他可能引起低血压的药物；正在接受无法停用的抗高血压治疗的患者不应服用氨磷汀。非人类毒性值：小鼠腹腔注射LD50 700 mg/kg /氨磷汀一水合物/
氨磷汀是一种临床批准的药物，具有良好的安全性。最常见的不良反应与剂量相关，包括恶心、呕吐、低血压和潮红。也可能出现低钙血症和过敏反应。氨磷汀应在医疗专业人员的指导下使用。该化合物在治疗剂量下通常耐受性良好。

[1]. Kouvaris, J.R., V.E. Kouloulias, and L.J. Vlahos, Amifostine: the first selective-target and broad-spectrum radioprotector. Oncologist, 2007. 12(6): p. 738-47.

[2]. Amifostine (WR2721) restores transcriptional activity of specific p53 mutant proteins in a yeast functional assay. Oncogene. 2001 Jun 14;20(27):3533-40.

[3]. Amifostine inhibits angiogenesis in vivo. J Pharmacol Exp Ther. 2003 Feb;304(2):729-37.

[4]. Amifostine induces anaerobic metabolism and hypoxia-inducible factor 1 alpha. Cancer Chemother Pharmacol. 2004 Jan;53(1):8-14.

[5]. Amifostine Pretreatment Attenuates Myocardial Ischemia/Reperfusion Injury by Inhibiting Apoptosis and Oxidative Stress. Oxid Med Cell Longev. 2017;2017:4130824.

治疗用途
放射保护剂
氨磷汀适用于降低晚期卵巢癌患者因反复使用顺铂而引起的累积性肾毒性。/已包含在美国产品标签中/
氨磷汀适用于降低晚期非生殖细胞实体瘤患者因反复使用顺铂而引起的累积性肾毒性。/未包含在美国产品标签中/
氨磷汀适用于降低接受头颈部肿瘤术后放疗且放疗范围涵盖大部分腮腺的患者发生中度至重度口干症的风险。/已包含在美国产品标签中/
有关氨磷汀（8种类型）治疗用途的更完整数据，请访问HSDB记录页面。

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药物警告
虽然氨磷汀细胞保护治疗期间低钙血症的发生率较低，但对于有低钙血症风险的患者，例如肾病综合征患者或接受多次氨磷汀治疗的患者，应监测血清钙水平，并根据需要补充钙剂。
由于氨磷汀治疗期间恶心和/或呕吐很常见且可能很严重，因此应在氨磷汀治疗前和治疗期间给予有效的止吐治疗（例如，静脉注射皮质类固醇，如地塞米松和5-HT3受体拮抗剂）。根据同时进行的化疗或放疗的致吐性，可能需要额外的止吐药。此外，对于接受高致吐性化疗的患者，应密切监测体液平衡。
在静脉注射氨磷汀期间和之后，应密切监测患者是否出现过敏反应，包括罕见的与心脏骤停相关的过敏性休克。
如发生急性超敏反应，应立即永久停止输注。生产商指出，应备有肾上腺素和其他适当的急救措施，以便立即处理此类事件。
对于持续时间少于 5 分钟的输注，应至少在输注开始前和输注结束后立即监测血压，并根据需要继续监测。如果出现低血压且需要中断氨磷汀输注，应将患者置于头低脚高位，并通过另一静脉输注 0.9% 氯化钠溶液。有关氨磷汀的更多完整数据（共 9 项），请访问 HSDB 记录页面。药效学：氨磷汀是一种有机硫代磷酸酯类细胞保护剂，适用于降低晚期卵巢癌或非小细胞肺癌患者因反复使用顺铂而引起的累积性肾毒性，以及降低接受头颈部肿瘤术后放疗患者中度至重度口干症的发生率。氨磷汀是一种前药，在组织中经碱性磷酸酶脱磷酸化生成具有药理活性的游离硫醇代谢物，该代谢物被认为可以降低顺铂的累积性肾毒性并减轻放射线对正常口腔组织的毒性作用。由于氨磷汀及其代谢物在健康细胞中的浓度比肿瘤细胞高100倍，因此健康细胞优先受到保护。
氨磷汀（YM08310）是一种用于降低化疗和放疗毒性作用的细胞保护剂。本品适用于降低顺铂相关的累积性肾毒性，以及减轻头颈癌放疗引起的口干症。氨磷汀以多种商品名销售，包括Ethyol。本品为处方药，不可非处方购买。

C5H21N2O6PS

268.27

214.054

C, 28.03; H, 7.06; N, 13.08; O, 22.41; P, 14.46; S, 14.97

20537-88-6

112901-68-5 (trihydrate); 20537-88-6 (free); 59178-37-9 (sodium); 63717-27-1 (monohydrate)

2141

White to off-white solid powder

1.4±0.1 g/cm3

441.7±51.0 °C at 760 mmHg

160-161ºC

220.9±30.4 °C

0.0±2.3 mmHg at 25°C

1.555

-1.68

130.69

4

6

7

12

152

0

OP(SCCNCCCN)(O)=O

JKOQGQFVAUAYPM-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C5H15N2O3PS/c6-2-1-3-7-4-5-12-11(8,9)10/h7H,1-6H2,(H2,8,9,10)

2-((3-Aminopropyl)amino)-ethanethiol, dihydrogen phosphate ester (9CI)

Apaetp; AU-95722; YM-08310;NSC 296961; S 8744; Ethyol; Sapep; Aminopropylaminoethyl thiophosphate; NSC-296961; WR 2721; YM 08310; Ethiofos; Gammaphos;

2934.99.03.00

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

H2O : ~100 mg/mL (~466.81 mM)
DMF : 1 mg/mL (~4.67 mM)
DMSO :< 1 mg/mL

配方 1 中的溶解度: 100 mg/mL (466.81 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。 (<60°C).

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。