Aprocitentan (ACT-132577)   中文名称: 阿普昔腾坦

ETA (IC50 = 3.4 nM); ETA (pA2 = 6.7); ETB (IC50 = 987 nM); ETB (pA2 = 5.5)
Aprocitentan targets the endothelin receptors ETA and ETB. It acts as a dual antagonist with high affinity for the ETA receptor (IC50 = 3.4 nM) and lower affinity for the ETB receptor (IC50 = 987 nM). By blocking these receptors, Aprocitentan inhibits the effects of endothelin-1 and endothelin-2, leading to vasodilation and reduced blood pressure.

当应用于非重组细胞（主要人肺平滑肌细胞、大鼠主动脉平滑肌细胞系A10和小鼠成纤维细胞系3T3）时，阿普罗替坦（ACT-132577）可完全抑制ET-1引起的细胞内钙离子升高[1]。
体外实验表明，阿普罗替坦是一种强效的ETA受体拮抗剂，IC50值为3.4 nM。与低亲和力的ETB受体拮抗活性（IC50 = 987 nM）相比，它对ETA受体表现出更高的亲和力和选择性。在功能性实验中，它可抑制ET-1和ET-2诱导的收缩。

在大鼠体内，阿普罗比坦（ACT-132577）的半衰期比其母体化合物更长，且分布容积大于血浆容积[1]。阿普罗比坦（ACT-132577）在大鼠血浆中的平均回收率为82.6%至90.6%，而其在大鼠血浆中的基质效应为101.4%至115.2%[2]。
在体内，阿普罗比坦正被研究用于治疗难治性高血压及相关心血管疾病。作为马西替坦的活性代谢物，它有助于该药物的整体治疗效果。其双重受体阻断作用为高血压及其相关器官损伤的治疗性调节提供了机制基础。

马西替坦（Macitentan），又名Actelion-1或ACT-064992 [N-[5-(4-溴苯基)-6-(2-(5-溴嘧啶-2-基氧基)乙氧基)-嘧啶-4-基]-N'-丙基氨基磺酰胺]，是一种新型的双重ET(A)/ET(B)内皮素(ET)受体拮抗剂，专为组织靶向给药而设计。马西替坦的选择基于其对两种ET受体的抑制效力以及对理化性质的优化，使其对亲脂性环境具有高亲和力。在体内，马西替坦代谢为一种主要的、具有药理活性的代谢物ACT-132577。马西替坦及其代谢物可拮抗ET-1与过表达ET(A)和ET(B)受体的细胞膜的特异性结合，并能抑制多种天然细胞系中ET-1诱导的钙动员，其抑制常数在纳摩尔范围内。在功能性实验中，马西替坦和ACT-132577可抑制离体去内皮大鼠主动脉（ET(A)受体）中ET-1诱导的收缩以及离体大鼠气管（ET(B)受体）中沙拉毒素S6c诱导的收缩。在肺动脉高压大鼠模型中，马西替坦可预防肺动脉压升高和右心室肥大，并显著提高生存率。在糖尿病大鼠模型中，长期服用马西替坦可降低血压和蛋白尿，并预防终末器官损伤（肾血管肥大和结构损伤）。总之，马西替坦凭借其组织靶向特性和对内皮素受体的双重拮抗作用，可保护糖尿病患者的终末器官免受损伤，并提高肺动脉高压大鼠的生存率。这一特性使马西替坦成为治疗与慢性组织内皮素系统激活相关的心血管疾病的新型药物。[1]
阿普西替坦的体外检测包括测量其抑制内皮素受体介导的信号传导的能力。使用表达ETA和ETB受体的细胞或组织进行放射性配体结合试验或功能试验（例如，测量离体组织中的钙动员或收缩）。IC50和pA2值由剂量反应曲线确定。

校准标准品和质控样品[2]
ACT-132577 (1.0 mg/mL) 和地西泮 (内标) (100 µg/mL) 的储备液均用甲醇-水 (50:50, v/v) 配制。内标工作标准溶液 (0.25 µg/mL) 由内标储备液用甲醇稀释制备；校准和质控工作溶液也以相同方式由储备液制备。所有溶液均储存于 4°C，使用前恢复至室温。
ACT-132577 校准标准品通过向空白大鼠血浆中加入适量工作溶液制备。校准曲线的偏移范围为 10-4000 ng/mL，用于测定大鼠血浆中 ACT-132577 的浓度（10、20、50、100、200、500、1000、2000 和 4000 ng/mL）。质控 (QC) 样品的制备方法与校准标准品相同，但血浆浓度不同（20、1800 和 3600 ng/mL）。分析标准品和 QC 样品均储存于 -20°C。
通过分析空白大鼠血浆、添加了 ACT-132577 和内标的空白血浆以及一份大鼠血浆样品来评估该方法的选择性。
通过在三个不同日期分析添加了内标的校准样品来构建校准曲线。以 ACT-132577 与内标的峰面积比值对分析物浓度作图。所得标准曲线与线性回归方程拟合良好，浓度范围为 10-4000 ng/mL，权重因子为浓度的倒数 (1/x)。定量下限 (LLOQ) 定义为校准曲线上的最低浓度。
通过分析浓度分别为 20 和 3600 ng/mL 的大鼠血浆样品（每个浓度重复三次），评估 ACT-132577 在大鼠血浆中的稳定性，所有样品均暴露于不同条件下。并将结果与新鲜制备的血浆样品进行比较。短期稳定性测定方法为：将加标样品在室温下放置 2 小时，并将待进样样品（蛋白质沉淀后）在室温下置于 HPLC 自动进样器中 24 小时。冻融稳定性测定方法为：连续三天进行三个完整的冻融循环（-20 至 25°C）。将添加了标准品的血浆样品在-20°C下储存20天后，评估其长期稳定性。内标（IS，50 ng/mL）的稳定性也采用类似方法进行评估。
使用表达内皮素受体的细胞进行阿普西坦的细胞活性测定。用该化合物处理细胞，并用内皮素-1刺激细胞。通过测量下游信号事件来评估受体激活情况。该化合物的拮抗活性通过其阻断内皮素诱导反应的能力来确定。

药代动力学研究[2]
本研究使用了12只雄性Sprague-Dawley大鼠（200-220 g）。实验动物的伦理编号为wydw2013-0071。所有实验程序和方案均经温州医科大学动物伦理委员会审查批准。实验前12小时禁食，但可自由饮水。分别于口服（15 mg/kg，n=6）和静脉注射（5 mg/kg，n=6）马西替坦后0.0333、0.15、0.5、1、1.5、2、4、6、8、12和24小时，从尾静脉采集血样（0.2 mL），置于肝素化1.5 mL锥形塑料离心管中。用75%酒精清洁大鼠尾静脉后，用剪刀剪断尾静脉末端。用1.5 mL锥形塑料离心管轻轻挤压并按摩尾静脉末端，收集滴落的血液。立即将样本以3000 × g离心10分钟。将所得血浆（50 µL）储存于-20°C，直至进行UPLC-MS/MS分析。使用DAS（药物与统计）软件分析每只大鼠血浆中ACT-132577的浓度-时间数据。
现有资料中未详细描述Aprocitentan的体内动物研究。该化合物是Macitentan的活性代谢物，Macitentan已在高血压和心血管疾病动物模型中进行过研究。供应商文件中未描述具体的动物模型和给药方案。

吸收
阿普拉环坦的绝对口服生物利用度尚不清楚。单次口服25 mg后，平均Cmax和AUC0-tau分别约为1.3 mcg/mL和23 mcg·h/mL，Tmax在4至5小时之间。
消除途径
单次服用放射性标记的阿普拉环坦后，约52%的剂量经尿液排出（0.2%为原形），25%经粪便排出（6.8%为原形）。
分布容积
阿普拉环坦的表观分布容积约为20 L。
清除率
阿普拉环坦的表观清除率约为0.3 L/h。
蛋白结合
阿普拉环坦与血浆中的蛋白质高度结合（>99%），主要与白蛋白结合。代谢物/代谢产物
阿普拉西坦主要通过N-糖基化以及UGT1A1和UGT2B7介导的非酶水解代谢。
生物半衰期
阿普拉西坦的有效半衰期约为41小时。
阿普拉西坦在所有剂量下均耐受良好。未报告严重不良事件（AE）。最常见的不良事件是头痛。每日一次服用100 mg的受试者体重略有增加。基于44小时的半衰期，单次给药和多次给药后阿普拉西坦的血浆浓度-时间曲线相似，支持每日一次给药方案。多次给药后，药代动力学呈剂量比例关系。在第8天达到稳态时，药物蓄积量达到3倍。健康女性和男性、健康老年人和成年受试者之间以及空腹和进食状态下的药物暴露量差异很小。血浆ET-1浓度反映了ETB受体拮抗作用，并在剂量≥25 mg时显著升高。时间匹配的心电图(ECG)参数分析未显示药物引起的ECG效应。暴露-反应分析显示，血浆浓度高达10 µg/mL时未出现QTc间期延长。(Drug Des Devel Ther. 2019; 13: 949–964)
阿普西坦是一种口服活性化合物。作为马西坦的主要代谢产物，它影响着马西坦的药代动力学特征。现有资料中未详细列出阿普西坦的具体药代动力学参数，例如半衰期、生物利用度和清除率，但马西坦的临床文献中有相关数据。

妊娠期和哺乳期影响
◉ 哺乳期用药概述
目前尚无关于阿普拉西坦在哺乳期临床应用的信息。由于阿普拉西坦与血浆蛋白的结合率超过99%，其在母乳中的浓度可能较低。然而，其半衰期为41小时，这可能导致其在婴儿体内蓄积。鉴于目前尚无关于阿普拉西坦在哺乳期应用的信息，建议使用其他药物，特别是对于母乳喂养的新生儿或早产儿。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
截至修订日期，未找到已发表的信息。
◉ 对哺乳和母乳的影响
截至修订日期，未找到已发表的信息。
现有资料中未提供阿普拉西坦的毒性数据详情。作为一种已获批准药物的活性代谢物，它已在马西替坦研发项目中进行了安全性评估。供应商文件中未提供具体的毒理学数据。

[1]. Pharmacology of macitentan, an orally active tissue-targeting dual endothelin receptor antagonist. J Pharmacol Exp Ther. 2008 Dec;327(3):736-45.

[2]. Pharmacokinetic study of ACT-132577 in rat plasma by ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry. Int J Clin Exp Med. 2015 Oct 15;8(10):18420-6.

ACT-132577属于磺酰胺类化合物，其磺酰胺基团中的一个氨基被5-(4-溴苯基)-6-{2-[(5-溴嘧啶-2-基)氧基]乙氧基}嘧啶-4-基取代。它是马西替坦（一种用于治疗肺动脉高压的孤儿药，通过氧化脱丙醇化法制备）的活性代谢物。ACT-132577具有多种功能，包括降压活性、内皮素受体拮抗作用、药物代谢和外源性物质代谢。它是一种芳香醚，属于有机溴化合物，属于嘧啶和磺酰胺类化合物。其结构与乙二醇相关。阿普西坦（Aprocitentan）正在临床试验NCT03541174中进行研究（该研究旨在验证阿普西坦治疗难治性高血压的疗效并进一步了解其安全性）。

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药物适应症
治疗高血压。
马西坦（Macitentan），又名Actelion-1或ACT-064992 [N-[5-(4-溴苯基)-6-(2-(5-溴嘧啶-2-基氧基)乙氧基)嘧啶-4-基]-N'-丙基氨基磺酰胺]，是一种新型的双重ET(A)/ET(B)内皮素(ET)受体拮抗剂，专为组织靶向治疗而设计。选择马西坦是基于其对ET受体的抑制效力以及优化的理化性质，使其对亲脂性环境具有高亲和力。在体内，马西替坦代谢为一种主要的、具有药理活性的代谢物ACT-132577。马西替坦及其代谢物通过特异性结合过表达ET(A)和ET(B)受体的细胞膜，以及减弱多种天然细胞系中ET-1诱导的钙动员，从而拮抗ET-1的作用，其抑制常数在纳摩尔范围内。功能研究表明，马西替坦和ACT-132577抑制了ET-1诱导的离体无内皮素大鼠主动脉（ET(A)受体）收缩和S6c诱导的离体大鼠气管（ET(B)受体）收缩。在肺动脉高压大鼠模型中，马西替坦可预防肺动脉压力升高和右心室肥厚，并显著提高生存率。在糖尿病大鼠模型中，长期服用马西替坦可降低血压和蛋白尿，并预防终末器官损伤（肾血管肥大和结构损伤）。总之，马西替坦凭借其组织靶向特性和对内皮素受体的双重拮抗作用，能够保护糖尿病大鼠免受终末器官损伤，并提高肺动脉高压大鼠的存活率。这些特性使马西替坦成为治疗与组织内皮素系统慢性激活相关的心血管疾病的新型药物。[1] 据报道，马西替坦主要通过细胞色素P450 3A4代谢，其药理活性代谢物ACT-132577阻断内皮素受体的效力比马西替坦低五倍。本研究建立并验证了一种灵敏、选择性高的超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）方法，用于测定大鼠血浆中的ACT-132577。以地西泮为内标，采用乙腈沉淀法制备样品。色谱分离在UPLC BEH C18色谱柱（2.1 mm × 100 mm，1.7 μm）上进行，流动相为0.2%甲酸甲醇溶液，并采用梯度洗脱。电喷雾电离（ESI）正离子模式；定量分析采用多反应监测（MRM）模式，目标碎片离子为m/z 546.9→200.6（ACT-132577）和m/z 285.1→193.1（内标）。在大鼠血浆中，ACT-132577 的校准曲线在 10–4000 ng/mL 范围内呈线性关系。ACT-132577 在大鼠血浆中的平均回收率为 82.6%–90.6%，基质效应范围为 101.4%–115.2%。日内和日间精密度的相对标准偏差 (RSD) 均小于 11%。该方法的准确度为 96.1%–103.5%。该方法已成功应用于口服和静脉注射马西替坦后 ACT-132577 的药代动力学研究。[2]

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阿普拉替坦是内皮素受体 A 和 B 的双重拮抗剂，用于治疗难治性高血压。它是马西替坦的活性代谢物。约10-15%的高血压患者患有难治性高血压，其定义为尽管联合使用肾素-血管紧张素系统阻滞剂、钙通道阻滞剂和利尿剂（均达到最大耐受剂量），血压仍无法控制。难治性高血压患者发生心血管和肾脏事件的风险增加，且传统治疗选择有限。内皮素受体拮抗剂为治疗难治性高血压提供了一种新的途径。2024年3月，FDA批准了阿普西坦用于治疗标准疗法控制不佳的高血压。它是近40年来首个获批的具有全新作用机制的抗高血压药物。阿普西坦是一种内皮素受体拮抗剂，其作用机制是拮抗内皮素受体。阿普拉西坦是一种小分子药物，已完成最多的IV期临床试验（涵盖所有适应症），并于2024年首次获批用于治疗高血压，同时还有三个在研适应症。该药物已被美国食品药品监督管理局（FDA）发出黑框警告。
马西普兰代谢物
药效学
阿普拉西坦通过拮抗ETA和ETB受体发挥药理作用，这些受体在高血压的发病机制中发挥作用。在PRECISION试验中，阿普拉西坦在降低坐位收缩压和舒张压方面均优于安慰剂，坐位谷值血压平均降低幅度比安慰剂高约4 mmHg。阿普拉西坦的大部分降压作用在治疗的前两周内即可观察到。根据其他内皮素受体拮抗剂的动物生殖研究，妊娠期间服用阿普拉西坦可能对胎儿造成损害。开始使用阿普拉西匹坦治疗前，应排除妊娠，并采取有效的避孕措施。患者应每月监测妊娠情况，并在治疗期间及停药后一个月内采取有效的避孕措施。由于阿普拉西匹坦具有显著的胚胎-胎儿毒性风险，因此仅可通过名为Tryvio REMS的限制性项目获得。
作用机制
内皮素-1 (ET-1) 是人类心血管系统中主要的内皮素亚型。内皮素-1 (ET-1) 由血管内皮细胞组成性产生，以维持血管张力，并存在于多种其他细胞中，包括血管平滑肌细胞、心肌细胞、成纤维细胞、巨噬细胞、神经元以及肺和肾脏的上皮细胞。内皮素-1 (ET-1) 作用于位于血管平滑肌细胞和内皮细胞上的两种受体：ETA 和 ETB，它们通过诱导血管收缩或舒张来调节血压。ET-1 是一种强效血管收缩剂，主要通过与 ETA 受体相互作用发挥作用；在病理条件下，ET-1 可通过与 ETB2 相互作用进一步诱导血管收缩。ET-1 及其受体的过度表达已在多种病理条件下得到证实，包括原发性高血压、肺动脉高压、慢性肾脏病和糖尿病。阿普唑仑是一种双重内皮素受体拮抗剂，可抑制 ET-1 与 ETA 和 ETB 受体的结合。这种抑制作用可减轻ET-1过度表达引起的高血压效应，包括内皮功能障碍、血管肥大和重塑、交感神经激活以及醛固酮合成增加。
阿普西坦是马西坦的主要活性代谢产物，马西坦是一种获批用于治疗肺动脉高压的药物。它是一种双重ETA/ETB拮抗剂，目前正在研究其在难治性高血压中的应用。该化合物可从商业供应商处获得，用于研究用途。

C₁₆H₁₀D₄BR₂N₆O₄S

546.194

543.916

C, 35.18; H, 2.58; Br, 29.26; N, 15.39; O, 11.72; S, 5.87

1103522-45-7

Aprocitentan-d4

25099191

White to off-white solid powder

4.385

150.59

2

10

8

29

597

0

C1=CC(=CC=C1C2=C(N=CN=C2OCCOC3=NC=C(C=N3)Br)NS(=O)(=O)N)Br

DKULOVKANLVDEA-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C16H14Br2N6O4S/c17-11-3-1-10(2-4-11)13-14(24-29(19,25)26)22-9-23-15(13)27-5-6-28-16-20-7-12(18)8-21-16/h1-4,7-9H,5-6H2,(H2,19,25,26)(H,22,23,24)

N-[5-(4-bromophenyl)-6-{2-[(5-bromopyrimidin-2-yl)oxy]ethoxy}pyrimidin-4-yl]sulfuric diamide

ACT 132577; ACT-132577; Aprocitentan; ACT132577; N-Despropyl-macitentan; Tryvio; Aprocitentan [USAN]; Macitentan metabolite m6; MZI81HV01P; Despropyl Macitentan.

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~25 mg/mL (~45.77 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.58 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.58 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。