Aprocitentan (ACT-132577)   中文名称: 阿普昔腾坦

ETA (IC50 = 3.4 nM); ETA (pA2 = 6.7); ETB (IC50 = 987 nM); ETB (pA2 = 5.5)

当应用于非重组细胞（主要人肺平滑肌细胞、大鼠主动脉平滑肌细胞系 A10 和小鼠成纤维细胞系 3T3）时，aproticentan (ACT-132577) 完全抑制 ET-1 引起的细胞内钙升高[1]。

在大鼠中，aprobicitentan (ACT-132577) 比其母体化学物质具有更长的半衰期，并且分布体积大于血浆体积[1]。 Aprocitentan (ACT-132577) 在大鼠血浆中的平均回收率范围为 82.6% 至 90.6%，而 Aprocitentan (ACT-132577) 在大鼠血浆中的基质效应范围为 101.4% 至 115.2%[2]。

Macitentan，也被称为Actelion-1或ACT-064992 [N-[5-(4-溴苯基)-6-(2-(5-溴嘧啶-2-氧基)乙氧基)-嘧啶-4-基]-N'-丙基氨基磺酰胺]，是一种新型的ET(a)/ET(B)内皮素(ET)受体双拮抗剂，用于组织靶向。马西坦的选择是基于对ET受体的抑制效力和优化物理化学性质，以达到对亲脂环境的高亲和力。在体内，马西坦被代谢成一种主要的、具有药理活性的代谢物ACT-132577。马西坦及其代谢物可拮抗ET-1在过表达ET(A)和ET(B)受体的细胞膜上的特异性结合，并在多种天然细胞系中减弱ET-1诱导的钙动员，抑制常数在纳摩尔范围内。在功能试验中，马西坦和ACT-132577抑制ET-1诱导的离体内皮剥离大鼠主动脉(ET(A)受体)收缩和萨拉福毒素s6c诱导的离体大鼠气管(ET(B)受体)收缩。在肺动脉高压大鼠中，马西坦既能抑制肺动脉压升高，又能抑制右心室肥厚，显著提高生存率。在糖尿病大鼠中，长期给药马西坦可以降低血压和蛋白尿，防止终末器官损伤(肾血管肥大和结构损伤)。综上所述，马西坦通过其组织靶向特性和对ET受体的双重拮抗作用，保护糖尿病终末器官损伤，提高肺动脉高压大鼠的生存率。这一特点使得马西坦成为治疗慢性组织ET系统激活相关心血管疾病的新药物。[1]

校准标准和质量控制样品[2]
以甲醇-水(50:50,v/v)配制ACT-132577 (1.0 mg/mL)和地西泮(IS)(100µg/mL)原液。用甲醇稀释IS原液，制得0.25µg/mL IS工作标准液;用同样的方法从原液中制备用于校准和控制的工作溶液。所有的溶液在4°C下保存，使用前带到室温。

在空白大鼠血浆中加入适量的工作溶液制备ACT-132577校准标准品。校正图偏移到大鼠血浆中ACT-132577(10、20、50、100、200、500、1000、2000和4000 ng/mL)的10-4000 ng/mL范围内。按照与校准标准品相同的方法制备三种不同血浆浓度(20、1800和3600 ng/mL)的质量控制(QC)样品。分析标准品和QC样品保存在-20℃

通过分析空白大鼠血浆、空白血浆加标ACT-132577和IS以及大鼠血浆样品来评价该方法的选择性。

通过分析三天的加标样品，构建了校准曲线。act -132577- is的峰面积比随分析物浓度绘制。在10-4000 ng/mL浓度范围内，以浓度倒数(1/x)为权重因子，得到的标准曲线与方程拟合良好。定量下限(LLOQ)定义为校准曲线上的最低浓度。

通过分析不同条件下浓度分别为20和3600 ng/mL的血浆样品，评价ACT-132577在大鼠血浆中的稳定性。这些结果与新鲜制备的血浆样品进行了比较。将加标样品在室温下暴露2小时后测定短期稳定性，将待注射样品(蛋白质沉淀后)在HPLC自进样器中于室温下放置24小时。在连续3天的完整冻融循环(-20至25°C)后评估冻融稳定性。标准加标血浆样品在-20°C下保存20天后，评估其长期稳定性。对IS (50 ng/mL)的稳定性进行了类似的评价。

药代动力学研究[2]
本研究使用了12只雄性Sprague-Dawley大鼠（200-220 g）。实验动物的伦理编号为wydw2013-0071。所有实验程序和方案均经温州医科大学动物伦理委员会审查批准。实验前12小时禁食，但可自由饮水。分别于口服（15 mg/kg，n=6）和静脉注射（5 mg/kg，n=6）马西替坦后0.0333、0.15、0.5、1、1.5、2、4、6、8、12和24小时，从尾静脉采集血样（0.2 mL），置于肝素化1.5 mL锥形塑料离心管中。用75%酒精清洁大鼠尾静脉后，用剪刀剪断尾静脉末端。用1.5 mL锥形塑料离心管轻轻挤压并按摩尾静脉末端，收集滴落的血液。立即将样品以3000 × g离心10分钟。取50 µL血浆，置于-20°C保存，直至进行UPLC-MS/MS分析。使用DAS（药物与统计）软件分析每只大鼠血浆中ACT-132577浓度随时间变化的数据。

吸收
阿普西坦的绝对口服生物利用度尚不清楚。单次口服25mg后，平均Cmax和AUC0-tau分别约为1.3 mcg/mL和23 mcg·h/mL，Tmax在4-5小时之间。
消除途径
单次服用放射性标记的阿普西坦后，约52%的剂量经尿液排出（0.2%为原形），25%经粪便排出（6.8%为原形）。
分布容积
阿普西坦的表观分布容积约为20 L。
清除率
阿普西坦的表观清除率约为0.3 L/h。
蛋白结合
阿普西坦在血浆中与蛋白质高度结合（>99%），主要与白蛋白结合。
代谢/代谢物
阿普西坦主要通过UGT1A1和UGT2B7介导的N-糖苷化和非酶水解代谢。
生物半衰期
阿普西坦的有效半衰期约为41小时。
所有剂量下阿普西坦的耐受性良好。未发生严重不良事件（AE）。最常见的不良事件是头痛。每日一次服用100 mg的受试者体重略有增加。单次和多次给药后，阿普西坦的血浆浓度-时间曲线相似，基于44小时的半衰期，支持每日一次的给药方案。多次给药后，药代动力学与剂量成正比。在第8天达到稳态时，药物蓄积量为3倍。仅观察到健康女性和男性、健康老年人和成年受试者以及空腹和进食状态下暴露量的微小差异。血浆ET-1浓度反映了ETB受体拮抗作用，在剂量≥25 mg时显著升高。时间匹配的心电图(ECG)参数分析未提示药物引起的ECG效应。暴露-反应分析表明，血浆浓度高达10 µg/mL时未观察到QTc间期延长。Drug Des Devel Ther. 2019; 13: 949–964.

妊娠期和哺乳期影响
◉ 哺乳期用药概述
目前尚无关于阿普西坦在哺乳期临床应用的信息。由于阿普西坦与血浆蛋白的结合率超过99%，因此其在乳汁中的含量可能很低。然而，其半衰期为41小时，可能会在婴儿体内蓄积。由于目前尚无关于阿普西坦在哺乳期应用的信息，因此建议选择其他药物，尤其是在哺乳新生儿或早产儿时。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。
◉ 对泌乳和母乳的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。

[1]. Pharmacology of macitentan, an orally active tissue-targeting dual endothelin receptor antagonist. J Pharmacol Exp Ther. 2008 Dec;327(3):736-45.

[2]. Pharmacokinetic study of ACT-132577 in rat plasma by ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry. Int J Clin Exp Med. 2015 Oct 15;8(10):18420-6.

ACT-132577 属于磺酰胺类化合物，其磺酰胺基团的一个氨基被 5-(4-溴苯基)-6-{2-[(5-溴嘧啶-2-基)氧基]乙氧基}嘧啶-4-基取代。它是马西替坦（一种用于治疗肺动脉高压的孤儿药，经氧化脱丙醇化制得）的活性代谢物。ACT-132577 具有抗高血压、内皮素受体拮抗、药物代谢和外源性物质代谢等多种功能。它是一种芳香醚、有机溴化合物，属于嘧啶类和磺酰胺类化合物。它在功能上与乙二醇相关。
Aprocitentan 正在临床试验 NCT03541174 中进行研究（一项研究旨在显示 Aprocitentan 在治疗难治性（顽固性）高血压（高血压）中的疗效并进一步了解其安全性）。

---

药物适应症
治疗高血压。

---

Macitentan，也称为 Actelion-1 或 ACT-064992 [N-[5-(4-溴苯基)-6-(2-(5-溴嘧啶-2-基氧基)乙氧基)-嘧啶-4-基]-N'-丙基氨基磺酰胺]，是一种新型的双重 ET(A)/ET(B) 内皮素 (ET) 受体拮抗剂，设计用于组织靶向治疗。选择马西替坦是基于其对ET受体的抑制效力以及优化理化性质以实现对亲脂性环境的高亲和力。在体内，马西替坦代谢为一种主要的、具有药理活性的代谢物ACT-132577。马西替坦及其代谢物拮抗ET-1与过表达ET(A)和ET(B)受体的细胞膜的特异性结合，并减弱ET-1诱导的多种天然细胞系中的钙动员，其抑制常数在纳摩尔范围内。在功能性实验中，马西替坦和ACT-132577抑制了ET-1诱导的离体去内皮大鼠主动脉（ET(A)受体）收缩以及沙拉毒素S6c诱导的离体大鼠气管（ET(B)受体）收缩。在肺动脉高压大鼠模型中，马西替坦可预防肺动脉压升高和右心室肥大，并显著提高生存率。在糖尿病大鼠模型中，长期服用马西替坦可降低血压和蛋白尿，并预防终末器官损伤（肾血管肥大和结构损伤）。总之，马西替坦凭借其组织靶向特性和对内皮素受体的双重拮抗作用，可保护糖尿病大鼠免受终末器官损伤，并提高肺动脉高压大鼠的生存率。这些特性使马西替坦成为治疗与慢性组织内皮素系统激活相关的心血管疾病的新型药物。[1]

---

据报道，马西替坦主要通过细胞色素P450 3A4代谢，其药理活性代谢物ACT-132577阻断内皮素受体的效力比马西替坦低五倍。本研究建立并验证了一种灵敏、选择性高的超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）方法，用于测定大鼠血浆中的ACT-132577。以地西泮为内标（IS），采用乙腈沉淀法制备样品。色谱分离在UPLC BEH C18色谱柱（2.1 mm × 100 mm，1.7 μm）上进行，流动相为0.2%甲酸和甲醇，采用梯度洗脱。使用电喷雾电离源，正离子模式；采用多反应监测（MRM）模式进行定量，目标碎片离子分别为m/z 546.9→200.6（ACT-132577）和m/z 285.1→193.1（内标）。在大鼠血浆中，ACT-132577 的校准曲线在 10-4000 ng/mL 范围内呈线性关系。ACT-132577 在大鼠血浆中的平均回收率为 82.6% 至 90.6%，基质效应为 101.4% 至 115.2%。日内和日间精密度的相对标准偏差 (RSD) 均小于 11%。该方法的准确度为 96.1% 至 103.5%。该方法已成功应用于口服和静脉注射马西替坦后 ACT-132577 的药代动力学研究。[2]

---

阿普西替坦是一种内皮素受体 A 和 B 的双重拮抗剂，用于治疗难治性高血压。它是马西替坦的活性代谢物。约10-15%的高血压患者患有难治性高血压，其定义为尽管联合使用肾素-血管紧张素系统阻滞剂、钙通道阻滞剂和利尿剂（均已达到最大耐受剂量），血压仍无法控制。难治性高血压患者发生心血管和肾脏事件的风险增加，且传统上可选择的治疗方案有限。内皮素受体拮抗剂为难治性高血压患者的治疗提供了一种新的途径。2024年3月，FDA批准了阿普西坦（Aprocitentan）用于治疗标准疗法控制不佳的高血压患者。它是近40年来首个获批的采用全新作用机制的降压药。
阿普西坦是一种内皮素受体拮抗剂。阿普西坦的作用机制是内皮素受体拮抗剂。
阿普西坦是一种小分子药物，目前已完成最多IV期临床试验（涵盖所有适应症），于2024年首次获批，用于治疗高血压，并有3个在研适应症。该药物已获得美国食品药品监督管理局（FDA）的黑框警告。
马西坦代谢物
药效学
阿普西坦通过拮抗ETA和ETB受体发挥药理作用，这些受体在高血压的发病机制中发挥作用。在PRECISION试验中，阿普西坦在降低坐位收缩压和舒张压方面均优于安慰剂，坐位谷值血压平均降低幅度比安慰剂高约4 mmHg。阿普西坦的大部分降压作用在治疗的前两周内即可显现。根据其他内皮素受体拮抗剂的动物生殖研究数据，妊娠期间服用阿普西坦可能对胎儿造成损害。开始使用阿普西坦治疗前，应排除妊娠，并采取有效的避孕措施。患者应每月监测妊娠情况，并在治疗期间及停药后一个月内采取有效的避孕措施。由于存在显著的胚胎-胎儿毒性风险，阿普西坦仅可通过名为Tryvio REMS的限制性项目获得。
作用机制
内皮素-1 (ET-1) 是人类心血管系统中主要的内皮素亚型。它由血管内皮细胞组成性产生，以维持血管张力，并存在于多种其他细胞中，包括血管平滑肌细胞、心肌细胞、成纤维细胞、巨噬细胞、神经元以及肺和肾脏的上皮细胞。内皮素-1 (ET-1) 作用于位于血管平滑肌细胞和内皮细胞上的两种受体：ETA 和 ETB，它们通过诱导血管收缩或舒张来调节血压。ET-1 是一种强效的血管收缩剂，主要通过与 ETA 受体相互作用发挥作用；在病理条件下，ET-1 还可通过与 ETB2 相互作用进一步诱导血管收缩。ET-1 和 ET 受体的过度表达已在多种病理状态下得到证实，包括原发性高血压、肺动脉高压、慢性肾脏病和糖尿病。阿普西坦是一种双重内皮素受体拮抗剂，可抑制 ET-1 与 ETA 和 ETB 受体的结合。这种抑制作用可减轻 ET-1 过度表达引起的高血压效应，包括内皮功能障碍、血管肥大和重塑、交感神经激活以及醛固酮合成增加。

C₁₆H₁₀D₄BR₂N₆O₄S

546.194

543.916

C, 35.18; H, 2.58; Br, 29.26; N, 15.39; O, 11.72; S, 5.87

1103522-45-7

Aprocitentan-d4

25099191

White to off-white solid powder

4.385

150.59

2

10

8

29

597

0

C1=CC(=CC=C1C2=C(N=CN=C2OCCOC3=NC=C(C=N3)Br)NS(=O)(=O)N)Br

DKULOVKANLVDEA-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C16H14Br2N6O4S/c17-11-3-1-10(2-4-11)13-14(24-29(19,25)26)22-9-23-15(13)27-5-6-28-16-20-7-12(18)8-21-16/h1-4,7-9H,5-6H2,(H2,19,25,26)(H,22,23,24)

N-[5-(4-bromophenyl)-6-{2-[(5-bromopyrimidin-2-yl)oxy]ethoxy}pyrimidin-4-yl]sulfuric diamide

ACT 132577; ACT-132577; Aprocitentan; ACT132577; N-Despropyl-macitentan; Tryvio; Aprocitentan [USAN]; Macitentan metabolite m6; MZI81HV01P; Despropyl Macitentan.

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~25 mg/mL (~45.77 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.58 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

---

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.58 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。