| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Aurora A (approx 3 nM, based on 52% inhibition at 3.0 nM) [1]
Aurora B (approx 3 nM, based on 58% inhibition at 3.0 nM) [1] JAK2 (IC50 = 1.2 nM) [1] JAK3 (IC50 = 1.1 nM) [1] Abl (T315I) (IC50 = 4 nM) [1] Other kinases with IC50 values: GSK3-β, FGFR2, VEGFR3 (Flt4), Mer, Ret, Rsk2, Rsk3, Tyk2, Yes (1-10 nM); Abl(Q252H), DRAK1, FGFR1, FGFR1(V561M), FGFR2(N549H), FGFR3, VEGFR1(Flt1), Flt-3, PDGFR-α(D842V), PDK1, PKCμ, Rsk4, SRC(T341M), VEGFR2 (10-30 nM); 21 kinases (30-100 nM); 37 kinases (100-300 nM); 14 kinases (>300 nM). [1] AT-9283 HCl targets multiple kinases, including Aurora A, Aurora B, JAK2, JAK3, and Abl (T315I). Aurora kinases are essential for mitotic progression, and their inhibition leads to cell cycle arrest and apoptosis. JAK2 and JAK3 are involved in cytokine signaling and hematopoiesis. By inhibiting these kinases, AT-9283 disrupts cell proliferation and survival pathways. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
AT9283 通过抑制 HCT116 细胞中 Aurora B 激酶的活性（IC50 为 30 nM）导致明显的多倍体表型。此外，AT9283 还对 HCT116 细胞的克隆形成具有显著的抑制作用。
激酶活性测定：Aurora A 和 B 的活性测定采用 DELFIA 法进行。将 Aurora A 酶与 AT9283 和 3 μM 交叉底物（生物素-CGPKGPGRRGRRRTSSFAEG）在以下缓冲液中孵育：10 mM MOPS（pH 7）、0.1 mg/mL BSA、0.001% Brij-35、0.5% 甘油、0.2 mM EDTA、10 mM MgCl2、0.01% β-巯基乙醇、15 μM ATP 和 2.5% DMSO。将 Aurora B 酶与 AT9283、3 μM 上述底物在 25 mM Tris（pH 8.5）、5 mM MgCl₂、0.1 mg/mL BSA、0.025% Tween-20、1 mM DTT、15 μM ATP 和 2.5% DMSO 中孵育。Aurora A 和 Aurora B 的反应分别进行 60 分钟和 45-90 分钟，然后用 EDTA 终止反应。将反应混合物转移至中性链霉亲和素包被的微孔板中，并使用磷酸化特异性抗体和铕标记的二抗，通过时间分辨荧光法（激发波长 337 nm；发射波长 620 nm）定量磷酸化肽。对照化合物的IC50值分别为92 nM（Aurora A法）和17 nM（Aurora B法）。 细胞实验：HCT 116细胞培养于DMEM + 10% FBS + GLUTAMAX I培养基中。将细胞接种于黑色96孔平底（透明）组织培养板中，每孔加入200 μL培养基，并在37°C、5% CO2的湿润空气中培养约16小时。用九种不同浓度的测试化合物（浓度范围为1 nM至10 μM，另加DMSO溶剂对照）处理细胞，然后继续培养72小时。记录细胞的多倍体形态学特征。报告产生明显多倍体表型所需的AT9283浓度。将细胞以 75-100 个细胞/mL 的浓度接种于 6 孔或 24 孔组织培养板中，并在相应的培养基中培养 16 小时使其恢复。向每个处理组的两个孔中加入测试化合物（11 个浓度，范围从 0.1 nM 到 10 μM）或溶剂对照（DMSO），使最终 DMSO 浓度为 0.1%。加入化合物后，培养 10 至 14 天，以便进行最佳的菌落计数。用 2 mL Carnoy 固定液（25% 乙酸，75% 甲醇）固定菌落，并用 2 mL 0.4% (w/v) 结晶紫染色。计数每个孔中的菌落数。 IC50 值采用 Prism Graphpad 软件，通过 S 型剂量反应（可变斜率）IC50 曲线计算得出。 AT-9283 HCl 抑制 HCT116 细胞的生长和存活，产生通常与 Aurora B 激酶抑制相关的多倍体细胞表型。[1] 在 HCT116 细胞中，0.03 μM 的 AT-9283 HCl 可产生明显的多倍体表型。[1] 在二级细胞实验中，AT-9283 HCl 能有效抑制 HCT116 细胞的集落形成，IC50 值为 12 nM。[1] 体外实验表明，AT-9283 HCl 是 Aurora A、Aurora B、JAK2 和 JAK3 的强效抑制剂。在无细胞实验中，该化合物对JAK2和JAK3的抑制IC₅₀值分别为1.2 nM和1.1 nM。它能有效抑制Aurora A和Aurora B激酶，从而影响细胞增殖和存活。研究发现，该化合物能有效抑制Aurora A和Aurora B激酶，进而影响细胞增殖和存活。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在携带 HCT116 人类结肠癌异种移植瘤的小鼠中，AT9283 治疗（15 mg/kg 和 20 mg/kg）16 天可分别显著抑制肿瘤生长 67% 和 76%。此外，与血浆（0.5 小时）相比，AT9283 在肿瘤中的半衰期显著延长（2.5 小时），且在小鼠体内具有中等的口服生物利用度（Fp.o. = 24%）。
在携带早期 HCT116 人结肠癌异种移植瘤的免疫缺陷 BALB/c 裸鼠中，腹腔注射 15 mg/kg 和 20 mg/kg 的 AT-9283 HCl（每日两次，每 4 天一次，共 5 个疗程）在治疗第 16 天分别产生了 67%（%T/C = 33%）和 76%（%T/C = 24%）的显著肿瘤生长抑制率。两种剂量均耐受良好，平均体重维持在初始体重的 90% 以上。[1] 在体内，AT-9283 HCl 具有治疗多发性骨髓瘤和其他癌症的潜力。作为一种多靶点激酶抑制剂，它可以干扰参与肿瘤生长和存活的多个信号通路。然而，现有文献中关于其在动物模型中的具体体内疗效数据并不详尽。该化合物目前仍处于研究阶段，尚未获准用于临床。 |
| 酶活实验 |
Aurora A 和 Aurora B 激酶活性测定采用 DELFIA 法进行。对于 Aurora A：将酶与测试化合物和 3 μM 生物素标记的交叉底物（生物素-CGPKGPGRRGRRRTSSFAEG）在 10 mM MOPS pH 7、0.1 mg/mL BSA、0.001% Brij-35、0.5% 甘油、0.2 mM EDTA、10 mM MgCl2、0.01% β-巯基乙醇、15 μM ATP 和 2.5% DMSO 中孵育。对于 Aurora B：将酶与测试化合物和 3 μM 底物在 25 mM Tris pH 8.5、5 mM MgCl2、0.1 mg/mL BSA、0.025% Tween-20、1 mM DTT、15 μM ATP 和 2.5% DMSO 中孵育。反应进行 60 分钟（Aurora A）或 45-90 分钟（Aurora B）后，用 EDTA 终止反应。将反应混合物转移至中性链霉亲和素包被的微孔板中，并使用磷酸化特异性抗体和铕标记的二抗，通过时间分辨荧光法（激发波长 337 nm，发射波长 620 nm）定量磷酸化肽。[1]
AT-9283 HCl 的体外激酶活性测定使用纯化的重组激酶进行。将激酶与肽底物和ATP在不同浓度的AT-9283存在下孵育。采用基于发光或荧光的检测方法检测磷酸化。根据剂量反应曲线计算IC₅₀值。通过筛选一系列激酶来验证其选择性。 |
| 细胞实验 |
原代HCT116细胞实验：将HCT116细胞培养于DMEM + 10% FBS + GLUTAMAX I培养基中。将5×10^3个细胞/孔接种于黑色96孔平底组织培养板中，每孔加入200 μL培养基，并在37℃、5% CO2条件下培养约16小时。用九种不同浓度的测试化合物（浓度范围为1 nM至10 μM，另设DMSO溶剂对照）处理细胞，并继续培养72小时。观察多倍体形态，并记录产生明显多倍体表型所需的最低浓度。[1]
HCT116集落形成实验（二级实验）：将细胞以75-100个细胞/mL的密度接种于6孔或24孔板中，并使其恢复16小时。将测试化合物（11 个浓度，范围从 0.1 nM 到 10 μM）或溶剂对照（DMSO）加入到重复孔中（最终 DMSO 浓度为 0.1%）。培养 10-14 天后，用 Carnoy 固定液（25% 乙酸，75% 甲醇）固定，并用 0.4% 结晶紫染色。计数菌落，并使用 Prism Graphpad 软件通过 S 形剂量反应（可变斜率）曲线计算 IC50 值。[1] AT-9283 HCl 的体外细胞实验采用癌细胞系进行，例如多发性骨髓瘤细胞。将细胞培养在合适的培养基中，并用不同浓度的 AT-9283 处理 48-72 小时。使用 MTT 或 CellTiter-Glo 法检测细胞活力。使用流式细胞术进行细胞周期分析。细胞凋亡通过 caspase-3/7 激活和 Annexin V/PI 染色进行评估。 |
| 动物实验 |
将AT-9283 HCl配制成盐酸盐，溶于10% DMSO、20%水和70%羟丙基-β-环糊精（25% w/v 水溶液）中；剂量为15和20 mg/kg；腹腔注射给药。将HCT116细胞皮下注射到雄性BALB/c小鼠的后侧腹部。
体内疗效研究：将HCT116细胞悬液皮下接种到雄性BALB/c无胸腺裸鼠（Hsd：无胸腺裸鼠-Foxn1nu）的后侧腹部，使其生长至约100 mm^3。AT-9283 HCl配制成盐酸盐，溶于10% DMSO、20%水和70%羟丙基-β-环糊精（25% w/v 水溶液）中。小鼠腹腔注射给药，每日两次，连续给药2天，停药2天（bid × 2 q4d），此循环重复5次。剂量为15和20 mg/kg。每隔2或3天使用外部测量方法记录肿瘤大小，并使用椭球体公式（长×宽²/2）计算肿瘤体积。对照组仅按相同方案注射赋形剂。[1] 药代动力学和肿瘤分布研究：AT-9283 HCl单次给药于BALB/c小鼠。静脉注射剂量为 5 或 10 mg/kg（100% 生理盐水），腹腔注射剂量为 20 mg/kg（10% DMSO、20% 水、70% 羟丙基-β-环糊精，25% w/v 水溶液），口服剂量为 10 mg/kg（10% 生理盐水、90% 水）。在设定的时间间隔采集肿瘤和/或血浆样本。将肿瘤样本在 5 倍体积（w/v）的乙腈/水（50/50）混合液中匀浆。采用液相色谱-串联质谱法（LC/MS/MS）进行定量分析。[1] AT-9283 HCl 的体内动物研究通常采用多发性骨髓瘤或其他癌症的小鼠异种移植模型。将癌细胞注射到免疫缺陷小鼠体内以建立肿瘤。当肿瘤达到一定大小时，通过腹腔注射或口服途径给予 AT-9283。肿瘤生长情况需随时间推移进行测量。药效学研究则评估肿瘤组织中的靶点抑制情况。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在小鼠中：血浆蛋白结合率为 81.5%（平衡透析）。静脉注射 5 mg/kg 后：清除率为 114 mL/min/kg，稳态分布容积 (Vss) 为 3.9 L/kg，血浆半衰期 (t1/2) 为 0.5 h，血药峰浓度 (Cmax) 为 4.9 μM，AUC0-t 为 1.9 μM·h。口服 10 mg/kg 后：血药峰浓度 (Cmax) 为 0.45 μM，AUC0-t 为 0.91 μM·h，口服生物利用度为 24%。腹腔注射 20 mg/kg 后：血药峰浓度 (Cmax) 为 8.4 μM，AUC0-t 为 7.7 μM·h，腹腔生物利用度为 100%（吸收基本完全）。肿瘤半衰期 (t1/2) 为 2.5 h（静脉注射 10 mg/kg 后）。 [1]
在体外小鼠肝细胞中，清除率为 8.8 (μM/min)/百万细胞。[1] 现有文献中对 AT-9283 HCl 的具体药代动力学特性，例如半衰期和口服生物利用度，描述并不详尽。作为一种分子量为 417.89 g/mol 的小分子，预计其口服生物利用度中等。它可溶于 DMSO，通常配制成用于体内给药的制剂。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在疗效研究中，15 和 20 mg/kg 的剂量（腹腔注射，每日两次，每 4 天一次，共两次）耐受性良好，平均体重维持在初始体重的 90% 以上。[1]
AT-9283 HCl 显示出良好的 CYP450 酶活性谱，对 CYP3A4、CYP2D6、CYP1A2、CYP2C9 和 CYP2C19 的 IC50 值均 >10 μM。[1] AT-9283 HCl 的全面毒理学数据在公开文献中并不常见。作为一种研究化合物，它仅供实验室使用，不得用于人体治疗。处理该化合物时应遵循标准安全预防措施。该化合物的纯度≥98%。 |
| 参考文献 |
J Med Chem.2009 Jan 22;52(2):379-88.
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| 其他信息 |
AT-9283 HCl是通过基于片段的药物发现方法，从吡唑-苯并咪唑片段5（Aurora A IC50 = 0.91 μM，配体效率 = 0.59）出发筛选得到的。在整个优化过程中，该片段与Aurora A之间的关键氢键相互作用得以保留。X射线晶体衍射和核磁共振证实，该化合物具有折叠构象，其稳定性由环丙基环与苯并咪唑之间的疏水相互作用所维持。[1]
除了Aurora激酶外，AT-9283 HCl还能抑制JAK2、JAK3和Abl (T315I)，这归因于这些激酶铰链区存在额外的甘氨酸残基（Aurora A中的Gly216，JAK2中的Gly935）。该化合物的结合对门控残基的性质相对不敏感，因此对Abl的T315I突变体也具有活性。[1] AT-9283 HCl已进入治疗癌症（难治性血液系统恶性肿瘤）的I期临床试验。[1] AT-9283 HCl是一种多靶点激酶抑制剂，具有潜在的抗肿瘤活性。它能抑制Aurora A、Aurora B、JAK2、JAK3和Abl（T315I）。它也被称为AT9283盐酸盐。该化合物曾被用于治疗多发性骨髓瘤的研究。本产品仅供研究使用。 |
| 分子式 |
C19H24CLN7O2
|
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|---|---|---|
| 分子量 |
417.89
|
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| 精确质量 |
417.167
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| CAS号 |
896466-61-8
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| 相关CAS号 |
896466-61-8 (HCl);896466-04-9;896466-76-5 (lactate);
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| PubChem CID |
135461257
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| tPSA |
111
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|
| 氢键供体(HBD)数目 |
5
|
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
29
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| 分子复杂度/Complexity |
554
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|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
|
| SMILES |
O=C(NC1CC1)NC2=CNN=C2C=3NC4=C(N3)C=C(C=C4)CN5CCOCC5.Cl
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| InChi Key |
NHFNYIVVGIXBPD-UHFFFAOYSA-N
|
|
| InChi Code |
InChI=1S/C19H23N7O2.ClH/c27-19(21-13-2-3-13)24-16-10-20-25-17(16)18-22-14-4-1-12(9-15(14)23-18)11-26-5-7-28-8-6-26;/h1,4,9-10,13H,2-3,5-8,11H2,(H,20,25)(H,22,23)(H2,21,24,27);1H
|
|
| 化学名 |
1-cyclopropyl-3-[5-[6-(morpholin-4-ylmethyl)-1H-benzimidazol-2-yl]-1H-pyrazol-4-yl]urea;hydrochloride
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3930 mL | 11.9649 mL | 23.9297 mL | |
| 5 mM | 0.4786 mL | 2.3930 mL | 4.7859 mL | |
| 10 mM | 0.2393 mL | 1.1965 mL | 2.3930 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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AT9283 potently inhibits Aurora B activity in B-NHL cell lines.Int J Cancer.2012 Jun 15;130(12):2997-3005. |
AT9283 plus docetaxel suppresses tumor growth and prolong survival of Granta-519-SCID xenografted mice.Int J Cancer.2012 Jun 15;130(12):2997-3005. |
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COA
Figure 5
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463611831
