ATP-Red 1

别名: ATP-Red 1; 1847485-97-5; [2-[3',6'-bis(diethylamino)-3-oxospiro[isoindole-1,9'-xanthene]-2-yl]phenyl]boronic acid; (2-(3',6'-Bis(diethylamino)-3-oxospiro[isoindoline-1,9'-xanthen]-2-yl)phenyl)boronic acid;
目录号: V32137 纯度: ≥98%
ATP-Red 1是一种多位点结合可切换荧光探针,可以选择性、快速检测活细胞中的ATP含量。
ATP-Red 1 CAS号: 1847485-97-5
产品类别: New2
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规格 价格 库存 数量
1mg
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纯度/质量控制文件

纯度: ≥98%

产品描述
ATP-Red 1是一种多位点结合可切换荧光探针,可以选择性、快速检测活细胞中的ATP含量。
生物活性&实验参考方法
靶点
Fluorescent probe/dye
体外研究 (In Vitro)
ATP-Red 1 是一种可切换荧光探针,具有多个结合位点,可以选择性地快速响应活细胞中的 ATP 水平。最高吸收和发射波长分别为 570/566 和 590/585 nm。 ATP-Red 1具有很强的膜渗透性,在5 mM ATP存在下,其荧光强度增加5.6倍。 KCN 抑制 OXPHOS 后,ATP-Red 1(2.5 μM,20 分钟)显示出较低的荧光,导致 OSCC 细胞中线粒体 ATP 水平降低 [1]。
细胞实验
1. 溶液配制
1.1 原液配制
• 溶剂:DMSO
• 浓度:推荐10 mM
• 储存:分装后于-20°C或-80°C避光保存。避免反复冻融。
1.2 工作液配制
• 用PBS或无血清细胞培养基将原液稀释至1-10 µM终浓度(根据实验条件优化)。
• 注意:工作液需现配现用,并避光保存。
________________________________________
2. 细胞染色流程
2.1 细胞准备
• 将细胞悬浮于96孔板的100 µL PBS中,密度为2×10⁵个细胞/孔。
2.2 ATP-Red 1染色
• 加入ATP-Red 1至终浓度5-10 µM。
2.3 孵育
• 室温或37°C孵育15分钟(活细胞成像可延长至30分钟)。
2.4 溶液移除
• 孵育后移除ATP-Red 1工作液。
2.5 荧光检测
• 使用荧光显微镜检测(激发/发射波长=510/590 nm)。
参考文献

[1]. A Multisite-Binding Switchable Fluorescent Probe for Monitoring Mitochondrial ATP Level Fluctuation in Live Cells. Angew Chem Int Ed Engl. 2016 Jan 26;55(5):1773-6.

其他信息
Adenosine triphosphate (ATP) is mainly produced by mitochondria and is required by almost all organisms; therefore, fluorescent probes for monitoring fluctuations in mitochondrial ATP levels are crucial and urgently needed. This paper reports a multi-site binding switchable fluorescent probe, ATP-Red 1, which can selectively and rapidly respond to changes in intracellular ATP concentration. Live-cell imaging results show that ATP-Red 1 is mainly located in mitochondria and has good biocompatibility and membrane permeability. In particular, with the help of ATP-Red 1, we not only successfully observed a decrease in mitochondrial ATP levels under potassium cyanide (KCN) and starvation conditions, but also an increase in mitochondrial ATP levels in the early stage of apoptosis. These results indicate that ATP-Red 1 is an effective tool for studying ATP-related biological processes. [1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C34H36BN3O4
分子量
561.478348731995
精确质量
561.279
CAS号
1847485-97-5
PubChem CID
132274056
外观&性状
Pale purple to purple solid powder
tPSA
76.5
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
6
可旋转键数目(RBC)
8
重原子数目
42
分子复杂度/Complexity
893
定义原子立体中心数目
0
SMILES
O1C2C=C(C=CC=2C2(C3C=CC(=CC1=3)N(CC)CC)C1C=CC=CC=1C(N2C1C=CC=CC=1B(O)O)=O)N(CC)CC
InChi Key
SSNKNUIFMZUJTL-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C34H36BN3O4/c1-5-36(6-2)23-17-19-27-31(21-23)42-32-22-24(37(7-3)8-4)18-20-28(32)34(27)26-14-10-9-13-25(26)33(39)38(34)30-16-12-11-15-29(30)35(40)41/h9-22,40-41H,5-8H2,1-4H3
化学名
[2-[3',6'-bis(diethylamino)-3-oxospiro[isoindole-1,9'-xanthene]-2-yl]phenyl]boronic acid
别名
ATP-Red 1; 1847485-97-5; [2-[3',6'-bis(diethylamino)-3-oxospiro[isoindole-1,9'-xanthene]-2-yl]phenyl]boronic acid; (2-(3',6'-Bis(diethylamino)-3-oxospiro[isoindoline-1,9'-xanthen]-2-yl)phenyl)boronic acid;
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~50 mg/mL (~89.05 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.45 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.45 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.7810 mL 8.9050 mL 17.8101 mL
5 mM 0.3562 mL 1.7810 mL 3.5620 mL
10 mM 0.1781 mL 0.8905 mL 1.7810 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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