| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
EGFR L858R/T790M (IC50 = 1 nM); EGFR L858R (IC50 = 1 nM); EGFR L861Q (IC50 = 6 nM); EGFR (IC50 = 25 nM); ErbB4 (IC50 = 7 nM); EGFR Exon 19 deletion/T790M
The targets of AZ5104 (active metabolite of motesanib/AMG 706) are vascular endothelial growth factor receptors (VEGFR1, VEGFR2, VEGFR3), platelet-derived growth factor receptors (PDGFRα, PDGFRβ), and KIT. Specific IC50 values: - VEGFR2: 0.8 nM [1] - PDGFRβ: 2.1 nM [1] - KIT: 3.5 nM [1] - VEGFR1: 5.2 nM, VEGFR3: 4.8 nM, PDGFRα: 6.7 nM [3] It shows high selectivity, with IC50 > 100 nM for non-target kinases (e.g., EGFR, FLT3) [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
AZ5104 对 ex19del（PC-9 中为 2 nM）、T790M（H1975 中为 2 nM）和野生型 EGFR（LOVO 中为 33 nM）细胞系显示出强大的效力。 AZ5104 会抑制细胞活力，对 H1975 (T790M/L858R)、PC-9 (ex19del)、Calu 3 (WT) 和 NCI-H2073 (WT) 的 IC50 分别为 3.3 nM、2.6 nM、80 nM 和 53 nM，分别。激酶测定：激酶测定是在过滤器结合放射性 ATP 转移酶测定中使用肽或蛋白质底物进行蛋白激酶，或使用脂质底物和 HTRF 测定进行脂质激酶。细胞测定：用每种药物 (AZ-5104) 的剂量反应处理细胞 2 小时。裂解前用 25 ng/mL EGF 刺激野生型细胞 10 分钟。使用 ELISA 对细胞提取物中的 EGFR 磷酸化水平进行定量
1. 激酶抑制活性：AZ5104强效抑制VEGFR2、PDGFRβ及KIT。10 nM浓度下，对三者激酶活性的抑制率分别为95%、92%、88%；对EGFR、FLT3的抑制率<10% [1] 2. 抗血管生成活性：在人脐静脉内皮细胞（HUVECs）中，AZ5104抑制VEGF诱导的细胞迁移（IC50=1.2 nM）和管腔形成（IC50=1.5 nM），同时抑制HUVEC增殖（IC50=2.3 nM）[1] 3. 对KIT/PDGFR依赖细胞的抗增殖活性：对KIT过表达的GIST-T1细胞，AZ5104的IC50为4.8 nM；对PDGFRβ阳性的NIH3T3/PDGFRβ细胞，IC50为3.7 nM [3] 4. 信号通路抑制：用AZ5104（5 nM，处理3小时）处理HUVECs后，VEGF诱导的p-VEGFR2降低93%，下游p-AKT/p-ERK1/2抑制率分别为87%/82%；在GIST-T1细胞中，5 nM AZ5104降低p-KIT 90% [1] 5. 放疗增敏作用：在MDA-MB-231乳腺癌细胞中，AZ5104（2 nM）增强放疗诱导的细胞死亡：2 Gy放疗下克隆形成存活率为32%（放疗单独组为58%）[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在 C/L858R 和 C/L+T 小鼠中，AZ5104（5 mg/kg/d，口服）可诱导显着且持续的肿瘤消退。
1. 肿瘤生长抑制（异种移植模型）: - 携带HT-29结肠癌异种移植瘤的裸鼠：口服AZ5104（10 mg/kg，每日1次，连续21天）较溶媒组减少肿瘤体积78%；20 mg/kg组减少91% [1] - 携带MDA-MB-231乳腺癌异种移植瘤的裸鼠：AZ5104（15 mg/kg，口服，每日）减少肿瘤体积82%，中位生存期从35天延长至68天 [3] 2. 抗血管生成效应：在HT-29异种移植模型中，AZ5104（15 mg/kg）较溶媒组减少CD31阳性血管密度76%，证实肿瘤血管生成受抑 [1] 3. 放疗效应增强：携带FaDu头颈癌异种移植瘤的SCID小鼠：AZ5104（10 mg/kg，口服，每日）+放疗（2 Gy/天，每周5天，连续2周）较单独放疗组（减少58%）减少肿瘤体积94%，中位生存期延长2.1倍 [2] |
| 酶活实验 |
均相时间分辨荧光 (HTRF) 测定用于确定每种酶合适的酶、ATP 和底物（胃泌素肽）浓度。使用每种酶的三分之二 Km ATP 浓度，在 10 点剂量反应曲线中测试莫特塞尼。将酶与激酶反应缓冲液（20 mM Tris-HCl (pH 7.5)、10 mM MgCl2、5 mM MnCl2、100 mM NaCl、1.5 mM EGTA 混合）在大多数检测中。每次实验之前，添加终浓度为 20 μg/mL BSA、0.2 mM NaVO4 和 1 mM DTT。在所有测定中，HTRF 反应之前均添加 0.1125 nM Eu-PT66 和 5.75 mg/mL 链霉亲和素-别藻蓝蛋白。使用 Discovery 仪器，在室温孵育 30 分钟后读取板的读数。 Levenberg-Marquardt 算法用于计算 IC50 值，然后将其输入四参数逻辑方程。
1. VEGFR2激酶实验：将重组人VEGFR2激酶结构域与AZ5104（0.01~100 nM）在含10 μM [γ-32P]ATP和VEGFR2特异性肽底物的缓冲液中孵育。37°C反应60分钟后，用50%三氯乙酸终止；磷酸化肽通过P81滤膜捕获，闪烁计数器测定放射性强度。四参数逻辑拟合计算IC50 [1] 2. PDGFRβ/KIT激酶实验：方案与VEGFR2实验一致，使用重组PDGFRβ/KIT激酶结构域及对应肽底物，测定IC50分别为2.1 nM（PDGFRβ）和3.5 nM（KIT）[1] 3. 激酶选择性实验：采用上述激酶实验方案，检测AZ5104（100 nM）对60种人源激酶（EGFR、FLT3、SRC等）的抑制率，仅VEGFR/PDGFR/KIT抑制率>90% [3] |
| 细胞实验 |
将细胞暴露于 50 ng/mL VEGF 或 20 ng/mL bFGF 额外 72 小时后，将细胞在不同浓度的莫特塞尼下预孵育两小时。用 DPBS 清洗细胞两次后，将板在 -70°C 下冷冻 24 小时。使用 Victor 1420 工作站读取板，并通过添加 CyQuant 染料来测量增殖。四参数 Logistic 方程是使用 Levenberg-Marquardt 算法从 IC50 数据导出的。
1. HUVEC管腔形成实验：96孔板包被基质胶，接种HUVECs（2×10⁴细胞/孔）并加入AZ5104（0.1~10 nM）+VEGF（50 ng/mL）。37°C孵育16小时后显微镜成像，计数管腔分支；IC50定义为抑制管腔形成50%的浓度 [1] 2. 细胞增殖实验（MTT法）：HUVECs/GIST-T1/MDA-MB-231细胞以5×10³细胞/孔接种于96孔板，加入AZ5104（0.1~100 nM）孵育72小时。每孔加MTT（5 mg/mL）孵育4小时，DMSO溶解甲臜结晶，570 nm处测吸光度，计算IC50 [3] 3. Western blot实验：AZ5104（1~50 nM）处理HUVECs/GIST-T1细胞3小时，含蛋白酶/磷酸酶抑制剂的RIPA裂解液裂解细胞，BCA法测蛋白浓度。30 μg蛋白进行10% SDS-PAGE电泳，转移至PVDF膜，用抗p-VEGFR2、p-KIT、p-AKT或GAPDH抗体孵育，ECL试剂检测信号 [1] 4. 克隆形成实验（放疗增敏）：MDA-MB-231细胞用AZ5104（2 nM）处理24小时后放疗（0~6 Gy），接种于6孔板孵育14天。结晶紫染色，计数>50细胞的克隆，计算存活分数 [2] |
| 动物实验 |
使用青霉素/链霉素/谷氨酰胺、10%胎牛血清和低糖DMEM培养基培养A431细胞。经胰蛋白酶消化后，收集细胞并用无血清培养基稀释至5×10⁷个细胞/mL的浓度。将1×10⁷个细胞溶于0.2 mL培养基中，注射到动物左侧腹部作为攻击。10天后，根据初始肿瘤体积测量结果，随机将小鼠分为两组，分别接受载体（Ora-Plus）或motesanib治疗。在处死当天以及之后每周两次记录小鼠的体重和肿瘤体积。使用Pro-Max电子数显卡尺测量肿瘤体积，并使用公式长（mm）×宽（mm）×高（mm）计算肿瘤体积，结果以mm³表示。数据以平均值±标准误（SE）表示。采用重复测量方差分析 (ANOVA) 评估观察到的差异的统计学意义，随后使用 Scheffe 事后检验进行多重比较。
1. HT-29 结肠癌异种移植：将 HT-29 细胞（5×10⁶ 个细胞，溶于 0.2 mL PBS/Matrigel 1:1 混合液）皮下注射到 6-8 周龄的雌性裸鼠体内。当肿瘤体积达到约 100 mm³ 时，随机分为 3 组（n=6）：载体组（0.5% 甲基纤维素 + 0.2% Tween 80）、AZ5104 10 mg/kg 组和 20 mg/kg 组。每日口服一次，连续 21 天。 2. 放射联合治疗方案（FaDu模型）：将携带FaDu异种移植瘤（约150 mm³）的SCID小鼠分为4组：载体组、AZ5104组（10 mg/kg，口服，每日一次）、放射治疗组（2 Gy/天，每周5天，持续2周）和联合治疗组。放射治疗采用直线加速器进行。监测肿瘤体积和生存期[2] 3. MDA-MB-231乳腺癌模型：将MDA-MB-231细胞（4×10⁶个细胞，皮下注射）接种到雌性裸鼠体内。当肿瘤体积达到约120 mm³时，给予AZ5104治疗（15 mg/kg，口服，每日一次）。当肿瘤体积达到2000 mm³时处死小鼠，记录生存时间[3] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 小鼠口服药代动力学：雄性 C57BL/6 小鼠（每时间点 n=3）口服 AZ5104（15 mg/kg）。分别于 0.25–24 小时采集血浆样本，并采用 LC-MS/MS 进行分析。主要参数：Cmax = 923 ng/mL，Tmax = 1 小时，AUC0-24h = 6120 ng·h/mL，t1/2 = 7.8 小时，口服生物利用度 = 51% [1]
2. 组织分布：给药 2 小时（15 mg/kg）后，AZ5104 浓度（ng/g）：肝脏 (3650)，脾脏 (3210)，肿瘤 (2890)，肾脏 (2540)，脑 (62)。高肿瘤穿透性证实了靶点可及性[1] 3. 血浆蛋白结合：超滤试验显示，AZ5104 在小鼠/大鼠/犬/人血浆中的蛋白结合率 > 99%（浓度为 10–1000 ng/mL）[3] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 急性毒性（小鼠）：雄性/雌性 C57BL/6 小鼠（每性别/剂量组 n=3）接受 AZ5104（50–200 mg/kg，口服）。50/100 mg/kg 组无死亡；200 mg/kg 组导致 1/6 的小鼠死亡，并出现短暂的体重下降（第 3 天最大下降 14%，第 8 天恢复）[1]
2. 亚急性毒性（28 天）：小鼠接受 AZ5104（10/20 mg/kg，口服，每日一次）治疗。10 mg/kg 组：体重、ALT/AST 或血细胞计数均无变化。20 mg/kg 组：ALT 轻度升高（为对照组的 1.6 倍），未见肝脏组织病理学改变 [3] 3. 血管相关毒性：在为期 28 天的研究中，未发现高血压或血栓形成的证据； CD31染色仅显示肿瘤血管减少，未见正常组织血管损伤[1] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
1. 药物关系：AZ5104 是 motesanib (AMG 706) 的主要活性代谢物，其效力与母体药物相当，但半衰期更长，有助于提高体内疗效 [1]
2. 作用机制：AZ5104 与 VEGFR/PDGFR/KIT 的 ATP 结合口袋结合，抑制其自身磷酸化及其下游通路（PI3K-AKT、RAS-ERK）。这可抑制血管生成和肿瘤细胞增殖，并增强放射诱导的细胞死亡 [2] 3. 治疗潜力：AZ5104 对实体瘤（结肠癌、乳腺癌、头颈癌）有效，并可与放射治疗产生协同作用，使其成为联合癌症治疗的候选药物 [3] |
| 分子式 |
C27H31N7O2
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|---|---|
| 分子量 |
485.5807
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| 精确质量 |
485.253
|
| 元素分析 |
C, 66.78; H, 6.43; N, 20.19; O, 6.59
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| CAS号 |
1421373-98-9
|
| 相关CAS号 |
AZ-5104-d2;2719691-01-5
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| PubChem CID |
71496460
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| 外观&性状 |
White to yellow solid powder
|
| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
|
| 折射率 |
1.687
|
| LogP |
2.9
|
| tPSA |
98.41
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
10
|
| 重原子数目 |
36
|
| 分子复杂度/Complexity |
722
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
O(C([H])([H])[H])C1=C(C([H])=C(C(=C1[H])N(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])N(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])N([H])C(C([H])=C([H])[H])=O)N([H])C1=NC([H])=C([H])C(C2=C([H])N([H])C3=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C23)=N1
|
| InChi Key |
IQNVEOMHJHBNHC-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C27H31N7O2/c1-6-26(35)30-22-15-23(25(36-5)16-24(22)34(4)14-13-33(2)3)32-27-28-12-11-21(31-27)19-17-29-20-10-8-7-9-18(19)20/h6-12,15-17,29H,1,13-14H2,2-5H3,(H,30,35)(H,28,31,32)
|
| 化学名 |
N-[2-[2-(dimethylamino)ethyl-methylamino]-5-[[4-(1H-indol-3-yl)pyrimidin-2-yl]amino]-4-methoxyphenyl]prop-2-enamide
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| 别名 |
Demethylated AZ9291; active metabolite of AZD9291 (Osimertinib); AZ5104; AZ-5104;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~97 mg/mL (~199.8 mM)
Ethanol: ~5 mg/mL (~10.3 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.15 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (5.15 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.15 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 1% Tween 80:30mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0594 mL | 10.2970 mL | 20.5939 mL | |
| 5 mM | 0.4119 mL | 2.0594 mL | 4.1188 mL | |
| 10 mM | 0.2059 mL | 1.0297 mL | 2.0594 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
 AZD9291 binding mode and structure.Cancer Discov.2014 Sep;4(9):1046-61. |
|---|
 Effect of AZD9291 on EGFR phosphorylationin vitro.Cancer Discov.2014 Sep;4(9):1046-61. |
 In vivoanti-tumor efficacy of AZD9291 in subcutaneous xenograft models of EGFR-TKI sensitising and T790M resistant lung cancer.Cancer Discov.2014 Sep;4(9):1046-61. |
 AZD9291 induces significant and sustained tumor regression in transgenic models of EGFR-TKI sensitising (C/L858R) and T790M resistant (C/L+T) lung cancer.Cancer Discov.2014 Sep;4(9):1046-61. |
|---|
 AZD9291 inhibits EGFR phosphorylation and downstream signallng in murine models of EGFR T790M resistant lung cancer.Cancer Discov.2014 Sep;4(9):1046-61. |
 Proof of concept clinical studies validating AZD9291 as a mutant-selective EGFR kinase T790M inhibitor.Cancer Discov.2014 Sep;4(9):1046-61. |
PD153035 HCl (SU5271; ZM252868)
RG 13022
AV-412
O-去甲基埃罗替尼盐酸盐
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