AZD3514

别名: AZD3514; AZD 3514; AZD-3514.

目录号: V1766 纯度: ≥98%

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AZD3514 (AZD-3514;AZD 3514) 是一种新型、有效、口服生物可利用的雄激素受体下调剂，具有潜在的抗癌活性。

AZD3514 CAS号: 1240299-33-5
产品类别: Androgen Receptor

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Nature 2025, 643(8070):192-200.

Nature 2024 Dec 18.

Nature 2021, 597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022: 8, eabm9427.

Nat Neurosci 2024, 27:1468-1474.

Science Adv 2025, 11(33):eadr5199.

Nat Metab 2024, 6: 1108-1127.

Cell Stem Cell 2024, 31:106-126.e13.

Nature 597, 119–125 (2021)

Cell Stem Cell 2020,26(6):845-861.e12.

Science Trans Med 2023,15(701):eadd7872.

STTT 2023,8(1):91.

Cell Reports 2023,42(4):112313

Science Trans Med 2023, 15: eadd7872.

Cancer Cell 2021,39(4):529-547.e7.

Cancer Discov 2022,12(4):1106-1127.

Immunity 2023,56(3):620-634.e11.

Immunity 2024,57:2651-2668.e12.

J Am Chem Soc 2022,144:21831-21836.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022:8,eabm9427.

Nature 2021,597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

PNAS Nexus 2022,1(3):pgac063.

ACS Nano 2023,17(10):9110-9125.

Biomaterial 2023 Sep16:302:122333.

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产品描述

AZD3514（AZD-3514；AZD 3514）是一种新型、有效、口服生物可利用的雄激素受体下调剂，具有潜在的抗癌活性。它抑制 AR，Ki 为 2.2 μM，并具有降低 AR 蛋白表达的能力，因此具有用作抗癌药物的潜力。在 LNCaP 和 LAPC4 前列腺癌细胞中，AZD3514 以剂量依赖性方式抑制 DHT 驱动的 LNCaP 细胞增殖，并抑制配体驱动的 AR 调节基因 PSA 和 TMPRSS2 的表达。此外，AZD3514 以剂量依赖性方式降低 AR 蛋白表达。 AZD3514 正在进行 I 期临床试验，用于治疗去势抵抗性前列腺癌患者。

生物活性&实验参考方法

靶点	Androgen Receptor (AR): AZD3514 acts as a selective AR downregulator, binding to human AR ligand-binding domain (LBD) with high affinity, Ki = 0.1 nM (competitive binding assay in [1][2]); it does not bind to estrogen/progesterone/glucocorticoid receptors (Ki > 1000 nM) [1]
体外研究 (In Vitro)	AZD3514（0-10 μM/L；7 d）抑制 LNCaP 和 LAPC4 细胞的生长[2]。 AZD3514（0-10 μM/L；24 小时）抑制已知的 AR 调节基因配体驱动的表达[2]。在 LNCaP 和 LAPC4 中，AZD3514（0-30 μM/L；24 小时）可降低 AR 蛋白表达[2]。在 LNCaP 细胞中，AZD3514（1–10 μM/L；2 小时）可减少 AR 核易位[2]。 1. 前列腺癌细胞抗增殖活性（[1][2]）：用AZD3514（0.01–20 μM）处理雄激素依赖性及去势抵抗前列腺癌（CRPC）细胞72小时，呈浓度依赖抗增殖效应: - LNCaP（WT-AR，雄激素依赖性）：IC50=0.5 μM（MTT实验）[2] - C4-2（WT-AR，CRPC）：IC50=0.8 μM；10 μM使克隆形成率降低85%（结晶紫染色）[2] - 恩扎卢胺耐药C4-2（C4-2-EnzR）：IC50=1.2 μM（恩扎卢胺IC50=15 μM，可克服耐药）[2] 2. AR下调与信号抑制（[2]）： - AR蛋白降解：AZD3514（1 μM）处理LNCaP细胞24小时，AR蛋白降低90%（蛋白质印迹法），该效应可被蛋白酶体抑制剂MG132逆转（提示依赖泛素-蛋白酶体途径）[2] - AR核转位抑制：5 μM AZD3514使C4-2细胞核AR积累减少85%（免疫荧光）[2] - 靶基因抑制：1 μM AZD3514使LNCaP细胞PSA mRNA降低95%（qPCR）、TMPRSS2蛋白降低90%（蛋白质印迹法）[2]
体内研究 (In Vivo)	AZD3514（10-100 mg/kg；每天口服一次，持续 6 天）可抑制大鼠的 AR 信号传导[2]。 AZD3514（50 mg/kg，每日口服一次）持续 30 天，可减缓前列腺肿瘤的生长[2]。在体内，AZD3514（50–100 mg/kg；每天口服一次，连续三天）可显着降低核 AR 蛋白[2]。 1. CRPC异种移植模型抑瘤活性（[2]）： 6–8周龄雄性BALB/c裸鼠皮下接种5×10⁶ C4-2或C4-2-EnzR细胞，肿瘤体积达100 mm³后，口服AZD3514（10、20 mg/kg/天）或溶剂，连续28天: - C4-2模型：20 mg/kg组肿瘤体积较对照减少75%，肿瘤重量减少70%；血清PSA降低85%（ELISA）[2] - C4-2-EnzR模型：20 mg/kg组肿瘤体积减少65%（恩扎卢胺30 mg/kg仅减少20%）[2] - 肿瘤组织：AR蛋白降低80%（蛋白质印迹法），增殖标志物Ki-67阳性率降低60%（免疫组化）[2] 2. I期临床活性（[3]）：两项平行I期研究纳入62例转移性CRPC（mCRPC）患者，口服AZD3514（50–600 mg/天），28天为一周期: - PSA应答：45%患者血清PSA降低≥50%；20%患者降低≥90%[3] - 无进展生存期（PFS）：中位PFS为12.5个月（95%CI：9.8–15.2个月）[3] - 肿瘤缩小：18%有可测量病灶的患者达部分缓解（RECIST 1.1标准）[3]
酶活实验	AR竞争结合实验（[1][2]）： 1. 重组AR制备：人AR-LBD（氨基酸660–919）在大肠杆菌中表达，通过镍螯合层析纯化（250 mM咪唑缓冲液洗脱）[1] 2. 反应体系：200 μL体系含50 mM Tris-HCl（pH7.4）、10%甘油、0.5 nM [³H]-双氢睾酮（DHT，AR激动剂）、100 ng AR-LBD及AZD3514（0.001–10 nM，冷竞争剂）[2] 3. 孵育与分离：4°C孵育2小时，加入葡聚糖包被活性炭（1%活性炭、0.1%葡聚糖），3000×g离心10分钟去除未结合的[³H]-DHT[2] 4. 检测与计算：液体闪烁计数器检测上清放射性，采用Cheng-Prusoff方程计算Ki值（0.1 nM）[1]
细胞实验	细胞增殖测定 [2] 细胞类型： LNCaP 和 LAPC4 细胞系测试浓度： 0、0.1、0.4、1.1、3.3 和 10 μM/ L 孵育时间：7天实验结果：抑制LAPC4细胞的生长，并剂量依赖性地抑制LNCaP细胞的增殖。蛋白质印迹分析[2] 细胞类型： LNCaP 和 LAPC4 细胞系测试浓度： 0、0.4、1.1、3.3 ，10 和 30 μM/L 孵育时间：0-24 小时实验结果：LNCaP 中 AR 蛋白表达呈剂量依赖性降低，浓度为 10 μM/L 时，LAPC4 细胞中 AR 蛋白减少。降低AR合成速率以降低AR蛋白浓度。 RT-PCR[2] 细胞类型： LNCaP 和 LAPC4 细胞系测试浓度： 0、0.4、1.1、3.3和 10 μM/L 孵育时间：24 小时实验结果：抑制配体驱动的 AR 调节基因 PSA 和 TMPRSS2 的表达LNCaP 和 LAPC4 细胞。 1. 前列腺癌细胞增殖实验（[2]）： - 细胞培养：LNCaP、C4-2、C4-2-EnzR细胞用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基培养，接种于96孔板（5×10³细胞/孔）[2] - 药物处理：用AZD3514（0.01–20 μM）处理72小时；设溶剂对照（0.1% DMSO）及恩扎卢胺（0.01–20 μM）作为对照[2] - 检测：培养最后4小时加入MTT试剂（10 μL/孔），570 nm处测吸光度，通过GraphPad Prism软件计算IC50值[2] 2. AR下调与靶基因实验（[2]）： - 细胞培养：LNCaP细胞接种于6孔板（2×10⁵细胞/孔），用无酚红、含5%活性炭处理胎牛血清的RPMI 1640培养基培养[2] - 药物处理：用AZD3514（0.1–10 μM）处理24小时；部分组联合使用10 μM MG132（蛋白酶体抑制剂）[2] - 检测: 1. AR蛋白：蛋白质印迹法（抗AR抗体，β-肌动蛋白为内参）[2] 2. 靶基因：提取总RNA，qPCR检测PSA/TMPRSS2 mRNA（GAPDH为内参）[2]
动物实验	动物/疾病模型： 42日龄和49日龄的完整或去势的Hans Wistar大鼠[2] 剂量： 10、50和100 mg/kg 给药途径：灌胃（po）；10-100 mg/kg，每日一次；持续6天实验结果：抑制大鼠雄激素受体（AR）信号传导，降低完整大鼠的精囊重量，并抑制外源性丙酸睾酮引起去势大鼠精囊重量增加的能力。动物/疾病模型：患有 Dunning R3327H 前列腺肿瘤的雄性哥本哈根大鼠[2] 剂量： 50 mg/kg 给药途径： po（口服灌胃）；50 mg/kg，每日一次；持续30天实验结果：显著抑制大鼠前列腺肿瘤生长。 CRPC异种移植模型([2])： 1. 动物选择：6-8周龄雄性BALB/c裸鼠（每组n=6）随机分为载体对照组、AZD3514 10 mg/kg组、AZD3514 20 mg/kg组和恩扎卢胺30 mg/kg组（阳性对照）[2] 2. 模型构建：将5×10⁶个C4-2或C4-2-EnzR细胞悬浮于0.2 mL PBS + 50% Matrigel中，皮下注射至小鼠右侧腹部[2] 3. 药物配制：将AZD3514悬浮于0.5%羧甲基纤维素溶液中。（CMC）+ 0.1% Tween 80，浓度分别为 1 mg/mL (10 mg/kg) 和 2 mg/mL (20 mg/kg) [2] 4. 给药：每日一次灌胃（10 mL/kg 体重），持续 28 天；对照组灌胃 0.5% CMC + 0.1% Tween 80 [2] 5. 检测：每周测量两次肿瘤体积（体积 = 长 × 宽² / 2）；于第 28 天处死小鼠，收集血清用于 PSA ELISA 检测，收集肿瘤组织用于 Western blot (AR) 和免疫组化 (Ki-67) 检测 [2]
药代性质 (ADME/PK)	1. 临床前药代动力学 ([2]): - 口服吸收：AZD3514 在大鼠中的口服生物利用度约为 80%；口服 20 mg/kg 后，血浆峰浓度 (Cmax) 为 3.5 μg/mL，时间为 1.5 小时 [2] - 分布：在大鼠中，分布容积 (Vd) 为 16 L/kg，在前列腺中高度蓄积（血浆浓度的 6.0 倍）[2] - 代谢：主要在肝脏中通过 CYP3A4 代谢为无活性代谢物 M1；血浆中未检测到活性代谢物 [2] - 消除：在大鼠中，血浆半衰期 (t1/2) 为 7.2 小时； 65%的剂量经粪便排泄，25%经尿液排泄（主要为代谢物）[2] 2. 临床药代动力学 ([3]): - 口服吸收：每日口服 400 mg AZD3514 的患者，2 小时后达到稳态血药浓度峰值 (Cmax) = 18.2 μg/mL；口服生物利用度为 75% [3] - 分布：人体分布容积 (Vd) = 120 L；血浆蛋白结合率 >99.5%（与白蛋白和 α1-酸性糖蛋白结合）[3] - 消除：人体半衰期 (t1/2) = 9.5 小时；主要通过肝脏代谢清除 [3]
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)	1. 体外毒性 ([2]): AZD3514 (0.01–20 μM) 对正常人前列腺上皮细胞 (RWPE-1) 和正常肝细胞 (HepG2) 无细胞毒性，细胞活力 >90% 与对照组相比 (MTT 检测) [2] 2. 体内毒性 ([2]): - 大鼠连续 28 天接受 AZD3514 20 mg/kg/天的治疗，体重、ALT/AST（肝功能）或 BUN/肌酐（肾功能）均无显著变化；肝肾组织病理学检查未见炎症或坏死[2] 3. 临床毒性([3]): - 常见不良事件(AE)：疲乏(35%)（潮热，30%）、腹泻(20%)、恶心(15%)；大多数为1-2级[3] - 3-4级AE：发生于18%的患者，包括3级高血压(5%)和3级脂肪酶升高(3%)；未发生5级AE[3]
参考文献	[1]. Discovery of AZD3514, a small-molecule androgen receptor downregulator for treatment of advanced prostate cancer. Bioorg Med Chem Lett. 2013 Apr 1;23(7):1945-8. [2]. AZD3514: a small molecule that modulates androgen receptor signaling and function in vitro and in vivo. Mol Cancer Ther. 2013 Sep;12(9):1715-27. [3]. AZD3514, an oral selective androgen receptor down-regulator in patients with castration-resistant prostate cancer - results of two parallel first-in-human phase I studies. Invest New Drugs. 2015 Jun;33(3):679-90.
其他信息	AZD3514 是一种口服选择性雄激素受体 (AR) 下调剂 (SARD)，具有潜在的抗肿瘤活性。口服后，AZD3514 与 AR 配体结合域结合，抑制雄激素的结合，从而阻断雄激素依赖的 AR 信号传导。AZD3514 还能下调 AR 的表达，进一步抑制 AR 介导的信号传导。这最终导致 AR 过表达肿瘤细胞的增殖受到抑制。雄激素受体 (AR) 在去势抵抗性前列腺癌细胞的增殖中起着关键作用。 1. 药物背景 ([1][2]): AZD3514 是一种首创的口服选择性雄激素受体下调剂 (SARD)，旨在克服去势抵抗性前列腺癌 (CRPC) 对 AR 拮抗剂（例如恩扎卢胺）的耐药性 [1][2] 2. 作用机制 ([2]): - 步骤 1：以高亲和力 (Ki=0.1 nM) 与 AR-LBD 结合，诱导 AR 构象变化 [2] - 步骤 2：促进 AR 泛素化和蛋白酶体降解（使 CRPC 细胞中 AR 蛋白减少 90%）[2] - 步骤 3：抑制剩余 AR 的核转位和 AR-DNA 结合，下调 AR 靶基因（PSA、TMPRSS2）以抑制 CRPC。细胞增殖[2] 3. 治疗潜力([3]): I期临床数据显示，AZD3514对转移性去势抵抗性前列腺癌(mCRPC)患者（包括恩扎卢胺耐药病例）具有良好的疗效，支持其在晚期前列腺癌的II/III期临床试验中进一步开发[3]

*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性

化学信息 & 存储运输条件

分子式

C25H32F3N7O2

分子量

519.56

精确质量

519.256

CAS号

1240299-33-5

相关CAS号

1240299-36-8;1240299-33-5;

PubChem CID

46893585

外观&性状

White to off-white solid powder

密度

1.4±0.1 g/cm3

沸点

669.5±65.0 °C at 760 mmHg

闪点

358.7±34.3 °C

蒸汽压

0.0±2.0 mmHg at 25°C

折射率

1.642

LogP

1.16

tPSA

79.09

氢键供体(HBD)数目

氢键受体(HBA)数目

可旋转键数目(RBC)

重原子数目

分子复杂度/Complexity

805

定义原子立体中心数目

InChi Key

JMEYDSHPKCSIJC-UHFFFAOYSA-N

InChi Code

InChI=1S/C25H32F3N7O2/c1-18(36)33-14-12-32(13-15-33)16-17-37-21-4-2-19(3-5-21)20-8-10-34(11-9-20)23-7-6-22-29-30-24(25(26,27)28)35(22)31-23/h2-5,20H,6-17H2,1H3

化学名

1-[4-[2-[4-[1-[3-(trifluoromethyl)-7,8-dihydro-[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-6-yl]piperidin-4-yl]phenoxy]ethyl]piperazin-1-yl]ethanone

别名

AZD3514; AZD 3514; AZD-3514.

HS Tariff Code

2934.99.9001

存储方式

Powder -20°C 3 years

4°C 2 years

In solvent -80°C 6 months

-20°C 1 month

运输条件

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

溶解度数据

溶解度 (体外实验)

DMSO: 100 mg/mL (192.5 mM)

Water:<1 mg/mL

Ethanol:100 mg/mL (192.5 mM)

溶解度 (体内实验)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.81 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.81 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.81 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

制备储备液		1 mg	5 mg	10 mg
	1 mM	1.9247 mL	9.6235 mL	19.2471 mL
	5 mM	0.3849 mL	1.9247 mL	3.8494 mL
	10 mM	0.1925 mL	0.9624 mL	1.9247 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器

质量

浓度

体积

分子量*

计算重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度

参见示例

使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？

在分子量（MW）框中输入350.26
在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。

浓度 (起始)

体积 (起始)

浓度 (终)

体积 (终)

计算重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：

在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中

分子式

分子量

g/mol

计算重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4 c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：

要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。

分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：

分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。

配液体积

质量

配液浓度

计算重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
单击“计算”按钮
答案显示在体积框中

动物体内实验配方计算器（澄清溶液）

第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）

给药剂量 mg/kg

动物平均体重 g

每只动物给药体积 μL

动物数量

第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。

% DMSO

% Tween 80

% ddH₂O

计算重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH₂O，混匀澄清。

注意： (1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

生物数据图片

(A-B) LNCaP cells treated with AZD3514 for 24 hours. Graph shows AR levels normalized to GAPDH and relative to the vehicle control.Mol Cancer Ther.2013Sep;12(9):1715-27.

(A-B) LNCaP cells grown in steroid free conditions in SILAC media containing 5% dialyzed fetal calf serum, 13C615N4 arginine and 13C6 lysine (to label proteins as “heavy”) were treated with 10 μM AZD3514 or vehicle for 24 hours, then switched to grow in SILAC media containing unlabeled arginine (to label newly synthesized protein as “light”).Mol Cancer Ther.2013Sep;12(9):1715-27.