Bisbenzimide HCl (Pibenzimol, Hoechst 33258)

别名: HOECHST 33258; HOE 33258; Bisbenzimidazole trihydrochloride; Pibenzimol hydrochloride; Hoechst Dye 33258; Hoechst 33258 Trihydrochloride; bisBenzimide H 33258; 赫斯特荧光染料 33258; 33258 荧光染料;H33258荧光染料;2'-(4-羟苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5'-联苯并咪唑三盐酸盐水合物 [用于生化];Bis Benzimide Hoechst NO.33258 荧光染料;Hoechst 33258 *超级纯*;赫斯特荧光染料;双苯并咪唑H33258三盐酸盐;荧光染料33258;2'-(4-羟苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5'-联苯并咪唑三盐酸盐水合物; ;赫斯特荧光燃料;赫斯特荧光燃料,33258;甲嗪双苯咪酚;双苯并咪唑H33258;烟酸己可碱 三盐酸盐;甲嗪双苯咪酚 三盐酸盐;赫斯特荧光染料 33258 溶液;双苯酰亚胺H 33258
目录号: V8097 纯度: ≥98%
Bisbenzimide,以前称为 Pibenzimol,Hoechst 33258,是一种细胞渗透性苯并咪唑染料,优先结合富含腺嘌呤和胸腺嘧啶的序列的双链 DNA 小沟。
Bisbenzimide HCl (Pibenzimol, Hoechst 33258) CAS号: 23491-45-4
产品类别: Fluorescent Dye
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
50mg
100mg
250mg
500mg
1g
Other Sizes

Other Forms of Bisbenzimide HCl (Pibenzimol, Hoechst 33258):

  • Hoechst 33258
  • Hoechst 33258类似物
  • Hoechst 33258 analog 2
  • Hoechst 33258类似物 3
  • Hoechst 33258 analog 5
  • Hoechst 33258 analog 6
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纯度/质量控制文件

纯度: ≥98%

产品描述

描述:双苯并咪唑(Bisbenzimide),曾用名Pibenzimol、Hoechst 33258,是一种细胞渗透性苯并咪唑染料,可与双链DNA的小沟结合,尤其偏好富含腺嘌呤和胸腺嘧啶的序列。


生物活性&实验参考方法
靶点
IC50 = 51 μM (HeLa cells), 32 μM (HL60 cells), and 15 μM (U937 cells)
It is described as a compound that exerts anti-tumor activity via DNA minor groove binding. [1]
体外研究 (In Vitro)
1.1 Hoechst 工作液的配制:将 10 mg Hoechst 溶于 5 mL DMSO 中。建议将原液避光保存于 4°C 或 -20°C,以避免反复冻融。1.2 Hoechst 原液的配制:将原液溶于 PBS 或无血清细胞培养基中,配制成终浓度为 10 μg/mL 的 Hoechst 工作液。注:请根据实际情况调整 Hoechst 工作液的浓度。1. 细胞染色 2.1 六孔悬浮板 a. 4°C 下以 1000g 离心 3~5 分钟后弃去上清液。用 PBS 洗涤两次,每次 5 分钟。细胞密度为 1×10⁶/mL。c. 加入 1 mL 工作液后,等待 3~10 分钟。在400 g、4°C下离心3-4分钟,弃去上清液。d. 用PBS洗涤两次,每次5分钟。e. 将细胞重悬于PBS或无血清培养基中。使用流式细胞仪或荧光显微镜观察。2.2 贴壁细胞 在无菌盖玻片上培养贴壁细胞(a)。b. 吸除多余细胞,并将盖玻片从培养基中取出。b. 倒入100 μL工作液,轻轻摇晃使其完全覆盖。预处理:细胞培养3-10分钟。d. 用PBS洗涤两次,每次5分钟。使用流式细胞仪观察。注1:请根据实际情况调整Hoechst工作液的浓度。2. 本产品仅供研发用途;不可用于家庭、医疗或其他用途。 3. 为了您自身的健康和安全,操作时请穿戴实验服和手套。
使用 MTT 法评估了 Hoechst 33258 对三种人类肿瘤细胞系的抗增殖活性。HeLa(宫颈癌)细胞的 IC50 值为 51.31 ± 4.56 μM,HL60(人类早幼粒细胞白血病)细胞的 IC50 值为 32.43 ± 3.27 μM,U937(人类白血病单核细胞淋巴瘤)细胞的 IC50 值为 15.42 ± 2.16 μM。[1]
酶活实验
Pibenzimol/Hoechst 33258 是一种苯并咪唑衍生物的荧光染料。Pibenzimol 与双链 DNA 小沟中的 AT 特异性位点结合,抑制拓扑异构酶 I 和 DNA 聚合酶,从而阻止 DNA 复制。该药物可延长细胞周期的 G2 期,并诱导肿瘤细胞凋亡。Pibenzimol 是一种苯并咪唑类抗丝虫药物;当其与 DNA 中的某些核苷酸结合时会发出荧光,因此可用于研究 DNA 复制;它还能干扰有丝分裂。
细胞实验
染色示例:
示例 1:Hoechst 33258 可用于检测细胞核。
方法:用于细胞染色。
1. 首先固定、渗透并密封细胞。
2. 将细胞与 Hoechst 33258(1:1000;30 分钟;避光)孵育。
3. 用 PBS 洗涤细胞五次,并使用荧光显微镜成像。
示例 2:Hoechst 33258 可用于检测细胞核并对活细胞和死细胞(凋亡/坏死)的细胞核进行染色。
方法:细胞染色。
1. 将培养的细胞与 1 mL 配制的 Hoechst 33258 溶液(7.5 μg/mL;37℃;5% CO2;30 分钟;1×PBS)孵育。
2. 使用 Evos FLc 荧光倒置显微镜进行成像。
示例 3:Hoechst 33258 可用于细胞核检测以及细胞凋亡检测。
方法:细胞染色。
1. 转染后用多聚甲醛固定细胞,并用 PBS 洗涤细胞。
2. 用 Hoechst 33258 染色细胞(30 分钟;20℃;避光)。
3. 使用荧光显微镜成像。
采用 MTT 法评价 Hoechst 33258 的抗肿瘤活性。将肿瘤细胞(HeLa、HL60、U937)接种于 96 孔板中,并用不同浓度的化合物处理指定时间。孵育后,加入 MTT 溶液,溶解生成的甲臜晶体。测量吸光度以计算细胞活力并确定 IC50 值。[1]
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
大鼠静脉注射LD50为32200微克/千克。行为:嗜睡(整体活动抑制);肺、胸膜或呼吸系统:呼吸困难;皮肤及附属器官(皮肤):毛发:其他。美国国家技术信息服务中心,PB84-171206。小鼠静脉注射LD50为36900微克/千克。行为:嗜睡(整体活动抑制);肺、胸膜或呼吸系统:呼吸困难;皮肤及附属器官(皮肤):毛发:其他。美国国家技术信息服务中心,PB84-171206。犬静脉注射LD50>22400微克/千克。感觉器官和特殊感觉:流泪;眼睛;肺、胸膜或呼吸系统:呼吸困难;胃肠道:唾液腺结构或功能改变。国家技术信息服务处,PB84-171206。
参考文献

[1]. Newly synthesized bis-benzimidazole derivatives exerting anti-tumor activity through inductionof apoptosis and autophagy. Bioorg Med Chem Lett. 2012 Oct 1;22(19):6297-300.

[2]. Synthesis, DNA/RNA affinity and antitumour activity of new aromatic diamidines linked by 3,4-ethylenedioxythiophene. Eur J Med Chem. 2011 Feb;46(2):743-55.

其他信息
一种苯并咪唑类抗丝虫药物;它与DNA中的某些核苷酸结合时会发出荧光,因此可用于研究DNA复制;它还可以干扰有丝分裂。另见:双苯并咪唑(注:已移至此处)。
Hoechst 33258 是一种具有头尾相连的双苯并咪唑结构的荧光化合物。最初发现它对L1210小鼠白血病具有细胞毒性。该化合物的I期临床试验显示出对胰腺癌的积极活性,但随后的II期临床试验未能获得任何客观结果。[1]
由于其合成简便且与DNA小沟具有很高的结合亲和力,Hoechst 33258已被用作开发新型抗肿瘤药物的药效团模型。[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C25H27CL3N6O
分子量
533.882
精确质量
532.131
元素分析
C, 56.24; H, 5.10; Cl, 19.92; N, 15.74; O, 3.00
CAS号
23491-45-4
相关CAS号
Hoechst 33258;23491-44-3; Hoechst 33258 trihydrochloride;23491-45-4;Hoechst 33258 analog;258843-62-8;Hoechst 33258 analog 2;23491-54-5;Hoechst 33258 analog 3;23554-98-5;Hoechst 33258 analog 5;23491-55-6;Hoechst 33258 analog 6;129244-66-2
PubChem CID
31953
外观&性状
Yellow to green solid powder
沸点
643.1ºC at 760mmHg
熔点
314 °C
闪点
342.7ºC
LogP
6.639
tPSA
84.07
氢键供体(HBD)数目
6
氢键受体(HBA)数目
5
可旋转键数目(RBC)
3
重原子数目
35
分子复杂度/Complexity
634
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
4-[6-(4-methyl-1-piperazinyl)[2,6'-bi-1H-benzimidazol]-2'-yl]-phenol, trihydrochloride
InChi Code
SMNPLAKEGAEPJD-UHFFFAOYSA-N
化学名
Bisbenzimide Bisbenzimide trihydrochloride Pibenzimol Pibenzimol HCl Pibenzimol trihydrochloride. H 33258 HOE 33258 Hoechst 33258 NSC 322921.
别名
HOECHST 33258; HOE 33258; Bisbenzimidazole trihydrochloride; Pibenzimol hydrochloride; Hoechst Dye 33258; Hoechst 33258 Trihydrochloride; bisBenzimide H 33258;
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~100 mg/mL (~187.31 mM)
H2O : ~12.5 mg/mL (~23.41 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: 9.09 mg/mL (17.03 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。 (<60°C).

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.8731 mL 9.3654 mL 18.7308 mL
5 mM 0.3746 mL 1.8731 mL 3.7462 mL
10 mM 0.1873 mL 0.9365 mL 1.8731 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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