| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
IC50 = 51 μM (HeLa cells), 32 μM (HL60 cells), and 15 μM (U937 cells)
Hoechst 33258 binds to nucleic acids by binding to the minor groove in the DNA double strand. It preferentially binds to A/T-rich regions of DNA. Its fluorescence intensity is significantly enhanced when bound to A/T-rich dsDNA. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
Hoechst 工作液的制备：
1.1 储备液的制备 用 DMSO 配制 1 mg/mL 的 Hoechst 储备液。 注意： 建议将 Hoechst 储备液分装后避光保存于 -4 ℃ 或 -20 ℃。 1.2 工作液的制备 用预热的无血清细胞培养基或 PBS 将储备液稀释至终浓度为 10 μg/mL 的 Hoechst 工作液。 注意： 请根据您的具体需求调整 Hoechst 工作液的浓度，并使用新鲜配制的溶液。 2. 细胞染色（悬浮细胞） 2.1 离心收集细胞，用 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度为 1 × 10~6/mL 2.2 加入 1 mL Hoechst 工作液，室温孵育 3-10 分钟。 2.3 400 g 离心 3-4 分钟，弃上清液。 2.4 用 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。 将细胞重悬于 1 mL 无血清培养基或 PBS 中，使用荧光显微镜或流式细胞仪观察。 3.细胞染色（贴壁细胞） 3.1 将贴壁细胞培养在无菌盖玻片上。 3.2 将盖玻片从培养基中取出，吸除多余的培养基。 3.3 加入 100 μL 染料工作液，轻轻摇晃使染料完全覆盖细胞，孵育 3-10 分钟。 3.4 移除染料工作液，用培养基洗涤 2-3 次，每次 5 分钟，然后使用荧光显微镜或流式细胞仪观察。 在无细胞体系中，Hoechst 33258 的活性取决于其 DNA 结合和荧光特性。其与 DNA 的结合可以通过光谱学方法进行研究，结合 DNA 后可测量其荧光强度。在体外，Hoechst 33258 可用作多种应用中的核复染剂。它可用于细胞计数、细胞周期分析和细胞复制研究。它在识别凋亡细胞中的浓缩细胞核方面特别有用。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，Hoechst 33258 已被评估其对包括 HeLa、HL60 和 U937 在内的人类肿瘤细胞系的细胞毒性。其抗丝虫活性表明其具有潜在的体内疗效，但它主要用作研究工具。
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| 酶活实验 |
Pibenzimol/Hoechst 33258 是一种苯并咪唑衍生物荧光染料。Pibenzimol 与双链 DNA 小沟中的 AT 特异性位点结合，抑制拓扑异构酶 I 和 DNA 聚合酶，从而阻止 DNA 复制。该药物可延长细胞周期的 G2 期，并诱导肿瘤细胞凋亡。
它是一种苯并咪唑类抗丝虫药物；当其与 DNA 中的特定核苷酸结合时会发出荧光，因此可用于研究 DNA 复制；它还能干扰有丝分裂。 Hoechst 33258 与 DNA 的结合可在无细胞体系中进行研究。将染料与 DNA 孵育，并测量结合后的荧光增强。由此可以确定其对不同 DNA 序列的结合亲和力。 |
| 细胞实验 |
染色示例：
示例 1：Hoechst 33258 可用于检测细胞核。 方法：用于细胞染色。 1. 首先固定、渗透并密封细胞。 2. 将细胞与 Hoechst 33258（1:1000；30 分钟；避光）孵育。 3. 用 PBS 洗涤细胞五次，并使用荧光显微镜成像。 示例 2：Hoechst 33258 可用于检测细胞核并对活细胞和死细胞（凋亡/坏死）的细胞核进行染色。 方法：细胞染色。 1. 将培养的细胞与 1 mL 配制的 Hoechst 33258 溶液（7.5 μg/mL；37℃；5% CO2；30 分钟；1×PBS）孵育。 2. 使用 Evos FLc 荧光倒置显微镜进行成像。 示例3：Hoechst 33258可用于细胞核检测以及细胞凋亡检测。 方法：细胞染色。 1. 转染后用多聚甲醛固定细胞，并用PBS洗涤细胞。 2. 用Hoechst 33258染色细胞（30分钟；20℃；避光）。 3. 使用荧光显微镜成像。 细胞与Hoechst 33258孵育。染料进入细胞并与细胞核内的DNA结合。然后使用荧光显微镜观察染色后的细胞。该方法可用于活细胞成像，并可与BrdU染色联合使用。 |
| 动物实验 |
体内成像研究可能需要向动物体内注射染料。该染料可用于标记细胞以进行追踪。其抗丝虫活性已在动物模型中得到研究。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
大鼠（静脉注射）：LD50：32200 µg/kg
小鼠（静脉注射）：LD50：36900 µg/kg 由于Hoechst 33258并非治疗药物，因此其药代动力学特性与其无关。它是一种用于染色和成像的研究工具。其稳定性和荧光特性是其应用的主要考虑因素。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
毒性数据
大鼠（静脉注射）：LD50：32200 µg/kg 小鼠（静脉注射）：LD50：36900 µg/kg Hoechst 33258 通常按照实验室化学品和染料的标准安全预防措施进行操作。它不适用于治疗用途，其毒性并非作为研究试剂应用的主要考虑因素。它已进行过细胞毒性评估。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
吡苯齐莫尔是一种联苯并咪唑和N-甲基哌嗪化合物。它既是一种荧光染料，也是一种驱虫药。吡苯齐莫尔是一种苯并咪唑衍生物的荧光染料。它与双链DNA小沟中的AT特异性位点结合，抑制拓扑异构酶I和DNA聚合酶，从而阻止DNA复制。该药物可以延长细胞周期的G2期，并诱导肿瘤细胞凋亡。(NCI04) 吡苯齐莫尔是一种苯并咪唑类抗丝虫药物；当它与DNA中的某些核苷酸结合时会发出荧光，因此可用于研究DNA复制；它还可以干扰有丝分裂。
Hoechst 33258是一种广泛使用的荧光DNA染料。它是推进遗传学、细胞生物学和诊断方法研究的关键工具。它不是一种药物。 |
| 分子式 |
C25H22N6O
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|---|---|
| 分子量 |
422.481784343719
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| 精确质量 |
424.201
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| 元素分析 |
C, 70.73; H, 5.70; N, 19.80; O, 3.77
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| CAS号 |
23491-44-3
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| 相关CAS号 |
Hoechst 33258 trihydrochloride;23491-45-4;Hoechst 33258 analog;258843-62-8;Hoechst 33258 analog 2;23491-54-5;Hoechst 33258 analog 3;23554-98-5;Hoechst 33258 analog 5;23491-55-6;Hoechst 33258 analog 6;129244-66-2
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| PubChem CID |
2392
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| 密度 |
1.337 g/cm3
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| 沸点 |
643.1ºC at 760 mmHg
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| 熔点 |
314ºC
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| 闪点 |
342.7ºC
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| 蒸汽压 |
0mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.742
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| LogP |
4.233
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| tPSA |
84.07
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
32
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| 分子复杂度/Complexity |
634
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
INAAIJLSXJJHOZ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C25H24N6O/c1-30-10-12-31(13-11-30)18-5-9-21-23(15-18)29-25(27-21)17-4-8-20-22(14-17)28-24(26-20)16-2-6-19(32)7-3-16/h2-9,14-15,32H,10-13H2,1H3,(H,26,28)(H,27,29)
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| 化学名 |
4-[6-[6-(4-methylpiperazin-1-yl)-1H-benzimidazol-2-yl]-1H-benzimidazol-2-yl]phenol
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| 别名 |
Pibenzimol; HOECHST 33258; Bisbenzimidazole; 23491-44-3; Hoe-33258; CHEBI:52082; LHQ7J5KV9B; 4-(5-(4-Methyl-1-piperazinyl)(2,5'-bi-1H-benzimidazol)-2'-yl)phenol;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~41.67 mg/mL (~98.16 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.90 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.90 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3670 mL | 11.8349 mL | 23.6698 mL | |
| 5 mM | 0.4734 mL | 2.3670 mL | 4.7340 mL | |
| 10 mM | 0.2367 mL | 1.1835 mL | 2.3670 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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