| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Human soluble adenylyl cyclase (sAC, AC10) - inhibitor (IC50 = 4.0 ± 0.2 μM) [2]
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| 体外研究 (In Vitro) |
在盐水中，联硫醇（0.1–10 mg/mL，72 小时）对新鲜的副阿米巴寄生虫表现出毒性 [1]。腺苷酸环化酶 (AC) 活性被联硫醇 (0-100 μM) 抑制，达到 IC50 值。 Bithionol（50 和 100 μM，0-10 分钟）可降低 cAMP 并几乎抑制 sAC。在过度表达 4-4 累积影响的细胞中，sAC 增强 cAMP。
酶抑制活性：在含有5 mM ATP、10 mM MgCl2和10 mM CaCl2的测定条件下，对纯化的人可溶性腺苷酸环化酶催化域 (sAC-cat，残基1-469) 进行的剂量反应实验表明，Bithionol能有效抑制sAC活性，IC50为4.0 ± 0.2 μM。其效力与已知的sAC抑制剂KH7及其类似物六氯酚 (IC50 = 1.6 ± 0.1 μM) 相当。[2] 结合亲和力：微量热泳动测量确定了Bithionol与apo-sAC蛋白的结合亲和力 (KD) 为0.43 ± 0.06 μM，表明存在高亲和力相互作用。[2] 抑制机制：动力学分析（在不同抑制剂浓度下的ATP滴定）表明，Bithionol是sAC的混合型抑制剂。它导致表观Vmax显著降低，对底物Km的增效应较弱，表明其对ATP主要是非竞争性抑制，兼有较小的竞争性成分。用混合抑制模型直接拟合得到的Ki为2.3 μM。该抑制作用似乎与生理激活剂碳酸氢根存在竞争关系，因为增加碳酸氢根浓度会使IC50值升高（从无碳酸氢根时的6 μM升高到40 mM碳酸氢根时的11 μM）。[2] 抑制的结构基础（X射线晶体学）：解析了人sAC催化域与Bithionol复合物的晶体结构，分辨率为2.24 Å。结构显示，Bithionol深入结合在变构碳酸氢根结合位点 (BBS) 中，并占据了连接该调节位点与活性位点的通道。关键相互作用包括与Val167、Ala100、Leu162、Leu102、Val175以及由Phe338/Phe296形成的疏水补丁的疏水接触，以及与Phe45和Phe336的T型π-π堆积。一个羟基与Met337的骨架酰胺形成氢键。氯原子可能与Lys95和骨架原子形成极性相互作用。活性位点和变构位点之间通讯的关键残基Arg176与Bithionol的π电子相互作用。结合诱导了构象变化，包括底物结合位点的收紧和催化残基Asp99的位移，这阻碍了有活性的酶-底物复合物的形成。[2] 突变分析：与野生型sAC相比，抑制sAC-R176A突变体需要2-3倍更高浓度的Bithionol，证实了Arg176参与抑制剂结合和抑制机制。[2] 对跨膜ACs (tmACs) 的选择性：在sAC敲除的小鼠胚胎成纤维细胞中（其cAMP产生完全来自tmACs），高达100 μM的Bithionol不抑制福司可林刺激的cAMP积累，而tmAC特异的P位点抑制剂2',5'-双脱氧腺苷则具有抑制作用。这证明在细胞环境中，Bithionol相对于tmACs对sAC具有特异性。[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在小鼠中，联硫醇对未成熟的 H. nana 表现出中等功效（100 mg/kg/天，侧壁粉末，持续 12 天）[3]。
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| 酶活实验 |
sAC活性测定：活性测定使用100 ng纯化的人sAC-cat蛋白，在含有50 mM Tris/HCl (pH 8.0)、50 mM NaCl、10 mM MgCl2、10 mM CaCl2和5 mM ATP的缓冲液中进行。反应在37°C下孵育，并通过快速冷冻终止。生成的cAMP使用以下三种方法之一进行定量：1) 测量³²P标记的cAMP，2) RapidFire质谱法，或 3) 在UPLC系统上使用C18柱进行反相色谱分析，等度洗脱流动相为97% 20 mM醋酸铵 (pH 4.5) 和3% 乙腈。对于抑制研究，化合物在不同浓度下测试，数据拟合到适当的抑制模型。[2]
结合实验（微量热泳动）：使用微量热泳动法测量Bithionol与sAC的结合亲和力。使用0.4 μM的sAC-cat蛋白，缓冲液含有50 mM Tris/HCl (pH 8)、50 mM NaCl和15 mM CaCl2。KD值通过将结合转变曲线拟合到单位点结合方程来确定。[2] |
| 细胞实验 |
细胞cAMP积累实验（sAC过表达）：为了测试Bithionol的细胞活性，在稳定过表达sAC的培养4-4细胞中测量cAMP积累。用500 μM异丁基甲基黄嘌呤抑制细胞磷酸二酯酶。与抑制剂孵育指定时间后，使用直接cAMP酶免疫分析法定量细胞cAMP。Bithionol引起cAMP形成的剂量依赖性减少，在100 μM时几乎完全抑制了sAC依赖的cAMP积累，效果与已知的sAC抑制剂KH7 (30 μM) 相似。[2]
细胞cAMP积累实验（tmAC活性）：为了评估选择性，在sAC敲除的小鼠胚胎成纤维细胞中测量福司可林刺激的cAMP积累。细胞在存在或不存在抑制剂的情况下用50 μM福司可林处理。如上所述定量细胞cAMP。100 μM的Bithionol不抑制这种tmAC依赖的cAMP积累。[2] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：感染了未成熟矮小绦虫的小鼠[3]
剂量：100 mg/kg/天 给药途径：口服，感染后12天 实验结果：48%的成熟矮小绦虫被清除。LD50：760 mg/kg。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
吸收、分布和排泄
联硫酚在宿主消化道的吸收程度有限，主要在血液中检测到，尤其是在胆汁中检测到，并最终通过胆汁排出体外。给药后2小时内，胆汁中的药物浓度达到峰值。血液中的药物浓度显著低于胆汁中的浓度。 当给大鼠喂食(35)S-联硫酚、(35)S-联硫酚亚砜或(35)S-联硫酚砜时，代谢物的尿液排泄量非常低。联硫酚亚砜主要通过粪便排出。超过90%的胆汁放射性以三种化合物的葡萄糖醛酸苷形式存在，其中超过70%的葡萄糖醛酸苷为硫双酚葡萄糖醛酸苷。 代谢/代谢物 当大鼠口服(35)S-硫双酚亚砜后，收集尿液、粪便和胆汁。在尿液中观察到八种代谢物。纸层析和化学测试鉴定出其中一种为无机硫酸盐。一种强酸被鉴定为3,5-二氯-2-羟基磺酸。另外两种化合物被鉴定为硫双酚砜和硫双酚。此外，还鉴定出三种化合物为硫双酚、硫双酚亚砜和硫双酚砜的葡萄糖醛酸苷。还有一种代谢物未被鉴定。除游离的硫双酚砜外，胆汁中发现的代谢物与尿液中发现的代谢物相同。然而，定量差异很大。硫双酚砜的葡萄糖醛酸苷占胆汁中 (35)S 的 71%，但在尿液中仅占 16.5%。/硫双酚亚砜/ 当给大鼠喂食 (35)S-硫双酚、(35)S-硫双酚亚砜或 (35)S-硫双酚砜时，代谢物的尿排泄量……非常低。……超过 90% 的胆汁放射性以这 3 种化合物的葡萄糖醛酸苷的形式存在，其中超过 70% 的葡萄糖醛酸苷以硫双酚葡萄糖醛酸苷的形式存在。砜代谢生成儿茶酚和愈创木酚。 /硫双酚和硫双酚砜是硫双酚亚砜的主要代谢产物。/ |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
相互作用
当比硫酚与四氯化碳、酒石酸锑钠、盐酸依米丁、六氯乙烷或六氯对二甲苯联合使用时，毒性会中度至显著增强。 非人类毒性值 大鼠口服LD50：1430 mg/kg 小鼠口服LD50：2100 mg/kg 小鼠静脉注射LD50：18 mg/kg 一般细胞毒性：作者指出，他们观察到比硫酚在浓度约为10 μM时开始出现一般细胞毒性作用，该浓度是细胞环境中显著抑制sAC所需的浓度。 [2] 历史上的FDA禁令：比硫酚曾被用作化妆品中的抗菌剂，但由于其光敏性，美国食品药品监督管理局（FDA）禁止了这种用途。[2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
2,2'-硫代双(4,6-二氯苯酚)为白色或灰白色结晶性粉末，具有非常淡的芳香或酚类气味。(NTP, 1992)
硫代双酚是一种芳基硫醚，属于二苯基硫醚，其中每个苯基的2位被羟基取代，3位和5位被氯取代。它是一种杀真菌剂和驱虫剂，曾用于多种外用药物中治疗肝吸虫病，但由于被证实是一种强效光敏剂，可能引起严重的皮肤疾病，因此被撤市。它目前可用作抗扁形动物药物和抗真菌农药。它是一种芳基硫醚、有机氯杀虫剂、二氯苯、多酚、桥联二苯基杀菌剂和桥联二苯基抗真菌药物。 比硫酚曾作为多种外用药物的活性成分上市，但已被证实是一种强效光敏剂，可能导致严重的皮肤疾病。1967年10月24日，比硫酚药物产品的新药申请被撤销（参见1967年10月31日《联邦公报》（32 FR 15046））。 一种用于治疗吸虫和绦虫感染的卤代抗感染剂。 作用机制 比硫酚干扰蠕虫（目标物种）的神经肌肉生理，损害其卵的形成，并可能导致覆盖蠕虫的保护性角质层出现缺陷。在生化水平上，氧化磷酸化受到抑制，并且硫双酚分子可以螯合铁，从而使含铁酶系统失活。在目标物种中，体内用硫双酚治疗成虫可降低糖酵解和氧化代谢。具体而言，琥珀酸氧化受到抑制。虽然硫双酚的确切作用机制尚不清楚，但推测其作用机制可能依赖于酚羟基作为氢受体，这些氢原本会参与与琥珀酸氧化相关的反应。干扰这些反应或许会使吸虫缺乏维持生命所需的能量。 治疗用途 局部抗感染剂；抗扁形动物药物 硫双酚用于治疗肺吸虫病，剂量为30至50 mg/kg体重，隔日口服，共10至15次。在治疗肝吸虫病时，也使用了相同的剂量。在治疗肝片吸虫病时，也曾使用过硫双酚，剂量最高可达每日3克，隔日服用，共15次。在绦虫感染中，曾使用过最高剂量为60毫克/公斤体重的硫双酚，分两次服用，间隔约1小时。 肺部感染患者中，0.8%会发生脑部感染。在一组24例脑部感染患者中，硫双酚对所有患者均有效，能够清除痰液中的虫卵并终止铁锈痰的产生。然而，仅有9例患者服用该药后脑部症状得到有效控制，包括视力丧失、明显的脑膜炎以及1例硬膜内脓肿。 该药需与食物同服，以降低胃肠道症状的发生率和严重程度。 有关BITHIONOL（共16种）的更多治疗用途（完整）数据，请访问HSDB记录页面。 背景和治疗潜力：可溶性腺苷酸环化酶（sAC）是糖尿病、青光眼等疾病的潜在治疗靶点，也可作为男性避孕药。Bithionol是一种新型sAC抑制剂，它通过与生理激活剂（碳酸氢盐）结合的变构机制发挥作用。[2] 作用机制：Bithionol是一种强效的sAC特异性抑制剂，其作用机制主要为非竞争性变构。它与sAC独特的碳酸氢根结合位点（BBS）结合，诱导构象变化，从而破坏活性位点并阻碍催化。这是首个已知通过这种机制作用于该位点的sAC抑制剂。[2] 化学骨架和药物开发潜力：尽管比硫酚及其类似物六氯酚在有效浓度下具有多效性生物学效应（抗病毒、抗菌、抑制癌细胞生长）和细胞毒性，使其本身不适合作为药物，但它们的化学骨架、结合位点和抑制机制为开发更具特异性和更强效的sAC靶向治疗药物提供了宝贵的起点。[2] 与其他抑制剂的比较：比硫酚与BBS的结合深度比弱抑制剂DIDS更深。与之前描述的强效抑制剂 ASI-8（其作用范围从 BBS 延伸至底物结合位点）不同，Bithionol 主要占据调节位点，从而导致其独特的、主要为变构抑制的特性。[2] |
| 分子式 |
C12H6CL4O2S
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|---|---|
| 分子量 |
356.038
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| 精确质量 |
353.884
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| CAS号 |
97-18-7
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| 相关CAS号 |
Bithionol (sulfoxide);844-26-8
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| PubChem CID |
2406
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.8±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
444.7±45.0 °C at 760 mmHg
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| 熔点 |
188°C
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| 闪点 |
222.8±28.7 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.1 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.741
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| LogP |
5.51
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| tPSA |
65.76
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
19
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| 分子复杂度/Complexity |
282
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
JFIOVJDNOJYLKP-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C12H6Cl4O2S/c13-5-1-7(15)11(17)9(3-5)19-10-4-6(14)2-8(16)12(10)18/h1-4,17-18H
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| 化学名 |
2,4-dichloro-6-(3,5-dichloro-2-hydroxyphenyl)sulfanylphenol
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| 别名 |
Bithionol CP 3438 Bitin CP3438 Lorothidol CP-3438
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 33 mg/mL (~92.68 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.84 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.84 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.8087 mL | 14.0434 mL | 28.0867 mL | |
| 5 mM | 0.5617 mL | 2.8087 mL | 5.6173 mL | |
| 10 mM | 0.2809 mL | 1.4043 mL | 2.8087 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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