| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Neutral lipids and lipid droplets. BODIPY 493/503 methyl bromide is a lipophilic dye that partitions into neutral lipid compartments within cells, particularly lipid droplets. It does not have a specific protein target but rather accumulates in neutral lipid droplets based on its hydrophobicity. The “493/503” designation refers to its excitation/emission maxima. The methyl bromide group can be used to chemically conjugate the dye to other molecules, but in its native form, it is used as a direct stain for lipid droplets and neutral lipids. Because BODIPY 493/503 is less polar than other BODIPY dyes, it preferentially stains neutral lipids over polar lipids (such as membrane phospholipids). This makes it highly specific for lipid droplets, which are composed primarily of neutral lipids (triglycerides, cholesterol esters). The dye is used to visualize lipid droplet size, number, and distribution in cells, and to study lipid metabolism, obesity, fatty liver disease, and atherosclerosis. It is also used as a tracer for fatty acid uptake and metabolism, as a fluorescent fatty acid analog (the methyl bromide group may be replaced by a fatty acid chain, or the dye itself is used as a stand-in for a fatty acid due to its hydrophobic nature). In in vitro binding assays, the dye can be used to label isolated lipid droplets or synthetic lipid emulsions. It is also used in fluorescence-based assays to measure lipid droplet formation, lipolysis, and lipid exchange processes. The dye is cell-permeable and can be used for live-cell imaging as well as for fixed-cell staining.
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| 体外研究 (In Vitro) |
使用指南 1. BODIPY493/503 甲基溴工作液配制 1.1 配制储备液:将 1 mg BODIPY493/503 甲基溴加入 10 mM 无水 DMSO (382 μL) 中。 注意:为了配制 1-10 μM 的 BODIPY493/503 甲基溴工作液,建议将 BODIPY493/503 甲基溴储存液分装到 1.2 工作液中,而不是使用预先配制的无血清细胞培养基或 PBS。请根据实际情况调整 BODIPY493/503 甲基溴工作液的浓度。 2. 悬浮细胞染色 (2.1):离心细胞,加入 PBS,然后洗涤两次,每次 5 分钟。 2.2 当细胞密度为 1×10⁶/mL 时,加入 1 mL BODIPY493/503 甲基溴工作液,搅拌 5–30 分钟。2.3 以 400g 离心 3–4 分钟,弃去上清液。2.4 加入 PBS 后,用 PBS 洗涤细胞两次,每次 5 分钟。2.5 将细胞重悬于 1 mL PBS 或无血清培养基中,并使用流式细胞仪或荧光显微镜进行观察。3. 贴壁细胞染色:3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。3.2 用 100 μL 步骤 3.3 中的染料工作液完全覆盖细胞,轻轻摇晃,灭菌 5 至 30 分钟。 3.4 吸出染料工作液,用培养基冲洗两到三次,每次五分钟,然后使用流式细胞仪或荧光显微镜进行观察。储存条件:-20℃保存一年,避免阳光直射。注意事项:1. 请根据实际情况调整BODIPY493/503甲基溴化物工作液的浓度和左侧的时间间隔。2. 建议实验中包含急性对照。在进行任何后续测试之前,细胞需要用30 μM油酸载体处理8小时。3. 本产品不适用于临床诊断或治疗;仅供从事科学研究的专家使用。4. 操作时,请佩戴医用手套和实验服,以确保您的健康和安全。
在体外,BODIPY 493/503 甲基溴化物广泛用于细胞和组织中中性脂质和脂滴的特异性染色。在无血清培养基或 PBS 中,工作浓度为 1-10 uM 时,细胞可在 5-30 分钟内被明亮染色,呈现与脂滴相对应的点状图案。该染料对中性脂质具有高度特异性,对其他细胞膜的染色不明显,因此对比度高。它适用于活细胞和固定细胞成像(经温和甲醛固定后)。该染料可用于通过荧光显微镜(例如,每个细胞的积分荧光强度)或流式细胞术定量细胞脂质含量。它还可用于研究脂滴的动态变化,例如脂质自噬过程中脂滴的形成、融合、分裂和降解。该染料可与其他荧光标记物(例如,用于标记线粒体、内质网或溶酶体的标记物)联合使用,实现多色成像。在生化分析中,BODIPY 493/503 甲基溴可用于标记纯化的脂滴或脂蛋白颗粒,以进行体外结合或摄取研究。例如,该染料可掺入人工脂滴中(通过与甘油三酯和磷脂混合),然后用于研究脂滴与细胞或蛋白质的相互作用。该染料还可用作荧光探针,用于高通量筛选脂滴形成调节剂。它是研究脂质代谢紊乱的理想工具。溴甲基可用于将该染料与其他分子偶联,但大多数染色应用直接使用未修饰的染料。在体外,该染料的常用浓度为 1-10 uM,孵育时间为 5-30 分钟。对于固定样品,细胞通常在染色前或染色后用 4% 多聚甲醛固定。该染料与免疫荧光兼容,但应尽可能避免甲醇透化步骤,因为它可能会提取脂质并去除染料。对于活细胞成像,应在无血清培养基中使用该染料,因为血清中含有白蛋白和脂蛋白,它们可能会结合染料并将其从细胞中去除。可能需要针对每种细胞类型和条件通过实验确定最佳染色浓度。与其他BODIPY染料(例如不含甲基溴基团的BODIPY 493/503或尼罗红)相比,BODIPY 493/503甲基溴对中性脂质具有更高的特异性。其光谱特性(激发/发射波长=493/503 nm)非常适合GFP/FITC滤光片组。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在活体动物模型中,BODIPY 493/503 甲基溴可用于对小型透明动物模型(例如斑马鱼幼体)中的脂滴和脂质分布进行成像。该染料可添加到水族箱水中(1-10 uM),或显微注射到斑马鱼胚胎或幼体中。吸收后,染料会在脂滴中积聚,从而实现对脂质代谢、卵黄吸收以及药物或基因操作对脂质稳态影响的活体成像。在小鼠模型中,该染料可通过全身给药(静脉或腹腔注射)标记各种组织中的脂滴,但其绿色荧光限制了组织穿透性。局部应用或注射到特定组织(例如皮下脂肪、肿瘤)可用于组织切片的离体成像。该染料还可用于富含脂质的组织(例如肝脏、脂肪组织和动脉粥样硬化斑块)的离体成像。全身给药后,该染料可能迅速从血液中清除,并被肝细胞和脂肪细胞吸收。由于该染料主要用于体外或离体研究,因此详细的体内活性数据有限。目前尚无获批的临床应用。
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| 酶活实验 |
对于无细胞脂质结合实验,可使用BODIPY 493/503甲基溴化物来评估其与分离的脂滴或人工脂质乳剂的相互作用。脂滴可通过超速离心从细胞(例如脂肪细胞或肝细胞)中分离。或者,也可将脂质混合物(例如三油酸甘油酯或甘油三酯)与表面活性剂(例如磷脂酰胆碱)在缓冲液中乳化,制备合成脂滴。将染料溶解于DMSO中,配制成1-10 mM的储备液。将分离的脂滴或合成脂质乳剂用PBS稀释(脂质浓度为0.1-1 mg/mL)。向脂质乳剂中加入不同浓度(0.1-10 uM)的染料。混合物在室温下孵育10-30分钟。使用荧光计或酶标仪测量荧光强度(激发波长488 nm,发射波长510-530 nm)。荧光强度增加(相对于不含脂质的缓冲液中的染料)表明染料与脂质结合。结合常数 (Kd) 可通过滴定逐渐增加的脂质浓度并拟合荧光强度变化来估算。或者,分配系数 (logP) 可通过测量染料在水性缓冲液和有机溶剂(例如辛醇)或脂质相之间的分布来确定。该测定方法可提供探针的亲脂性及其对中性脂质相对于其他脂质类别的特异性信息。
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| 细胞实验 |
对于脂滴的细胞染色,通常采用以下方案。配制浓度为 1-10 mM 的 BODIPY 493/503 甲基溴化物 DMSO 储备液。将储备液用预热的无血清细胞培养基或 PBS 稀释至终浓度为 1-10 uM(根据具体应用调整浓度)。对于贴壁细胞:将细胞培养于盖玻片或 96 孔板中,直至细胞汇合度达到 70-80%。移除培养基,用 PBS 洗涤细胞一次。加入染料工作液(24 孔板每孔 100-200 uL,或足以覆盖细胞的量),避光于 37℃ 或室温孵育 5-30 分钟。孵育后,移除染料溶液,用 PBS 洗涤细胞 2-3 次(每次 5 分钟)。对于活细胞成像,加入新鲜的无酚红培养基或PBS,并立即使用荧光显微镜进行成像,激发波长为488 nm,发射波长为505-530 nm(FITC/GFP滤光片组)。对于固定细胞成像,染色和洗涤后,细胞可用4%多聚甲醛在室温下固定10-15分钟,洗涤后用抗褪色封片剂封片(可选配DAPI用于细胞核复染)。该染料与甲醛固定兼容,但应避免使用甲醇固定,因为甲醇可能会提取脂质。对于悬浮细胞:通过离心(300-400 × g,3-5分钟)收集细胞,用PBS洗涤一次,重悬于染料工作液中(1×10⁶个细胞/mL),并在室温下避光孵育5-30分钟。用PBS洗涤2-3次,重悬于PBS或无血清培养基中,然后进行流式细胞术分析(488 nm激光器,530/30 nm发射滤光片),或制备细胞涂片用于显微镜观察。对于组织切片:将冰冻切片(10-20 um)用PBS洗涤,在室温下用染料工作液(1-10 uM,溶于PBS)孵育15-30分钟,再用PBS洗涤,最后用抗褪色剂封片。对于石蜡包埋切片,脱蜡、复水后染色(但处理过程中的脂质提取可能会降低信号强度;脂质染色最好使用冰冻切片)。染料应以粉末形式避光保存于-20℃,DMSO储备液应在-20℃下保存长达6个月。避免反复冻融。不同细胞类型的染色浓度和时间可能需要优化。阳性对照:用油酸(100-300 uM)处理细胞以诱导脂滴积累。阴性对照:用脂肪酶抑制剂处理细胞或在无血清条件下培养以最大程度减少脂滴。本产品仅供研究使用,不得用于临床或诊断用途。
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| 动物实验 |
对于斑马鱼体内脂滴成像,将BODIPY 493/503甲基溴化物储备液(10 mM DMSO溶液)用胚胎水(或E3培养基)稀释至终浓度为1-10 μM(终DMSO浓度≤0.1%)。将斑马鱼幼体(例如,受精后3-7天,dpf)转移至含有染料溶液的6孔板或小培养皿中。幼体在28℃下避光孵育30-60分钟。染色后,用新鲜的E3培养基洗涤幼体3次(每次5分钟),然后用0.016%三卡因(MS-222)麻醉进行成像。将幼虫置于载玻片上,滴加一滴甲基纤维素以固定幼虫,然后使用配备 GFP/FITC 滤光片组(激发波长 488 nm,发射波长 515-530 nm)的荧光立体显微镜或共聚焦显微镜采集图像。对于小鼠研究,BODIPY 493/503 甲基溴化物可溶解于含 <10% DMSO 和 1% Tween-80 的无菌 PBS 缓冲液中,浓度为 0.5-2 mg/mL。腹腔注射时,小鼠接受 100-200 μL 溶液(剂量 2-10 mg/kg)。尾静脉注射时,可给予相同剂量。小鼠在染料循环 1-6 小时后处死。采集目标组织(例如肝脏、脂肪组织、肾脏),用4%多聚甲醛固定,用30%蔗糖进行低温保护,然后用OCT包埋剂冷冻,用于冰冻切片。将组织切片(10-20 μm)用DAPI染色,并通过荧光显微镜成像。对于全身成像(使用小鼠成像系统),可以使用绿色激发/发射光,但由于背景较高且组织穿透性差,因此并非最佳选择;建议在小鼠全身成像中使用红色/近红外染料。该化合物目前未用于人体临床成像。该染料仅供研究使用,必须遵守所有适用的动物护理和使用指南。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
由于 BODIPY 493/503 甲基溴(分子量 341.00,logP ~5)主要用作研究用染色剂,其药代动力学数据有限。基于其高亲脂性,该染料静脉注射后可能迅速从循环系统中清除(半衰期为数分钟),并会被肝脏、脂肪组织和其他富含脂质的组织吸收。它可能储存在脂滴中,并在数天至数周内缓慢消除。该染料的代谢并不显著,但甲基溴基团可能易发生亲核取代反应,从而与内源性硫醇结合。然而,出于染色目的,该染料通常用作直接染色剂,因此通常不需要药代动力学数据。研究人员应注意,该染料不适用于人体全身给药,注射后可能在组织中蓄积。为了进行准确的定量生物分布研究,可使用有机溶剂(例如甲醇/氯仿)从组织中提取该染料,并通过高效液相色谱-荧光检测法进行分析。由于缺乏已发表的药代动力学数据,建议用户在必要时自行开展研究。该染料的荧光在黑暗中稳定,但在长时间光照下可能发生光漂白。进行活细胞成像时,应尽量减少光照,以避免光毒性和光漂白。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
BODIPY 493/503 甲基溴的毒理学数据有限。体外实验表明,在典型工作浓度(1-10 μM)和短时间暴露(5-60 分钟)内,该染料通常无毒,这已通过细胞活力检测(MTT、LDH)得到证实。然而,在较高浓度(>50 μM)或长时间暴露(>24 小时)下,可能会观察到一定的细胞毒性,这可能是由于溴甲基(一种烷基化剂)对细胞蛋白和 DNA 的影响所致。应谨慎操作该染料。甲基溴基团具有潜在的遗传毒性,因为它能够烷基化 DNA。因此,应采取适当的安全措施:佩戴手套、实验服和护目镜;避免吸入粉尘或气溶胶;在处理粉末或配制储备液时,应在通风良好的区域或通风橱内操作;避免皮肤接触。该染料应储存在 -20℃ 的环境中,避光防潮。该化合物仅供研究使用,不可用于人体诊断或治疗。操作时请穿戴实验服和一次性手套,确保个人安全。请根据当地法规处理废弃物。目前尚无慢性毒性或致癌性数据。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
BODIPY 493/503 甲基溴是一种研究级荧光染料,目前尚无获批的临床应用。它以固体粉末形式供应(颜色:橙色至红色),纯度≥97%(通常为97-98%)。分子量为341.00,分子式为C14H16BBrF2N2。该染料可溶于DMSO(10-20 mg/mL)和其他有机溶剂(DMF、乙醇、甲醇),应以粉末形式在-20℃避光保存,最长可达3年。DMSO储备液(1-10 mM)应在-20℃避光保存,最长可达6个月;避免反复冻融。该染料是一种高特异性、高亮度的脂滴染色剂,广泛应用于细胞生物学中,用于研究脂质代谢、肥胖、脂肪肝、糖尿病和癌症生物学。其激发/发射波长最大值分别为 493/503 nm,发出明亮的绿色荧光,可与红色或远红外荧光染料区分开来。甲基溴基团可作为化学修饰的潜在位点,但大多数染色应用中,直接使用未修饰的染料即可。该染料也称为 BODIPY 493/503 甲基溴,其同义词包括 8-溴甲基-4,4-二氟-1,3,5,7-四甲基-4-硼-3a,4a-二氮杂-s-茚。本品仅供专业人员进行科学研究,不得用于临床、食品或药品用途。为获得最佳效果,染料在处理和储存过程中应避光保存。有关具体的实验细节,请务必查阅产品数据表和相关文献。
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| 分子式 |
C14H16BN2F2BR
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|---|---|
| 分子量 |
341.00204
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| 精确质量 |
340.055
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| CAS号 |
216434-81-0
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| PubChem CID |
71774308
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| 外观&性状 |
Brown to reddish brown solid powder
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| LogP |
3.201
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| tPSA |
13.32
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
1
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| 重原子数目 |
20
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| 分子复杂度/Complexity |
525
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
[B-]1(N2C(=CC(=C2C(=C3[N+]1=C(C=C3C)C)CBr)C)C)(F)F
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| InChi Key |
JLSHPOSUMKVMAP-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C14H16BBrF2N2/c1-8-5-10(3)19-13(8)12(7-16)14-9(2)6-11(4)20(14)15(19,17)18/h5-6H,7H2,1-4H3
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| 化学名 |
8-(bromomethyl)-2,2-difluoro-4,6,10,12-tetramethyl-3-aza-1-azonia-2-boranuidatricyclo[7.3.0.03,7]dodeca-1(12),4,6,8,10-pentaene
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~10 mg/mL (~29.33 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 1 mg/mL (2.93 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 悬浮液;超声助溶。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 10.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9326 mL | 14.6628 mL | 29.3255 mL | |
| 5 mM | 0.5865 mL | 2.9326 mL | 5.8651 mL | |
| 10 mM | 0.2933 mL | 1.4663 mL | 2.9326 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。