| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
BPO-27 is a racemic inhibitor of the Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator (CFTR) chloride channel. The activity resides in the R-enantiomer (IC50 ≈ 4 nM for chloride conductance inhibition), while the S-enantiomer is inactive (no significant inhibition at 100 nM). The racemic mixture (±)-BPO-27 was previously reported to have an IC50 ≈ 8 nM. [1]
BPO-27 is an inhibitor of the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) chloride channel. The activity resides in the (R)-enantiomer, which inhibits CFTR chloride current. The IC50 for (R)-BPO-27 was approximately 0.36 nM when applied extracellularly in whole-cell patch-clamp recordings, and approximately 0.53 nM when applied to the cytosolic side in inside-out membrane patch recordings. The (S)-enantiomer is inactive (no significant inhibition at 1 μM). [2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
Benzopyrimidopyrroloxazinedione BPO-27 是 PPQ-102 的类似物，可抑制 CFTR，IC50 为 8 nM。 BPO-27 的 R 对映体抑制 CFTR 氯化物电导，IC50 为 4 nM，而 S 对映体是惰性的。肝微粒体的体外代谢稳定性表明，两种对映体都很稳定，4小时内代谢率低于5%[1]。 (R)-BPO-27 结合在常见的 ATP 结合位点。全细胞膜片钳研究证明了线性 CFTR 电流的电压无关 (R)-BPO-27 阻断机制。当 (R)-BPO-27 浓度使 CFTR 氯化物电流减慢 50% 时，CFTR ATP 激活的 EC50 从 0.27 mM 增加至 1.77 mM [2]。
BPO-27 的R-对映异构体（(+)-2，在生理缓冲液中转化为(R)-1）在使用表达人CFTR的FRT细胞进行的短路电流实验中，在100 nM浓度下能完全抑制CFTR氯离子传导，而S-对映异构体((-)-2)在相同浓度下未显示显著抑制。 [1] 活性R-对映异构体的浓度依赖性实验得出抑制CFTR氯离子电流的IC50值约为4 nM。 [1] 先前报道的外消旋混合物 (±)-BPO-27（化合物1）在常染色体显性多囊肾病（ADPKD）的胚胎肾脏培养模型中显示出可预防和逆转肾囊肿形成。 [1] 在使用表达人野生型CFTR的CHO-K1细胞进行的全细胞膜片钳记录中，(R)-BPO-27 在所有测试电压下均以浓度依赖性的方式抑制福司柯林激活的CFTR氯离子电流，在1 μM浓度下显示出近乎完全的抑制。在(R)-BPO-27存在下，电流-电压关系保持线性，表明这是一种电压非依赖性的阻断机制。相反，1 μM的(S)-BPO-27对电流没有影响。 [2] 在使用HEK-293T细胞进行的全细胞膜片钳记录中，(R)-BPO-27 抑制CFTR的IC50约为0.36 nM。当应用于游离的膜内面向外式膜片的细胞质侧时，IC50约为0.53 nM，这表明该化合物从细胞质侧发挥作用且膜通透性低。 [2] 在HEK-293T细胞的膜内面向外式膜片单通道记录中，5 nM的(R)-BPO-27 将通道开放概率（NPo）从0.29显著降低至0.08，略微降低了平均通道开放时间，并大幅增加了平均通道关闭时间。单通道电导未受影响。相同浓度的(S)-BPO-27对这些参数均无影响。 [2] 在宏观膜内面向外式膜片记录中，0.5 nM的(R)-BPO-27（在3 mM ATP存在下可抑制约50%的电流）将ATP激活CFTR的EC50从0.26 mM显著增加至1.77 mM。相同浓度的(S)-BPO-27不影响ATP的EC50。作用于与ATP结合域不同位点的噻唑烷酮类抑制剂CFTRinh-172（0.5 μM）也未改变ATP的EC50。 [2] 在存在不可水解的ATP类似物ATPγS（1 mM）的情况下，ATP激活CFTR的EC50增加。用0.5 nM (R)-BPO-27处理后，该值进一步增加，表明(R)-BPO-27与ATPγS在CFTR的ATP结合位点存在竞争。 [2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
小鼠腹腔推注后，血清 (R)-1 在 t1/2 = 1.6 小时内衰减，为肾脏提供持续的治疗浓度 [1]。
|
| 细胞实验 |
使用稳定表达人野生型CFTR的 Fischer Rat Thyroid (FRT) 上皮细胞，通过短路电流（Isc）实验测量CFTR抑制效力。将细胞培养在可渗透性支撑膜上。建立跨上皮氯离子梯度。使用两性霉素B通透基底侧膜，以允许由顶端CFTR通道驱动的电流流动。通过向基底侧添加福司柯林（10 μM）以增加细胞内cAMP水平来激活CFTR。在建立稳定的福司柯林激活电流后，将测试化合物（BPO-27的对映异构体，以其2-丙胺盐形式，即化合物2）添加到顶端侧。测量与CFTR氯离子传导成比例的短路电流的抑制情况。通过添加递增浓度的活性(+)-2对映体来生成剂量反应曲线。 [1]
对于全细胞膜片钳记录，使用瞬时表达人野生型CFTR的CHO-K1或HEK-293T细胞。浴液含有N-甲基-D-葡糖胺氯化物、氯化钙、氯化镁、葡萄糖和HEPES（pH 7.4）。微电极（细胞内）液含有N-甲基-D-葡糖胺氯化物、EGTA、氯化镁、Tris-ATP和HEPES（pH 7.2）。在建立全细胞构型后，将细胞与(R)-或(S)-BPO-27孵育5分钟。然后在抑制剂持续存在的情况下，向浴液中添加10 μM福司柯林以激活CFTR。通过从0 mV的保持电位向+80至-80 mV之间的电位施加20 mV步长的电压脉冲来激发全细胞电流。记录、数字化和过滤电流。 [2] 对于单通道和宏观膜内面向外式膜片记录，使用共转染CFTR和绿色荧光蛋白的HEK-293T细胞。游离出膜内面向外式膜片。微电极（细胞外）液含有HCl、N-甲基-D-葡糖胺、HEPES、氯化镁和EGTA（pH 7.2）。浴液（细胞内）含有HCl、N-甲基-D-葡糖胺、HEPES、氯化镁、氯化钙和葡萄糖（pH 7.4），并补充有3 mM MgATP和蛋白激酶A催化亚基（10 U/ml）以激活CFTR。对于抑制剂研究，将(R)-或(S)-BPO-27添加到浴液中。在-60 mV的保持电位下记录单通道活动。对电流进行过滤和采样。对于ATP竞争研究，在存在或不存在抑制剂的情况下，测量膜内面向外式膜片在不同ATP浓度下的宏观电流。 [2] |
| 动物实验 |
在小鼠体内评估了活性对映体 (R)-1 的体内药代动力学。(R)-1 配制于含有 5% DMSO、2.5% Tween-80 和 2.5% PEG400 的水性溶剂中。小鼠接受单次腹腔注射 (ip) (R)-1，剂量为 10 mg/kg 体重。在注射后特定时间点采集血液和肾脏组织进行分析。[1]
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
使用添加了 NADPH 的大鼠肝微粒体评估了 BPO-27 的两种对映异构体（化合物 (R)-1 和 (S)-1）的体外代谢稳定性。化合物与微粒体孵育后，通过液相色谱-质谱联用 (LC/MS) 法定量分析未代谢的母体化合物的含量随时间的变化。两种对映异构体均表现出较高的稳定性，4 小时内代谢率低于 5%。[1] 在小鼠腹腔单次注射 (R)-1 (10 mg/kg) 后，采用 LC/MS 法测定血清浓度。血清中 (R)-1 的消失呈衰减趋势，估计半衰期 (t1/2) 约为 1.6 小时。[1] 在注射后 4 小时测定肾脏匀浆中 (R)-1 的浓度，结果为 0.6 ± 0.3 μM（平均值 ± 标准误差，n=3 只小鼠）。 [1]
采用生物测定法区分活性(R)-1和非活性(S)-1，在给药后4小时采集的血清样本中未检测到对映异构体之间的可测量相互转化（消旋化）。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
BPO-27 是一种苯并嘧啶并吡咯并噁嗪二酮 (BPO) 类化合物，是早期 CFTR 抑制剂 PPQ-102 的类似物。[1]
外消旋体 BPO-27（化合物 1）最初以 R 和 S 对映异构体 50:50 的混合物形式合成并进行了测试。[1] 氢氘交换实验表明，BPO-27 中的手性中心在生理条件下构型稳定，手性碳上的质子没有丢失。[1] 通过对非活性对映异构体的乙酯衍生物 (S)-3 进行 X 射线晶体衍射分析，确定了其绝对构型，证实活性对映异构体具有 R 构型。 [1] (R)-BPO-27 的作用靶点很可能是 CFTR 本身，因为它能抑制多种激动剂激活的 CFTR 氯离子电流。[1] CFTR 抑制剂（如 BPO-27）的潜在治疗应用包括常染色体显性多囊肾病 (ADPKD) 和分泌性腹泻。[1] BPO-27 是一种苯并嘧啶并吡咯并噁嗪二酮类 CFTR 抑制剂。[2] 活性对映体是 (R)-BPO-27，而 (S)-对映体则无活性。[2] 使用 CFTR 闭合构象的同源模型进行计算机对接，结果表明存在五个潜在的结合位点。评分函数和立体选择性分析表明，(R)-BPO-27 最可能的结合位点是核苷酸结合域 (NBD) 1 和 NBD2 界面处的典型 ATP 结合位点（标记为 C 位点）。[2] 对 (R)- 和 (S)-BPO-27 对接至典型 ATP 结合位点进行了分子动力学模拟。计算得到的 (R)-对映体的结合能 (ΔG_binding) 显著低于 (S)-对映体（更有利），这与实验活性数据一致。[2] (R)-BPO-27 的作用机制可能是与 CFTR 的典型 ATP 结合位点上的 ATP 竞争性抑制，从而干扰 ATP 依赖性通道门控。这种机制与其他类型的CFTR抑制剂（例如噻唑烷酮类（如CFTRinh-172）和甘氨酸酰肼类（如GlyH-101））不同。[2] CFTR抑制剂（如BPO-27）的潜在治疗应用包括分泌性腹泻和常染色体显性多囊肾病（ADPKD）。[2] |
| 分子式 |
C26H18BRN3O6
|
|---|---|
| 分子量 |
548.3416
|
| 精确质量 |
547.037
|
| CAS号 |
1314873-02-3
|
| 相关CAS号 |
(R)-BPO-27;1415390-47-4
|
| PubChem CID |
53387352
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| LogP |
3.8
|
| tPSA |
105
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
36
|
| 分子复杂度/Complexity |
914
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
BrC1=C([H])C([H])=C(C2([H])C3=C4C(C(N(C([H])([H])[H])C(N4C([H])([H])[H])=O)=O)=C(C4C([H])=C([H])C([H])=C([H])C=4[H])N3C3C([H])=C(C(=O)O[H])C([H])=C([H])C=3O2)O1
|
| InChi Key |
GNHIGSRGYXEQEP-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C26H18BrN3O6/c1-28-21-19(24(31)29(2)26(28)34)20(13-6-4-3-5-7-13)30-15-12-14(25(32)33)8-9-16(15)36-23(22(21)30)17-10-11-18(27)35-17/h3-12,23H,1-2H3,(H,32,33)
|
| 化学名 |
9-(5-bromofuran-2-yl)-12,14-dimethyl-13,15-dioxo-17-phenyl-8-oxa-1,12,14-triazatetracyclo[8.7.0.02,7.011,16]heptadeca-2(7),3,5,10,16-pentaene-4-carboxylic acid
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~16.67 mg/mL (~30.40 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 1.67 mg/mL (3.05 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 16.7 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1.67 mg/mL (3.05 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 16.7 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8237 mL | 9.1184 mL | 18.2369 mL | |
| 5 mM | 0.3647 mL | 1.8237 mL | 3.6474 mL | |
| 10 mM | 0.1824 mL | 0.9118 mL | 1.8237 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
