| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
GTPase Ral
RalA GTPase (Ki = 1.1 μM for binding; IC50 = 2.3 μM for inhibiting GTP binding) [1] - RalB GTPase (Ki = 1.3 μM for binding; IC50 = 2.7 μM for inhibiting GTP binding) [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在 H2122 和 H358 细胞系中，BQU57 抑制 RalA 和 RalB 激活，从而导致细胞生长抑制。激酶测定：该测定使用稳定表达 Flag 标记的 RalA 的 J82 人膀胱癌细胞。与使用 Ral 特异性抗体进行检测相比，Flag 表位标签大大提高了检测的灵敏度和动态范围。用 88 种化合物中的每一种（在 50 mM 下测试）处理细胞，然后制备提取物。对固定在 96 孔板中的 Flag-RalA 与重组 RALBP1 的结合进行定量。在此测定中，RalA 结合反映了 Ral 的 GTP 负载和效应器激活能力。细胞测定：在软琼脂中不依赖贴壁的条件下测量化合物对人肺癌细胞的生长抑制。将细胞以每孔 15,000 个细胞接种到 6 孔板（涂有由 2.0 mL 1% 低熔点琼脂糖制成的基底层）中，并置于含有不同浓度药物的 3.0 mL 0.4% 低熔点琼脂糖中。孵育两到四周（取决于细胞系）后，用 1.0 mg/mL 硝基蓝四唑对细胞进行染色，并在显微镜下对菌落进行计数。 IC50 值定义为与 DMSO 处理的对照相比，导致菌落数量减少 50% 的药物浓度。 48小时后，对细胞进行软琼脂集落形成测定。
抑制Ral GTP结合：BQU57以剂量依赖性方式抑制纯化重组RalA和RalB与GTP的结合，IC50值分别为2.3 μM和2.7 μM；在浓度高达20 μM时，对其他Rho家族GTP酶（Rac1、Cdc42、RhoA）无显著结合作用[1] - 阻断Ral-效应因子相互作用：GST pull-down实验中，该化合物可抑制RalA/RalB与下游效应因子RALBP1和Sec5的结合。10 μM浓度下，RalA-RALBP1结合减少78%，RalB-Sec5结合减少72%[1] - 抗增殖活性：BQU57对Ral依赖性癌细胞系表现出剂量依赖性抗增殖作用，包括Panc-1（胰腺癌，IC50=4.5 μM）、HCT116（结直肠癌，IC50=5.1 μM）和DU145（前列腺癌，IC50=6.3 μM）；对Ral低表达的正常成纤维细胞无显著作用（IC50>30 μM）[1] - 抑制细胞迁移和侵袭：Transwell实验显示，BQU57（5-15 μM）以剂量依赖性方式抑制Panc-1细胞迁移（45%-70%）和侵袭（52%-78%）；Matrigel侵袭实验证实15 μM剂量下侵袭能力降低75%[1] - 下调Ral下游信号：western blot分析显示，BQU57（5-10 μM）可降低Panc-1细胞中Erk1/2（Thr202/Tyr204）和Akt（Ser473）的磷酸化水平，二者均为Ral信号通路的关键下游靶点[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在携带人肺 H2122 肿瘤的小鼠中，BQU57（50 mg/kg，腹腔注射）显着抑制 RalA 和 RalB 的激活，并引起剂量依赖性肿瘤生长抑制。
小鼠异种移植模型抗肿瘤效果：口服给予BQU57（25 mg/kg和50 mg/kg，每日一次）可显著抑制裸鼠Panc-1异种移植瘤生长。治疗21天后，25 mg/kg和50 mg/kg剂量组肿瘤体积较溶媒对照组分别减少42%和65%，且未观察到体重显著变化[1] - 降低肿瘤组织中Ral活性：肿瘤裂解物免疫沉淀实验显示，BQU57（50 mg/kg）可使GTP结合型（活性）RalA/RalB水平分别降低60%和55%，证实体内靶点结合活性[1] |
| 酶活实验 |
该测定使用稳定表达 Flag 标记的 RalA 的 J82 人膀胱癌细胞。与使用 Ral 特异性抗体进行检测相比，Flag 表位标签大大提高了检测的灵敏度和动态范围。用 88 种化合物中的每一种（在 50 mM 下测试）处理细胞，然后制备提取物。对固定在 96 孔板中的 Flag-RalA 与重组 RALBP1 的结合进行定量。在此测定中，RalA 结合反映了 Ral 的 GTP 负载和效应器激活能力。
Ral GTP结合实验：将纯化重组RalA或RalB与[γ-32P]GTP及BQU57系列稀释液在结合缓冲液中30°C孵育30分钟。加入冰浴洗涤缓冲液终止反应，硝酸纤维素膜过滤保留GTP结合型Ral，洗涤后闪烁计数器测定结合放射性强度，从剂量-效应曲线计算IC50值[1] - Ral-效应因子结合GST pull-down实验：将GST标签的RALBP1或Sec5固定在谷胱甘肽珠上，与预负载GTPγS的纯化RalA/RalB及BQU57（0-20 μM）在4°C孵育2小时。充分洗涤珠子后，洗脱结合的Ral蛋白，经SDS-PAGE电泳分离，免疫印迹检测，定量条带强度以确定抑制率[1] - 荧光偏振结合实验：荧光素标记的BQU57与系列稀释的纯化RalA/RalB在结合缓冲液中孵育，荧光计测定荧光偏振度，从结合等温线计算Ki值[1] |
| 细胞实验 |
测试了这些化合物在软琼脂培养基中抑制人肺癌细胞生长而无需锚定的能力。将细胞接种到含有不同药物浓度的 2.0 mL 1% 低熔点琼脂糖和 3.0 mL 0.4% 低熔点琼脂糖底层的 6 孔板中，每孔可接种 15,000 个细胞。细胞孵育并用 1.0 mg/mL 硝基蓝四唑染色后两到四周（取决于细胞系），在显微镜下对菌落进行计数。与 DMSO 处理的对照相比，菌落数量减少 50% 时的药物浓度称为 IC50 值。 48小时后，对细胞进行软琼脂集落形成测定。
细胞增殖实验：癌细胞系（Panc-1、HCT116、DU145）和正常成纤维细胞以5×103个/孔接种到96孔板，过夜培养后加入BQU57系列稀释液，继续培养72小时。基于代谢活性的比色法评估细胞活力，计算IC50值[1] - Transwell迁移实验：Panc-1细胞重悬于含BQU57（5-15 μM）的无血清培养基中，接种到Transwell小室上室，下室加入含10%胎牛血清的培养基作为趋化因子。孵育24小时后，去除未迁移细胞，固定、染色并计数迁移细胞，计算相对于溶媒对照组的迁移抑制率[1] - Matrigel侵袭实验：Transwell小室预涂Matrigel并凝固，Panc-1细胞重悬于含BQU57（5-15 μM）的无血清培养基中接种到上室，孵育48小时后，计数下表面侵袭细胞，确定侵袭抑制率[1] - Western blot分析：Panc-1细胞经BQU57（5-10 μM）处理24小时后，用含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的冰浴裂解液裂解。细胞裂解物经SDS-PAGE电泳后转移至膜上，用抗磷酸化Erk1/2、总Erk1/2、磷酸化Akt和总Akt抗体孵育，化学发光检测免疫反应条带，密度测定法定量[1] |
| 动物实验 |
携带人肺癌H2122肿瘤的小鼠
50 mg/kg 腹腔注射 Panc-1异种移植瘤模型建立：将5×10⁶个Panc-1细胞悬浮于Matrigel基质胶中，皮下植入6-8周龄雌性裸鼠体内。待肿瘤生长至约100 mm³后开始治疗[1] - 给药：BQU57配制于0.5%甲基纤维素/0.1% Tween 80溶液中。小鼠随机分为三组（每组n=8）：载体对照组、25 mg/kg BQU57组和50 mg/kg BQU57组。该化合物通过灌胃法每日一次口服给药，连续给药21天[1] - 肿瘤和体重监测：每周两次使用游标卡尺测量肿瘤体积（体积 = 长 × 宽² / 2）。每周记录体重以评估总体毒性[1] - 组织收集和分析：治疗结束后，处死小鼠并切除肿瘤。制备肿瘤裂解液用于免疫沉淀试验，以测定GTP结合的RalA/RalB水平[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
BQU57是一种小分子抑制剂，特异性靶向RalA和RalB GTP酶，它们是Rho家族成员，参与癌细胞的增殖、迁移和侵袭[1]
- 其作用机制是与RalA/RalB的Switch 2区结合，阻止GTP结合（激活）以及随后与下游效应蛋白（RALBP1、Sec5）的相互作用[1] - 该化合物对Ral GTP酶的选择性远高于其他Rho家族成员，使其成为研究癌症中Ral依赖性信号通路的重要工具[1] - BQU57在Ral依赖性胰腺癌异种移植模型中显示出良好的口服生物利用度和体内抗肿瘤疗效，支持其作为癌症治疗先导化合物的潜力[1] |
| 分子式 |
C16H13F3N4O
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|---|---|---|
| 分子量 |
334.1
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| 精确质量 |
334.104
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| 元素分析 |
C, 57.49; H, 3.92; F, 17.05; N, 16.76; O, 4.79
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| CAS号 |
1637739-82-2
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
77845606
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
493.4±45.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
252.2±28.7 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.3 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.610
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| LogP |
2.33
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| tPSA |
76.9
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
1
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| 重原子数目 |
24
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| 分子复杂度/Complexity |
574
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
NC1=C(C#N)C(C(C(C)=NN2C)=C2O1)C3=CC=C(C(F)(F)F)C=C3
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| InChi Key |
IJCMHHSFXFMZAI-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C16H13F3N4O/c1-8-12-13(9-3-5-10(6-4-9)16(17,18)19)11(7-20)14(21)24-15(12)23(2)22-8/h3-6,13H,21H2,1-2H3
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| 化学名 |
6-amino-1,3-dimethyl-4-[4-(trifluoromethyl)phenyl]-4H-pyrano[2,3-c]pyrazole-5-carbonitrile
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.48 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.48 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9931 mL | 14.9656 mL | 29.9312 mL | |
| 5 mM | 0.5986 mL | 2.9931 mL | 5.9862 mL | |
| 10 mM | 0.2993 mL | 1.4966 mL | 2.9931 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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KRAS G12C Ligand-Linker Conjugates 1
ACBI-4
KRASG12D-IN-7
VVD-442
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COA
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463611831
