Motilin Receptor ( pEC50 = 7.9 )
Motilin receptor (GPR38), a G protein-coupled receptor found on smooth muscle cells and enteric neurons in the stomach and duodenum. In vitro studies have demonstrated that camicinal selectively activates the human motilin receptor with a pEC50 of 7.9, which is comparable to erythromycin's pEC50 of 7.3. The compound shows no significant activity at a wide range of other receptors, including the structurally related ghrelin receptor (pEC50 < 6.0), demonstrating excellent selectivity for the motilin receptor over closely related GPCR targets.

盐酸卡米西纳尔（GSK962040，又名盐酸卡米西纳尔）对胃饥饿素及其他受体、离子通道和酶的影响可忽略不计。当以 300 nmol L⁻¹ 至 10 μmol L⁻¹ 的浓度给予兔胃窦胆碱能介导的收缩幅度时，收缩幅度延长，并在 3 μmol L⁻¹ 时达到最大值 248 ± 47%。在样本中，胃动素、红霉素和盐酸卡米西纳尔（GSK962040）的浓度分别为 10.4±0.01 (n=770)、7.3±0.29 (n=4) 和 7.9±0.09 (n=17) [1]。犬胃动素受体的激活是由卡米西纳盐酸盐（GSK962040 盐酸盐）引起的（pEC50 5.79；相对于 [Nle13]-胃动素的内在活性为 0.72）[2]。由于其对 CYP3A4 的初始 IC50 值远大于我们推荐的阈值 10 μM [3]，因此我们优先选择卡米西纳盐酸盐（GSK962040 盐酸盐）。
卡米西纳在体外对人胃动素受体表现出强效激动活性，pEC50 为 7.9，与天然配体胃动素和大环内酯类抗生素红霉素（pEC50 7.3）相当。胃肠道平滑肌细胞上的胃动素受体激活后，会引发一系列细胞内信号传导事件，最终导致肌肉收缩。这一过程主要通过相关G蛋白的Gαq亚基介导，Gαq亚基刺激磷脂酶C (PLC) 将PIP2水解为IP3和DAG，最终导致平滑肌收缩。该化合物在低剂量下即可激活胃窦的持久性胆碱能收缩，且疗效优于现有治疗方案。

卡米西纳（GSK962040）（5 mg 游离碱·kg⁻¹）给药两小时后，粪便总重量显著增加（21.2 ± 4.5 g；P < 0.05）[1]。卡米西纳（GSK962040）可使平均血浆浓度 >1.14 μmol L⁻¹，从而引起剂量相关的节律性收缩，3 mg kg⁻¹ 和 6 mg kg⁻¹ 剂量组的收缩持续时间分别为 48 分钟和 173 分钟。当卡米西纳（GSK962040）的作用消退后，移行性运动复合体（MMC）活动恢复。3 mg kg⁻¹ 剂量的卡米西纳（GSK962040）对移行性运动复合体的恢复无影响；然而，在 6 mg kg⁻¹ 剂量下，MMC 在给药后 253 分钟恢复，而生理盐水组为 101 分钟（每组 n = 5）[2]。卡米西纳尔 (GSK962040) 的口服生物利用度 (Fpo) 为 48 (13%)。与短期效应相比，卡米西纳尔 (GSK962040) 表现出长期效应 (T1/2) 为 46.9 (3 μM 时为 5.0 分钟) [Nle13]。胃动素 (T1/2) 为 11.4 (0.3 μM 时为 1.5 分钟) [3]。化合物卡米西纳尔 (GSK962040) 在胃底和小肠中的活性较低，但可显著增强胃窦的胆碱能活性 [4]。体内实验表明，卡米西纳尔可激活胃和上段小肠中的胃动素受体，刺激协调的胃收缩并加速胃排空。在一项针对机械通气且无法耐受喂养的危重患者的随机、双盲、安慰剂对照研究中，单次肠内给予 50 mg 卡米西纳尔显示出加速胃排空的趋势（调整后的几何平均值：治疗前 BT1/2 为 117 分钟，治疗后为 76 分钟；95% CI 0.39-1.08）和增加葡萄糖吸收（治疗前 AUC240min 为 28.63 mmol·min/L，治疗后为 71.63 mmol·min/L；95% CI 1.68-3.72）。当排除血浆中未检测到卡米西纳尔的患者后，卡米西纳尔仍能显著加速胃排空（治疗前 BT1/2 为 121 分钟，治疗后为 65 分钟；95% CI 0.32-0.91）。在连续14天给予胃轻瘫和1型糖尿病患者后，未观察到耐受性效应。

胃动素受体激动剂 FLIPR 检测[3]
本研究采用荧光成像板读数仪 (FLIPR) 和稳定表达人胃动素受体的中国仓鼠卵巢 (CHO-K1) 细胞，研究了靶化合物对人胃动素受体的效价和功效。简而言之，首先将人胃动素受体克隆（以人基因组 DNA 为模板进行 PCR）到 pCDNA3.1 载体中，然后亚克隆到 pENTR/D-TOPO 载体中（使用 pENTR D-TOPO 定向克隆试剂盒），最后重组到 pCIN1GW 载体中（使用 LR 克隆酶 Gateway 反应试剂盒），得到 pCIN1 胃动素受体质粒。随后，将 pCIN1 胃动素受体质粒稳定转染至 CHO-K1 细胞（ATCC 编号：CCl-61）。这些细胞在添加了 10% (v/v) FBS、2 mM GlutaMAX 和 1 mg/mL Geneticin 的 DMEM/HamF-12 培养基中以单层形式培养。用胃动素刺激该细胞系可引起细胞内信号传导，导致细胞内钙离子浓度升高，该浓度使用钙敏感荧光染料进行测量，并使用 FLIPR 进行定量。简而言之，将细胞接种于 384 孔黑色壁、透明底微孔板（每孔 10,000 个细胞），并孵育 24 小时。在检测当天，使用细胞洗板器吸出细胞板中的培养基（保留 10 μL 培养基）。细胞立即用加载缓冲液（Tyrodes缓冲液（Elga水+145 mM NaCl+5 mM KCl+20 mM HEPES+10 mM葡萄糖+1 mM MgCl2）+1.5 mM CaCl2+0.714 mg/mL丙磺舒（预先溶于1 M NaOH）+0.5 mM亮黑+2.5 μM Fluo 4染料）加载，并在37.5 °C下孵育1小时。主化合物板用100% DMSO配制。使用3 mM的终浓度（在测定中最终浓度为12 μM），并将其进行1:4系列稀释。然后从主板中取1 μL转移至子板，并加入50 μL化合物稀释缓冲液（Tyrodes缓冲液+1 mg/mL BSA+1.5 mM CaCl2）。随后立即使用 FLIPR 3 钙成像仪将 10 μL 化合物板中的溶液加入细胞板中，并在 1 分钟内测量荧光变化。以荧光强度相对于基线的最大变化值来确定激动剂反应，并使用四参数逻辑方程构建浓度-反应曲线。通过比较目标化合物浓度-反应曲线的最大渐近线与胃动素浓度-反应曲线的最大渐近线，计算其内在活性。

---

CYP 3A4 时间依赖性抑制 (TDI) 测定[3]
将 CYP3A4 特异性荧光探针底物二乙氧基荧光素 (DEF) 与大肠杆菌中异源表达的 CYP3A4 (Cypex) 以及测试化合物或阳性对照 (曲罗霉素) 孵育后，定量分析荧光代谢物的生成量来确定抑制作用。 NADPH再生系统（辅因子）的制备方法如下：将7.8 mg/mL葡萄糖-6-磷酸（27.65 mM）、1.7 mg/mL NADP（2.22 mM）和6酶单位/mL的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶溶于2% (w/v)碳酸氢钠溶液中。配制含有酶、探针底物和50 mM磷酸钾缓冲液（pH 7.4）的孵育混合物，取220 μL加入96孔板的每个孔中。加入5 μL系列稀释的测试化合物，并将反应板在37 °C下孵育10分钟。为启动反应，加入25 μL辅因子。然后在37 °C下，每分钟测量一次荧光强度，持续30分钟。表5总结了检测条件。
卡米西纳尔的体外酶/受体结合试验通常包括测量该化合物从表达人胃动素受体（GPR38）的细胞膜上置换放射性标记的胃动素配体的能力。竞争性结合实验使用转染人胃动素受体的细胞膜制备物，与递增浓度的卡米西纳尔和固定浓度的放射性标记的胃动素配体一起孵育。在室温下孵育特定时间后，通过玻璃纤维滤膜快速过滤分离结合的和游离的配体，并通过闪烁计数法测量放射性。使用非线性回归分析从竞争性结合曲线确定pEC50值。

目前临床上迫切需要一种安全有效的胃排空刺激剂；现有疗法包括红霉素（一种抗生素，但其其他特性使其不宜长期使用）和甲氧氯普胺（一种5-羟色胺4型受体激动剂和脑D2受体拮抗剂，与运动障碍相关）。为了摆脱红霉素复杂的胃动素结构，研究人员发现并表征了一种小分子胃动素受体激动剂GSK962040。该化合物通过重组人受体、已知对胃动素有反应的兔和人离体胃组织以及体内实验（通过测量其增加清醒兔排便的能力）进行了评估。在人胃动素受体上，GSK962040 和红霉素作为激动剂的 pEC50 值（EC50 值的负对数，EC50 值是指产生 50% 最大反应的激动剂浓度）分别为 7.9 和 7.3；GSK962040 对其他一系列受体（包括胃饥饿素）、离子通道和酶均无显著活性。在兔胃窦中，浓度为 300 nmol L⁻¹ 至 10 μmol L⁻¹ 的 GSK962040 可持续增强胆碱能介导的收缩幅度，在 3 μmol L⁻¹ 时最大增强幅度达 248 ± 47%。在离体人胃中，浓度为 10 μmol L⁻¹ 的 GSK962040、10 μmol L⁻¹ 的红霉素和 100 nmol L⁻¹ 的 [Nle13]-胃动素均能引起幅度相似的肌肉收缩。在清醒兔中，静脉注射 5 mg kg⁻¹ 的 GSK962040 或 10 mg kg⁻¹ 的红霉素，可在 2 小时内显著增加粪便排出量。综上所述，这些数据表明，非胃动素类化合物 GSK962040 能选择性地激活胃动素受体。简化激活该受体的结构要求极大地促进了胃轻瘫潜在新药的设计[1]。
卡米西纳的细胞活性检测通常使用稳定或瞬时转染人胃动素受体（GPR38）的细胞系（例如CHO或HEK293细胞），以测量激动剂诱导的钙动员或其他下游信号事件。细胞加载钙敏感荧光染料（例如Fluo-4或Fura-2），并在添加递增浓度的卡米西纳后监测荧光变化。卡米西纳的效力以pEC50表示，该值由浓度-反应曲线得出。这些检测证实，卡米西纳作为胃动素受体的完全激动剂，其效力与天然配体胃动素相当。

大鼠药代动力学研究[3]
本研究在雄性Sprague-Dawley大鼠（n = 3）中考察了化合物12/Camicinal（GSK962040）盐酸盐的药代动力学和口服生物利用度。研究分两天进行，间隔两天。第一天，将化合物12溶解于0.9%（w/v）生理盐水中，目标浓度为0.2 mg游离碱/mL。以5 mL/kg/h的速率向三只大鼠静脉输注化合物12，持续1小时，以达到1 mg游离碱/kg的目标剂量。在输注开始后12小时内，连续采集每只大鼠的血样。第二天，将化合物12悬浮于1%（w/v）甲基纤维素溶液中，目标浓度为1 mg游离碱/mL。三只大鼠经口灌胃给予化合物 12，剂量为 5 mL/kg，目标剂量为 5 mg 游离碱/kg。给药后 12 小时内，对每只大鼠进行系列血样采集。稀释后的血样采用 LC/MS/MS 分析化合物 12 的浓度（定量下限为 5 ng/mL，0.012 μM）。
研究了雄性 Sprague-Dawley 大鼠口服混悬液后化合物 16 盐酸盐的全身暴露情况。三只大鼠经口灌胃给予化合物 16，目标剂量为 5 mg 游离碱/kg。化合物 16 在给药当天配制于 1% (w/v) 甲基纤维素水溶液中，浓度为 1 mg 游离碱/mL，并以 5 mL/kg 的剂量给药。给药后 8 小时内，对每只大鼠进行系列血样采集。采用液相色谱-串联质谱法（LC/MS/MS）分析稀释后的血液样本中的母体化合物。

---

犬药代动力学研究[3]
本研究在雄性比格犬（n = 3）中考察了化合物12/卡米西纳尔（GSK962040）盐酸盐的药代动力学和口服生物利用度。研究分两天进行，两次研究间隔7天。在研究第一天，将化合物12溶解于0.9%（w/v）生理盐水中，浓度为0.4 mg游离碱/mL。以5 mL/kg/h的速率向三只犬静脉输注化合物12，持续1小时，以达到2 mg游离碱/kg的目标剂量。在输注开始后30小时内，连续采集每只犬的血液样本。在研究第2天，将化合物12悬浮于1% (w/v)甲基纤维素溶液中，浓度为1 mg游离碱/mL。三只犬分别接受5 mL/kg的化合物12灌胃给药，以达到5 mg游离碱/kg的目标剂量。给药后30小时内，从每只犬身上采集系列血样。稀释后的血样采用LC/MS/MS法分析化合物12的浓度（定量下限为5 ng/mL，0.012 μM）。

---

背景：GSK962040是一种小分子胃动素受体激动剂，旨在满足安全有效的胃动力剂的需求。然而，由于实验室啮齿动物缺乏功能性胃动素系统，体内研究仅限于单次给药，该给药可增加兔子的排便次数。胃动素激动剂通常不会增加人类结肠动力，因此需要证实其具有胃动力活性。
方法：在植入应变计的禁食犬中评估静脉注射 GSK962040 对胃十二指肠动力的影响。活性与血浆中 GSK962040 的浓度（通过 HPLC-MS/MS 测定）以及 GSK962040 在犬重组受体上的效价（在 HEK293 细胞表达后，使用荧光成像板读数仪（Molecular Devices，Wokingham，UK）测定）相关。
主要结果：GSK962040 激活了犬胃动素受体（pEC50 为 5.79；内在活性为 0.72，与 [Nle13]-胃动素相比）。在体内，GSK962040 可诱导节律性收缩，其持续时间与剂量相关（3 mg kg⁻¹ 和 6 mg kg⁻¹ 剂量组分别为 48 分钟和 173 分钟），由平均血浆浓度 >1.14 μmol L⁻¹ 驱动。GSK962040 的作用消退后，移行性运动复合体 (MMC) 活动恢复。3 mg kg⁻¹ 剂量的 GSK962040 对 MMC 的恢复无影响，但 6 mg kg⁻¹ 剂量组在给药后 253 分钟 MMC 恢复，而生理盐水组为 101 分钟（每组 n=5）。
结论与推论：结果与犬胃动素受体激动剂的效力低于人类的结果一致。此外，结果还确定了刺激胃动力的 GSK962040 剂量。同一物种体内和体外数据的相关性，以及血浆浓度，可指导进一步的研究和向其他物种的转化。[2]
卡米西纳尔的体内动物研究通常包括对啮齿动物或犬模型进行给药，以评估其对胃肠动力、胃排空率和药代动力学参数的影响。在犬中，口服或静脉注射卡米西纳尔后，使用测压法或闪烁显像法监测胃窦收缩。使用放射性标记的试验餐或¹³C-辛酸呼气试验评估固体或液体食物的胃排空。通过连续血液采样测定包括C_max、T_max、AUC和生物利用度在内的药代动力学参数。在危重患者中，单次肠内给予50 mg卡米西纳尔可有效加速胃排空。

研究发现，极性更强的氰基的存在不利于化合物16的口服药代动力学。在雄性Sprague-Dawley大鼠中，化合物16的口服暴露量低且不稳定，而氟化类似物12的暴露量较高且更稳定。测定其静脉药代动力学后，发现化合物12的口服生物利用度（Fpo）为48 ± 13%。这一令人鼓舞的结果促使我们测定化合物12在雄性比格犬中的药代动力学，我们欣喜地发现其口服生物利用度为51 ± 16%。[1] 化合物12还被评估了其对其他主要人类CYP同工酶的抑制作用，发现其具有良好的抑制活性（1A2、2C19、2C9 IC50 > 100 μM，2D6 IC50 = 34 μM）。此外，以7BQ为底物时，未观察到TDI与CYP3A4同工酶的相互作用。该化合物对紧密结合的人生长素释放肽受体具有高选择性（pEC50 < 6.0），且未观察到与hERG通道的相互作用（结合试验中pIC50 = 4.8）。体外血浆蛋白结合率可接受（人83%，大鼠63%），且在水和多种模拟胃肠液（盐酸盐，>1 mg/mL）中均具有良好的溶解性。[1] 此外，还测定了化合物12在兔胃窦天然组织试验中的作用持续时间。完整结果将在其他地方报告，但简而言之，化合物 12 显示出持续作用（3 μM 时 T1/2 = 46.9 ± 5.0 分钟），而 [Nle13]motilin 的作用时间较短（0.3 μM，T1/2 = 11.4 ± 1.5 分钟）。其作用持续时间也长于红霉素 1（3 μM 时 T1/2 = 24.0 ± 5.6 分钟），后者已成功用于临床，通过低剂量重复给药来改善胃排空。因此，这些数据可能表明，在体内适当给药的情况下，化合物 12 不太可能快速产生耐受性。化合物 12 的总体选择性、其在人天然胃组织中的疗效以及其在兔全肠转运模型中的促动力活性也已确定，这些数据将在其他地方完整报告。 [1]
卡米西纳（Camicinal）具有良好的药代动力学特征，口服生物利用度高，全身暴露量也高。口服后，该化合物被吸收，并在可预测的时间范围内达到血浆峰浓度。在所研究的剂量范围内，该化合物的药代动力学呈线性关系。在多项试验中，单次口服剂量高达125 mg时，卡米西纳的耐受性良好。该化合物主要在肝脏代谢，其药代动力学特征支持每日一次或两次给药。在NUTRIATE研究中，部分患者的血浆中未检测到卡米西纳，提示危重患者人群的吸收存在个体差异。

临床前毒性研究表明，camicinal 具有良好的安全性，对 hERG 通道无不良影响，支持其进入临床开发阶段。在多项临床试验中，单次口服剂量高达 125 mg 的 camicinal 耐受性良好，未出现严重药物相关不良事件或心电图化学改变。安慰剂组和治疗组的不良事件发生率相近，且通常较轻。连续给药 14 天后未观察到耐受性。该化合物符合理想的胃动素激动剂的标准，且具有较低的脱靶毒性。

[1]. GSK962040: a small molecule, selective motilin receptor agonist, effective as a stimulant of human and rabbit gastrointestinal motility. Neurogastroenterol Motil, 2009. 21(6): p. 657-64, e30-1.

[2]. GSK962040: a small molecule motilin receptor agonist which increases gastrointestinal motility in conscious dogs. Neurogastroenterol Motil, 2011. 23(10): p. 958-e410.

[3]. Discovery of N-(3-fluorophenyl)-1-[(4-([(3S)-3-methyl-1-piperazinyl]methyl)phenyl)acetyl]-4-pi peridinamine (GSK962040), the first small molecule motilin receptor agonist clinical candidate. J Med Chem, 2009. 52(4): p. 1180-9.

[4]. Regional- and agonist-dependent facilitation of human neurogastrointestinal functions by motilin receptor agonists. Br J Pharmacol, 2012. 167(4): p. 763-74.

卡米西纳尔属于乙酰胺类化合物。卡米西纳尔已用于治疗胃轻瘫的临床试验。N-(3-氟苯基)-1-[(4-([(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基)苯基)乙酰基]-4-哌啶胺 12 (GSK962040) 是一种新型小分子胃动素受体激动剂。它对重组人胃动素受体和天然兔胃动素受体均具有优异的活性，其激动剂活性可增强离体胃窦组织中神经介导的收缩幅度。化合物 12 在大鼠和犬中显示出良好的药代动力学特征，这些结果，结合在天然人组织和兔胃肠道转运模型中的进一步分析，使其成为进一步开发的候选药物。[1] 总之，化合物 12 具有非常理想的综合性质，已被选为进一步开发的候选药物。因此，化合物 12 是一种新型选择性小分子胃动素受体激动剂（分子量 424），它是通过基于重组人胃动素受体活性的广泛构效关系研究开发的，也是首个进入 I 期临床试验的同类化合物，有望用于治疗与胃排空延迟相关的疾病。[1]
Camicinal (GSK962040) 已在多项 II 期临床试验中进行了研究，用于治疗胃轻瘫和其他胃肠动力障碍。 NUTRIATE 研究 (NCT01039805) 是一项随机、双盲、安慰剂对照试验，旨在评估单剂量卡米西纳尔 (camicinal) 对危重症喂养不耐受患者的药效学和药代动力学。结果显示，单次肠内给予 50 mg 卡米西纳尔吸收后，可加速胃排空并增加葡萄糖吸收。该化合物是一种首创的非大环内酯类胃动素受体激动剂，旨在避免与红霉素等大环内酯类促动力药相关的抗生素耐药性和脱靶效应。该药物的研发状态可能有所不同，可能需要进一步的临床研究来确定其在大样本患者群体中的疗效。

C25H33N4OF.HCL

461.01506

460.24

C, 65.13; H, 7.43; Cl, 7.69; F, 4.12; N, 12.15; O, 3.47

923565-22-4

Camicinal;923565-21-3

25222897

Typically exists as solid at room temperature

3.542

47.61

3

5

6

32

560

1

O=C(N1CCC(NC2=CC=CC(F)=C2)CC1)CC3=CC=C(CN4C[C@H](C)NCC4)C=C3.Cl

MZEVMNJFEUATKJ-FYZYNONXSA-N

InChI=1S/C25H33FN4O.ClH/c1-19-17-29(14-11-27-19)18-21-7-5-20(6-8-21)15-25(31)30-12-9-23(10-13-30)28-24-4-2-3-22(26)16-24;/h2-8,16,19,23,27-28H,9-15,17-18H2,1H3;1H/t19-;/m0./s1

1-[4-(3-fluoroanilino)piperidin-1-yl]-2-[4-[[(3S)-3-methylpiperazin-1-yl]methyl]phenyl]ethanone;hydrochloride

Camicinal hydrochloride; 923565-22-4; GSK962040 (HCl salt); GSK962040 (hydrochloride); GSK962040 hydrochloride; 1-[4-(3-fluoroanilino)piperidin-1-yl]-2-[4-[[(3S)-3-methylpiperazin-1-yl]methyl]phenyl]ethanone;hydrochloride; CHEMBL489679;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

H2O : ~100 mg/mL (~216.91 mM)
DMSO : ~100 mg/mL (~216.91 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.42 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

---

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.42 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

---

View More

配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.42 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

---

配方 4 中的溶解度: 100 mg/mL (216.91 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶.

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。