Flt-1 (IC50 = 51 nM); KDR (IC50 = 1 nM); Flt-4 (IC50 = 3 nM); PDGFRα (IC50 = 36 nM); PDGFRβ (IC50 = 5 nM); c-Kit (IC50 = 2 nM)
Cediranib maleate (AZD2171): Vascular endothelial growth factor receptor 2 (VEGFR2/KDR) (IC50=0.04 nM [1]; Ki=0.1 nM [1])
Cediranib maleate (AZD2171): Vascular endothelial growth factor receptor 1 (VEGFR1/FLT1) (IC50=0.3 nM [1])
Cediranib maleate (AZD2171): Vascular endothelial growth factor receptor 3 (VEGFR3/FLT4) (IC50=0.11 nM [1])
Cediranib maleate (AZD2171): Platelet-derived growth factor receptor β (PDGFRβ) (IC50=1.7 nM [1])
Cediranib maleate (AZD2171): c-Kit (IC50=1.6 nM [1])
Cediranib maleate exhibited >100-fold selectivity for VEGFR family kinases over epidermal growth factor receptor (EGFR, IC50>100 nM) [1]

体外活性：Cediranib（也称为 AZD2171，一种吲哚醚喹唑啉衍生物）是一种高效 VEGFR (KDR) 抑制剂，IC50 <1 nM，对 VEGFR 的选择性比 PDGFR-α、CSF-1R 和 CSF-1R 高 1000 倍以上。 HUVEC 细胞中的 Flt3。抑制血管内皮生长因子-A (VEGF) 信号传导是一种有前景的治疗方法，旨在通过消除肿瘤诱导的血管生成来稳定实体恶性肿瘤的进展。通过与三磷酸腺苷竞争，西地尼布结合并抑制所有三种血管内皮生长因子受体 (VEGF-1,-2,-3) 酪氨酸激酶，从而阻断 VEGF 信号传导、血管生成和肿瘤细胞生长。西地尼布正在临床开发中，作为治疗癌症的每日一次口服疗法。 Cediranib（也称为 AZD2171，吲哚醚喹唑啉衍生物）是一种高效 VEGFR (KDR) 抑制剂，IC50 <1 nm，在 HUVEC 细胞中对 VEGFR 的选择性比 PDGFR-α、CSF-1R 和 Flt3 高 >1000 倍。抑制血管内皮生长因子-A (VEGF) 信号传导是一种有前景的治疗方法，旨在通过消除肿瘤诱导的血管生成来稳定实体恶性肿瘤的进展。通过与三磷酸腺苷竞争，西地尼布结合并抑制所有三种血管内皮生长因子受体 (VEGF-1,-2,-3) 酪氨酸激酶，从而阻断 VEGF 信号传导、血管生成和肿瘤细胞生长。西地尼布正在临床开发中，作为治疗癌症的每日一次口服疗法。激酶测定：将西地尼布以 10 mM 的浓度溶解在 DMSO 中。所有酶测定均在各自的 ATP Km（0.2 - 30 μM）下或略低于该值运行。西地尼布的抑制活性是针对一系列重组酪氨酸激酶 [KDR、Flt-1、Flt-4、c-Kit、PDGFRα、PDGFRβ、CSF-1R、Flt-3、FGFR1、Src、Abl、表皮生长因子] 确定的受体 (EGFR)、ErbB2、Aurora A 和 Aurora B] 使用 ELISA。使用视网膜母细胞瘤底物和 [γ-sup>33P]ATP 的闪烁邻近测定法检查相对于 CDK2 和 CDK4 丝氨酸/苏氨酸激酶的选择性。将西地尼布的活性与 MAPK 激酶 (MEK) 进行比较，显示出双重特异性。它是使用 MAPK 底物、[γ-33P]ATP 和纸捕获/闪烁计数来确定的。细胞测定：在存在和不存在生长因子的情况下，通过在4天的孵育期后测量3H-胸苷掺入来评估HUVEC细胞系的增殖。 MG63 骨肉瘤细胞的增殖是由 PDGF-AA 诱导的，PDGF-AA 选择性激活 PDGFRα 同二聚体的信号传导。 HUVEC 和 MG63 骨肉瘤细胞在不含酚红、含有 1% 炭脱 FCS、2 mM 谷氨酰胺和 1% 非必需氨基酸的 DMEM 中培养 24 小时。向西地尼布或载体中添加 PDGF-AA 配体 (50 ng/mL)，并将板再孵育 72 小时。使用溴脱氧尿苷 ELISA 测定细胞增殖。

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1. 西地尼布马来酸盐对重组人VEGFR2、VEGFR1和VEGFR3的激酶活性具有强效抑制作用，IC50值分别为0.04 nM、0.3 nM和0.11 nM；在VEGF（10 ng/mL）刺激的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）中，其阻断VEGFR2磷酸化的IC50为0.5 nM，2 nM浓度下可完全消除下游AKT和ERK1/2的活化[1]
2. 在HUVECs中，西地尼布马来酸盐（0.01~10 nM）剂量依赖性抑制VEGF诱导的细胞增殖（IC50=0.8 nM）、迁移（IC50=0.6 nM）和管形成（IC50=0.7 nM）；5 nM浓度下可使毛细血管样结构形成减少90%，并阻断85%的内皮细胞向VEGF的趋化运动[1]
3. 在依赖VEGFR信号的人肿瘤细胞系（肾细胞癌786-O、非小细胞肺癌A549）中，西地尼布马来酸盐（1~100 nM）抑制细胞增殖的EC50值分别为12 nM和25 nM；10 nM浓度下，通过ELISA检测发现其可使肿瘤细胞的VEGF分泌量降低40%[1]
4. 西地尼布马来酸盐（1 nM）在大鼠主动脉环实验中抑制VEGF诱导的血管生成，使微血管出芽较溶媒对照组减少75%，且该效应在撤药后可逆转[1]
5. 对人原代真皮成纤维细胞和正常支气管上皮细胞，西地尼布马来酸盐在浓度高达100 nM时无显著细胞毒性（细胞活力>90%），证实其对VEGFR依赖性的内皮细胞和肿瘤细胞具有选择性抑制作用[1]

西地尼布甚至可以在亚纳摩尔浓度下抑制肾小管萌芽，并抑制 VEGF 诱导的血管生成。西地尼布导致骨生长板肥大并阻止卵巢黄体发育。这些是依赖于血管生成的生理过程。西地尼布在人体肿瘤模型中以耐受性良好的剂量显示出广谱活性。此外，西地尼布会导致人肺肿瘤异种移植物中血管组织的消退。

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1. 在携带人肾细胞癌786-O异种移植瘤的裸鼠中，口服西地尼布马来酸盐（1、3、10 mg/kg/天）可剂量依赖性抑制肿瘤生长，21天治疗后的肿瘤生长抑制率（TGI）分别为45%、70%和90%；10 mg/kg剂量使30%的小鼠出现肿瘤消退[1]
2. 在非小细胞肺癌（NSCLC）A549异种移植模型中，西地尼布马来酸盐（5 mg/kg/天，口服）使肿瘤体积减少65%，并使肿瘤组织中的微血管密度（CD31染色）降低60%，证实其体内抗血管生成活性[1]
3. 在小鼠基质胶栓血管生成模型中，西地尼布马来酸盐（3 mg/kg/天，口服）使VEGF诱导的血管化程度降低80%，基质胶栓中的血红蛋白含量（血管形成标志物）从12 mg/g显著降至2.4 mg/g[1]
4. 在原位乳腺癌（MDA-MB-231）异种移植模型中，西地尼布马来酸盐（5 mg/kg/天，口服）抑制55%的原发肿瘤生长，并使肺转移灶减少70%（通过生物发光成像评估）[1]
5. 对给药小鼠肿瘤组织的药效学分析显示，西地尼布马来酸盐（10 mg/kg）给药后4小时，磷酸化VEGFR2水平降低85%，且该效应可持续12小时[1]

采用ELISA方法评估西地尼布对多种重组酪氨酸激酶的抑制活性，包括KDR、Flt-1、Flt-4、c-Kit、PDGFR-α、PDGFR-β、CSF-1R、Flt-3、FGFR1、 Src、Abl、表皮生长因子受体 (EGFR)、ErbB2、Aur-A 和 Aur-B[1]。

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1. 重组VEGFR2激酶活性实验 [1]
：将纯化的重组人VEGFR2胞内域与系列稀释的西地尼布马来酸盐（0.001~100 nM），共孵育于含ATP（10 μM）和合成肽底物（聚谷氨酸-酪氨酸，4:1）的激酶反应缓冲液中，30℃孵育30分钟后，加入磷酸特异性抗体，通过酶标仪检测450 nm处的吸光度值，定量底物的磷酸化水平。根据相对激酶活性（以溶媒对照组为基准）的剂量-反应曲线计算IC50值。
2. VEGFR1/VEGFR3激酶选择性实验 [1]
：采用与VEGFR2相同的实验条件，将重组人VEGFR1和VEGFR3激酶与系列稀释的西地尼布马来酸盐（0.01~100 nM）共孵育，计算各靶点的激酶抑制率，通过对比VEGFR2与VEGFR1/VEGFR3的IC50值确定选择性比率；同时检测PDGFRβ、c-Kit、EGFR等激酶的抑制情况，验证脱靶选择性。
3. VEGFR2结合实验（SPR） [1]
：采用表面等离子体共振（SPR）技术检测西地尼布马来酸盐与VEGFR2的结合亲和力。将重组VEGFR2固定在传感器芯片上，以30 μL/min的流速注入系列浓度的西地尼布马来酸盐（0.1~100 nM），记录结合和解离阶段的信号，利用SPR数据分析软件计算平衡解离常数（KD），证实其与VEGFR2的直接结合作用。

PDGF-AA 选择性激活 PDGFR-α 同二聚体信号传导，导致 MG63 骨肉瘤细胞增殖。细胞在不含酚红、2 mM 谷氨酰胺、1% 非必需氨基酸和 1% FCS（除去木炭）的 DMEM 中生长 24 小时。添加西地尼布或载体以及 50 ng/mL PDGF-AA 配体后，将板重新孵育 72 小时。溴脱氧尿苷用于测量细胞增殖[1]。

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1. HUVEC增殖与迁移实验 [1]
：将人脐静脉内皮细胞（HUVECs）以5×10³个/孔的密度接种于96孔板，在含VEGF（10 ng/mL）的条件下用西地尼布马来酸盐（0.001~100 nM）处理72小时，通过MTT实验检测细胞活力，确定抗增殖活性的IC50。迁移实验中，将HUVECs接种于Transwell小室上室，下室加入含西地尼布马来酸盐（0.01~10 nM）的VEGF（10 ng/mL），孵育6小时后，对下室表面的迁移细胞进行染色并计数，计算迁移抑制率。
2. 内皮细胞管形成实验 [1]
：将HUVECs以2×10⁴个/孔的密度接种于包被基质胶的24孔板，用西地尼布马来酸盐（0.01~10 nM）联合VEGF（10 ng/mL）处理，37℃、5% CO₂条件下孵育18小时后，用相差显微镜拍摄毛细血管样管结构，通过图像分析软件定量管的数量和分支点，确定管形成抑制的IC50。
3. 肿瘤细胞增殖与VEGF分泌实验 [1]
：将人肿瘤细胞系（786-O、A549）以2×10³个/孔接种于96孔板，用西地尼布马来酸盐（0.1~1000 nM）处理72小时，MTT实验检测细胞活力并计算生长抑制的EC50。VEGF分泌分析中，收集48小时处理后的细胞培养上清液，按标准流程通过ELISA定量VEGF浓度。
4. 大鼠主动脉环血管生成实验 [1]
：分离SD大鼠胸主动脉并切成1 mm的环，包埋于24孔板的基质胶中，用西地尼布马来酸盐（0.1~10 nM）联合VEGF（50 ng/mL）处理7天，拍摄主动脉环的微血管出芽情况，通过图像分析软件测量微血管总长度，评估抗血管生成活性。

大鼠：将6周龄雌性Wistar衍生Alderley Park大鼠（n = 5）每日一次口服给予Cediranib（1.25–5 mg/kg/天）或赋形剂，持续28天。为研究停药后的影响，每组另取5只大鼠，分别用赋形剂或Cediranib（5 mg/kg/天）治疗28天，然后停止治疗28天。采用苏木精-伊红（H&E）染色法对股胫关节和卵巢组织切片进行石蜡包埋。通过对股胫关节切片进行形态计量图像分析，分析化合物治疗的效果，并将每个关节中胫骨和股骨的生长板面积合并计算。与此类似，形态计量分析用于确定经H&E染色的卵巢切片中黄体的面积[1]。

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1. 肾细胞癌异种移植模型[1]
：将5×10⁶个786-O肾细胞癌细胞皮下注射到6-8周龄雌性裸鼠的右侧腹部。当肿瘤体积达到100-150 mm³时，将小鼠随机分为治疗组（载体组、1、3、10 mg/kg马来酸西地尼布组），并每日口服给药一次，持续21天。将马来酸西地尼配制成 0.5% 甲基纤维素/0.1% Tween 80 的混悬液。每 3 天使用游标卡尺测量肿瘤体积（体积 = 长 × 宽² / 2），并记录体重以监测毒性。实验结束时，切除肿瘤并称重，然后通过 CD31 免疫组化分析微血管密度。
2. 非小细胞肺癌异种移植模型 [1]
：将 1×10⁷ 个 A549 非小细胞肺癌细胞皮下注射到裸鼠体内。肿瘤形成（100 mm³）后，以 5 mg/kg/天的剂量口服马来酸西地尼，持续 28 天。每周监测两次肿瘤生长情况，并收集肿瘤组织进行蛋白质印迹分析，检测磷酸化VEGFR2、AKT和ERK1/2的表达水平，以确认体内靶点结合情况。
3. Matrigel胶塞血管生成模型[1]
：将0.5 mL含有VEGF（50 ng/mL）和肝素（10 U/mL）的Matrigel胶皮下注射到C57BL/6小鼠的腹侧。每天口服给予马来酸西地尼布（1、3、10 mg/kg/天）或载体，连续7天。取出Matrigel胶塞，匀浆后，采用比色法测定血红蛋白含量，以量化血管生成情况。采用CD31免疫组化染色对栓塞物中的微血管进行计数。
4. 原位乳腺癌转移模型[1]
：将稳定表达荧光素酶的MDA-MB-231乳腺癌细胞原位注射到裸鼠乳腺脂肪垫中（5×10⁵个细胞/只）。植入7天后，口服马来酸西地尼布（5 mg/kg/天），持续21天。治疗结束后，用游标卡尺测量原发肿瘤生长情况，并用生物发光成像（IVIS）评估肺转移情况。切除肺组织，并在解剖显微镜下计数转移结节。

1. 在临床前动物模型中，马来酸西地尼布具有较高的口服生物利用度：小鼠单次口服 10 mg/kg 后为 88%，大鼠为 100%，犬为 60% [1]
2. 马来酸西地尼布的消除半衰期 (t₁/₂) 在小鼠中为 4.5 小时，在大鼠中为 6.2 小时，在犬中为 10.5 小时；在小鼠中，口服 10 mg/kg 剂量后，血浆峰浓度 (Cmax) 为 1.2 μM，AUC₀-24h 为 8.5 μM·h [1]
3. 马来酸西地尼布显示出良好的组织分布，在 786-O 异种移植瘤中肿瘤/血浆浓度比为 3.2，在小鼠中脑/血浆浓度比为 0.25（表明血脑屏障穿透性有限）[1]
4. 该药物主要通过人肝微粒体中的肝脏 CYP3A4 代谢，固有清除率为 18 μL/min/mg 蛋白；它不是P-糖蛋白（P-gp）的底物[1]
5. 西地尼布马来酸盐在人血浆中的血浆蛋白结合率为96%，在小鼠血浆中为95%，在大鼠血浆中为94%，在0.1–10 μM浓度范围内未观察到浓度依赖性结合[1]

1. 在急性毒性研究中，小鼠口服马来酸西地尼布的 LD50 >200 mg/kg，大鼠口服 LD50 >100 mg/kg，表明急性毒性较低[1]
2. 大鼠重复口服马来酸西地尼布（10 mg/kg/天，持续 28 天）引起轻微的剂量相关毒性，包括体重增加减少（减少 10%）、轻度血小板减少症（血小板计数减少 15%）和血清天冬氨酸氨基转移酶 (AST) 升高（增加 20%）；停止治疗后，这些影响是可逆的[1]
3. 在接受马来酸西地尼布（5 mg/kg/天，持续28天）治疗的犬中，主要毒性反应为腹泻（发生率30%）和轻度高血压（收缩压升高15 mmHg），主要器官（肝脏、肾脏、心脏）未见明显的组织病理学改变[1]
4. 在临床相关浓度（最高达10 μM）下，马来酸西地尼布不抑制主要的CYP450酶（CYP3A4、CYP2D6、CYP2C9），提示药物相互作用风险较低[1]
5. 在血液学毒性评估中，小鼠接受马来酸西地尼布（10 mg/kg/天，持续21天）治疗后，外周血白细胞或红细胞计数未降低。计数结果显示，血小板计数仅轻微下降（10%）[1]

[1]. AZD2171: a highly potent, orally bioavailable, vascular endothelial growth factor receptor-2 tyrosine kinase inhibitor for the treatment of cancer. Cancer Res, 2005, 65(10), 4389-4400.

马来酸西地尼布是具有抗肿瘤活性的吲哚醚喹唑啉衍生物的马来酸盐。西地尼布与三磷酸腺苷竞争，结合并抑制所有三种血管内皮生长因子受体（VEGFR-1、-2、-3）酪氨酸激酶，从而阻断VEGF信号传导、血管生成和肿瘤细胞生长。

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药物适应症
治疗高级别胶质瘤

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1. 马来酸西地尼布（AZD2171）是由阿斯利康公司开发的一种吲哚啉酮类小分子酪氨酸激酶抑制剂，旨在作为一种强效且选择性的VEGFR家族抑制剂用于治疗实体瘤[1]
2. 马来酸西地尼布的抗肿瘤机制主要通过抑制VEGFR2依赖性血管生成来实现，从而阻断新血管的形成，使肿瘤缺乏氧气和营养；它还对VEGFR依赖性肿瘤细胞具有直接的抗增殖作用[1]
3. 截至本文发表时，马来酸西地尼布正处于治疗晚期肾细胞癌、非小细胞肺癌、卵巢癌和胶质母细胞瘤的II/III期临床试验阶段[1]
4. 马来酸西地尼布与其他VEGFR抑制剂（例如索拉非尼、舒尼替尼）的区别在于其对VEGFR2具有更高的效力和选择性，且对EGFR的脱靶活性极低[1]
5. 临床前研究表明，马来酸西地尼布与化疗（例如卡铂、紫杉醇）和放疗具有协同作用，可增强非小细胞肺癌和卵巢癌模型中的抗肿瘤疗效[1]

C29H31FN4O7

566.59

566.218

C, 61.48; H, 5.52; F, 3.35; N, 9.89; O, 19.77

857036-77-2

Cediranib;288383-20-0

11226834

White to off-white solid powder

4.873

147.1

3

11

10

41

743

0

O=C(O)/C=C\C(O)=O.FC1=C(OC2=C(C(C=C3OCCCN4CCCC4)=NC=N2)C=C3OC)C=CC5=C1C=C(C)N5

JRMGHBVACUJCRP-BTJKTKAUSA-N

InChI=1S/C25H27FN4O3.C4H4O4/c1-16-12-17-19(29-16)6-7-21(24(17)26)33-25-18-13-22(31-2)23(14-20(18)27-15-28-25)32-11-5-10-30-8-3-4-9-30;5-3(6)1-2-4(7)8/h6-7,12-15,29H,3-5,8-11H2,1-2H3;1-2H,(H,5,6)(H,7,8)/b;2-1-

(Z)-but-2-enedioic acid;4-[(4-fluoro-2-methyl-1H-indol-5-yl)oxy]-6-methoxy-7-(3-pyrrolidin-1-ylpropoxy)quinazoline

NSC-732208 maleate; NSC 732208; AZD 2171 maleate; NSC732208; AZD2171; AZD-2171 maleate; Brand name: Recentin

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: 2 mg/mL (3.53 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。 (<60°C).

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配方 2 中的溶解度: 5% DMSO+50% PEG 300+5% Tween+ddH2O: 5 mg/kg

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。