规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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10 mM * 1 mL in DMSO |
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1mg |
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5mg |
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50mg |
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100mg |
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250mg |
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500mg |
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1g |
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Other Sizes |
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靶点 |
ALK (IC50 = 20 nM); c-Met (IC50 = 8 nM)
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体外研究 (In Vitro) |
体外活性:PF-2341066 在 mIMCD3 小鼠或 MDCK 犬上皮细胞中表现出类似的抗 c-Met 磷酸化功效,IC50 分别为 5 nM 和 20 nM。与 NIH3T3 细胞相比,PF-2341066 对工程表达 c-Met ATP 结合位点突变体 V1092I 或 H1094R 或 P 环突变体 M1250T 的 NIH3T3 细胞表现出改善或相似的活性,IC50 分别为 19 nM、2 nM 和 15 nM表达野生型受体,IC50 为 13 nM。相反,与野生型受体相比,观察到 PF-2341066 针对表达 c-Met 激活环突变体 Y1230C 和 Y1235D 的细胞的效力发生显着变化,IC50 分别为 127 nM 和 92 nM。 PF-2341066 还可有效防止 NCI-H69 和 HOP92 细胞中 c-Met 的磷酸化,IC50 分别为 13 nM 和 16 nM,这些细胞分别表达内源性 c-Met 变体 R988C 和 T1010I。与 c-Met 相比,PF-2341066 对 VEGFR2 和 PDGFRβ RTK 的选择性 > 1,000 倍,对 IRK 和 Lck 的选择性 > 250 倍,对 Tie2、TrkA 和 TrkB 的选择性大约 40 至 60 倍。 PF-2341066 对 RON 和 Axl RTK 的选择性是 20 至 30 倍。相比之下,PF-2341066 对 KARPAS299 人间变性大细胞淋巴瘤 (ALCL) 细胞系表达的 ALK RTK 的核磷蛋白 (NPM)-间变性淋巴瘤激酶 (ALK) 致癌融合变体显示出近乎等效的 IC50 为 24 nM。 PF-2341066 抑制癌细胞的 c-Met 依赖性肿瘤表型和内皮细胞的血管生成表型。 PF-2341066 抑制人 GTL-16 胃癌细胞生长,IC50 为 9.7 nM。 PF-2341066 诱导 GTL-16 细胞凋亡,IC50 为 8.4 nM。 PF-2341066 抑制 HGF 刺激的人 NCI-H441 肺癌细胞迁移和侵袭,IC50 分别为 11 nM 和 6.1 nM。 PF-2341066 抑制 MDCK 细胞散射,IC50 为 16 nM。 PF-2341066 可防止 HGF 刺激的 c-Met 磷酸化、细胞存活和基质胶侵袭,IC50 分别为 11 nM、14 nM 和 35 nM。此外,PF-2341066 还可防止纤维蛋白凝胶中血清刺激的 HMVEC 分支管生成(血管形成)。 PF-2341066 还可有效抑制 Karpas299 或 SU-DHL-1 ALCL 细胞中的 NPM-ALK 磷酸化,IC50 为 24 nM。 PF-2341066 有效防止细胞增殖,这与 G(1)-S 期细胞周期停滞和诱导 ALK 阳性 ALCL 细胞凋亡相关,IC50 为 30 nM,但与 ALK 阴性淋巴瘤细胞无关。此外,PF-2341066 还可预防与原发肿瘤生长(即增殖和存活)以及转移(例如侵袭和克隆性)相关的骨肉瘤行为。激酶测定:将细胞接种在 96 孔板中补充有 10% 胎牛血清 (FBS) 的培养基中,24 小时后转移至无血清培养基 [含 0.04% 牛血清白蛋白 (BSA)]。在研究配体依赖性 RTK 磷酸化的实验中,添加相应的生长因子长达 20 分钟。将细胞与 PF-2341066 和/或适当的配体孵育指定时间后,用补充有 1 mM Na3VO4 的 HBSS 洗涤细胞一次,并从细胞中产生蛋白质裂解物。随后,使用用于包被 96 孔板的特异性捕获抗体和对磷酸化酪氨酸残基具有特异性的检测抗体,通过夹心 ELISA 方法评估所选蛋白激酶的磷酸化。抗体包被板 (a) 在蛋白质裂解物存在下于 4°C 孵育过夜; (b) 用含 1% Tween 20 的 PBS 洗涤七次; (c) 在辣根过氧化物酶缀合的抗总磷酸酪氨酸 (PY-20) 抗体 (1:500) 中孵育 30 分钟; (d)再清洗七次; (e) 在 3,3',5,5'-四甲基联苯胺过氧化物酶底物中孵育以启动比色反应,通过添加 0.09 N H2SO4 来终止该反应; (f) 使用分光光度计测量 450 nm 处的吸光度。细胞测定:将包括GTL-16胃癌细胞和T47D乳腺癌细胞的细胞(GTL-16胃癌细胞和T47D乳腺癌细胞)接种到96孔板中补充有10%胎牛血清(FBS)的培养基中并转移24 小时后转移至无血清培养基 [含 0.04% 牛血清白蛋白 (BSA)]。在研究配体依赖性 RTK 磷酸化的实验中,添加相应的生长因子长达 20 分钟。将细胞与 PF-2341066 和/或适当的配体孵育指定时间后,用补充有 1 mM Na3VO4 的 HBSS 洗涤细胞一次,并从细胞中产生蛋白质裂解物。随后,使用用于包被 96 孔板的特异性捕获抗体和对磷酸化酪氨酸残基具有特异性的检测抗体,通过夹心 ELISA 方法评估所选蛋白激酶的磷酸化。抗体包被板 (a) 在蛋白质裂解物存在下于 4 °C 孵育过夜; (b) 用含 1% Tween 20 的 PBS 洗涤七次; (c) 在辣根过氧化物酶缀合的抗总磷酸酪氨酸 (PY-20) 抗体 (1:500) 中孵育 30 分钟; (d)再清洗七次; (e) 在 3,3',5,5'-四甲基联苯胺过氧化物酶底物中孵育以启动比色反应,通过添加 0.09 N H2SO4 来终止该反应; (f) 使用分光光度计测量 450 nm 处的吸光度。
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体内研究 (In Vivo) |
在 GTL-16 模型中,PF-2341066 揭示了在 50 mg/kg/天和 75 mg/kg/天治疗组中,能够使已形成的大肿瘤 (>600 mm3) 显着消退,减少 60% 43 天给药方案的平均肿瘤体积。在另一项研究中,PF-2341066 显示出完全抑制 GTL-16 肿瘤生长超过 3 个月的能力,在 50 mg/kg/ 的 3 个月治疗方案中,12 只小鼠中只有 1 只表现出肿瘤生长显着增加。天。在 NCI-H441 NSCLC 模型中,在 38 天的 PF-2341066 给药周期中,每天 50 mg/kg 时观察到平均肿瘤体积减少 43%。在 Caki-1 RCC 模型中,在 33 天的 PF-2341066 给药周期中,观察到平均肿瘤体积减少 53%,与每天 50 mg/kg/天的每个肿瘤体积减少至少 30% 相关。 PF-2341066 还显示,在 U87MG 胶质母细胞瘤或 PC-3 前列腺癌异种移植模型中,每天 50 mg/kg 剂量时,PF-2341066 几乎完全预防已形成肿瘤的生长,在最后研究日分别抑制 97% 或 84%。相比之下,以 50 mg/kg/天口服给予 PF-2341066 不会显着抑制 MDA-MB-231 乳腺癌模型或 DLD-1 结肠癌模型中的肿瘤生长。在 GTL-16 肿瘤中,在 12.5 mg/kg/天、25 mg/kg/天和 50 mg/kg/天时观察到 CD31 阳性内皮细胞的显着剂量依赖性减少,表明 MVD 的抑制显示出剂量与抗肿瘤功效的依赖性相关性。 PF-2341066 在 GTL-16 和 U87MG 模型中均显示出人 VEGFA 和 IL-8 血浆水平的显着剂量依赖性降低。口服 PF-2341066 后,在 GTL-16 肿瘤中观察到磷酸化 c-Met、Akt、Erk、PLCλ1 和 STAT5 水平的显着抑制。对携带 Karpas299 ALCL 肿瘤异种移植物的严重联合免疫缺陷米色小鼠口服 PF-2341066 会产生剂量依赖性抗肿瘤功效,在初始化合物给药 15 天内,100 mg/kg/d 剂量下所有肿瘤完全消退。此外,在浓度或剂量水平下观察到 PF-2341066 对关键 NPM-ALK 信号传导介质(包括磷脂酶 C-gamma、信号转导器和转录激活剂 3、细胞外信号调节激酶和 Akt)的抑制作用,这与抑制作用相关NPM-ALK 磷酸化和功能。 PF-2341066 可预防与原发肿瘤生长(例如增殖和存活)以及转移(例如侵袭和克隆性)相关的骨肉瘤行为。在通过口服强饲法用 PF-2341066 治疗的裸鼠中,PF-2341066 阻止了骨肉瘤异种移植物的生长以及相关的骨质溶解和皮质外骨基质形成。用 50 mg/kg PF-2341066 处理 c-MET 扩增的 GTL-16 异种移植物可引起肿瘤消退,这与 18F-FDG 摄取缓慢减少有关,并降低葡萄糖转运蛋白 1 (GLUT-1) 的表达。
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动物实验 |
PF-2341066 is administered orally by gavage to athymic mice carrying xenografts (300-800 mm3) at predetermined dose levels. Mice are given PF-2341066 at predetermined intervals, and tumors are removed with humane care. Using a liquid nitrogen-cooled cryomortar and pestle, tumors are snap frozen, ground into a paste, protein lysates are produced, and protein concentrations are measured with a BSA assay. Through the use of immunoprecipitation-immunoblotting or capture ELISA, the amount of total and phosphorylated protein is measured.
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参考文献 |
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分子式 |
C21H22CL2FN5O
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分子量 |
450.34
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精确质量 |
449.12
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元素分析 |
C, 56.01; H, 4.92; Cl, 15.74; F, 4.22; N, 15.55; O, 3.55
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CAS号 |
877399-52-5
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外观&性状 |
white to off-white solid powder
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SMILES |
C[C@H](C1=C(C=CC(=C1Cl)F)Cl)OC2=C(N=CC(=C2)C3=CN(N=C3)C4CCNCC4)N
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InChi Key |
KTEIFNKAUNYNJU-GFCCVEGCSA-N
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InChi Code |
InChI=1S/C21H22Cl2FN5O/c1-12(19-16(22)2-3-17(24)20(19)23)30-18-8-13(9-27-21(18)25)14-10-28-29(11-14)15-4-6-26-7-5-15/h2-3,8-12,15,26H,4-7H2,1H3,(H2,25,27)/t12-/m1/s1
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化学名 |
3-[(1R)-1-(2,6-dichloro-3-fluorophenyl)ethoxy]-5-(1-piperidin-4-ylpyrazol-4-yl)pyridin-2-amine
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别名 |
PF-2341066; PF2341066; PF02341066; PF-02341066; PF 2341066; Crizotinib; PF 02341066; US trade name: Xalkori
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HS Tariff Code |
2934.99.9001
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存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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溶解度 (体外) |
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溶解度 (体内) |
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 50% PEG300 → 5% Tween-80 → 35% ddH2O;假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄 清 DMSO 储备液加到 500 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入350 μL ddH2O定容至 1 mL); 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
1 mM | 2.2205 mL | 11.1027 mL | 22.2054 mL | |
5 mM | 0.4441 mL | 2.2205 mL | 4.4411 mL | |
10 mM | 0.2221 mL | 1.1103 mL | 2.2205 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
NCT02034981 | Active Recruiting |
Drug: Crizotinib | Hematologic Cancers Solid Tumors |
UNICANCER | August 2013 | Phase 2 |
NCT02223819 | Active Recruiting |
Drug: Crizotinib | Uveal Melanoma | Columbia University | March 2015 | Phase 2 |
NCT04439266 | Active Recruiting |
Drug: Crizotinib | Advanced Lymphoma Refractory Lymphoma |
National Cancer Institute (NCI) |
August 12, 2015 | Phase 2 |
NCT04439253 | Active Recruiting |
Drug: Crizotinib | Advanced Lymphoma Refractory Lymphoma |
National Cancer Institute (NCI) |
August 12, 2015 | Phase 2 |
NCT01121588 | Active Recruiting |
Drug: Crizotinib | Neoplasms Malignant | Pfizer | March 22, 2011 | Phase 1 |
Mol Cancer Ther. 2012 Jul;11(7):1557-64. td> |
Mol Cancer Ther. 2012 Jul;11(7):1557-64. td> |