p32-sphingosine-activated protein kinase (EC50 = 8 ± 3 μM)
p18-sphingosine-activated protein kinase (Activates at 20-100 μM) [1]
Protein kinase C (PKC) [2]
Protein phosphatase 2A (PP2A) [4]

p32-鞘氨醇激活蛋白对低剂量的 D-赤型-鞘氨醇有反应，在 2.5 μM 时观察到首次激活，在 10 -20 μM 时观察到最大活性。鞘氨醇相对于其他鞘氨醇立体异构体的潜力，以及鞘氨醇相对于氢化异鞘氨醇的偏好[1]。 D-erythro-Sphingosine 在体外抑制蛋白质调节 C[2]。 D-赤型-鞘氨醇已被证明可以抑制影响细胞调节和众多信号转导的连接多肽 C，并在一系列细胞中显示出抗肿瘤作用 [3]。

---

D-erythro-鞘氨醇 在 Jurkat T 细胞胞质溶胶中激活一种 p32-鞘氨醇激活的蛋白激酶，导致 p32 蛋白磷酸化水平增加约4倍，初始激活浓度为 2.5 μM，峰值活性在 10-20 μM。 [1]
它激活一种 p18-鞘氨醇激活的蛋白激酶，在较高浓度（20-100 μM）下诱导 p18 底物磷酸化，在 100 μM 时磷酸化水平增加5倍。 [1]
p32 激酶的激活对 D-erythro-鞘氨醇 相对于其其他立体异构体（L-erythro, D-threo, L-threo）显示出适度的特异性。 [1]
p18 激酶的激活对鞘氨醇的赤式异构体具有特异性；苏式异构体基本无活性。 [1]
在激活 p32 和 p18 激酶方面，D-erythro-鞘氨醇 优于其二氢类似物（二氢鞘氨醇）。 [1]
油酸可抑制鞘氨醇诱导的 p32 和 p18 磷酸化，IC50 约为 20 μM。 [1]
合成的 D-erythro-鞘氨醇 和商业来源的鞘氨醇制剂在基于囊泡的测定中都能有效抑制纯化的人血小板蛋白激酶C (PKC) 活性，在 50 μM 浓度下观察到完全抑制。 [2]
在使用 Triton X-100/磷脂酰丝氨酸/二酰基甘油的混合胶束测定中，合成和商业的 D-erythro-鞘氨醇 均能抑制纯化的 PKC，50%抑制率对应的浓度约为 ~6 mol%。 [2]
D-erythro-鞘氨醇 抑制了 γ-凝血酶诱导的完整人血小板中 40 kDa 蛋白（一种 PKC 底物）的磷酸化。 [2]
D-erythro-鞘氨醇 以剂量依赖的方式抑制 8 nM γ-凝血酶诱导的人血小板聚集，50%抑制率对应的浓度约为 10 μM。 [2]
D-erythro-鞘氨醇 抑制了 8 nM γ-凝血酶诱导的人血小板 ATP 分泌。 [2]
合成的和商业的 D-erythro-鞘氨醇 对 PKC 活性、血小板 40 kDa 蛋白磷酸化、聚集和分泌的抑制效力是相等的。 [2]
N,N-二甲基鞘氨醇 (DMS) 也能抑制纯化的 PKC，但未发现其污染本研究中使用的商业鞘氨醇制剂。 [2]
在小脑颗粒神经元 (CGNs) 培养模型中，用 D-erythro-鞘氨醇 (DES, 10 nM) 处理 5-20 分钟，可下调酪氨酸-307 磷酸化的 PP2A (pY307) 的水平。 [4]
用 DES (10 nM) 处理 20 分钟，还可降低去甲基化的 Leu-309 PP2A (DML309) 的水平。 [4]
PP2A 活性测定表明，DES 处理在 5-20 分钟的暴露期间增加了 PP2A 的活性。 [4]
DES 处理显著降低了塌陷反应介导蛋白-2 (pCRMP2) 在 5-20 分钟时的磷酸化水平。 [4]
在神经突生长实验中，用抑制性底物 (CSPGs 或 MAG) 预包被培养板会显著减少神经突的生长。用 DES (10 nM) 处理 48 小时可显著逆转这种神经突生长障碍。 [4]

在大鼠脊髓损伤 (SCI) 模型中，通过皮下渗透泵慢性给予 D-erythro-鞘氨醇 (DES, 1 μM 溶液) 7 天，增强了损伤部位周围的 PP2A 活性。 [4]
与载体治疗的大鼠相比，DES 治疗显著降低了损伤脊髓组织中的 pY307 和 pCRMP2 水平。 [4]
脊髓白质的免疫荧光分析显示，DES 治疗后 pY307 和 pCRMP2 信号减少。 [4]
在 SCI 后第 32 天进行生物素化葡聚糖胺 (BDA) 顺行示踪显示，DES 治疗促进了轴突发芽，与载体治疗的对照组不同，可见细小的萌芽延伸至附近的灰质和损伤尾侧。 [4]
根据 BBB (Basso, Beattie, Bresnahan) 和 CBS (联合行为评分) 量表评估，DES 治疗的大鼠在 SCI 后第 7 天至第 28 天表现出显著的运动功能恢复改善。 [4]

蛋白质激酶实验在总体积 50 μl 的体系中进行，包含 5 μl 鞘氨醇悬浮液（或作为对照的乙醇溶液）、5 μl 其他效应物、20 μl Mg²⁺/ATP 溶液（含有 100 mM Tris/HCl pH 7.4, 25 mM MgCl₂, 62.5 μM ATP 和 62.5 μCi/ml [γ-³²P]ATP）以及 20 μl 稀释的 Jurkat T 细胞胞质溶胶（每样品 8–12 μg 蛋白质）。 [1]
将反应混合物孵育，并评估蛋白质磷酸化情况。 [1]
使用两种方法测定蛋白激酶C (PKC) 活性。在囊泡测定法中，在磷脂酰丝氨酸 (PS) 和二油酰甘油 (DAG) 存在下测量酶活性。 [2]
在混合胶束测定法中，使用含有 PS 和 DAG 的 Triton X-100 混合胶束测定 PKC 活性。 [2]
对于抑制研究，在反应混合物中加入不同浓度的 D-erythro-鞘氨醇、商业鞘氨醇或 N,N-二甲基鞘氨醇。酶活性以未添加抑制剂时测得活性的百分比表示。 [2]
使用商业化的蛋白磷酸酶活性测定试剂盒测量 PP2A 活性。从细胞上清液或组织提取物中去除内源性游离磷酸盐。 [4]
将蛋白样品与化学合成的、对 PP2A 最优的磷酸肽底物一起孵育，孵育在优化了 PP2A 活性并抑制了阳离子依赖性磷酸酶 PP2B 和 PP2C 的缓冲液中进行。反应在 33°C 下进行 30 分钟。 [4]
通过测量 630 nm 处钼酸盐-孔雀石绿-磷酸盐复合物的吸光度来确定从底物释放的磷酸盐量。 [4]

从健康志愿者的血液中制备洗涤过的人血小板。 [2]
对于聚集和分泌实验，将血小板与指定浓度的 D-erythro-鞘氨醇（溶于乙醇）预孵育，然后用 8 nM γ-凝血酶刺激。监测聚集和 ATP 分泌情况。 [2]
对于 40 kDa 底物磷酸化实验，在存在或不存在不同鞘氨醇制剂的情况下，用 8 nM γ-凝血酶刺激血小板沉淀。通过 SDS-PAGE 分离磷酸化蛋白，切下 40 kDa 条带，并计数掺入的 ³²P。 [2]
从 1 至 3 日龄的大鼠幼崽中培养原代小脑颗粒神经元 (CGNs)。将解离的组织消化并接种在聚-D-赖氨酸预包被的培养板上。 [4]
在一些实验中，培养板用抑制性底物 (CSPGs 或 MAG) 在 37°C 下预包被 4 小时。 [4]
神经元在接种后 2-4 小时用 D-erythro-鞘氨醇 (DES, 10 nM) 或其他试剂处理。 [4]
对于蛋白质分析，神经元在培养 24 小时后或在处理后指定时间点裂解，用于 Western blotting。 [4]
对于神经突生长分析，神经元处理 48 小时，然后固定并用 βIII-微管蛋白抗体染色。使用图像分析软件测量神经突长度。 [4]
对于 PP2A 活性测量，在处理后指定时间点收集细胞上清液。 [4]

A moderate spinal cord injury (SCI) was induced in adult Sprague-Dawley rats at the T11 level using a weight-drop impactor. [4]
Immediately after SCI, a subcutaneous osmotic pump was implanted close to the injury site. [4]
The pump was filled with either saline (vehicle) or a solution of D-erythro-Sphingosine (DES, 1 μM). [4]
A catheter connected the pump to the subdural space on the dorsal aspect of the spinal cord at the injury center. The pump delivered the solution continuously. [4]
For chronic treatment assessing functional recovery, the pump was removed 7 days after surgery. Behavioral tests (BBB, CBS) were performed periodically up to 28 days post-injury. [4]
For tissue analysis, rats were sacrificed at specified time points (e.g., 7 days post-injury for Western blot and immunofluorescence). [4]

[1]. Regulation of sphingosine-activated protein kinases: selectivity of activation by sphingoid basesand inhibition by non-esterified fatty acids. Biochem J. 1993 Sep 15;294 ( Pt 3):699-703.

[2]. Protein kinase C and platelet inhibition by D-erythro-Sphingosine: comparison with N,N-dimethylsphingosine and commercial preparation. Biochem Biophys Res Commun. 1990 Oct 30;172(2):683-91.

[3]. A concise synthesis of a promising protein kinase C inhibitor: D-erythro-Sphingosine. Arch Pharm Res. 2007 Jan;30(1):22-7.

[4]. Protein phosphatase 2A (PP2A) activation promotes axonal growth and recovery in the CNS. J Neurol Sci. 2015 Dec 15;359(1-2):48-56.

Sphingosine is a sphing-4-enine in which the double bond is trans. It has a role as a human metabolite and a mouse metabolite. It is a conjugate base of a sphingosine(1+). It is an enantiomer of a L-erythro-sphingosine.
An amino alcohol with a long unsaturated hydrocarbon chain. Sphingosine and its derivative sphinganine are the major bases of the sphingolipids in mammals. (Dorland, 28th ed)
Sphingosine has been reported in Rehmannia glutinosa, Glycine max, and other organisms with data available.
An amino alcohol with a long unsaturated hydrocarbon chain. Sphingosine and its derivative sphinganine are the major bases of the sphingolipids in mammals. (Dorland, 28th ed)
See also: L-erythro-Sphingosine (annotation moved to).

---

D-erythro-Sphingosine is a bioactive sphingolipid that can activate specific protein kinases in cell-free systems. [1]
Its effects are stereospecific, with the erythro configuration being crucial for activity, especially for the p18 kinase. [1]
This study distinguishes two distinct sphingosine-activated protein kinases (p32-SAPK and p18-SAPK) based on substrate specificity, activation potency, and stereochemical preference. [1]
Fatty acids like oleic acid can inhibit sphingosine-induced phosphorylation, revealing a potential antagonistic interaction between different lipid messengers in regulating protein kinase activity. [1]
D-erythro-sphingosine is a potent and specific inhibitor of protein kinase C. [2]
Commercial preparations of sphingosine used in this study were found to predominantly contain the D-erythro stereoisomer and contained no detectable N,N-dimethylsphingosine contamination. [2]
This study validates the utility of well-characterized commercial sphingosine as a pharmacological inhibitor of PKC for in vitro and cellular studies. [2]
In this study, D-erythro-Sphingosine (DES) is used as a classical agonist of protein phosphatase 2A (PP2A). [4]
The study identifies a signaling pathway where inhibitory substrates (CSPGs, MAG) activate EGFR, which in turn phosphorylates and inactivates PP2A at Y307. Inactive PP2A fails to dephosphorylate CRMP2, leading to impaired axon growth. [4]
DES acts by activating PP2A, promoting the dephosphorylation of CRMP2, thereby facilitating axon regeneration and functional recovery after spinal cord injury. [4]
This suggests that pharmacological activation of PP2A, for example by D-erythro-Sphingosine, could be a potential therapeutic strategy for central nervous system axonal injuries. [4]

C₁₈H₃₇NO₂

299.49

299.282

C, 72.19; H, 12.45; N, 4.68; O, 10.68

123-78-4

D-erythro-Sphingosine hydrochloride;2673-72-5;D-erythro-Sphingosine-d7;1246304-34-6

5280335

White to off-white solid powder

0.9±0.1 g/cm3

445.9±45.0 °C at 760 mmHg

81-82ºC

223.5±28.7 °C

0.0±2.4 mmHg at 25°C

1.489

6.4

66.48

3

3

15

21

231

2

CCCCCCCCCCCCC/C=C/[C@@H](O)[C@@H](N)CO

WWUZIQQURGPMPG-KRWOKUGFSA-N

InChI=1S/C18H37NO2/c1-2-3-4-5-6-7-8-9-10-11-12-13-14-15-18(21)17(19)16-20/h14-15,17-18,20-21H,2-13,16,19H2,1H3/b15-14+/t17-,18+/m0/s1

2S-amino-4E-octadecene-1,3R-diol

Erythrosphingosine erythro-C18-Sphingosine trans-4-Sphingenine(−)-Sphingosine D-erythro-Sphingosine C-18 Sphingosine (d18

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~50 mg/mL (~166.95 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.35 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

---

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.35 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。