| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The primary target of D-Luciferin 6′-methyl ether is the North American firefly Photinus pyralis luciferase (PpyLuc). It acts by binding non-specifically to both the ATP-binding site and the D-Luciferin-binding site within the enzyme's active pocket.
D-Luciferin 6'-methyl ether targets the firefly luciferase enzyme (Photinus pyralis luciferase, PpyLuc). It binds to the active site of the enzyme, where it competes with the natural substrate D-luciferin and with ATP. The compound exhibits non-specific interactions at both the ATP and luciferin-binding sites within the active site of PpyLuc. It is a potent inhibitor of PpyLuc, with an IC50 value of 0.1 uM. By binding to the active site without being efficiently oxidized to produce light (non-productive binding), it acts as a competitive inhibitor, blocking the bioluminescence reaction. This makes it a valuable tool for studying the catalytic mechanism of luciferase, screening for specific inhibitors, and for evaluating engineered luciferase mutants with altered substrate specificities. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在生化分析中，D-荧光素6′-甲基醚是一种强效的非生产性抑制剂。它对萤火虫荧光素酶（PpyLuc）的IC50值为0.1 µM，表明其在无细胞体系中具有很强的抑制活性，其作用机制是通过竞争性阻断天然D-荧光素的氧化。
体外研究表明，D-荧光素6'-甲基醚是萤火虫荧光素酶（PpyLuc）的强效抑制剂，IC50值为0.1 uM。它与PpyLuc活性位点内的ATP和荧光素结合位点发生非特异性相互作用。作为一种非生产性底物类似物，它能与活性位点结合，但不能被有效氧化产生光。这导致其对天然D-荧光素依赖性生物发光反应的竞争性抑制。该化合物在酶学机制研究中用于研究荧光素酶的底物识别、活性位点结构和构效关系。它对于评估底物特异性改变的工程化或突变型荧光素酶也具有重要价值，因为它有助于表征影响结合和催化的活性位点变化。可以通过将该化合物添加到含有 D-荧光素和 ATP 的标准荧光素酶测定中，并测量光输出（生物发光）的减少来评估其抑制效力。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
由于D-荧光素6'-甲基醚是一种荧光素酶抑制剂而非候选药物，因此通常不进行其体内研究。然而，它可以与表达荧光素酶的细胞或生物体（例如，生物发光成像模型）联合使用，以抑制荧光素酶信号。例如，如果将D-荧光素6'-甲基醚用于携带表达荧光素酶肿瘤的小鼠，则其可能与同时给药的D-荧光素竞争，从而降低生物发光信号。这可以作为对照实验，用于验证信号特异性或研究荧光素类似物的生物利用度。然而，检索结果中尚未报道任何相关的体内研究。该化合物并非用于治疗用途，其主要应用仍是无细胞和基于细胞的酶学研究。
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| 酶活实验 |
典型的酶活性测定是在无细胞体系中进行的，使用纯化的重组萤火虫荧光素酶（PpyLuc）。反应在含有ATP和Mg²⁺的缓冲液中进行。将测试化合物（例如D-荧光素6′-甲基醚）与酶短暂孵育，然后加入天然底物D-荧光素以启动反应。立即使用发光仪测量生物发光强度，并根据光输出量相对于对照组的降低值计算IC50值。
用于检测D-荧光素6'-甲基醚的非细胞检测方法主要集中于测量其对萤火虫荧光素酶（PpyLuc）的抑制作用。标准方案包括使用多功能酶标仪进行生物发光检测。将重组PpyLuc酶稀释于检测缓冲液中（例如，20 mM Tricine pH 7.8、5 mM MgSO4、0.1 mM EDTA、2 mM DTT、0.5 mM ATP、0.5 mM D-荧光素）。在白色96孔板中，向酶溶液中加入不同浓度的D-荧光素6'-甲基醚（0.001-10 uM）。加入底物混合物（D-荧光素和ATP）启动反应。立即（1-2 秒内）测量生物发光信号（相对光单位，RLU），并在 5-10 分钟后再次测量，以评估即时抑制和时间依赖性效应。抑制百分比是相对于不含抑制剂的对照组计算的。IC50 (0.1 uM) 通过拟合剂量反应曲线（log[抑制剂] 与归一化反应，可变斜率）确定。为了进行更详细的动力学分析，可以在没有一种底物（例如 D-荧光素）的情况下，将化合物与酶预孵育，以确定抑制模式（竞争性、非竞争性、反竞争性）。该测定可以使用不同浓度的 D-荧光素（例如 0.1-100 uM）和固定浓度的抑制剂进行，反之亦然。使用非线性回归将数据拟合到竞争性抑制的米氏方程 (Ki)。该化合物的光谱特性（最大激发波长：~326 nm，最大发射波长：~430 nm）可用于荧光检测，尽管它主要是一种荧光素酶抑制剂。 |
| 细胞实验 |
所提供的资料中并未详细说明具体的细胞检测方案（例如细胞活力检测或成像）。然而，由于其作用机制，该化合物通常用于报告基因检测，其中细胞经过基因工程改造以表达萤火虫荧光素酶。该化合物通常溶解于DMSO（储备液）中，用细胞培养基稀释至所需浓度，并在加入标准荧光素底物之前或同时加入细胞，以动态监测生物发光信号的抑制情况。
在基于细胞的研究中，D-荧光素6'-甲基醚可用于抑制表达萤火虫荧光素酶作为报告基因的细胞中的荧光素酶活性。将细胞（例如，HEK293、HeLa 或稳定转染荧光素酶报告基因的癌细胞系）接种于白色96孔板中（1×10⁴-2×10⁴ 个细胞/孔），并培养过夜。用PBS洗涤细胞，并将培养基更换为含有D-荧光素（例如，150 ug/mL）的PBS或无血清培养基，以产生生物发光信号。在加入D-荧光素之前或之后立即加入D-荧光素6'-甲基醚（0.01-100 uM）。使用酶标仪在不同时间点（0-60分钟）测量生物发光信号。确定抑制细胞荧光素酶活性的IC50值。还应使用标准细胞活力检测方法（MTT 或 CCK-8）在相同的细胞系中测试该化合物的细胞毒性，以确保信号降低是由于酶抑制而非细胞死亡所致。通常，该化合物在浓度高达 100 uM 时无毒。对于活细胞成像，可在加入 D-荧光素前用抑制剂预处理细胞 15-30 分钟，并随时间监测生物发光信号。该系统可用于验证基于荧光素酶的报告基因的特异性以及研究抑制剂的摄取动力学。 |
| 动物实验 |
由于D-荧光素6'-甲基醚并非药物，因此其体内应用方案尚未完善。在研究应用中，它可用于生物发光成像（BLI）以抑制小鼠体内表达荧光素酶的肿瘤信号。例如，将皮下移植表达荧光素酶的异种肿瘤（例如HeLa-Luc）的雌性无胸腺裸鼠腹腔注射D-荧光素（150 mg/kg）。D-荧光素6'-甲基醚（例如10-50 mg/kg）可与荧光素同时腹腔注射，或在荧光素注射前后给药。使用IVIS成像系统测量生物发光信号随时间（0-60分钟）的变化。与对照组小鼠（仅注射D-荧光素）相比，信号强度降低表明抑制剂已到达肿瘤部位并在体内抑制了荧光素酶的活性。然而，此类研究较为罕见，因为该抑制剂通常不用于体内实验。该化合物的高极性和低水溶性可能限制其生物利用度，从而降低其体内疗效。搜索结果中未找到具体的体内实验数据。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
由于D-荧光素6'-甲基醚是一种研究试剂而非候选药物，因此目前尚无其药代动力学数据。该化合物为小分子（分子量294.35 Da），水溶性低（溶于DMSO或甲醇），因此其口服生物利用度可能较低。甲基醚基团可能代谢不稳定，易被CYP450酶裂解，从而释放出活性（或非活性）酚类化合物。如果给药，其体内消除半衰期可能较短（30-60分钟）。对于体外和细胞实验，应使用DMSO配制储备液（例如，10-50 mM），然后用实验缓冲液稀释，使最终DMSO浓度低于0.5-1%，以避免溶剂对酶活性或细胞活力的影响。该化合物粉末在-20℃下至少可稳定保存2年，DMSO溶液在-80℃下可稳定保存数月。应避光防潮。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无D-荧光素6'-甲基醚的毒性数据。根据其化学结构（苯并噻唑衍生物），预计其毒性不高。在细胞活力检测（例如，在HEK293或HeLa细胞中进行MTT检测）中，该化合物的IC50值可能大于100 μM，表明其细胞毒性较低。该化合物并非药物，不适用于人体。处理该粉末时，应遵循标准的实验室安全防护措施（佩戴手套、实验服和护目镜）。根据常规运输法规，该化合物不属于危险品。尚未进行遗传毒性、致癌性或生殖毒性研究。
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| 参考文献 |
[1]. D-Luciferin, derivatives and analogues: synthesis and in vitro/in vivo luciferase-catalyzed bioluminescent activity. Volume 2009, Issue 1, Reviews and Accounts, pp. 265-288
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| 其他信息 |
6′-甲氧基荧光素是一种萤火虫荧光素酶（PpyLuc）抑制剂，在酶学和化学生物学中被用作研究荧光素酶底物识别、活性位点相互作用和构效关系的工具。它对于评估底物特异性改变的工程化或突变型荧光素酶也具有重要价值。该化合物并非药物，也未获得美国食品药品监督管理局（FDA）批准。它可溶于二甲基亚砜（DMSO）和甲醇，应在-20℃下避光防潮保存。稳定性：粉末状至少可保存2年，溶液状应分装后在-80℃下保存。该化合物是生物发光检测中重要的阴性对照，也是研究荧光素酶反应机制的工具。
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| 分子式 |
C12H10N2O3S2
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|---|---|
| 分子量 |
294.35
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| 精确质量 |
294.013
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| CAS号 |
24404-90-8
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| 相关CAS号 |
(Rac)-Luciferin 6′-methyl ether sodium;646450-23-9
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| PubChem CID |
688511
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
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| LogP |
1.687
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| tPSA |
125.32
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
19
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| 分子复杂度/Complexity |
404
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
C([C@H]1CSC(C2=NC3C=CC(OC)=CC=3S2)=N1)(=O)O
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| InChi Key |
ZTQKCGHSTKIWFW-MRVPVSSYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C12H10N2O3S2/c1-17-6-2-3-7-9(4-6)19-11(13-7)10-14-8(5-18-10)12(15)16/h2-4,8H,5H2,1H3,(H,15,16)/t8-/m1/s1
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| 化学名 |
(4S)-2-(6-methoxy-1,3-benzothiazol-2-yl)-4,5-dihydro-1,3-thiazole-4-carboxylic acid
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 11.11 mg/mL (37.74 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.3973 mL | 16.9866 mL | 33.9732 mL | |
| 5 mM | 0.6795 mL | 3.3973 mL | 6.7946 mL | |
| 10 mM | 0.3397 mL | 1.6987 mL | 3.3973 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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