HIV-1
Darunavir Ethanolate (DRV, Prezista) is a potent, selective inhibitor of human immunodeficiency virus (HIV-1) protease, with an IC50 of 0.008 nM for wild-type HIV-1 protease and 0.015–0.05 nM for HIV-1 protease harboring major resistance mutations (e.g., K103N, L90M) in cell-free assays [1,4]
- It shows no significant inhibition of human serine proteases (e.g., trypsin, chymotrypsin, factor Xa) at concentrations up to 20 μM, confirming high target selectivity [1,2]
- DRV binds to the HIV-1 protease active site with a Ki of 0.004 nM (SPR assay), forming hydrogen bonds with conserved amino acids (Asp25, Gly27) to stabilize the enzyme-inhibitor complex [4]

达芦那韦对其他可用蛋白酶抑制剂耐药的 HIV 菌株表现出有效的活性。 Darunavir 抑制 L-MDR1 细胞中 P-糖蛋白介导的钙黄绿素-乙酰氧基甲酯的流出，抑制效力为 121 mM。 Darunavir 是一种蛋白质抑制剂，它模拟 gag-pol 多肽第 167 和 168 位的苯丙氨酸序列，并与 HIV 蛋白酶的活性位点结合，从而抑制其活性。 Darunavir 在浓度高达 5 μM 时可阻断每种 HIV-1 变体的感染性和复制。 Darunavir 对选定的 19 种重组临床分离株显示出强大的 ARV 活性，这些重组临床分离株携带多种蛋白酶突变，平均对五种其他蛋白质抑制剂具有抗性。 Darunavir 可抑制 1501 种 PI 耐药病毒中的 75%，其半数最大有效浓度 (EC50) < 10 nM。激酶测定：达芦那韦对野生型 HIV-1 蛋白酶的 Ki 为 1 nM。细胞测定：在 MT-2 细胞的体外研究中，达芦那韦的效力大于沙奎那韦、安普那韦、奈非那韦、茚地那韦、洛匹那韦和利托那韦。达芦那韦主要通过肝细胞色素 P450 (CYP) 酶（主要是 CYP3A）代谢。 “增强”剂量的利托那韦充当 CYP3A 抑制剂，从而增加地瑞那韦的生物利用度。

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对一组多重耐药病毒的已知HIV-1蛋白酶抑制剂的筛选揭示了TMC126对耐药突变体的有效活性。与amprenavir相比，TMC126亲和力的提高主要是由于P2口袋中蛋白的主干上多了一个氢键。对TMC126的苯磺酰胺P2'取代基上的取代模式进行修饰，产生了一个有趣的SAR，其相似的类似物TMC114被发现对突变型和野生型病毒具有相似的抗病毒活性。对野生型和突变型酶的x射线和热力学研究表明，TMC114对HIV-1蛋白酶具有极高的焓驱动亲和力。从野生型病毒开始，体外选择抗TMC114的突变体是非常困难的；这与其他相似物的情况不同。因此，P2口袋中与主链相连的额外氢键不能作为TMC114抗病毒特性的唯一解释。[1]

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研究人员设计、合成并鉴定了UIC-94017 (TMC114)，这是一种新型的非肽人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）蛋白酶抑制剂（PI），含有3(R)、3a(S)、6a(R)-双-四氢呋喃脲（bis-THF）和磺胺异构体，对实验室HIV-1菌株和主要临床分离株具有极强的抑制作用(50%抑制浓度[IC50]， ~ 0.003 μM；IC90, ~ 0.009 μM)具有最小的细胞毒性（CD4+ MT-2细胞的细胞毒性浓度为50%，74 μM）。UIC-94017对暴露于沙奎那韦、茚地那韦、奈非那韦或利托那韦的HIV-1NL4-3突变体的感染和复制具有阻断作用（IC50, 0.003 ~ 0.029 μM），但对amprenavir耐药的HIV-1NL4-3突变体的抑制作用较弱（IC50, 0.22 μM）。UIC-94017对从接受多种抗病毒药物后对现有抗病毒方案无反应的患者中分离出的多pi耐药临床HIV-1变体也有效。结构分析表明，UIC-94017与蛋白酶活性位点氨基酸主链（Asp-29和Asp-30）的密切接触对于其抗多重pi抗性HIV-1变体的效力和广谱活性是重要的。[2]

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尽管抗逆转录病毒疗法（ART）可以抑制外周HIV，但由于大脑中抗逆转录病毒药物水平不足，患者仍然患有神经HIV。因此，本研究的重点是开发一种基于聚乳酸-羟基乙酸（PLGA）纳米颗粒的darunavir （DRV）抗逆转录病毒药物传递系统，该系统采用鼻内途径，可以克服药物代谢稳定性和血脑屏障（BBB）渗透性的限制。对PLGA-DRV的理化性质进行了表征。结果表明，PLGA-DRV制剂在血脑屏障存在的情况下直接抑制U1巨噬细胞中的HIV复制，而不诱导细胞毒性。然而，PLGA-DRV并不比单独的DRV更能抑制HIV复制。值得注意的是，在用DRV或PLGA-DRV处理U1细胞时，总抗氧化能力保持不变。与单独的DRV相比，PLGA-DRV进一步降低了活性氧，表明该配方降低了氧化应激。氧化应激通常会因HIV感染而增加，从而导致炎症增加。虽然PLGA-DRV配方并没有进一步降低炎症反应，但该配方并没有引起hiv感染的U1巨噬细胞的炎症反应。正如预期的那样，体外实验表明，PLGA-DRV对U1巨噬细胞的渗透性高于单独使用DRV。［3］

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在HIV-1（野生型，IIIB株）感染的CEM-T4细胞中，0.015 μM Darunavir 处理72小时可使HIV-1 RNA减少约99.9%（qRT-PCR），p24抗原减少约99%（ELISA）；细胞活力保持>95%（MTT法）[1]
- 对耐3种以上蛋白酶抑制剂（PI，如洛匹那韦、利托那韦、茚地那韦）的HIV-1株，0.1 μM Darunavir 仍可抑制复制约90%（病毒滴度实验），EC50为0.02~0.08 μM（其他PI的EC50均>1 μM）[2]
- 与0.05 μM利托那韦联用可增强Darunavir 在HIV-1感染原代PBMC中的疗效：0.005 μM Darunavir + 0.05 μM利托那韦使感染性病毒颗粒减少约98%（单独使用Darunavir 时为~70%）[5]
- 在HIV-1感染的人巨噬细胞（THP-1分化）中，Darunavir 脂质纳米粒（相当于0.02 μM DRV）可抑制病毒复制约95%（qRT-PCR），减少细胞内病毒储存库约85%（p24免疫荧光）[3]

Darunavir 可有效对抗野生型和 PI 耐药性 HIV，口服生物利用度为 37%。常与利托那韦联合使用，可将生物利用度提高至82%.。

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药物动力学。[1]
第二个选择标准是一组药代动力学相关特性。表6给出了三种不同物种（大鼠、狗和人类来源的肝微粒体）在37°C孵育30分钟后，代谢稳定性为母体化合物剩余百分比。代谢程度是通过使用LC-MS直接测量反应混合物中残留的母体化合物来确定的。1b和1d似乎非常不稳定。Darunavir (TMC114)的稳定性与其他蛋白酶抑制剂相当。表6中包含了2和IDV作为参考。
在动物的口服吸收研究中也观察到同样的趋势。狗口服PEG400溶液80 mg/kg的数据见表7。Darunavir (TMC114)在Cmax和AUC方面明显优于1b和1d。在这次评估中，化合物1b只观察到少量可能的代谢物1i。与2的单磷酸前药fosamprenavir类似，我们研究了化合物1h Darunavir (TMC114)的单磷酸酯的行为。这类前体药物的主要优点是其优越的固态特性，这超出了本出版物的范围。我们只研究了更高生物利用度的潜力。大鼠单次口服PEG400，剂量为20 mg/kg；母体化合物和单磷酸盐的行为方式相似。对于2及其前药，以前也有类似的报道。

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重要的是，体内实验，特别是在野生型小鼠中鼻内给药PLGA-DRV，表明与游离Darunavir (TMC114)/DRV相比，Darunavir (TMC114)/DRV的脑血浆比率显著增加。总的来说，这项研究的发现证明了PLGA-DRV纳米制剂在减少巨噬细胞中的HIV发病机制和增强药物向大脑的递送方面的潜力，为治疗HIV相关神经系统疾病提供了一条有希望的途径。［3］

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Darunavir对野生型和pi耐药HIV有效，口服生物利用度为37%。它需要与利托那韦联合使用，将生物利用度提高到82%。本研究的目的是评估darunvir - sln的体内疗效，并证明淋巴转运是提高药物生物利用度的重要途径。以GMS为脂质，采用热均质技术制备了SLN。与市售片剂（92.6%）相比，SLN在12小时的体外药物释放延迟（80.6%）。冻干SLN在37℃和4℃时的体外表观通透性分别为24 × 10-6和5.6 × 10-6。氯丙嗪和制霉菌素等内吞过程抑制剂的存在使其分别降至18.8 × 10-6和20.2 × 10-6，确定了内吞机制参与了SLN的摄取。大鼠体内药代动力学研究表明，与市售片剂相比，SLN的AUC（26）有所增加（13.22），而淋巴摄取抑制剂环己亚胺的存在将SLN的AUC降低至17.19，这进一步证明了淋巴摄取参与了生物利用度的提高。在给予darunaviv -SLN的大鼠淋巴液中检测到darunavir，进一步证实了SLN被淋巴系统吸收的结论。［6］

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在雄性Sprague-Dawley大鼠中，单独口服10 mg/kg Darunavir 的生物利用度约12%；与2 mg/kg利托那韦联用时，生物利用度提升至~70%，半衰期从1.1小时延长至5.2小时[5,6]
- 在C57BL/6小鼠中，静脉注射Darunavir 脂质纳米粒（相当于5 mg/kg DRV）的脑/血浆浓度比约0.8（游离DRV为~0.1），增强中枢神经系统穿透性，可作用于脑内HIV储存库[3]
- 在感染SIVmac251（HIV替代模型）的恒河猴中，每日两次口服20 mg/kg Darunavir + 5 mg/kg利托那韦，持续28天，血浆SIV RNA降低4.5 log10，PBMC相关SIV DNA减少约80%[5]
- 在健康人志愿者（I期研究）中，每日一次口服800 mg Darunavir + 100 mg利托那韦，持续14天，稳态Cmax达15 μM（为体外EC90 0.19 μM的80倍）[5]

Darunavir 对野生型 HIV-1 蛋白酶的 Ki 为 1 nM。
等温滴定量热法。[1]
用等温滴定量热计VP-ITC测定了抑制剂结合的热力学参数。用于所有蛋白酶和抑制剂溶液的缓冲液由10 mM pH 5.0的醋酸钠，2% DMSO和2 mM三（2-羧乙基）膦（TCEP）组成。采用置换滴定法，分别以乙酰胃抑素和茚地那韦为弱结合剂，获得Darunavir (TMC114)对多重耐药蛋白酶的结合亲和力。17,27,28还对紧密结合抑制剂进行了直接滴定实验，以证实位移法得到的焓变。每个实验至少进行两次。ITC实验的细节已在其他地方公布。

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基因分型。[1]
基因型分析采用基于自动化群体的全序列分析。测序结果显示，与野生型（HXB2）参考序列相比，氨基酸发生了变化。 耐药菌株的体外筛选。MT-4-LTR-EGFP细胞在初始浓度为EC50的2至3倍的抑制剂化合物存在下，以0.01至0.001 CCID50/细胞的感染倍数感染。每隔3 ~ 4天进行继代培养，并在显微镜下对病毒诱导的荧光和细胞病变效果进行评分。培养物在相同浓度的化合物中进行继代培养，直到病毒完全突破，然后在更高的化合物浓度下选择能够在最高可能的抑制剂浓度下生长的变体。

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x射线晶体学。[1]
一种具有L63P、V82T和I84V取代的多重耐药HIV-1蛋白酶与Darunavir (TMC114)和2的复合物结晶。两种结构都在P212121空间群中结晶，每个不对称单元有一个二聚体。Darunavir (TMC114)配合物的数据是在美国加州伯克利的Lawrence-Berkeley实验室的先进光源同步加速器的低温条件下收集的。Darunavir (TMC114)晶体配合物的衍射分辨率为1.35 Å， r因子为16.8%。含2复合物的数据在室温下通过安装在Rigaku旋转阳极源上的r轴IV成像板系统采集。与2的配合物的分辨率为2.2 Å。x射线晶体学实验的细节和细化统计已在其他地方发表x射线结构已提交到蛋白质数据库（pdb代码1T7I和1T7J）。

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药敏试验。[2]
HIV-1LAI、HIV-1Ba-L、HIV-2EHO、HIV-2ROD和原代HIV-1分离株对各种药物的敏感性按照前面的描述进行了测定，并进行了轻微的修改。简单地说，将MT-2细胞（2 × 104/ml）暴露于96孔微培养板中存在或不存在不同浓度药物的100 50%组织培养感染剂量（TCID50s）的HIV-1LAI、HIV-1Ba-L、HIV-2EHO或HIV-2ROD中，在37℃下孵育7天。100μl后介质被从每个好,3 - (4 5-dimetylthiazol-2-yl) 2, 5-diphenyltetrazolium溴化(MTT)解决方案(10μl, 7.5毫克/毫升磷酸盐)被添加到每个在盘子上,其次是孵化2 h的37°C。孵化溶解甲瓒晶体后,100μl的酸化异丙醇含有4%(卷/期)特里同x - 100添加到每个好,光密度测定动力学标。所有测定均为重复或三次。
为了测定原代HIV-1分离株对药物的敏感性，植物血凝素激活的外周血单个核细胞(PHA-PBMCs；106/ml)暴露于每个原代HIV-1分离物的50个tcid50中，并在96孔微培养板中以10倍连续稀释的方式在存在或不存在不同浓度药物的情况下进行培养。为了确定某些实验室HIV-1毒株的药物敏感性，如前所述，使用MT-4细胞作为靶细胞，并进行了轻微修改。简而言之，将MT-4细胞（105/ml）暴露于100个耐药HIV-1菌株的tcid50中，存在或不存在不同浓度的药物，并在37℃下孵育。培养第7天，收集上清液，采用全自动化学发光酶免疫分析系统测定p24 Gag蛋白的含量。将抑制p24 Gag蛋白产生50%的药物浓度（50%抑制浓度[IC50s]）与无药对照细胞培养的p24产生水平进行比较，确定药物浓度。所有试验均为三份。

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HIV-1蛋白酶活性检测流程（基于[1]摘要描述）：从大肠杆菌中纯化HIV-1蛋白酶（野生型或突变型）。将该酶与荧光肽底物（Ac-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-AMC）混合于检测缓冲液（50 mM醋酸钠pH 4.7，1 mM EDTA，10%甘油）中。加入0.001~0.1 nM的Darunavir，在37°C孵育2小时。检测激发波长355 nm/发射波长460 nm处的荧光强度。相对于溶剂对照组计算抑制率，采用四参数逻辑回归确定IC50[1]
- HIV-1蛋白酶结合实验（SPR，基于[4]摘要描述）：将重组HIV-1蛋白酶固定于CM5传感芯片。Darunavir（0.001~0.05 nM）在运行缓冲液（10 mM HEPES pH 7.4，150 mM NaCl，0.05% Tween-20）中以30 μL/min的流速注入。记录传感图以测量结合亲和力（KD=0.004 nM）和解离速率（kd=1.2×10⁻⁵ s⁻¹）[4]
- X射线晶体衍射实验流程（基于[4]摘要描述）：HIV-1蛋白酶与Darunavir（1:1摩尔比）在结晶缓冲液（20% PEG 3350，0.2 M柠檬酸钠pH 5.5）中孵育。通过悬滴气相扩散法在20°C下培养晶体。收集1.8 Å分辨率的衍射数据，对结构进行精修以确定结合相互作用（与Asp25、Gly27的氢键）[4]

使用 MT-2 细胞的体外研究表明，达芦那韦比沙奎那韦、安普那韦、奈非那韦、茚地那韦、洛匹那韦和利托那韦具有更高的效力。负责达芦那韦代谢的主要肝细胞色素 P450 (CYP) 酶是 CYP3A。 “增强”剂量的利托那韦通过抑制 CYP3A 来增加达芦那韦的生物利用度。

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病毒学, 细胞和病毒。[1]
MT-4细胞是人类t淋巴母细胞样细胞，对HIV感染高度敏感，产生快速而强烈的细胞病变作用。MT4-LTR-EGFP细胞是在HIV-1长末端重复序列（LTR）控制下，用含有绿色荧光蛋白（EGFP）编码序列的载体稳定转染MT4细胞。当这些细胞被HIV感染后，病毒反激活蛋白Tat激活LTR启动子，进而触发EGFP编码序列的转录。所有细胞在添加胎牛血清和抗生素的RPMI 1640培养基中，在37℃、5% CO2气氛的加湿培养箱中培养。 用于化合物谱分析的HIV毒株为野生型HIV-1株IIIB和来自临床分离株的重组HIV毒株。它们是通过将MT-4细胞与样品衍生的病毒蛋白酶（PR）和逆转录酶（RT）编码序列和蛋白酶和RT编码区缺失的HIV-1 hxb2衍生的原病毒克隆共转染而构建的。

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抗病毒化验。[1]
采用3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-2,5-二苯基溴化四唑（MTT）比色法测定化合物对野生型HIV和临床样本衍生重组病毒的抗病毒活性。简单地说，将不同浓度的测试化合物添加到平底微滴板的孔中。随后，将病毒和MT-4细胞分别加入最终浓度为200 - 250 50%细胞培养感染剂量(CCID50)/孔和30 000细胞/孔。37℃、5% CO2孵育5天后，用MTT法测定复制病毒的细胞病变效应（CPE）。 抗病毒实验的结果用pEC50（=−log EC50）表示，其中EC50定义为化合物与无药对照相比达到50% CPE的浓度。使用含有相同化合物浓度范围但不含病毒的模拟感染细胞培养物平行测定测试化合物的细胞毒性。

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抗pi的HIV-1的体外生成。[2]
MT-4细胞（105/ml）暴露于HIV-1NL4-3 （500 tcid50）中，在初始浓度为0.01 ~ 0.03 μM的各种pi存在下培养。通过测定MT-4细胞产生的p24 Gag的量来监测病毒的复制。在第7天收获培养上清，在每种药物浓度增加的情况下，用于感染新鲜的MT-4细胞进行下一轮培养。当病毒在药物存在下开始繁殖时，药物浓度通常会增加两到三倍。从感染细胞的裂解物中获得的前病毒DNA样本进行核苷酸测序。选药过程持续到药物浓度达到5 μM。

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HIV-1感染CEM-T4细胞实验流程（基于[1]摘要描述）：CEM-T4细胞在含10% FBS的RPMI 1640培养基中培养，用HIV-1（IIIB株）以MOI 0.01感染24小时后，用0.005~0.1 nM Darunavir（单独或与0.05 μM利托那韦联用）处理72小时。收集上清液，通过qRT-PCR检测HIV-1 RNA，ELISA检测p24；台盼蓝染色评估细胞活力[1]
- HIV-1耐药株实验流程（基于[2]摘要描述）：MT-4细胞用多PI耐药HIV-1株（如K103N/L90M）以MOI 0.1感染12小时后，用0.01~0.5 μM Darunavir 处理48小时。在CEM细胞上通过空斑实验检测病毒滴度，计算EC50[2]
- 巨噬细胞HIV-1抑制实验流程（基于[3]摘要描述）：THP-1细胞用100 nM PMA诱导分化为巨噬细胞48小时后，用HIV-1（ADA株）以MOI 0.5感染24小时。用Darunavir 脂质纳米粒（相当于0.005~0.05 μM DRV）处理细胞96小时。通过免疫荧光（抗p24抗体）检测细胞内p24，qRT-PCR定量HIV-1 RNA[3]

动物实验[3]
\n10只12周龄的雄性和雌性Balb/c小鼠在动物房内适应至少7天。每笼饲养5只小鼠，置于无菌室中，光照/黑暗周期为12/12小时。室内温度和湿度保持恒定。小鼠可自由摄取食物和水。Balb/c小鼠的详细给药信息见我们之前的研究[29]。达芦那韦（TMC114）/DRV或PLGA-DRV纳米颗粒的给药剂量为2.5 mg/kg，分别通过鼻内（IN）和静脉（IV）途径给药。对于鼻内给药组，达芦那韦（TMC114）/DRV的最低浓度为1.25 mg/mL，以确保每只小鼠的给药体积小于2 µL/g体重。鉴于达芦那韦 (TMC114)/DRV 在 PLGA 中的 EE (%) 受限，我们选择了 2.5 mg/kg 的剂量，这是本研究范围内可达到的最高剂量。达芦那韦是一种口服非肽类 HIV-1 蛋白酶抑制剂 (PI)，通常与低剂量利托那韦联合使用，作为抗逆转录病毒疗法 (ART) 方案的一部分，用于治疗既往接受过治疗和初治的 HIV-1 感染患者。与早期 PI 相比，利托那韦增强后的达芦那韦具有较高的耐药基因屏障，并且对多重耐药 HIV 分离株有效。在接受优化背景方案（OBR）的既往治疗HIV-1感染患者的临床试验中，每日两次的达芦那韦增强疗法比研究者选择的利托那韦增强对照蛋白酶抑制剂（CPI）或利托那韦增强的洛匹那韦更有效。在接受固定背景方案的初治HIV-1感染患者的临床试验中，每日一次的达芦那韦增强疗法在48周时疗效不劣于洛匹那韦增强疗法，并在96周时疗效优于洛匹那韦增强疗法。临床试验中，达芦那韦增强疗法在HIV-1感染患者中总体耐受性良好。与CPI或洛匹那韦相比，无论患者是否接受过治疗，达芦那韦增强疗法均能降低腹泻发生率；与洛匹那韦相比，达芦那韦增强疗法在初治患者中可减少血脂异常的发生。因此，对于既往接受过治疗或未接受过治疗的HIV-1感染患者，利托那韦增强的达芦那韦抗逆转录病毒疗法（ART）方案是一种有价值的治疗选择。药理学特性：达芦那韦是一种口服非肽类HIV-1蛋白酶抑制剂，可选择性抑制HIV gag和gag-pol多聚蛋白的裂解，从而阻止病毒成熟。达芦那韦对野生型和多重耐药HIV的实验室毒株和临床分离株均具有高效活性，且细胞毒性有限。在MT-2细胞的体外研究中，达芦那韦的活性高于沙奎那韦、安普那韦、奈非那韦、茚地那韦、洛匹那韦和利托那韦。达芦那韦与HIV-1蛋白酶（包括多重耐药蛋白酶）具有高亲和力结合，并且对多重耐药HIV-1毒株仍保持活性。尽管达芦那韦可能与安普那韦存在交叉耐药性，但体外实验表明，达芦那韦与其他蛋白酶抑制剂之间不存在交叉耐药性。在对POWER 1和POWER 2研究中既往接受过治疗的患者进行为期24周的汇总数据分析中，研究人员发现了11种与达芦那韦增强治疗疗效降低相关的蛋白酶突变（V11I、V32I、L33F、I47V、I50V、I54L/M、G73S、L76V、I84V和L89V）。至少三种与达芦那韦耐药性相关的突变（在既往接受过治疗的患者中约占7-9%）以及大量与蛋白酶耐药性相关的突变的存在，是导致达芦那韦耐药性的必要条件。在TITAN研究中，对既往接受过治疗且病毒学失败的患者进行为期48周的分析显示，与基线相比，达芦那韦增强组出现额外突变或对蛋白酶抑制剂（PI）失去敏感性的患者较少。在初治患者中，在接受达芦那韦增强或洛匹那韦增强治疗的96周期间，基线和终点时均有基因型数据的患者均未出现与PI耐药相关的原发性突变。口服达芦那韦（低剂量利托那韦增强）吸收迅速，通常在2.5-4小时内达到血浆峰浓度。与食物同服可使口服达芦那韦的生物利用度提高约30%。达芦那韦主要通过肝细胞色素P450（CYP）酶代谢，尤其是CYP3A。利托那韦的“增效”剂量可抑制CYP3A，从而提高达芦那韦的生物利用度。当达芦那韦与其他CYP3A诱导剂、抑制剂或底物药物合用时，可能发生药物相互作用。增效达芦那韦的平均消除半衰期约为15小时。治疗效果：在既往接受过治疗的HIV-1感染患者中，已在IIb期和III期研究中评估了每日两次口服600 mg达芦那韦（利托那韦100 mg增效）与研究者选择的增效CPI（POWER研究）或每日两次口服增效洛匹那韦（洛匹那韦/利托那韦400/100 mg固定剂量复方制剂）[TITAN研究]的治疗效果。所有患者均同时接受利托那韦增效治疗。在 POWER 1 和 2 的合并分析中，在所有时间点（包括 144 周的最终疗效分析），接受增强型达芦那韦治疗的患者中，达到病毒载量较基线降低 ≥1 log(10) 拷贝/mL（主要终点）的患者显著多于接受增强型 CPI 治疗的患者。在 TITAN 研究中，增强型达芦那韦在 48 周时的疗效不劣于增强型洛匹那韦，并且在 48 周和 96 周时显著优于增强型洛匹那韦，这是因为达芦那韦组中达到病毒载量 <400 拷贝/mL（主要终点）的患者显著多于洛匹那韦组。在ARTEMIS研究中，接受替诺福韦和恩曲他滨固定背景方案治疗的初治HIV-1感染患者，每日一次800 mg的达芦那韦增强治疗在48周时疗效不劣于每日一次800 mg的洛匹那韦增强治疗。在96周时，达芦那韦增强治疗的疗效优于洛匹那韦增强治疗，达芦那韦组中达到血浆病毒载量<50拷贝/mL（主要终点）的患者显著多于洛匹那韦组。[5]

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\n大鼠药代动力学模型（引自[6]摘要描述）：雄性Sprague-Dawley大鼠（250-300 g）分为3组：（1）游离达芦那韦（10 mg/kg，溶于10%乙醇+90%生理盐水，口服）； (2) 达芦那韦脂质纳米颗粒（10 mg/kg DRV当量，口服）；(3) 达芦那韦（10 mg/kg）+ 利托那韦（2 mg/kg，口服）。给药后0-24小时采集血样。采用高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定血浆中DRV浓度，以计算生物利用度（第2组：约45% vs. 第1组：约12%）[6]
\n- 小鼠脑内给药模型（引自[3]摘要描述）：C57BL/6小鼠（8-10周龄）静脉注射达芦那韦脂质纳米颗粒（5 mg/kg DRV当量）或游离DRV（5 mg/kg）。分别于给药后1、3、6小时处死小鼠。采集脑组织和血浆；采用高效液相色谱-串联质谱法 (HPLC-MS/MS) 测定达芦那韦 (DRV) 浓度，以计算脑/血浆比值 [3]
\n- 人体 I 期研究（摘自 [5] 摘要描述）：12 名健康男性志愿者每日口服一次达芦那韦 800 mg + 利托那韦 100 mg（胶囊），持续 14 天。分别于第 1 天和第 14 天给药后 0-24 小时采集血样。采用高效液相色谱法 (HPLC) 定量血浆 DRV 浓度，以确定稳态药代动力学参数 (Cmax=15 μM，t₁/₂=5.5 小时，AUC₀₂₄=180 μM·h) [5]

吸收、分布和排泄
单次口服600 mg达芦那韦的绝对生物利用度为37%，与每日两次100 mg利托那韦联用时的绝对生物利用度为82%。研究发现，在接受利托那韦增强治疗的患者中，达芦那韦的暴露量比未接受利托那韦增强治疗的患者高11倍。口服给药后约2.4至4小时达到达峰时间（Tmax）。与空腹状态相比，与食物同服时，达芦那韦与利托那韦联用时的Cmax和AUC增加30%。
一项在健康志愿者中进行的质量平衡研究表明，单次服用400 mg ¹⁴C-达芦那韦（与100 mg利托那韦联用）后，分别约有79.5%和13.9%的放射性标记达芦那韦从粪便和尿液中排出。在未接受利托那韦增强治疗的志愿者中，原形药物的排泄量占达芦那韦剂量的 8.0%。在接受利托那韦增强治疗的受试者中，由于利托那韦抑制了达芦那韦的代谢，原形达芦那韦占排泄剂量的 48.8%。在未接受利托那韦增强治疗的志愿者中，尿液中原形药物的排泄量占给药剂量的 1.2%，而在接受利托那韦增强治疗的志愿者中，该比例为 7.7%。
在一项与利托那韦联合用药的药代动力学研究中，健康年轻成年志愿者的达芦那韦分布容积为 206.5 L（范围 161.0–264.9 L）。另一项药代动力学研究显示，分布容积为 220 L。
达芦那韦的肾清除率较低。静脉给药后，单独使用达芦那韦和与利托那韦（100 mg，每日两次）联合使用时的清除率分别为 32.8 L/h 和 5.9 L/h。
达芦那韦与血浆蛋白的结合率约为 95%。达芦那韦主要与血浆α1-酸性糖蛋白 (AAG) 结合。
口服达芦那韦后，与利托那韦（100 mg，每日两次）联合使用时，达芦那韦的吸收达峰时间 (Tmax) 约为 2.5-4 小时。单独服用 600 mg 达芦那韦和与利托那韦（100 mg，每日两次）联合使用时的绝对口服生物利用度分别为 37% 和 82%。
达芦那韦可分布于大鼠乳汁中；尚不清楚该药物是否会分泌到人乳中。
一项针对健康志愿者的质量平衡研究表明，单次服用400 mg (14)C-达芦那韦（与100 mg利托那韦合用）后，分别有约79.5%和13.9%的(14)C-达芦那韦剂量从粪便和尿液中排出。未代谢的达芦那韦分别占粪便和尿液中给药剂量的约41.2%和7.7%。达芦那韦与利托那韦合用时的末端消除半衰期约为15小时。静脉给药后，单独使用达芦那韦和与每日两次、每次 100 mg 利托那韦联合使用时，达芦那韦的清除率分别为 32.8 L/hr 和 5.9 L/hr。
有关达芦那韦（共 8 项）的更多吸收、分布和排泄（完整）数据，请访问 HSDB 记录页面。

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代谢/代谢物
达芦那韦主要通过肝细胞色素酶（主要是 CYP3A）进行大量氧化和代谢。在未接受增强治疗的受试者中，达芦那韦的代谢非常广泛，主要途径包括氨基甲酸酯水解、异丁基脂肪族羟基化和苯胺芳香族羟基化，以及苄基芳香族羟基化和葡萄糖醛酸化。
体外人肝微粒体 (HLM) 实验表明，达芦那韦主要通过氧化代谢。达芦那韦主要通过CYP酶代谢，尤其是CYP3A。一项在健康志愿者中进行的质量平衡研究表明，单次服用400 mg (14)C-达芦那韦（与100 mg利托那韦联合服用）后，血浆中大部分放射性来源于达芦那韦。在人体内已鉴定出至少3种达芦那韦的氧化代谢物；所有这些代谢物的活性均比达芦那韦对野生型HIV的活性至少低90%。
本研究在8名健康男性受试者中，研究了达芦那韦（一种人类免疫缺陷病毒蛋白酶抑制剂）的吸收、代谢和排泄情况。受试者分别单次口服400 mg ((14)C)达芦那韦（单独服用，未增强组）或与利托那韦（达芦那韦给药前2天和给药后7天，每日两次，每次100 mg，增强组）联合服用。在未接受利托那韦增强治疗的受试者中，达芦那韦主要通过氨基甲酸酯水解、异丁基脂肪族羟基化和苯胺芳香族羟基化代谢，其次是苄基芳香族羟基化和葡萄糖醛酸化。未接受利托那韦增强治疗的受试者中，原形达芦那韦的总排泄量占给药剂量的8.0%。利托那韦增强治疗显著抑制了氨基甲酸酯水解、异丁基脂肪族羟基化和苯胺芳香族羟基化，但对苄基的芳香族羟基化没有影响；葡萄糖醛酸苷代谢物的排泄量显著增加，但仍仅占次要途径。由于利托那韦抑制了达芦那韦的代谢，在接受利托那韦增强治疗的受试者中，原形达芦那韦的总排泄量占给药剂量的48.8%。在未接受增强治疗的受试者中，尿液中未代谢的达芦那韦占给药剂量的1.2%，而在接受增强治疗的受试者中，该比例为7.7%，表明其肾清除率较低。
达芦那韦通过I期和II期生物转化机制代谢。使用动物和人肝细胞以及微粒体制剂在体外检测到了大量代谢物。大鼠、犬和人类的代谢途径在性质上相似。最主要的代谢途径是I期生物转化，包括氨基甲酸酯水解、异丁基部分的脂肪族羟基化和苯胺部分的芳香族羟基化。犬与人类的代谢途径最为接近，两种动物均以氨基甲酸酯水解为主。达芦那韦主要由CYP3A代谢。在小鼠和大鼠中，达芦那韦治疗可诱导肝微粒体CYP3A4的表达。此外，在大鼠中还诱导了UDP-GT活性。在犬中未观察到诱导作用。达芦那韦以单一对映异构体的形式存在，但体内不会发生手性转化。

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生物半衰期
达芦那韦与利托那韦联用时，其末端消除半衰期约为15小时。
一项在健康志愿者中进行的质量平衡研究表明，单次服用400 mg (14)C-达芦那韦，并与100 mg利托那韦联用后……达芦那韦与利托那韦联用时的末端消除半衰期约为15小时。
达芦那韦的药代动力学已在体外和多种动物（小鼠、大鼠、犬和兔）中进行评估，这些动物也用于非临床药理学和毒理学研究。口服给药后，消除半衰期迅速，半衰期通常小于 5 小时。

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在大鼠中：游离的达芦那韦（10 mg/kg 口服）Cmax=1.8 μM，t₁/₂=1.1 小时，Vd=3.2 L/kg；脂质纳米颗粒（10 mg/kg 口服）使 Cmax 增加至 8.5 μM，t₁/₂=3.8 小时，生物利用度=45% [6]
- 在人体中：达芦那韦（800 mg + 利托那韦 100 mg 口服，每日一次）生物利用度=70%，Cmax=15 μM（tmax=2.5 小时），t₁/₂=5.5 小时，AUC₀₂₄=180 μM·h [5]
- 代谢：达芦那韦主要通过肝脏 CYP3A4 代谢；利托那韦（CYP3A4抑制剂）可降低清除率约85%[5]
- 分布：达芦那韦脂质纳米颗粒可增强淋巴吸收（大鼠淋巴结/血浆比值为5.2，而游离达芦那韦为1.3）和中枢神经系统渗透（小鼠脑/血浆比值为0.8，而游离达芦那韦为0.1）[3,6]
- 血浆蛋白结合率：在人、大鼠和猴子中均>99.5%（超滤试验）[5,6]

肝毒性
服用含达芦那韦的抗逆转录病毒方案的患者中，相当一部分会出现一定程度的血清转氨酶升高。总体而言，3%至10%的患者会出现中度至重度血清转氨酶升高（高于正常值上限的5倍），HIV-HCV合并感染患者的发生率更高。在达芦那韦的临床试验中，2%至3%的患者出现血清ALT升高超过正常值上限5倍的情况，但没有受试者出现伴有黄疸的临床明显肝损伤。治疗期间的血清酶升高通常无症状且具有自限性，即使继续用药也能恢复正常。自达芦那韦获批并广泛应用以来，已有关于其引起临床明显急性肝损伤的报道，但尚未对其临床特征进行充分描述。由于大多数患者同时服用多种抗病毒药物，且许多患者合并慢性乙型或丙型肝炎或非酒精性脂肪性肝炎，因此很难确定特定抗HIV药物与肝损伤之间的因果关系。在已报道的病例中，肝损伤通常在治疗1至8周后出现，血清酶升高的模式通常（但不总是）为肝细胞性。超敏反应（发热、皮疹、嗜酸性粒细胞增多）和自身抗体形成均罕见。急性肝损伤通常具有自限性，停用达芦那韦后数周内即可消退。然而，至少赞助商已收到致命病例报告，建议在治疗期间监测肝酶。
最后，对于合并感染者，开始使用达芦那韦类高效抗逆转录病毒疗法可能会导致潜在的慢性乙型或丙型肝炎病情加重，这种情况通常在开始治疗后 2 至 12 个月出现，并伴有血清酶升高呈肝细胞模式以及血清中乙型肝炎病毒 (HBV) DNA 或丙型肝炎病毒 (HCV) RNA 水平升高。达芦那韦治疗尚未被明确证实与多种核苷类似物逆转录酶抑制剂相关的乳酸性酸中毒和急性脂肪肝有关。
可能性评分：C（可能，罕见，可导致临床上明显的肝损伤）。

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妊娠和哺乳期影响
◉ 哺乳期用药概述
有限的信息表明，母亲每日服用高达 800 mg 的达芦那韦联合利托那韦，乳汁中的药物浓度极低甚至无法检测，预计不会对母乳喂养的婴儿造成任何不良影响。达芦那韦与考比司他联合用药预计也会产生类似的结果。通过抗逆转录病毒疗法实现并维持病毒抑制可将母乳传播风险降低至 1% 以下，但并非为零。对于接受抗逆转录病毒疗法且病毒载量持续低于检测限的 HIV 感染者，如果她们选择母乳喂养，应予以支持。如果病毒载量未得到抑制，建议使用巴氏消毒的捐赠母乳或配方奶。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。
◉ 对泌乳和母乳的影响
据报道，接受高效抗逆转录病毒疗法的男性会出现男性乳房发育症。男性乳房发育症最初为单侧，但约一半病例会发展为双侧。未观察到血清催乳素水平的变化，即使继续治疗，通常也会在一年内自行消退。一些病例报告和体外研究表明，蛋白酶抑制剂可能导致部分男性患者出现高催乳素血症和溢乳，但这一点尚存争议。这些发现对哺乳期母亲的意义尚不清楚。对于已建立泌乳的母亲，催乳素水平可能不会影响其哺乳能力。

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蛋白结合
达芦那韦与血浆蛋白的结合率约为95%。达芦那韦主要与血浆α1-酸性糖蛋白（AAG）结合。

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妊娠和哺乳期影响
◉ 哺乳期用药概述
有限的信息表明，母亲每日服用高达800毫克的达芦那韦联合利托那韦，乳汁中的药物浓度极低甚至无法检测，预计不会对母乳喂养的婴儿造成任何不良影响。达芦那韦与考比司他联合用药预计会产生类似的结果。通过抗逆转录病毒疗法实现并维持病毒抑制可将母乳传播风险降低至1%以下，但并非为零。对于接受抗逆转录病毒治疗且病毒载量持续低于检测限的HIV感染者，如果选择母乳喂养，应予以支持。如果病毒载量未被抑制，建议使用巴氏消毒的捐赠母乳或配方奶。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。
◉ 对泌乳和母乳的影响
据报道，接受高效抗逆转录病毒治疗的男性会出现男性乳房发育症。男性乳房发育症最初为单侧，但约一半病例会发展为双侧。未观察到血清催乳素水平的变化，即使继续治疗，通常也会在一年内自行消退。一些病例报告和体外研究表明，蛋白酶抑制剂可能导致部分男性患者出现高催乳素血症和溢乳，但这一结论尚存争议。这些发现对哺乳期母亲的意义尚不明确。对于已建立泌乳的母亲而言，催乳素水平可能不会影响其哺乳能力。

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在临床试验中，HIV-1感染患者对达芦那韦增强剂的耐受性普遍良好，大多数不良事件为轻度至中度。在48周的分析中，对于既往接受过治疗或初治的患者，每日一次或两次服用达芦那韦增强剂最常见的不良事件为腹泻、恶心、头痛、上呼吸道感染和鼻咽炎。在既往接受过治疗的患者中，达芦那韦增强剂相关的2-4级实验室异常包括甘油三酯升高和总胆固醇升高。总体而言，在既往接受过治疗和初治的患者中，达芦那韦增强剂引起的腹泻少于免疫检查点抑制剂（CPI）或洛匹那韦增强剂，并且在初治患者中，达芦那韦增强剂引起的2-4级甘油三酯和总胆固醇升高发生率低于洛匹那韦增强剂。在接受48周治疗的初治患者中，因不良事件而停止治疗的患者中，达芦那韦增强剂组的发生率为3%，洛匹那韦增强剂组的发生率为7%。药物经济学考量：在英国和美国，两项为期1年的成本分析从医疗服务提供者的角度出发，并基于CD4+细胞计数和POWER研究的临床数据预测成本，结果显示，对于既往接受过治疗的HIV-1感染患者，达芦那韦增强剂组的医疗成本低于研究者选择的CPI。达芦那韦增强剂组的较高购置成本被其更优的疗效所抵消。在模型成本效益分析中，从欧洲医疗支付方的角度以及从美国社会的角度来看，对于既往接受过大量治疗的成年患者，达芦那韦增强剂组预计具有成本效益。在另一项针对至少携带一个原发性国际艾滋病协会-美国蛋白酶抑制剂（PI）突变的患者亚组的模型中，从欧洲医疗支付方的角度来看，增强型达芦那韦预计比增强型洛匹那韦更具成本效益。在所有成本效益分析中，每增加一个质量调整生命年（QALY）的增量成本均在公认的阈值范围内。[5]

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体外细胞毒性：浓度高达 20 μM 的达芦那韦处理 72 小时，对 CEM-T4 细胞、PBMC 或 THP-1 巨噬细胞均无显著毒性（细胞活力 >90%，与载体组相比）[1,3]
- 大鼠 28 天毒性研究：达芦那韦（5、20、80 mg/kg/天，口服）或 + 利托那韦（1、4、16 mg/kg/天）。无不良反应剂量 (NOAEL) 为 20 mg/kg/天（单药）或 20+4 mg/kg/天（联合用药）；80+16 mg/kg/天可引起轻度肝脂肪变性（可逆）[5]
- 人体不良事件（I-III 期）：常见不良事件为轻度胃肠道症状（腹泻：12%，恶心：8%）和头痛（6%）；未见严重肝毒性或肾毒性[5]
- 药物相互作用：达芦那韦（CYP3A4 底物）与强效 CYP3A4 诱导剂（例如利福平）相互作用，可使 Cmax 降低约 60%，但与核苷类逆转录酶抑制剂（例如替诺福韦）无相互作用[5]

[1]. Discovery and selection of TMC114, a next generation HIV-1 protease inhibitor. J Med Chem. 2005 Mar 24;48(6):1813-22.

[2]. Novel bis-tetrahydrofuranylurethane-containing nonpeptidic protease inhibitor (PI) UIC-94017 (TMC114) with potent activity against multi-PI-resistant human immunodeficiency virus in vitro. Antimicrob Agents Chemother. 2003 Oct;47(10):

[3]. Darunavir Nanoformulation Suppresses HIV Pathogenesis in Macrophages and Improves Drug Delivery to the Brain in Mice. Pharmaceutics . 2024 Apr 19;16(4):555.

[4]. High resolution crystal structures of HIV-1 protease with a potent non-peptide inhibitor (UIC-94017) active against multi-drug-resistant clinical strains. J Mol Biol. 2004 Apr 23;338(2):341-52.

[5]. Darunavir: a review of its use in the management of HIV infection in adults. Drugs. 2009;69(4):477-503.

[6]. In-vivo bioavailability and lymphatic uptake evaluation of lipid nanoparticulates of darunavir. Drug Deliv. 2016 Sep;23(7):2581-2586.

达芦那韦（商品名：Prezista）是一种处方药，经美国食品药品监督管理局（FDA）批准，用于治疗成人和儿童的 HIV 感染。达芦那韦必须与药代动力学增强剂（利托那韦（商品名：诺维尔）或考比司他（商品名：泰博斯特））以及其他抗HIV药物联合使用。
当达芦那韦与利托那韦联用时，可用于体重至少10公斤（22磅）的成人和3岁及以上儿童。
当达芦那韦与考比司他联用时，可用于体重至少40公斤（88磅）且符合特定条件的成人和儿童，具体条件由医疗保健提供者确定。
（也有含有达芦那韦和考比司他的固定剂量复方片剂[商品名：普瑞斯科比克斯]。）
达芦那韦乙醇酸盐是达芦那韦的乙醇酸盐形式，达芦那韦是一种人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）蛋白酶非肽抑制剂，具有抗HIV活性。口服达芦那韦后，可选择性地靶向并结合HIV-1蛋白酶的活性位点，抑制HIV-1蛋白酶的二聚化和催化活性。这可抑制HIV感染细胞中病毒Gag和Gag-Pol多聚蛋白的蛋白水解切割。这种抑制作用导致产生不成熟的、无感染性的病毒蛋白，这些蛋白无法形成成熟的病毒颗粒，从而阻止HIV复制。
达芦那韦是一种HIV蛋白酶抑制剂，用于治疗艾滋病和HIV感染。由于单独使用时会出现抗病毒药物耐药性，因此通常与其他抗HIV药物联合使用。
另见：考比司他；达芦那韦乙醇酸盐（成分）。

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药物适应症
Rezolsta 适用于与其他抗逆转录病毒药物联合使用，治疗 18 岁及以上成人的人类免疫缺陷病毒 1 型 (HIV-1) 感染。基因型检测应指导 Rezolsta 的使用。
PREZISTA 与低剂量利托那韦联合使用，适用于与其他抗逆转录病毒药物联合使用，治疗 3 岁及以上且体重至少 15 公斤的成人和儿童的人类免疫缺陷病毒 (HIV-1) 感染。PREZISTA 与考比司他联合使用，适用于与其他抗逆转录病毒药物联合使用，治疗 12 岁及以上且体重至少 40 公斤的成人和青少年的人类免疫缺陷病毒 (HIV-1) 感染。在决定开始使用普瑞巴林（PREZISTA）联合考比司他或低剂量利托那韦进行治疗时，应仔细考虑患者的治疗史以及不同药物相关的突变模式。基因型或表型检测（如有）和治疗史应指导普瑞巴林的使用。普瑞巴林联合低剂量利托那韦适用于与其他抗逆转录病毒药物联合治疗人类免疫缺陷病毒（HIV-1）感染患者。普瑞巴林75毫克、150毫克和600毫克片剂可用于提供合适的剂量方案：用于治疗接受过抗逆转录病毒治疗（ART）的成年HIV-1感染患者，包括既往接受过大量治疗的患者；用于治疗3岁及以上且体重至少15公斤的儿童HIV-1感染患者。决定开始使用普瑞巴林（PREZISTA）联合低剂量利托那韦治疗时，应仔细考虑患者的既往治疗史以及不同药物相关的突变模式。基因型或表型检测（如有）和既往治疗史应指导普瑞巴林的使用。普瑞巴林联合低剂量利托那韦适用于与其他抗逆转录病毒药物联合治疗人类免疫缺陷病毒（HIV-1）感染患者。普瑞巴林联合考比司他适用于与其他抗逆转录病毒药物联合治疗成人和青少年（12岁及以上，体重至少40公斤）的人类免疫缺陷病毒（HIV-1）感染。 PREZISTA 400 毫克和 800 毫克片剂可用于为 3 岁及以上、体重至少 40 公斤的成人和儿童 HIV-1 感染患者提供合适的治疗方案，这些患者需满足以下条件：未接受过抗逆转录病毒治疗 (ART)；或已接受过 ART 但无达芦那韦耐药相关突变 (DRV RAM)，且血浆 HIV-1 RNA < 100,000 拷贝/毫升，CD4+ 细胞计数 ≥ 100 × 10⁶ 个/升。对于此类已接受过 ART 的患者，在决定开始使用 PREZISTA 治疗时，应进行基因型检测以指导 PREZISTA 的使用。

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达芦那韦是一种 N,N-二取代苯磺酰胺，其 4 位上带有未取代的氨基，用于治疗 HIV 感染。达芦那韦是一种第二代HIV蛋白酶抑制剂，其设计目的是与多种HIV毒株的蛋白酶形成强效相互作用，包括来自对其他蛋白酶抑制剂具有多种耐药突变的既往治疗患者的毒株。它既是HIV蛋白酶抑制剂，也是一种抗病毒药物。它是一种呋喃类、氨基甲酸酯类和磺酰胺类化合物。
达芦那韦（商品名：普瑞巴林）是一种处方药，已获得美国食品药品监督管理局（FDA）批准，用于治疗成人和儿童的HIV感染。达芦那韦必须与药代动力学增强剂（利托那韦（商品名：诺维尔）或考比司他（商品名：泰博斯特））以及其他抗HIV药物联合使用。
当达芦那韦与利托那韦联用时，可用于体重至少10公斤（22磅）的成人和3岁及以上儿童。
当达芦那韦与考比司他联用时，可用于体重至少40公斤（88磅）且符合特定条件的成人和儿童，具体条件由医疗保健提供者确定。
（也有含有达芦那韦和考比司他的固定剂量复方片剂[商品名：普瑞斯科比克斯]。）
达芦那韦是一种蛋白酶抑制剂，与其他抗HIV蛋白酶抑制剂以及利托那韦联合使用，用于有效治疗HIV-1感染。作为一种第二代蛋白酶抑制剂，达芦那韦旨在对抗对标准HIV疗法的耐药性。它最初于2006年获得美国食品药品监督管理局（FDA）的批准。由于体外实验证据表明达芦那韦能够对抗SARS-CoV-2（导致COVID-19的冠状病毒）感染，因此目前正在研究其作为SARS-CoV-2潜在治疗药物的潜力。临床试验正在进行中，预计将于2020年8月结束。
达芦那韦是一种蛋白酶抑制剂。其作用机制是作为HIV蛋白酶抑制剂、细胞色素P450 3A抑制剂和细胞色素P450 2D6抑制剂。
达芦那韦是一种抗逆转录病毒蛋白酶抑制剂，用于治疗和预防人类免疫缺陷病毒（HIV）感染和获得性免疫缺陷综合征（AIDS）。达芦那韦可引起血清转氨酶水平短暂升高，通常无症状，但与罕见的临床表现明显的急性肝损伤病例相关。在合并乙型肝炎病毒（HBV）或丙型肝炎病毒（HCV）感染的患者中，使用达芦那韦进行高效抗逆转录病毒治疗可能导致原有慢性乙型或丙型肝炎病情加重。
达芦那韦是一种人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）蛋白酶非肽类抑制剂，具有抗HIV活性。口服后，达芦那韦选择性地靶向并结合HIV-1蛋白酶的活性位点，抑制HIV-1蛋白酶的二聚化和催化活性。这可抑制HIV感染细胞中病毒Gag和Gag-Pol多聚蛋白的蛋白水解切割。这种抑制作用导致产生不成熟的、无感染性的病毒蛋白，这些蛋白无法形成成熟的病毒颗粒，从而阻止HIV复制。
一种用于治疗艾滋病和HIV感染的HIV蛋白酶抑制剂。由于单独使用时会出现抗病毒药物耐药性，因此通常与其他抗HIV药物联合使用。

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药物适应症
达芦那韦与利托那韦及其他抗逆转录病毒药物联合使用，适用于治疗3岁及以上儿童和HIV-1感染成人的人类免疫缺陷病毒（HIV）感染。
FDA标签
达芦那韦与低剂量利托那韦联合使用，适用于与其他抗逆转录病毒药物联合使用，用于治疗人类免疫缺陷病毒（HIV-1）感染患者（参见4.2节）。达芦那韦（Mylan）75毫克、150毫克、300毫克和600毫克片剂可用于提供合适的剂量方案（参见4.2节）：用于治疗既往接受过抗逆转录病毒治疗（ART）的成年HIV-1感染患者，包括既往接受过大量治疗的患者；用于治疗3岁及以上且体重至少15公斤的儿童HIV-1感染患者。在决定开始使用达芦那韦联合低剂量利托那韦治疗时，应仔细考虑患者的治疗史以及不同药物相关的突变模式。基因型或表型检测（如有）和治疗史应指导达芦那韦的使用（参见4.2节、4.4节和5.1节）。达芦那韦与低剂量利托那韦联合用药，适用于与其他抗逆转录病毒药物联合治疗人类免疫缺陷病毒（HIV-1）感染患者。达芦那韦与考比司他联合用药，适用于与其他抗逆转录病毒药物联合治疗成人和青少年（12岁及以上，体重至少40公斤）的人类免疫缺陷病毒（HIV-1）感染（参见第4.2节）。达芦那韦迈兰400毫克和800毫克片剂可用于为3岁及以上、体重至少40公斤的成人和儿童患者提供合适的剂量方案，以治疗未接受过抗逆转录病毒治疗（ART）的HIV-1感染（参见第4.2节）。对于既往接受过抗逆转录病毒治疗（ART）且无达芦那韦耐药相关突变（DRV-RAMs）的患者，若其血浆HIV-1 RNA < 100,000拷贝/毫升，CD4+细胞计数≥100×10⁶个/升，则应考虑使用达芦那韦。在决定对这类既往接受过ART治疗的患者启动达芦那韦治疗时，应以基因型检测结果为指导（参见4.2、4.3、4.4和5.1节）。400毫克和800毫克达芦那韦克卡（Darunavir Krka）与低剂量利托那韦联合使用，适用于与其他抗逆转录病毒药物联合治疗人类免疫缺陷病毒（HIV-1）感染患者。达芦那韦克卡400毫克和800毫克片剂可用于为3岁及以上、体重至少40公斤的成人和儿童HIV-1感染患者提供合适的剂量方案，这些患者需满足以下条件：未接受过抗逆转录病毒治疗（ART）（参见4.2节）；或已接受过ART治疗但无达芦那韦耐药相关突变（DRV-RAMs），且血浆HIV-1 RNA<100,000拷贝/毫升，CD4+细胞计数≥100×10⁶个/升。对于此类已接受过ART治疗的患者，在决定是否开始使用达芦那韦治疗时，应以基因型检测结果为指导（参见4.2、4.3、4.4和5.1节）。达芦那韦克卡600毫克片剂与低剂量利托那韦联合使用，适用于与其他抗逆转录病毒药物联合治疗人类免疫缺陷病毒（HIV-1）感染患者。达芦那韦克卡600毫克片剂可用于提供合适的剂量方案（参见4.2节）：用于治疗既往接受过抗逆转录病毒治疗（ART）的成年HIV-1感染患者，包括既往接受过大量治疗的患者；用于治疗3岁及以上且体重至少15公斤的儿童HIV-1感染患者。在决定开始使用达芦那韦联合低剂量利托那韦治疗时，应仔细考虑患者的既往治疗史以及不同药物相关的突变模式。基因型或表型检测（如有）和治疗史应指导达芦那韦的使用。
普瑞巴林（PREZISTA）与低剂量利托那韦联合用药，适用于与其他抗逆转录病毒药物联合治疗成人和3岁及以上、体重至少15公斤的儿童患者的人类免疫缺陷病毒（HIV-1）感染。普瑞巴林（PREZISTA）与考比司他联合用药，适用于与其他抗逆转录病毒药物联合治疗成人和青少年（12岁及以上，体重至少40公斤）患者的人类免疫缺陷病毒（HIV-1）感染。在决定开始使用普瑞巴林（PREZISTA）联合考比司他或低剂量利托那韦进行治疗时，应仔细考虑患者的治疗史以及不同药物相关的突变模式。基因型或表型检测（如有）和治疗史应指导普瑞巴林（PREZISTA）的使用。普瑞巴林与低剂量利托那韦联合用药，适用于与其他抗逆转录病毒药物联合治疗人类免疫缺陷病毒（HIV-1）感染患者。普瑞巴林75毫克、150毫克和600毫克片剂可用于提供合适的剂量方案：用于治疗接受过抗逆转录病毒治疗（ART）的成年HIV-1感染患者，包括既往接受过大量治疗的患者；用于治疗3岁及以上且体重至少15公斤的儿童HIV-1感染患者。在决定开始使用普瑞巴林联合低剂量利托那韦治疗时，应仔细考虑患者的治疗史以及不同药物相关的突变模式。基因型或表型检测（如有）和治疗史应指导普瑞巴林（PREZISTA）的使用。 PREZISTA 与低剂量利托那韦联合用药，适用于与其他抗逆转录病毒药物联合治疗人类免疫缺陷病毒 (HIV-1) 感染患者。PREZISTA 与考比司他联合用药，适用于与其他抗逆转录病毒药物联合治疗成人和青少年（12 岁及以上，体重至少 40 公斤）的人类免疫缺陷病毒 (HIV-1) 感染。PREZISTA 400 毫克和 800 毫克片剂可用于为 3 岁及以上、体重至少 40 公斤的成人和儿童 HIV-1 感染患者提供合适的剂量方案，这些患者需满足以下条件：未接受过抗逆转录病毒治疗 (ART)；接受过 ART 但无达芦那韦耐药相关突变 (DRV RAM)，且血浆 HIV-1 RNA < 100 mmol/L。病毒载量为 100,000 拷贝/毫升，CD4+ 细胞计数为 100 x 10⁶ 个/升。对于此类既往接受过抗逆转录病毒治疗 (ART) 的患者，在决定开始使用 PREZISTA 治疗时，应以基因型检测结果为指导。
400 毫克和 800 毫克薄膜衣片。达芦那韦 (Darunavir Krka dd) 与低剂量利托那韦联合用药，适用于与其他抗逆转录病毒药物联合治疗人类免疫缺陷病毒 (HIV-1) 感染患者。达芦那韦 (Darunavir Krka dd) 与考比司他联合用药，适用于与其他抗逆转录病毒药物联合治疗成人人类免疫缺陷病毒 (HIV-1) 感染患者（参见第 4.2 节）。达芦那韦克卡 dd 400 毫克和 800 毫克片剂可用于为 3 岁及以上、体重至少 40 公斤的成人和儿童 HIV-1 感染患者提供合适的剂量方案，这些患者必须是：未接受过抗逆转录病毒治疗 (ART) 的患者（参见第 4.2 节）。对于既往接受过抗逆转录病毒治疗（ART）且无达芦那韦耐药相关突变（DRV-RAMs）的患者，若其血浆HIV-1 RNA < 100,000拷贝/毫升，CD4+细胞计数≥100×10⁶个/升，则应考虑使用达芦那韦。在决定对这类既往接受过ART治疗的患者启动达芦那韦治疗时，应以基因型检测结果为指导（参见4.2、4.3、4.4和5.1节）。600毫克薄膜衣片达芦那韦（Darunavir Krka dd）与低剂量利托那韦联合使用，适用于与其他抗逆转录病毒药物联合治疗人类免疫缺陷病毒（HIV-1）感染患者。达芦那韦克卡双倍剂量片（600毫克）可用于提供合适的剂量方案（参见第4.2节）：用于治疗既往接受过抗逆转录病毒治疗（ART）的成年HIV-1感染患者，包括既往接受过大量治疗的患者；用于治疗3岁及以上且体重至少15公斤的儿童HIV-1感染患者。在决定开始使用达芦那韦联合低剂量利托那韦治疗时，应仔细考虑患者的既往治疗史以及不同药物相关的突变模式。基因型或表型检测（如有）和治疗史应指导达芦那韦的使用。
人类免疫缺陷病毒 (HIV-1) 感染的治疗

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作用机制
HIV-1 蛋白酶是病毒前体蛋白加工和病毒成熟所必需的，为感染做好准备，因此是 HIV 抗逆转录病毒疗法的靶点。蛋白酶抑制剂是 HIV 感染患者高效抗逆转录病毒疗法 (HAART) 的一部分。研究表明，HAART 能有效抑制病毒，显著降低发病率和死亡率。达芦那韦是一种 HIV 蛋白酶抑制剂，它通过与蛋白酶结合来阻止 HIV 复制，从而阻止 HIV-1 蛋白酶的二聚化和催化活性。具体而言，它能抑制已感染病毒的细胞中 HIV 编码的 Gag-Pol 蛋白的裂解，阻止成熟病毒颗粒的形成，从而阻止感染的传播。达芦那韦与蛋白酶活性位点氨基酸（Asp-29 和 Asp-30）的初级链紧密接触，可能是其对耐药 HIV-1 变异株具有效力和疗效的原因之一。已知达芦那韦可与酶的不同位点结合：活性位点腔和蛋白酶二聚体中一个柔性瓣的表面。由于其分子柔性，达芦那韦能够适应蛋白酶形状的变化。
达芦那韦作为一种蛋白酶抑制剂，可抑制病毒感染细胞中 HIV 编码的 Gag-Pol 多聚蛋白的裂解，从而阻止成熟且具有感染性的新病毒颗粒的形成。它因其对野生型 HIV-1 和对目前已批准的蛋白酶抑制剂耐药的 HIV 毒株的效力而被选中。
达芦那韦是 HIV-1 蛋白酶的抑制剂。它选择性地抑制感染细胞中 HIV 编码的 Gag-Pol 多聚蛋白的裂解，从而阻止成熟病毒颗粒的形成。

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化合物UIC-94017 (TMC-114) 是一种第二代HIV蛋白酶抑制剂，具有改进的药代动力学特性，其化学结构与临床抑制剂安普那韦 (amprenavir) 相关。UIC-94017 是一种广谱强效抑制剂，对HIV-1临床分离株均有效，且细胞毒性极低。我们解析了UIC-94017与野生型HIV-1蛋白酶 (PR) 以及在耐药HIV中常见的突变蛋白酶PR(V82A)和PR(I84V)的复合物的高分辨率晶体结构。这些结构的精修分辨率为1.10-1.53 Å。PR和PR(I84V)与UIC-94017三元复合物的晶体结构表明，该抑制剂以两个重叠的位置与蛋白酶结合，而PR(V82A)复合物中抑制剂则只有一个有序结合位点。在所有三种结构中，UIC-94017 均与蛋白酶的保守主链原子 Asp29 和 Asp30 形成氢键。这些相互作用被认为对该化合物对抗多种蛋白酶抑制剂耐药的 HIV 分离株的活性至关重要。与 PR 相比，突变体与 UIC-94017 的相互作用还存在其他一些细微差异。与能更好地容纳抑制剂的PR结构相比，PR(V82A) 在第82位残基的主链原子位置上显示出差异。最后，PR(V82A) 与 UIC-94017 的 1.10 Å 分辨率结构显示催化天冬氨酸残基的电子密度分布异常，这与反应机制相关。[4]

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达芦那韦是一种第二代 HIV-1 蛋白酶抑制剂，具有双四氢呋喃氨基甲酸酯骨架，旨在增强对多重蛋白酶抑制剂耐药的 HIV-1 毒株的活性。[1,2]
- 机制：与 HIV-1 蛋白酶活性位点结合，阻断 Gag-Pol 多聚蛋白裂解为成熟蛋白（p24、逆转录酶），从而抑制病毒组装。[1,4]
- 批准用途：2006 年获得 FDA 批准，用于治疗成人 HIV-1 感染（与利托那韦联用）和儿童 HIV-1 感染。 2014 年获批用于儿科患者；用于初治或经治患者（包括对蛋白酶抑制剂耐药的患者）[5]
- 剂型：有口服片剂、胶囊和脂质纳米颗粒（增强生物利用度和中枢神经系统递送，以针对潜伏性 HIV 病毒库）[3,6]

C29H43N3O8S

593.73

593.277

C, 58.67; H, 7.30; N, 7.08; O, 21.56; S, 5.40

635728-49-3

Darunavir;206361-99-1

23725083

White to off-white solid powder

4.426

169.03

4

10

12

41

856

5

S(C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])N([H])[H])(N(C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])C([H])([H])[C@]([H])([C@]([H])(C([H])([H])C1C([H])=C([H])C([H])=C([H])C=1[H])N([H])C(=O)O[C@@]1([H])C([H])([H])O[C@]2([H])[C@@]1([H])C([H])([H])C([H])([H])O2)O[H])(=O)=O.O([H])C([H])([H])C([H])([H])[H]

QWSHKNICRJHQCY-VBTXLZOXSA-N

InChI=1S/C27H37N3O7S.C2H6O/c1-18(2)15-30(38(33,34)21-10-8-20(28)9-11-21)16-24(31)23(14-19-6-4-3-5-7-19)29-27(32)37-25-17-36-26-22(25)12-13-35-26;1-2-3/h3-11,18,22-26,31H,12-17,28H2,1-2H3,(H,29,32);3H,2H2,1H3/t22-,23-,24+,25-,26+;/m0./s1

[(3aS,4R,6aR)-2,3,3a,4,5,6a-hexahydrofuro[2,3-b]furan-4-yl] N-[(2S,3R)-4-[(4-aminophenyl)sulfonyl-(2-methylpropyl)amino]-3-hydroxy-1-phenylbutan-2-yl]carbamate;ethanol

Darunavir Ethanolate; TMC-114 Ethanolate; TMC114 Ethanolate; TMC 114 Ethanolate; UIC-94017 Ethanolate; UIC 94017 Ethanolate; UIC94017 Ethanolate; Trade name: Prezista

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.21 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.21 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.21 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。