| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Fer kinase and its cancer cell-specific variant FerT (kinase domain, KD)
Dissociation constant (Kd) of E260 binding to Fer/FerT KD: 0.85 µM (measured by microscale thermophoresis)[1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
E260 是一种 Fer 和 FerT 抑制剂，通过引起线粒体功能障碍和变形并激活耗能自噬，选择性地在癌细胞中产生代谢应激，最终降低细胞 ATP 水平。为了证明 E260 直接靶向 Fer 和 FerT，利用这些酶的纯化的包含激酶结构域 (KD) 的片段进行了体外激酶测试。这项研究表明 E260 对该结构域有直接抑制作用，证明与 ATP 一起孵育并增加 E260 浓度后，Fer/FerT KD 的自磷酸化水平大幅下降。此外，对模拟完整 Fer 蛋白中 E260 对接的计算检查表明，E260 与 Fer 的最高得分结合模式位于酶 KD 的 ATP 结合口袋内。为了估计 E260 从 Fer/FerT KD 的解离常数 (Kd)，使用浓度不断增加的 E260 进行微量热泳 (MST) 测定。这项研究证实了 E260 与 Fer/FerT KD 的直接结合，并确定 Kd 为 0.85 µM。为了评估 E260 胶束制剂对癌细胞中 Fer 的影响，在未处理和 E260 处理的 SW620 CC 细胞中进行了激酶的免疫沉淀。当给予转移性 IV 级 SW620 CC 细胞（去血清 16 小时并用 3 mM H2O2 处理以激活 Fer）时，E260 对 Fer 激酶活性表现出抑制作用，这反映在酶的自磷酸化活性的抑制上。为了描述 E260 对恶性细胞的影响，用 E260 处理转移性 SW620 细胞，然后分析活力。在 E260 处理的细胞中检测到死亡的开始，24 小时后 EC50 值为 400 nM，48 小时后 EC50 值为 300 nM。对源自原发性胰腺导管癌的非转移性 PANC-1 细胞进行 72 小时处理后，E260 的 EC50 为 3.2 µM。此外，用 4 µM E260 处理 72 小时后，这些细胞的最大死亡量约为 70%。相比之下，转移性导管癌细胞系SU.86.86被证明对E260更敏感，治疗72小时后EC50为1.1 µM，2 µM E260导致100%致命水平[1]。
E260 is a novel low-molecular-weight synthetic inhibitor of Fer and FerT kinases[1] It selectively induces metabolic stress, mitochondrial dysfunction, autophagy, and PARP-1 activation in malignant cells, leading to necrotic death[1] E260 is more effective against high-grade/metastatic cancer cells compared to low-grade cells[1] Its efficacy is influenced by extracellular glucose levels, with high glucose delaying but not preventing cell death[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
E260 抑制体内异种移植进展。在小鼠中，建立了 E260 的药代动力学 (PK) 曲线。 E260 在动物组织中有效分散，其在血液中的 T1/2 为 175 分钟，分布体积为 4244 mL/kg。将猪胰腺 SW620 细胞皮下注射到免疫功能低下的“裸”小鼠中，以评估 E260 对肿瘤生长的影响。在试验过程中，服用E260显着减缓了肿瘤的进展，治疗22天后，平均肿瘤体积缩小了十倍。通过用SW48细胞制成的异种移植物治疗小鼠，并追踪肿瘤的发展，进一步证明了E260的体内抗癌作用。与对照治疗组相比，给予 E260 的小鼠肿瘤进展停止了五到六次 [1]。
E260（25或50 mg/kg，腹腔注射，每日两次，持续22天）在限制饮食的免疫缺陷小鼠中显著抑制SW620和SW48移植瘤的生长[1] 与对照组相比，SW620肿瘤体积减少10倍，SW48减少5–6倍[1] 组织病理学显示，E260处理组肿瘤组织呈坏死且无血管，而对照组为有血管的存活组织[1] 治疗动物未出现显著体重下降或毒性反应[1] 在自由进食（高葡萄糖）条件下，肿瘤抑制效果减弱至2.5倍[1] |
| 酶活实验 |
重组Fer/FerT激酶结构域（KD）蛋白在大肠杆菌中表达，并通过亲和树脂和透析纯化[1]
将KD蛋白与ATP及不同浓度的E260在激酶缓冲液中室温孵育1小时[1] 通过SDS-PAGE和Western blot，使用抗磷酸酪氨酸和抗Fer抗体分析自磷酸化抑制情况[1] 采用微尺度热泳法测定结合亲和力：将标记的Fer KD与E260在结合缓冲液中孵育，通过非线性回归计算Kd值[1] |
| 细胞实验 |
结肠癌细胞系（SW620、SW48、HCT116）和正常细胞（Hfb、CCD841CoN）在最低必需培养基中培养[1]
细胞接种于96孔板，用不同浓度的E260处理指定时间[1] 使用MultiTox-Fluor或XTT法检测细胞活力[1] 线粒体膜电位通过TMRE染色结合显微镜或ELISA法检测[1] 自噬通过透射电镜观察自噬体和LC3免疫染色评估[1] 使用ELISA试剂盒检测培养上清中HMGB1的释放[1] 通过EthD-III摄取和Annexin V/PI染色确认坏死[1] 通过Western blot分析磷酸化蛋白、LC3、PARP-1及糖酵解酶的表达[1] |
| 动物实验 |
将免疫缺陷裸鼠皮下接种SW620或SW48结肠癌细胞[1]
接种前2天开始，小鼠喂食限制性饮食（每只小鼠每天3克），以降低血糖[1] 将E260配制成Cremophor纳米胶束，并以25或50 mg/kg的剂量腹腔注射，每日两次，持续22天[1] 对照组小鼠注射空胶束[1] 定期测量肿瘤体积，并在第22天处死小鼠进行组织病理学分析[1] 采集血液样本进行毒理学和药代动力学分析[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
腹腔注射后，E260 在小鼠血液中的半衰期 (T1/2) 为 175 分钟[1]
分布容积为 4244 mL/kg，表明其组织分布有效[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
小鼠每日两次以 25 或 50 mg/kg 的剂量接受 E260 治疗，持续 22 天，未观察到明显的毒性[1]
未出现体重减轻、血液生化指标（肝肾标志物、电解质）异常或主要器官（心脏、肝脏、肾脏）组织病理学异常[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
E260 是一种新型小分子合成的 Fer 和 FerT 激酶抑制剂[1]。它能选择性地诱导恶性细胞发生代谢应激、线粒体功能障碍、自噬和 PARP-1 激活，最终导致细胞坏死[1]。E260 对高级别/转移性癌细胞的疗效优于低级别癌细胞[1]。其疗效受细胞外葡萄糖水平的影响，高葡萄糖水平会延缓但不能阻止细胞死亡[1]。
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| 分子式 |
C24H34N6S
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|---|---|
| 分子量 |
438.6
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| 精确质量 |
438.256
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| CAS号 |
1241537-79-0
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| PubChem CID |
46898309
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
4.7
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| tPSA |
68.2
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
31
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| 分子复杂度/Complexity |
566
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CC(C)C1=CC=C(C2=CN3C(SC(N4CCC(CN5CCN(C)CC5)CC4)=N3)=N2)C=C1
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| InChi Key |
RFHSWNJYHRAOMP-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C24H34N6S/c1-18(2)20-4-6-21(7-5-20)22-17-30-23(25-22)31-24(26-30)29-10-8-19(9-11-29)16-28-14-12-27(3)13-15-28/h4-7,17-19H,8-16H2,1-3H3
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| 化学名 |
2-[4-[(4-methylpiperazin-1-yl)methyl]piperidin-1-yl]-6-(4-propan-2-ylphenyl)imidazo[2,1-b][1,3,4]thiadiazole
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~1 mg/mL (~2.28 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 0.1 mg/mL (0.23 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 1.0 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 0.1 mg/mL (0.23 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 1.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 0.1 mg/mL (0.23 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 22 mg/mL (50.16 mM) in 0.5% CMC-Na/saline water (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2800 mL | 11.3999 mL | 22.7998 mL | |
| 5 mM | 0.4560 mL | 2.2800 mL | 4.5600 mL | |
| 10 mM | 0.2280 mL | 1.1400 mL | 2.2800 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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