CFTR/cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
VX-445 (Elexacaftor, WHO-11180) is a next-generation cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) corrector designed to improve Phe508del CFTR protein processing and trafficking. [2]

为了恢复 Phe508del CFTR 蛋白的功能，elexacaftor (VX-445) 是一种新一代囊性纤维化跨膜调节因子 (CFTR) 矫正剂。elexacaftor (VX-445) 可能用于治疗囊性纤维化。 VX-445-Tezacaftor-VX-770 联合使用时，显著增强了 Phe508del CFTR 蛋白的加工、转运和氯离子转运，同时每种化学物质的含量也相应增加 [2]。
体外实验表明，VX-445-tezacaftor-ivacaftor 组合显著改善了 Phe508del CFTR 蛋白的加工、转运和氯离子转运，其效果优于其中任何两种药物的双重组合 [2]。

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VX-445（Elexacaftor，WHO-11180） 可增加从 Phe508del-MF 基因型供体和 Phe508del-Phe508del 基因型供体分离的人支气管上皮细胞中成熟 CFTR 蛋白的表达，免疫印迹分析证实了这一点。 [2]
VX-445（Elexacaftor，WHO-11180）与 tezacaftor 联合使用，无论是否联合 ivacaftor，均能比单独使用任一分子更显著地提高成熟 CFTR 蛋白的水平。[2]
在 Ussing 室实验中，添加 ivacaftor 可增强 VX-445（Elexacaftor，WHO-11180）与 tezacaftor 联合递送至细胞表面的成熟 Phe508del-CFTR 蛋白的氯离子转运，与单药治疗或双药联合治疗相比，在来自 Phe508del-MF 和 Phe508del-Phe508del 供体的人支气管上皮细胞中，氯离子转运的增加更为显著（与载体、tezacaftor-ivacaftor 或 VX-445-ivacaftor 组比较，P<0.05）。 [2]

在囊性纤维化患者中，VX-445-tezacaftor-ivacaftor 具有可接受的安全性和副作用特征。大多数不良事件为轻度或中度。该治疗还使 Phe508del-MF 组的预计 FEV1 百分比提高了高达 13.8 个百分点 (P<0.001)。在已接受 tezacaftor-ivacaftor 治疗的 Phe508del-Phe508del 组患者中，加用 VX-445 使预计 FEV1 百分比提高了 11.0 个百分点 (P<0.001)。两组患者的汗液氯化物浓度均有所下降，且囊性纤维化问卷修订版 (CFQ-R) 的呼吸功能评分均有所改善。结论：使用 VX-445–tezacaftor–ivacaftor 靶向 Phe508del CFTR 蛋白可提高体外 CFTR 功能，并可改善携带一个或两个 Phe508del 等位基因的囊性纤维化患者的病情。这种方法有可能治疗约 90% 患者的囊性纤维化根本病因 [2]。

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在一项 2 期随机、安慰剂对照、双盲、剂量范围试验中，VX-445（Elexacaftor，WHO-11180） 与 tezacaftor（每日一次 100 mg）和 ivacaftor（每 12 小时一次 150 mg）以三联组合口服给药，用于治疗年龄 ≥18 岁且具有 Phe508del-MF 基因型的囊性纤维化患者（VX-445 剂量：每日一次 50、100 或 200 mg）或具有 Phe508del-Phe508del 基因型的患者（VX-445 每日一次 200 mg），此前患者接受了 4 周的 tezacaftor-ivacaftor 导入治疗。经过 4 周的治疗，预计 FEV1 百分比较基线显著改善：Phe508del-MF 组改善高达 13.8 个百分点 (P<0.001)，Phe508del-Phe508del 组改善高达 11.0 个百分点 (P<0.001)。在第 15 天的首次评估中观察到改善，并在第 29 天维持。次要终点显示汗液氯化物浓度（CFTR 功能的体内指标）降低，以及囊性纤维化问卷修订版 (CFQ-R) 呼吸功能评分的改善。[2]

Ussing室检测[2]
采用Ussing室技术记录HBE细胞中CFTR介导的氯离子转运引起的跨上皮短路电流。在记录氯离子转运之前，将HBE细胞与化合物孵育18至24小时。如前所述，在阿米洛利、福克索林和CFTR抑制剂存在的情况下测量CFTR介导的氯离子转运。

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采用免疫印迹法评估CFTR的加工和转运。简而言之，将HBE细胞用含0.4%碳酸氢钠的HBSS缓冲液在37℃下洗涤3小时，然后用温热的PBS洗涤两次，之后在HBE培养基中分别加入DMSO、ivacaftor和tezacaftor、单独的VX-445或VX-445-tezacaftor-ivacaftor的组合，于37℃孵育24小时。孵育后，用含无EDTA蛋白酶抑制剂的冰冷CHAPS裂解缓冲液裂解细胞。裂解液在4℃下以10,000 × g离心15分钟，以沉淀细胞核和不溶性物质。将约 12 μg 总蛋白与含 5% β-巯基乙醇的 2× Laemmli 上样缓冲液混合，并上样至 3% 至 8% Tris-乙酸凝胶。将凝胶转移至硝酸纤维素膜，并使用 1:1000 稀释的 CFTR 单克隆抗体 596 和 1:5000 稀释的钙网蛋白兔单克隆抗体进行 Western 印迹分析。CFTR 的二抗为 1:5000 稀释的驴抗鼠-HRP 抗体，钙网蛋白的二抗为 1:5000 稀释的驴抗兔-HRP 抗体。使用 SuperSignal™ West Dura Extended Duration Substrate（Thermo Fisher Scientific，Waltham，MA）显色，然后用 myECL Imager 成像。使用 Image Studio Lite 软件对 C 带、B 带和钙网蛋白的相对含量进行定量分析。为了量化 CFTR 的成熟度，将 CFTR C 带蛋白的相对含量以相同蛋白样本中测得的钙网蛋白 (calnexin) 含量进行标准化，并将这些水平用于后续计算[2]。

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从 Phe508del-MF（n=4 例）和 Phe508del-Phe508del（n=3 例）基因型供体中分离出原代人支气管上皮细胞，并在 10 mg/mL 人血清白蛋白存在下，分别用 2 μM 的 VX-445（Elexacaftor，WHO-11180）、18 μM 的 tezacaftor 和/或 1 μM 的 ivacaftor 处理。进行免疫印迹分析时，裂解细胞，通过电泳分离蛋白质，并使用抗 CFTR 抗体检测成熟的 CFTR 蛋白。进行定量密度分析，并将数据以钙网蛋白作为上样对照进行标准化。三项独立实验的结果表明，VX-445（Elexacaftor，WHO-11180）与 tezacaftor（无论是否联合 ivacaftor）联用，与载体组或 tezacaftor-ivacaftor 组相比，显著提高了成熟 CFTR 蛋白水平（P<0.05）。氯离子转运评估中，将细胞置于 Ussing 室中，并测量短路电流。数据代表来自三或四个供体支气管的平均值，每个供体进行三或四次重复实验。VX-445（Elexacaftor，WHO-11180）（3 μM）、tezacaftor（18 μM）和 ivacaftor（1 μM）联用产生的氯离子转运显著高于载体组、tezacaftor-ivacaftor 组或 VX-445-ivacaftor 组（所有比较的 P<0.05）。[2]

临床开发[2]
在一项涉及健康志愿者的 I 期试验（此处未报告）之后，一项分为三个部分、随机、双盲、安慰剂或活性药物对照、平行组、剂量范围的 II 期试验于 2017 年 7 月至 2018 年 3 月进行。该试验在美国、荷兰、比利时和澳大利亚的 38 个研究中心招募了 18 岁及以上的囊性纤维化患者。试验设计和实施与 VX-6591 的配套试验类似（详见补充附录第 7 页）。
Phe508del–MF 基因型患者被随机分配接受为期 4 周的活性治疗，即每日口服一次 VX-445（剂量分别为 50、100 或 200 mg），联合 tezacaftor（每日 100 mg）和 ivacaftor（每 12 小时 150 mg）三联疗法；或接受三联安慰剂对照治疗。Phe508del–Phe508del 基因型患者接受为期 4 周的 tezacaftor 和 ivacaftor 导入治疗后，被随机分配接受为期 4 周的治疗，治疗方案为 VX-445（每日口服 200 mg）联合 tezacaftor（每日 100 mg）和 ivacaftor（每 12 小时 150 mg）或匹配的安慰剂联合 tezacaftor 和 ivacaftor。此外，该试验纳入了 Phe508del–MF 基因型患者，这些患者接受了 VX-445 与 tezacaftor 和 VX-561（每日一次服用的氘代 ivacaftor）的三联疗法，或三联安慰剂治疗。有关试验设计和监督的详细信息，包括 VX-561 的描述、试验参与者和评估方法，请参阅 Davies 等人撰写的关于 VX-659 的配套文章¹以及本文的补充附录（第 7 至 14 页，图 S1 和表 S1）。

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临床疗效[2]
临床疗效的评估基于一秒用力呼气容积 (FEV1) 相对于基线的变化以及疾病特异性健康相关生活质量评估工具——囊性纤维化问卷修订版 (CFQ-R)。 CFQ-R 的每个领域均采用 100 分制评分，分数越高表示症状对患者生活质量的影响越小。呼吸系统症状领域的最小临床重要差异为 4 分。

吸收、分布和排泄
依来沙星的绝对口服生物利用度约为 80%。每日一次服用 200 mg 依来沙星后，稳态 AUC_{0-24 h} 和 C_max 分别为 162 mcg∙h/mL 和 8.7 mcg/mL，中位 T_max 为 6 小时。摄入中等脂肪饮食后，依来沙星的 AUC 增加 1.9-2.5 倍——因此，建议将 Trikafta™ 与脂肪类食物一起服用。放射性标记的依来沙星剂量约 87.3% 存在于粪便中，主要以代谢物的形式存在，而仅有 0.23% 存在于尿液中。依来沙星的表观分布容积为 53.7 L。依来沙星的平均表观清除率为 1.18 L/h。

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代谢/代谢物
依来沙星代谢广泛，主要由 CYP3A4/5 催化。其主要活性代谢物 M23-ELX 与母体药物的效力相似。已发表的研究尚未阐明依来沙星的确切代谢途径。

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生物半衰期
依来沙星的平均终末半衰期约为 24.7 小时。
平均时间

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蛋白结合
Elexacaftor在血浆中的蛋白结合率>99%，主要与白蛋白结合。警告和注意事项 药物性肝损伤和肝衰竭 TRIKAFTA可引起严重且可能致命的药物性肝损伤。服用TRIKAFTA的患者，无论其既往肝病史如何，均有发生肝衰竭并最终导致肝移植和死亡的报道。肝损伤的报道最早出现在TRIKAFTA治疗的第一个月内，最长可达治疗开始后15个月。所有患者在开始TRIKAFTA治疗前均应进行肝功能检查（ALT、AST、碱性磷酸酶和胆红素），治疗的前6个月每月检查一次，接下来的12个月每3个月检查一次，之后至少每年检查一次。如果出现肝损伤的体征或症状，应立即停用TRIKAFTA。这些体征或症状可能包括：肝功能指标显著升高（例如，ALT 或 AST > 正常值上限 (ULN) 的 5 倍，或 ALT 或 AST > ULN 的 3 倍且胆红素 > ULN 的 2 倍）；或提示肝损伤的临床症状（例如，黄疸、右上腹疼痛、恶心、呕吐、精神状态改变、腹水）。应将患者转诊至肝病专科医生处，并密切监测患者的临床和实验室指标，直至异常情况消退。如果症状改善且预期获益大于风险，可在密切监测下恢复使用 TRIKAFTA。重度肝功能损害患者禁用 TRIKAFTA。不建议中度肝功能损害患者使用 TRIKAFTA，仅在有明确医疗需要且获益大于风险时才应考虑使用。如果必须使用，应谨慎减少剂量并密切监测患者。
超敏反应，包括过敏性休克
上市后监测中曾报告过超敏反应，包括血管性水肿和过敏性休克。如果在治疗期间出现严重超敏反应的体征或症状，应停止使用 TRIKAFTA 并采取适当的治疗措施。应权衡每位患者的获益和风险，以决定是否恢复 TRIKAFTA 治疗。与 CYP3A 诱导剂合用：
与强效 CYP3A 诱导剂合用会显著降低伊伐卡福的暴露量，预计也会降低依来卡福和替扎卡福的暴露量，这可能会降低 TRIKAFTA 的疗效。不建议与强效 CYP3A 诱导剂合用。与 CYP3A 抑制剂合用：
与强效或中效 CYP3A 抑制剂合用会增加 elexacaftor、tezacaftor 和 ivacaftor 的暴露量。与中效或强效 CYP3A 抑制剂合用时，应降低 TRIKAFTA 的剂量。白内障：
接受含 ivacaftor 治疗方案的儿科患者曾报告出现非先天性晶状体混浊。建议对开始 TRIKAFTA 治疗的儿科患者进行基线和随访眼科检查。
不良反应
严重不良反应
与安慰剂组相比，TRIKAFTA 治疗组中更常见的严重不良反应是皮疹（1% vs <1%）和流感（1% vs 0%）。最常见的不良反应
在TRIKAFTA治疗组中发生率≥5%且比安慰剂组高≥1%的最常见不良反应包括：头痛、上呼吸道感染、腹痛、腹泻、皮疹、丙氨酸氨基转移酶升高、鼻塞、血清肌酸磷酸激酶升高、天冬氨酸氨基转移酶升高、流涕、鼻炎、流感、鼻窦炎、血清胆红素升高和便秘。特殊人群
儿童用药
TRIKAFTA在2岁以下囊性纤维化患者中的安全性和有效性尚未确定。

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在II期临床试验中，VX-445（Elexacaftor，WHO-11180）与tezacaftor和ivacaftor三联用具有可接受的安全性。在接受三联疗法的74例患者中，68例（92%）报告了至少一次不良事件；其中36例（53%）为轻度不良事件，29例（43%）为中度不良事件，3例（4%）为重度不良事件。VX-445-tezacaftor-ivacaftor组有3例（4%）患者发生严重不良事件，包括囊性纤维化感染性肺部急性加重（2例）、远端肠梗阻综合征（2例）和颈静脉血栓形成（1例）。无死亡病例发生。接受三联疗法的患者因不良事件而停药，这些不良事件包括皮疹、胆红素升高和胸痛（分别发生在不同的患者身上）。3例患者因肝酶（天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶）升高、肌酸激酶升高、肌病、胆红素升高和便秘而中断治疗。最常见的不良事件（发生率>10%）包括咳嗽、痰量增多、囊性纤维化肺部感染加重、咯血和发热。8%的患者出现肝功能异常（天冬氨酸氨基转移酶或丙氨酸氨基转移酶>正常值上限的3倍）。3%的患者出现胆红素升高>正常值上限的2倍。给药后未观察到急性支气管收缩的证据。[2]

[1]. MODULATOR OF THE CYSTIC FIBROSIS TRANSMEMBRANE CONDUCTANCE REGULATOR , PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS , METHODS OF TREATMENT , AND PROCESS FOR MAKING THE MODULATOR. US 20180162839 A1.

[2]. VX-445-Tezacaftor-VX-770 in Patients with Cystic Fibrosis and One or Two Phe508del Alleles. N Engl J Med. 2018 Oct 25;379(17):1612-1620.

Elexacaftor（曾用名 VX-445）是一种小分子新一代囊性纤维化跨膜传导调节因子 (CFTR) 蛋白矫正剂。它于 2019 年 10 月获得 FDA 批准，可与 tezacaftor 和 ivacaftor 联合使用，组成复方制剂 Trikafta™。Elexacaftor 被认为是新一代 CFTR 矫正剂，因为它与 tezacaftor 等第一代矫正剂相比，具有不同的结构和作用机制。虽然双重矫正剂/增强剂联合疗法已被证明对某些囊性纤维化 (CF) 患者有效，但其应用通常仅限于 F508del-CFTR 基因纯合子患者。 Elexacaftor 与 [VX-659] 联合研发，旨在满足 F508del-CFTR 杂合子囊性纤维化 (CF) 患者的有效治疗需求。这些患者的基因无法产生该蛋白，或其产生的蛋白对 ivacaftor 或 tezacaftor 无反应。Trikafta™ 是由 Vertex Pharmaceuticals 公司生产的三联疗法，是首个获批用于治疗 F508del-CFTR 基因纯合子或杂合子囊性纤维化 (CF) 患者的药物，这类患者约占所有 CF 患者的 70-90%。Trikafta™ 与 [ivacaftor] 和 [tezacaftor] 联合使用，适用于治疗 12 岁及以上且至少携带一个 CFTR 基因 F508del 突变的囊性纤维化 (CF) 患者。作用机制：囊性纤维化 (CF) 是由囊性纤维化跨膜转运调节因子 (CFTR) 基因突变引起的。该基因产生的 CFTR 蛋白是一种跨膜离子通道，负责将钠离子和氯离子转运穿过细胞膜——水分子跟随氯离子到达细胞表面，有助于保持细胞表面的水分并稀释细胞周围的分泌物（例如黏液）。CFTR 基因突变会导致 CFTR 蛋白数量不足和/或功能异常，从而导致离子转运缺陷和黏液在全身积聚，进而引发影响多个器官系统的疾病，包括肺、胃肠道和胰腺。最常见的 CFTR 突变是 F508del 突变，据估计占所有 CFTR 突变的 70% 至 90%，会导致 CFTR 蛋白加工和转运的严重缺陷。 Elexacaftor 是一种 CFTR 矫正剂，它能调节 CFTR 蛋白，促进其转运至细胞表面并整合到细胞膜中。最终结果是增加细胞表面成熟 CFTR 蛋白的数量，从而改善离子转运和囊性纤维化症状。Elexacaftor 通常与 tezacaftor（另一种作用机制不同的 CFTR 矫正剂）和 ivacaftor（一种 CFTR 增强剂，可增强细胞表面 CFTR 蛋白的功能）联合使用——这种三药联合疗法产生的协同效应远超典型的矫正剂/增强剂双药疗法。

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VX-445（Elexacaftor，WHO-11180） 是一种新一代 CFTR 矫正剂，其作用机制与第一代矫正剂 tezacaftor 不同。 VX-445 与 tezacaftor 联合用药可使细胞表面 Phe508del CFTR 蛋白的含量高于单独使用任一分子。添加 CFTR 增强剂 ivacaftor 可进一步增强 CFTR 功能。这种三联疗法有望治疗约 90% 囊性纤维化患者的根本病因。VX-445 的临床开发与 VX-659 的临床开发同步进行，旨在提高获得针对该患者群体的获批疗法的可能性。截至本文发表时，VX-445 的 III 期临床试验正在进行中（ClinicalTrials.gov 注册号：NCT03447249、NCT03460990、NCT03447262、NCT03525444、NCT03525548、NCT03525574）。[2]

C26H34F3N7O4S

597.6529

597.23

C, 52.25 H, 5.73 F, 9.54 N, 16.41 O, 10.71 S, 5.36

2216712-66-0

(R)-Elexacaftor;2229860-99-3;Elexacaftor-d3;Elexacaftor-13C,d3

134587348

White to off-white solid powder

4.9

133

1

11

8

41

1050

1

C[C@H]1CC(N(C1)C2=C(C=CC(=N2)N3C=CC(=N3)OCC(C)(C)C(F)(F)F)C(=O)NS(=O)(=O)C4=CN(N=C4C)C)(C)C

MVRHVFSOIWFBTE-INIZCTEOSA-N

InChI=1S/C26H34F3N7O4S/c1-16-12-25(5,6)35(13-16)22-18(23(37)33-41(38,39)19-14-34(7)31-17(19)2)8-9-20(30-22)36-11-10-21(32-36)40-15-24(3,4)26(27,28)29/h8-11,14,16H,12-13,15H2,1-7H3,(H,33,37)/t16-/m0/s1

(S)-N-((1,3-dimethyl-1H-pyrazol-4-yl)sulfonyl)-6-(3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimethylpropoxy)-1H-pyrazol-1-yl)-2-(2,2,4-trimethylpyrrolidin-1-yl)nicotinamide

Elexacaftor, WHO 11180; WHO 11180; RRN67GMB0V; UNII-RRN67GMB0V; Elexacaftor (USAN); ELEXACAFTOR [MI]; WHO11180; VX-445; VX 445; VX445; Trikafta

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~125 mg/mL (~209.15 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.48 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.48 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。