| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| 500mg |
|
| 靶点 |
With antitumor activity, EMT Inhibitor-1 (C19) (0-10 μM; 24 hours) conjugates Hippo, TGF-β, and Wnt signaling dyes and couples migration, proliferation, and doxorubicin importance locally and topically[1].
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
EMT Inhibitor-1 (C19)（0-10 μM；24 小时）具有抗肿瘤活性，可与 Hippo、TGF-β 和 Wnt 信号染料结合，并结合局部和局部的迁移、增殖和阿霉素重要性[1]。
在 293 细胞中，通过荧光素酶报告基因检测，C19 能剂量依赖性地抑制 Hippo、Wnt 和 TGF-β 通路的转录活性。[1] 在 WM266 黑色素瘤细胞中，C19 能剂量依赖性地诱导 Mst1 和 Lats1 激酶的磷酸化（激活）。[1] 在 WM266 细胞中，C19 能降低细胞质和细胞核中 Hippo 转导蛋白 TAZ 的蛋白水平，但不影响其 mRNA 水平，提示其增强了蛋白降解。它不影响 YAP 和 TEAD 的蛋白水平。[1] 在 WM266 细胞中，C19 能降低核内 β-连环蛋白和 Smad 的水平，并抑制下游促 EMT 基因（如 CTGF、纤连蛋白、平滑肌肌动蛋白、胶原蛋白 A2）的表达。[1] 在 WM266 细胞中，C19 能剂量依赖性地抑制 EMT 相关基因（Zeb1、Snail、Hes、Myc、cyclin D）的表达。[1] 在单层细胞划痕实验中，C19 能抑制 WM266 细胞的迁移。[1] 在 MTT 实验中，C19 能抑制多种癌细胞系的增殖，包括黑色素瘤（WM115, WM266, SK-Mel28）、结肠癌（SW480）、乳腺癌（MCF7）和骨髓瘤（8226）。人真皮成纤维细胞的反应较弱。[1] 在多种细胞系（WM266, WM115, SW480, MCF7, SKN-SH）中，C19 能剂量和时间依赖性地诱导 AMPK 在 Thr172 位点的磷酸化。其效力比已知的 AMPK 激活剂 AICAR 强约 10 倍。[1] 在 WM266 细胞中，C19 能诱导 Ulk1 的磷酸化，增加自噬标志物 LC3-II 的水平，并引起细胞空泡化，提示其诱导自噬。在测试条件下，它不诱导 caspase-3 的切割（凋亡）。[1] 在 WM266 细胞中，C19 能减弱由 belinostat 处理细胞的条件培养基所赋予的多柔比星耐药性。[1] C19 对 Hippo 报告基因活性和细胞迁移的抑制作用依赖于 TAZ 的降解，而其诱导自噬的作用则由 AMPK 激活介导，且不依赖于 TAZ 降解。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在小鼠肿瘤模型中，EMT 抑制剂-1 (C19)（腹腔注射；5-20 mg/kg）表现出最强的抗肿瘤活性。从机制上讲，EMT抑制剂-1激活肿瘤抑制因子AMPK和降解复合物上游的Hippo缓冲液Mst/Lats，从而导致GSK3-β介导的Hippo传感器TAZ降解[1]。使用载体溶液（100 μL DMEM，含 5% DMEM）溶解 C19。
在接种 WM266 黑色素瘤细胞的裸鼠异种移植模型中，腹腔注射 C19（5、10 和 20 mg/kg，共注射 3 次，每次间隔 3 天）能剂量依赖性地抑制肿瘤生长。与溶剂对照组相比，20 mg/kg 剂量可抑制约 90% 的肿瘤生长。[1] 与对照组小鼠的肿瘤相比，C19 处理组小鼠的肿瘤中 TAZ 蛋白水平降低，AMPK 和 Mst1 的磷酸化增加，GSK3-β 的磷酸化减少，并且 Zeb1 和 cyclin D 的表达降低。[1] 在整个实验期间，用 C19 处理的小鼠未观察到体重显著变化或明显的毒性迹象（进食习惯、整体身体活动）。[1] |
| 酶活实验 |
进行了体外激酶实验以评估 C19 对 GSK3-β 活性的直接影响。从 WM266 细胞中免疫沉淀的 GSK3-β 在含有 [γ-³²P]ATP 的激酶缓冲液中与其底物共孵育，实验组加入 C19 或 GSK3 抑制剂 TWS119。孵育后终止反应，将反应物点在滤纸上，洗涤后计数放射性。C19 在该实验中未显示出对 GSK3-β 活性的直接影响。[1]
为了评估对 AMPK、Mst1 和 Lats1 的直接影响，从 WM266 细胞中免疫沉淀了这些激酶。将免疫沉淀物重悬于激酶缓冲液中，在不含放射性 ATP 的情况下，与 C19 或 AICAR（用于 AMPK）共孵育。反应终止后，使用磷酸化特异性抗体通过蛋白质印迹分析磷酸化状态。C19 在这些条件下能诱导 AMPK 的磷酸化，提示可能存在直接影响。在相同的实验条件下，未观察到对 Mst1 或 Lats1 磷酸化的直接影响。[1] |
| 细胞实验 |
对于荧光素酶报告基因实验，使用基于脂质体的转染试剂将细胞（如 293）瞬时转染报告基因构建体（8xGTIIC-luc 用于 Hippo，8xTCF-luc 用于 Wnt，A3Lux 用于 TGF-β）或 CMV-luc 对照。5 小时后更换培养基，并用 C19 或其他抑制剂处理细胞 24 小时。然后裂解细胞，测量蛋白质提取物中的荧光素酶活性。报告基因活性归一化至 CMV-luc 对照活性。[1]
对于蛋白质印迹分析，使用裂解缓冲液从单层细胞中提取蛋白质。对于核质分级分离，将细胞重悬于低渗缓冲液中，冰上孵育，用 Nonidet NP-40 裂解，离心分离细胞核。等量蛋白质通过 SDS-PAGE 分离，转移至膜上，并用特异性一抗和二抗进行孵育。使用化学发光法进行检测。[1] 对于定量 PCR（qPCR），使用商业试剂盒提取总 RNA，并合成第一链 cDNA。使用 Syber green Master Mix 在标准仪器上进行实时 PCR 测量基因表达。基因表达归一化至 GAPDH。[1] 对于细胞活力/增殖实验，将细胞接种于 96 孔板中，与 C19 孵育 96 小时。通过 MTT 法定量测定细胞活力。向每孔加入 MTT 溶液，孵育后溶解形成的沉淀，在 570 nm 波长下测量吸光度，参考波长为 650 nm。相对于未处理对照组计算活细胞百分比。[1] 对于细胞迁移实验，进行了单层细胞划痕实验。在不同时间点（例如第 1 天和第 3 天）拍照以评估伤口闭合情况。[1] 对于 siRNA 转染，根据制造商的方案，使用商业转染试剂试剂盒将细胞与 siRNA 双链体共转染。48 小时后，提取蛋白质进行蛋白质印迹分析。[1] |
| 动物实验 |
将6周龄的裸鼠（nu/nu）右侧腹部皮下接种WM266黑色素瘤细胞（10⁶个细胞溶于200 µL PBS）。当肿瘤可触及（直径约5 mm）时，将动物随机分为对照组和治疗组。[1]
C19溶解于含5%二甲基亚砜（DMSO）的DMEM培养基中。对照组仅注射溶剂。[1] 治疗组腹腔注射C19，剂量分别为5、10或20 mg/kg（每组7只动物）。注射三次，每次间隔3天。[1] 每日监测小鼠健康状况。肿瘤体积采用公式（长×宽²）/2计算。接种后2个月终止实验。采集肿瘤组织进行生化和基因表达分析。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在体内异种移植研究中，裸鼠接受剂量高达 20 mg/kg 的 C19 治疗（腹腔注射三次）后，未观察到体重显著变化或明显的毒性迹象（基于摄食习惯和整体活动水平）。未报告具体的毒理学参数，例如 LD50、器官毒性、药物相互作用或血浆蛋白结合率。[1]
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
C19 被鉴定为一种多靶点 EMT 通路抑制剂，靶向 Hippo、Wnt 和 TGF-β 信号通路。其作用机制涉及 AMPK 和 Mst/Lats 激酶的激活，进而导致 GSK3-β 介导的 Hippo 信号转导分子 TAZ 的降解，从而抑制 β-catenin 和 Smads 的转录激活功能，最终抑制 EMT。[1] 研究表明，通过 C19 同时靶向多个 EMT 通路可能是一种有前景的癌症治疗策略。AMPK 的激活也为 C19 在癌症以外的代谢相关疾病（例如糖尿病）和纤维化疾病中的潜在应用开辟了道路。[1] 该化合物在小鼠黑色素瘤异种移植模型中表现出强大的抗肿瘤活性，且无明显毒性，值得进一步开展临床前和临床研究。[1]
|
| 分子式 |
C12H12CL2N2O2S
|
|---|---|
| 分子量 |
319.206879615784
|
| 精确质量 |
317.999
|
| CAS号 |
1638526-21-2
|
| PubChem CID |
90718214
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| LogP |
3.6
|
| tPSA |
83.5
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
19
|
| 分子复杂度/Complexity |
276
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
ClC1=C(C=CC(=C1)C1C(=NSN=1)OCCCCO)Cl
|
| InChi Key |
FWMUIOJZHOPPDX-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C12H12Cl2N2O2S/c13-9-4-3-8(7-10(9)14)11-12(16-19-15-11)18-6-2-1-5-17/h3-4,7,17H,1-2,5-6H2
|
| 化学名 |
4-[[4-(3,4-dichlorophenyl)-1,2,5-thiadiazol-3-yl]oxy]butan-1-ol
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~313.27 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.83 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.83 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.83 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.1327 mL | 15.6637 mL | 31.3273 mL | |
| 5 mM | 0.6265 mL | 3.1327 mL | 6.2655 mL | |
| 10 mM | 0.3133 mL | 1.5664 mL | 3.1327 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
