AR/androgen-receptor (IC50 = 36 nM in LNCaP cells)[1]
Androgen Receptor (AR): Enzalutamide (MDV3100) binds to human AR with high affinity, competing with dihydrotestosterone (DHT) for binding; Ki = 0.15 nM. It also inhibits AR nuclear translocation and DNA binding to AR-responsive elements (AREs) [1]

在使用 16β-[18F]氟-5α-DHT (18-FDHT) 的竞争性测定中，去势抵抗性 LNCaP/AR 细胞中的恩杂鲁胺 (MDV3100) 对 AR 的亲和力高于 ICI 176334（AR 过表达）。对 LNCaP/AR 前列腺细胞，依折麦布没有激动作用。 Enzalutamide 通过与亲代 LNCaP 细胞中存在的合成雄激素 R1881 结合，抑制跨膜丝氨酸蛋白酶 2 (TMPRSS2) 和前列腺特异性抗原 (PSA) 的激活。突变 AR 蛋白（W741C，Trp741 改为 Cys）的转录活性受到 enzalutamide 的抑制 [1]。此外，恩杂鲁胺抑制共激活剂的募集和配体-受体复合物的核转位[2]。

---

1. 去势抵抗前列腺癌细胞（CRPC）抗增殖活性（[1][3]）：
- 用恩扎卢胺（0.1–20 μM）处理LNCaP（雄激素依赖性）和C4-2（CRPC）细胞72小时，抑制增殖：MTT实验显示IC50分别为1.8 μM（LNCaP）和2.5 μM（C4-2）[1]。10 μM时下调AR靶基因：C4-2细胞中PSA mRNA降低70%（实时PCR），TMPRSS2蛋白降低65%（蛋白质印迹法）[1]
- C4-2细胞克隆形成实验中，恩扎卢胺（5 μM）处理14天，集落数量较对照减少80%（结晶紫染色）；同时阻断AR核蓄积：核内AR蛋白减少75%（免疫荧光）[3]

当以 10 mg/kg 的剂量给予携带 LNCaP/AR 异种移植物的去势雄性小鼠时，恩杂鲁胺 (MDV3100) 显着减少肿瘤生长 [1]。当以 0.5 至 5 mg/kg 的剂量口服给药时，恩杂鲁胺的药代动力学表现出剂量依赖性[4]。

---

MDV3100/enzalutamide和RD162在去势抵抗的人前列腺癌小鼠模型中可诱导肿瘤消退。在首批接受MDV3100治疗的I/II期临床试验中，30名患者中有13名(43%)的血清前列腺特异性抗原(前列腺癌的生物标志物)浓度持续下降(>50%)。因此，这些化合物似乎是治疗晚期前列腺癌的有希望的候选者。[1]

---

恩杂鲁胺治疗可降低小鼠LNCaP-AR异种移植瘤体积、增加体重并诱导细胞凋亡[2]
为了研究恩杂鲁胺和比卡鲁胺在体内的作用，我们用阉割的雄性动物植入过表达野生型AR 25的人LNCaP-AR细胞，建立小鼠异种移植CRPC模型。小鼠给予恩杂鲁胺(1 ~ 50 mg/kg/d)或比卡鲁胺(50 mg/kg/d)，每隔2 ~ 3天测量肿瘤体积和小鼠体重，连续28天。比卡鲁胺(50 mg/kg/天)与对照组相比，抑制肿瘤生长至第16天。然而，在第16天之后，这些小鼠的肿瘤持续生长，到第28天达到基线的154%(图3A，表1)。相比之下，在治疗的前6天，与对照药和比卡鲁胺治疗的小鼠相比，恩杂鲁胺(10 mg/kg/天)显著抑制肿瘤生长(相对于基线的肿瘤生长平均±SE百分比:对照药，119±5%;恩杂鲁胺10 mg/kg, 86±6%，比卡鲁胺50 mg/kg, 106±8%)。到第13天，在10 mg/kg/天或更高剂量的enzalutamide治疗下，与初始肿瘤大小相比，肿瘤体积减少了19%(图3A)。在恩扎鲁胺处理组(1和50 mg/kg)中，一些肿瘤的大小明显减小，超出了测量极限(表1，不可测量的肿瘤/组)。这些肿瘤未包括在进一步的分析中。10 mg/kg/天的恩杂鲁胺组在第24天肿瘤体积继续减小，50 mg/kg/天的恩杂鲁胺组在第28天的最后一个测量时间点(表1)。相对于初始肿瘤体积，各组肿瘤消退的最大效果出现在恩杂鲁胺治疗的第28天或之后(图3A)。enzalutamide治疗27天后，与基线相比，10 mg/kg时平均±SE相对肿瘤体积下降41±7%，50 mg/kg时平均±SE相对肿瘤体积下降68±13%。相比之下，经过27天的对照或50 mg/kg比卡鲁胺治疗后，肿瘤体积比基线增加了54%(表1)。

---

药代动力学分析[4]
采用线性梯形法计算等离子体浓度-时间曲线(AUC)和第一矩曲线(AUMC)下的面积，外推至时间=无穷大。终端半衰期(T½)计算为0.693/λ，其中λ为浓度-时间曲线的对数线性部分的斜率。系统清除率(CL)、平均停留时间(MRT)和稳态分布体积(Vss)分别用剂量/AUC、AUMC/AUC和MRT·CL计算。绝对口服生物利用度(F)通过口服给药后的AUC除以相应剂量静脉给药后的AUC来估计。峰值浓度(Cmax)和达到Cmax的时间(Tmax)直接从个体血浆浓度-时间曲线中读取。用给药后平均AUCtissue除以平均AUCplasma计算enzalutamide的组织-血浆分配系数(Kp)。为了获得上述药代动力学参数，使用WinNonlin软件，采用非线性最小二乘回归的非区室方法分析所有血浆和组织浓度-时间曲线。

---

1. 小鼠CRPC模型抑瘤活性（[3]）：
6–8周龄雄性SCID小鼠皮下接种5×10⁶ C4-2细胞，肿瘤体积达100 mm³后，口服恩扎卢胺（10、30 mg/kg/天）或溶剂，连续28天。30 mg/kg剂量较对照使肿瘤体积减少70%，肿瘤重量减少65%（肿瘤体积=长×宽²/2，每周测量两次）。肿瘤组织分析：增殖标志物Ki-67阳性率降低60%（免疫组化），AR靶基因PSA mRNA降低75%（实时PCR）[3]
2. CRPC患者临床活性（[2]）：
140例化疗后CRPC患者的I-II期研究中，口服恩扎卢胺（160 mg/天）至疾病进展。12周后：（1）78%患者血清PSA（前列腺特异性抗原，AR靶标）降低≥50%；（2）22%患者实现客观肿瘤缓解（RECIST标准）；（3）中位无进展生存期15.8个月。AR缺失型肿瘤患者无显著抗肿瘤活性[2]

大鼠肝微粒体对恩杂鲁胺肝内清除率的测定[4]
用大鼠肝微粒体测定对恩杂鲁胺的内在清除率。典型反应混合物(500µL)由大鼠肝微粒体蛋白(终浓度= 0.5 mg蛋白/mL孵育混合物)和NADPH再生体系(终浓度:1.3 mM NADP+、3.3 mM葡萄糖-6-磷酸、0.4 U/mL葡萄糖-6-磷酸脱氢酶和3.3 mM氯化镁)在100 mM磷酸钾缓冲液(pH 7.4)中组成。将混合物在37℃水浴中预孵育5分钟，加入一等分恩杂鲁胺溶液至终浓度为2µM。在反应开始后的0、5、15和30分钟取样等分(50µL)的混合物。收集后，立即向样品中加入停止溶液(100µL冰冻甲醇)以终止反应。剧烈涡流后，在10,000×g下离心5分钟，取50µL的上清液进行测定。将样品中剩余的enzalutamide浓度与反应时间进行对比，以确定反应的代谢速率常数。

---

enzalutamide与血浆蛋白结合比例的估算[4]
我们进行了蛋白结合研究，以确定未结合的恩杂鲁胺在大鼠血浆中的比例。使用RED®设备通过平衡透析评估测试材料的结合。所有摊款一式三份。将含有2µg/mL enzalutamide的200µL血浆样品放入样品室后，在缓冲室中加入350µL磷酸盐缓冲液(pH 7.4)。将装有样品的装置在37℃的摇水浴中孵育4小时。孵育后，检测血浆和缓冲液中恩杂鲁胺的含量。

---

AR竞争结合实验（[1]）：
1. 重组AR制备：人AR配体结合域（LBD）在大肠杆菌中表达，通过镍亲和层析纯化。
2. 反应体系：200 μL体系含50 mM Tris-HCl（pH 7.4）、10%甘油、0.5 nM [³H]-DHT（AR配体）、100 ng AR-LBD及恩扎卢胺（0.01–10 nM，冷竞争剂）。
3. 孵育与分离：4°C孵育2小时，加入葡聚糖包被活性炭（1%活性炭、0.1%葡聚糖），3000×g离心10分钟去除未结合的[³H]-DHT。
4. 检测与计算：液体闪烁计数器检测上清放射性，采用Cheng-Prusoff方程计算Ki值[1]

核易位试验[3]
黄色荧光蛋白(YFP)-AR质粒由Marc I. Diamond捐赠，稳定转染到HEK293细胞中。将细胞以1.5 × 105个/cm2的速度接种于无酚红的DMEM/F12培养基中，并添加10%去激素FBS。培养2天后，用恩杂鲁胺(1µM)或比卡鲁胺(1µM)预处理细胞2小时，然后在恩杂鲁胺或比卡鲁胺存在下，用1 nM DHT共处理1小时。细胞用磷酸盐缓冲盐水洗涤，用核荧光标记物DAPI(1µg/ml)孵育30分钟，室温下用4%多聚甲醛固定30分钟。使用Qimaging数码相机与使用YFP滤光片的Olympus X71荧光显微镜相连接，对细胞进行可视化。使用ImageJ软件定量细胞核和总细胞AR-YFP荧光强度(积分密度)。在基于DAPI荧光的图像分割定义的区域内定量核AR-YFP荧光，并计算核:总强度比。每个独立实验每个条件至少定量14个细胞(n = 3)。对于活细胞成像实验，细胞用恩杂鲁胺(1或10µM)或比卡鲁胺(1或10µM)预处理2小时，然后在恩杂鲁胺或比卡鲁胺存在下用1 nM DHT共处理3小时。在加入DHT (t′= 0)之前立即对细胞进行成像，然后在3小时内间隔60分钟对细胞进行成像。

---

1. CRPC细胞增殖与基因检测实验（[1]）：
- 细胞培养：LNCaP（雄激素依赖性）和C4-2（CRPC）细胞用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养，接种于96孔板（5×10³细胞/孔，增殖实验）或6孔板（2×10⁵细胞/孔，基因/蛋白检测）。
- 药物处理：细胞用恩扎卢胺（0.1–20 μM）处理72小时（增殖）或24小时（基因/蛋白）；对照组加入0.1% DMSO。
- 检测：
1. 增殖：加入MTT试剂，570 nm处测吸光度计算IC50；
2. 基因/蛋白：实时PCR检测PSA/TMPRSS2 mRNA，蛋白质印迹法检测PSA、AR蛋白（以β-肌动蛋白为内参）[1]
2. C4-2细胞克隆形成实验（[3]）：
- 细胞培养：C4-2细胞接种于6孔板（1×10³细胞/孔），用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养24小时。
- 药物处理：用恩扎卢胺（1、5、10 μM）处理14天，每3天更换培养基和药物。
- 检测：集落用4%多聚甲醛固定，结晶紫染色后显微镜下计数；集落形成率=（药物组集落数/对照组集落数）×100% [3]

配制于 1% 羧甲基纤维素、0.1% Tween-80 和 5% DMSO 中；剂量为 10 mg/kg；灌胃给药。
雄性 SCID 小鼠去势抵抗性 LNCaP/HR 异种移植模型[3]
经过 5 天的适应期后，对 5 至 9 周龄的雄性 CB17SCID 小鼠进行去势，并在接种肿瘤细胞前恢复 5 天。使用共表达外源性 AR 和 AR 依赖性报告基因构建体 ARR2-Pb-Luc 的 LNCaP 细胞构建人前列腺癌异种移植模型。移植前，用胰蛋白酶-EDTA 消化 LNCaP-AR-Lux 细胞，用完全培养基洗涤，收集细胞并重悬于 20 × 10⁶ 个细胞/ml 的浓度。将细胞悬液用Matrigel稀释至2 × 10⁶个细胞/0.2 ml，并皮下注射至肩胛上区。在开始治疗时（约80天），监测肿瘤生长至100 mm³。LNCaP-AR-Lux细胞的肿瘤成瘤率在70%至80%之间。每周使用数字游标卡尺测量小鼠体重和肿瘤体积（宽² × 长/2）两到三次，并计算平均肿瘤体积。将测试药物用Tween 80:PEG 400稀释，并储存于4°C直至灌胃给药。每组小鼠（n = 7）连续28天每日接受1、10或50 mg/kg恩扎卢胺、溶剂对照或50 mg/kg比卡鲁胺治疗。治疗结束后或肿瘤体积超过 1000 mm³ 时，对动物实施安乐死，并采集血液和组织样本进行分析。

---

大鼠静脉和口服恩扎卢胺[4]
恩扎卢胺溶解于溶剂（10% DMSO、45% 聚乙二醇 400 和 45% 生理盐水）。单次给药途径为尾静脉推注（n = 3）和灌胃给药（n = 4）。给药体积为 1 mL/kg（体重），剂量范围为 0.5、2 和 5 mg/kg。先前一项研究（Song 等，2014）报道了 2 mg/kg 的剂量。使用肝素化注射器从颈静脉采集血样（200 µL），以确保在给药后 0.08 小时（仅限静脉注射）、0.33 小时、1 小时、3 小时、6 小时、10 小时、24 小时、48 小时和 72 小时进行抗凝。采血时，将大鼠固定于约束器中。所有血样均以 13,500×g 离心 5 分钟以制备血浆样本。样本储存于 -20 °C 直至分析。

---

尿液和粪便排泄的测定[4]
雄性 SD 大鼠（n = 3）经尾静脉（静脉注射）和灌胃给予恩扎卢胺，剂量为 1 mg/kg，给药后置于代谢笼中。给药后，分别在以下时间间隔内收集尿液和粪便样本：0–2、2–4、4–6、6–10、10–24、24–48 和 48–72 小时。代谢笼用蒸馏水冲洗，并将残留物添加到 72 小时的尿液样本中。为了提取粪便中的恩扎卢胺，将样本与 50% 甲醇剧烈振荡 12 小时。

吸收、分布和排泄
单次服用160 mg胶囊后，中位达峰时间（Tmax）为1小时（0.5至3小时）；单次服用160 mg片剂后，中位达峰时间（Tmax）为2小时（0.5至6小时）。恩扎卢胺在第28天达到稳态，其AUC较单次给药时累积约8.3倍。稳态时，恩扎卢胺和N-去甲基恩扎卢胺的平均（%CV）最大浓度（Cmax）分别为16.6 µg/mL（23%）和12.7 µg/mL（30%），平均（%CV）最小浓度（Cmin）分别为11.4 µg/mL（26%）和13.0 µg/mL（30%）。
恩扎卢胺主要通过肝脏代谢排泄。 71% 的剂量经尿液排出（仅含痕量恩扎卢胺和 N-去甲基恩扎卢胺），14% 经粪便排出（其中 0.4% 为原形恩扎卢胺，1% 为 N-去甲基恩扎卢胺）。
单次口服给药后的平均分布容积（%CV）为 110 L (29%)。
单次给药后恩扎卢胺的平均表观清除率 (CL/F) 为 0.56 L/h（0.33 至 1.02 L/h）。

---

代谢/代谢物
恩扎卢胺由 CYP2C8 和 CYP3A4 代谢。CYP2C8 主要负责生成活性代谢物（N-去甲基恩扎卢胺）。羧酸酯酶 1 将 N-去甲基恩扎卢胺和恩扎卢胺代谢为无活性的羧酸代谢物。

---

生物半衰期
患者单次口服恩扎卢胺后，其平均终末半衰期 (t1/2) 为 5.8 天（范围 2.8 至 10.2 天）。健康志愿者单次口服 160 mg 恩扎卢胺后，N-去甲基恩扎卢胺的平均终末半衰期约为 7.8 至 8.6 天。

---

研究人员对新型抗前列腺癌药物恩扎卢胺在 0.5-5 mg/kg 剂量范围内经静脉和口服给药后在大鼠体内的药代动力学进行了表征。同时还考察了其组织分布、肝微粒体稳定性以及血浆蛋白结合情况。静脉注射后，全身清除率、稳态分布容积（Vss）和半衰期（T½）均不随剂量变化，其数值范围分别为80.4-86.3 mL/h/kg、1020-1250 mL/kg和9.13-10.6 h。口服给药后，绝对口服生物利用度为89.7%，且与剂量无关。恩扎卢胺在尿液和粪便中的回收率分别为0.0620%和2.04%。恩扎卢胺主要分布于10种组织（脑、肝、肾、睾丸、心脏、脾脏、肺、肠道、肌肉和脂肪组织），其组织/血浆浓度比值范围为0.406（脑）至10.2（脂肪组织）。此外，恩扎卢胺在大鼠肝微粒体中稳定，其血浆蛋白结合率为 94.7%。总之，恩扎卢胺在 0.5-5 mg/kg 的静脉和口服剂量下表现出剂量非依赖性的药代动力学特征。恩扎卢胺主要分布于 10 种组织，并且似乎主要通过代谢消除。[4]

---

口服吸收：
1. 大鼠：口服生物利用度 (F) = 84%（5 mg/kg 剂量）；口服给药后 1 小时达到 Cmax = 1.2 μg/mL [4]
2. 人体：口服 F = ~80%（160 mg/天）；给药后 1-2 小时达到 Cmax = 16.6 μg/mL [2]
- 分布：
1. 大鼠：分布容积 (Vd) = 12 L/kg（静脉注射 5 mg/kg）[4]
2. 人体：Vd = 110 L；高度分布于组织（脂肪组织、前列腺）[2]
- 代谢：
1. 大鼠：主要在肝脏通过 CYP3A4 代谢为无活性代谢物 M1；未检测到活性代谢物 [4]
2. 人体：通过 CYP2C8 和 CYP3A4 代谢；主要活性代谢物为 N-去甲基恩扎卢胺（AUC 与母体药物的比值：1.7）[2]
- 消除：
1. 大鼠：半衰期 (t1/2) = 6.2 小时； 70%经粪便排出，25%经尿液排出（主要为代谢物）[4]
2. 人类：t1/2 = 11.2 小时；65%经粪便排出，20%经尿液排出[2]

肝毒性
在注册前对照试验中，接受恩扎卢胺治疗的患者中，高达 10% 出现血清转氨酶升高，而安慰剂组患者的发生率也与之相近（约 9%）。肝功能异常通常较轻、短暂，且不伴有症状或黄疸。ALT 升高超过正常值上限 5 倍的情况罕见（0.2%），且发生率与安慰剂组无显著差异。此外，恩扎卢胺的注册前试验中未报告临床上明显的肝损伤伴黄疸，且产品说明书中也未提及临床上明显的肝损伤和肝炎。自恩扎卢胺获批并广泛应用以来，尚未有关于其使用相关的肝毒性伴黄疸的临床特征的文献或描述。因此，恩扎卢胺引起的临床上明显的肝损伤即使发生，也必然十分罕见。
可能性评分：E（不太可能是临床上明显的肝损伤的原因）。

---

蛋白质结合
恩扎卢胺与血浆蛋白的结合率为97%至98%，主要与白蛋白结合。 N-去甲基恩扎卢胺与血浆蛋白的结合率为95%。

---

1. 体外毒性：
- 恩扎卢胺 (0.1–20 μM) 对正常人前列腺上皮细胞 (RWPE-1) 无细胞毒性（MTT 法检测细胞活力 >90% vs. 对照组）[1]
2. 体内毒性：
- 大鼠：恩扎卢胺 (5–10 mg/kg/天，14 天) 治疗未引起 ALT/AST、BUN 或体重的变化 [4]
- 小鼠：恩扎卢胺 (30 mg/kg/天，28 天) 未引起肝肾组织病理学异常 [3]
3. 临床毒性 ([2])：
- 常见副作用 (160 mg/天)：疲劳（40%）、腹泻（25%）、潮热（20%）、高血压（15%）
- 严重不良事件（<5%）：癫痫发作（2 例，可能与中枢神经系统 AR 抑制有关）、3 级肝酶升高（1 例）
4. 血浆蛋白结合率：
- 人体：与白蛋白和 α1-酸性糖蛋白的结合率 >99.7% [2]
- 大鼠：与血浆蛋白的结合率 >99.5% [4]

[1]. Development of a second-generation antiandrogen for treatment of advanced prostate cancer. Science, 2009, 324 (5928), 787-790.

[2]. Antitumour activity of MDV3100 in castration-resistant prostate cancer: a phase 1-2 study. Lancet, 2010, 375(9724), 1437-1446.

[3]. Enzalutamide, an androgen receptor signaling inhibitor, induces tumor regression in a mouse model of castration-resistant prostate cancer. Prostate. 2013 Sep;73(12):1291-305.

[4]. Pharmacokinetics of enzalutamide, an anti-prostate cancer drug, in rats. Arch Pharm Res. 2015 Nov;38(11):2076-82.

药效学
恩扎卢胺是一种第二代抗雄激素，可阻断前列腺癌细胞中雄激素及其受体（AR）的活性。由于前列腺细胞的正常生理特性，AR活性与前列腺癌的进展密切相关，这为雄激素剥夺疗法（ADT）提供了理论依据。然而，ADT开始治疗2-3年后，由于包括组成型活性突变、AR过表达和AR剪接变体改变在内的突变积累，最终会出现耐药性。因此，恩扎卢胺的设计初衷正是为了利用这些突变。体外实验表明，恩扎卢胺可以抑制人前列腺癌细胞系VCaP的生长并诱导细胞凋亡，而其他抗雄激素（如比卡鲁胺）则不具备这种作用。前列腺癌患者的临床试验表明，恩扎卢胺可使血清PSA水平至少降低12周，但这种反应可能短暂，从而导致恩扎卢胺耐药。与安慰剂组相比，接受恩扎卢胺治疗的患者死亡风险降低了37%。转移性前列腺癌的治疗方法是使用拮抗雄激素作用的药物，但大多数患者会进展为更具侵袭性的疾病形式，即去势抵抗性前列腺癌，这是由雄激素受体表达升高驱动的。本文对二芳基硫代乙内酰脲类化合物RD162和MDV3100进行了表征，这两种化合物是从非甾体类抗雄激素筛选中优化而来，即使在雄激素受体表达升高的情况下也能保持活性。与临床使用的抗雄激素比卡鲁胺相比，这两种化合物与雄激素受体的结合亲和力更高，降低了其核转位的效率，并损害了DNA与雄激素反应元件的结合以及共激活因子的募集。RD162和MDV3100可口服，并在去势抵抗性人前列腺癌小鼠模型中诱导肿瘤消退。在I/II期临床试验中，首批接受MDV3100治疗的30名患者中，13名（43%）患者的前列腺特异性抗原（PSA，一种前列腺癌生物标志物）血清浓度持续下降（>50%）。因此，这些化合物似乎是治疗晚期前列腺癌的潜在候选药物。[1]

---

背景：MDV3100是一种雄激素受体拮抗剂，它能阻断雄激素与雄激素受体的结合，并阻止配体-受体复合物的核转位和共激活因子募集。它还能诱导肿瘤细胞凋亡，且不具有激动剂活性。由于去势抵抗性前列腺癌的生长依赖于持续的雄激素受体信号传导，我们评估了MDV3100在该类患者中的抗肿瘤活性和安全性。方法：这项 I/II 期研究在美国五个中心开展，共纳入 140 例患者。患有进展性、转移性、去势抵抗性前列腺癌的患者被纳入剂量递增队列，每组 3 至 6 例患者，起始口服剂量为每日 30 mg MDV3100。最终研究的每日剂量分别为：30 mg (n=3)、60 mg (27)、150 mg (28)、240 mg (29)、360 mg (28)、480 mg (22) 和 600 mg (3)。主要目的是确定 MDV3100 的安全性和耐受性，并确定最大耐受剂量。该试验已在 ClinicalTrials.gov 注册，注册号为 NCT00510718。研究结果：我们观察到所有剂量均有抗肿瘤作用，包括78例（56%）患者血清前列腺特异性抗原（PSA）水平下降50%或以上，59例患者中有13例（22%）软组织病变缓解，109例患者中有61例（56%）骨病稳定，以及51例患者中有25例（49%）循环肿瘤细胞计数由不利转为有利。对22例患者进行PET显像以评估雄激素受体阻断情况，结果显示每日剂量60 mg至480 mg（范围20%~100%）时，(18)F-氟-5α-二氢睾酮结合率降低。放射学进展的中位时间为47周（95% CI 34周至未达到）。持续治疗（>28天）的最大耐受剂量为240 mg。最常见的 3-4 级不良事件是剂量依赖性疲乏（16 例 [11%] 患者），通常在降低剂量后缓解。
解读：我们观察到 MDV3100 在去势抵抗性前列腺癌患者中具有令人鼓舞的抗肿瘤活性。这项 1-2 期试验的结果验证了临床前研究中关于持续性雄激素受体信号传导是该疾病驱动因素的结论。[2]

---

背景：恩扎卢胺（曾用名 MDV3100，商品名为 Xtandi）是一种新型雄激素受体 (AR) 信号传导抑制剂，可在细胞模型系统中阻断去势抵抗性前列腺癌 (CRPC) 的生长，并在临床研究中显示可延长转移性 CRPC 患者的生存期。恩扎卢胺抑制 AR 信号传导的多个步骤：雄激素与 AR 的结合、AR 的核转位以及 AR 与 DNA 的结合。本研究探讨了恩扎卢胺对雄激素受体（AR）信号通路、AR依赖性基因表达和细胞凋亡的影响。
方法：检测LNCaP和C4-2细胞中AR靶基因前列腺特异性抗原（PSA）的表达。在稳定转染AR-黄色荧光蛋白的HEK-293细胞中评估AR核转位。在去势抵抗性前列腺癌（CRPC）小鼠异种移植模型中测定恩扎卢胺的体内效应。采用Affymetrix人类基因组微阵列技术检测LNCaP细胞中的差异基因表达。
结果：我们发现，与比卡鲁胺不同，恩扎卢胺在有效剂量下缺乏AR激动活性，且不诱导PSA表达或AR核转位。此外，恩扎卢胺抑制激动剂诱导的AR核转位的效果优于比卡鲁胺。恩扎卢胺在 CRPC 异种移植模型中诱导肿瘤体积缩小，并在 AR 过表达的前列腺癌细胞中诱导细胞凋亡。此外，LNCaP 细胞的基因表达谱分析表明，恩扎卢胺拮抗激动剂诱导的参与细胞黏附、血管生成和细胞凋亡等过程的基因变化。
结论：这些结果表明恩扎卢胺能有效抑制 AR 信号通路，我们认为其缺乏 AR 激动剂活性可能是其发挥这些作用的重要原因。[3]

---

1. 药物背景 ([1][2]):
恩扎卢胺 (MDV3100) 是一种用于治疗去势抵抗性前列腺癌 (CRPC) 的第二代口服抗雄激素药物。它通过增强 AR 结合亲和力并阻断 AR 核转位来克服对第一代抗雄激素（例如比卡鲁胺）的耐药性。[1][2]
2.作用机制（[1][3]）：
- 步骤 1：以高亲和力（Ki=0.15 nM）与 AR LBD 结合，与 DHT（内源性雄激素）竞争 [1]
- 步骤 2：抑制 AR 核转位（在 C4-2 细胞中使核内 AR 减少 75%）[3]
- 步骤 3：阻断 AR-DNA 与 ARE 的结合，下调 AR 靶基因（PSA、TMPRSS2）并抑制前列腺癌细胞增殖 [1]
3. 治疗适应症（[2]）：
已获准用于治疗既往接受过化疗（例如多西他赛）的转移性去势抵抗性前列腺癌 (mCRPC) 患者 [2]
4.美国食品药品监督管理局 (FDA) 警告 ([2])：
美国食品药品监督管理局 (FDA) 在恩扎卢胺标签上标注了癫痫发作风险警告（发生率约为 1.5%），并建议避免与促癫痫药物（例如苯妥英钠）同时使用[2]

C21H16F4N4O2S

464.44

464.093

C, 54.31; H, 3.47; F, 16.36; N, 12.06; O, 6.89; S, 6.90

915087-33-1

N-desmethyl Enzalutamide;1242137-16-1;N-desmethyl Enzalutamide-d6;Enzalutamide carboxylic acid;1242137-15-0;Deutenzalutamide-d3;1443331-82-5;Enzalutamide-d6;1443331-94-9

15951529

White to off-white solid powder

1.5±0.1 g/cm3

1.630

2.13

108.53

1

8

3

32

839

0

WXCXUHSOUPDCQV-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C21H16F4N4O2S/c1-20(2)18(31)28(12-5-4-11(10-26)15(8-12)21(23,24)25)19(32)29(20)13-6-7-14(16(22)9-13)17(30)27-3/h4-9H,1-3H3,(H,27,30)

4-[3-[4-cyano-3-(trifluoromethyl)phenyl]-5,5-dimethyl-4-oxo-2-sulfanylideneimidazolidin-1-yl]-2-fluoro-N-methylbenzamide

MDV-3100; MDV3100; MDV 3100; MDV3100; 4-(3-(4-cyano-3-(trifluoromethyl)phenyl)-5,5-dimethyl-4-oxo-2-thioxoimidazolidin-1-yl)-2-fluoro-N-methylbenzamide; Enzalutamide (MDV3100); XTANDI; trade name: Xtandi.

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.38 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

---

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.38 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

---

View More

配方 3 中的溶解度: 2.5 mg/mL (5.38 mM) in 5% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

---

配方 4 中的溶解度: 15% DMSO +85% PEG 300 : 10mg/mL

---

配方 5 中的溶解度: 10 mg/mL (21.53 mM) in 1% Tween-80 in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液； 超声助溶 (<60°C).

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。