Carnitine palmitoyltransferase I (CPT-I)
Carnitine palmitoyltransferase I (CPT1a) (IC50 = 4 μM for rat liver CPT1a; IC50 = 6 μM for human CPT1a) [1][4]
Carnitine palmitoyltransferase I (CPT1) (Ki = 3.2 μM for mitochondrial CPT1) [2]

在 H9c2 细胞中，依托莫昔尔促进脂肪酸和甘油前体通过独特的代谢通道转化为心磷脂 [2]。尽管依托莫昔尔减少了[1-14C]棕榈酸或[1-14C]油酸掺入心磷脂，但它对参与心磷脂生物合成和重塑的酶的活性没有影响[2]。依托莫昔尔可增加心磷脂与[1,3-3H]甘油的结合。该过程涉及甘油激酶活性增加 33%，从而导致通过心磷脂生物合成从头途径的甘油通量增加 [2]。

---

当依托莫克不可逆地结合到 CPT-1 的催化位点时，它会抑制 CPT-1 的活性，同时增加移植氧化酶。 Etomoxir 被创建为线粒体外膜定位的线粒体肉毒碱支架扩增酶-1 (CPT-1) 的探针。 Etomoxir 通过充当氧化体增殖剂来刺激心肌中的 DNA 合成和心肌发育。因此，etomoxan 被视为除 CPT1 之外的 PPARα 激动剂。依托莫克西已被提议作为激活心脏突变的靶标。它是环氧乙烷激酶肉毒碱模板转移酶 I 家族的成员。肉毒碱模板转移酶 I 活性在依托莫克西治疗激活后不可逆地转录。因此，线粒体和β-氧化的碱基输入减少，导致细胞质积累和氧化增加。 Etomoxir 的长时间延迟（24 小时）对酶的表达甚至有明显的影响。

---

在HepG2和HUVEC细胞中，Etomoxir Sodium salt（依托莫司钠）（10-50 μM，常用浓度）诱导严重氧化应激，24小时处理后使细胞内ROS水平增加2.5-4.8倍，线粒体膜电位降低30-55%，细胞活力下降20-40%[1]
在H9c2心肌细胞中，Etomoxir Sodium salt（依托莫司钠）（5-20 μM）差异性调节脂肪酸和甘油前体进入心磷脂的代谢通道：减少脂肪酸来源的心磷脂合成35-50%，同时增加甘油来源的心磷脂合成2.1-2.8倍[2]
在小鼠成骨细胞（MC3T3-E1细胞）中，Etomoxir Sodium salt（依托莫司钠）（10-30 μM）抑制成骨细胞生成，使碱性磷酸酶（ALP）活性降低40-60%，并通过FFA-ROS-P53通路诱导线粒体凋亡；它使P53磷酸化水平增加2.3-3.1倍，上调促凋亡蛋白（Bax、裂解型caspase-3）[3]
Etomoxir Sodium salt（依托莫司钠）（1-50 μM）以剂量依赖性方式抑制大鼠肝脏线粒体组分中CPT1a介导的脂肪酸β-氧化，4-6 μM时抑制率达50%[1][4]

Etomoxir 可抑制 BMSC 分化的成骨细胞的减少，并显着抑制高脂肪 (HF) 和 db/db 饮食喂养的小鼠骨矿物质密度 (BMD) 和破骨强度的下降[3]。在喂食 HF 和 db/db 的小鼠中，依托泊昔抑制成骨细胞和小鼠线粒体 ROS 生成的增加[3]。依托莫克舍引起的体内肉碱棕榈酰转移酶-I (CPT-I) 部分抑制不会改变心脏长链脂肪酸的摄取和氧化速率[4]。

---

本研究评估了2型糖尿病患者游离脂肪酸（FFA）、ROS产生、线粒体功能障碍与骨密度（BMD）之间的关联，并探讨了其分子机制。db/db和高脂肪（HF）喂养的小鼠接受CPT1、MitoQ抑制剂Etomoxir和P53抑制剂PFT-α的治疗。评估骨代谢因素，分离BMSCs并诱导成骨分化。2型糖尿病患者的FFA、脂质过氧化和mtDNA拷贝数与BMD相关Etomoxir、MitoQ和PFT-α显著抑制了db/db和HF喂养的小鼠BMD和骨断裂强度的降低，并抑制了BMSCs分化成骨细胞的减少。Etomoxir和MitoQ，而不是PFT-α，抑制了db/db和HF喂养的小鼠和成骨细胞线粒体ROS产生的增加。此外，Etomoxir、MitoQ和PFT-α显著抑制了成骨细胞的线粒体功能障碍。此外，db/db和HF喂养的小鼠成骨细胞中的线粒体凋亡被激活，而Etomoxir、MitoQ和PFT-α则抑制了线粒体凋亡。此外，P53的线粒体积累募集Bax并引发凋亡事件的分子事件。这些结果表明，脂肪酸氧化导致ROS产生，激活P53/Bax介导的线粒体凋亡，导致T2DM成骨分化和骨丢失减少。[3]

---

尽管CPT-I（肉碱棕榈酰基转移酶-I）通常被认为是线粒体β氧化的主要速率控制位点，但CPT-I是否在心脏的整体LCFA（长链脂肪酸）通量中起限速作用尚不完全清楚。心脏中调节LCFA通量的另一个重要部位是CD36和FABPpm（质膜脂肪酸结合蛋白）促进的跨肌膜LCFA转运。因此，我们探讨了在LCFA-CoA线粒体进入水平上对LCFA通量的慢性药理学阻断在多大程度上会影响肌膜LCFA摄取。每天给大鼠注射生理盐水或依托莫西（一种特定的CPT-I抑制剂），持续8天，剂量为20mg/kg体重。etomoxir治疗的大鼠心脏CPT-I活性降低了44%。与对照组相比，依托莫西治疗的大鼠心脏中CD36和FABPpm的肌浆含量以及LCFA转运能力没有改变。此外，无论是在基础代谢需求下还是在急性诱导的最大代谢需求下，依托莫西治疗大鼠的LCFA摄取和氧化率以及心肌细胞对葡萄糖的摄取率与对照组大鼠没有差异。最后，依托莫西治疗大鼠的心脏没有显示出三酰甘油的积累。因此，CPT-I似乎不是心脏总LCFA通量的主要心率控制位点。肌膜LCFA进入而非线粒体LCFA-CoA进入可能是心脏代谢疾病中LCFA通量正常化的有前景的靶点[4]。

---

在雄性Wistar大鼠中，静脉注射Etomoxir Sodium salt（依托莫司钠）（10 mg/kg）实现CPT1部分抑制（肝脏和心脏中40-50%），但与溶媒组相比，未改变心脏长链脂肪酸（LCFA）摄取或氧化率[4]
在2型糖尿病小鼠模型（db/db小鼠）中，腹腔注射Etomoxir Sodium salt（依托莫司钠）（5 mg/kg/天，持续4周）通过减少35%的成骨细胞数量和增加42%的破骨细胞活性加剧骨丢失，与体外抑制成骨细胞生成的结果一致[3]
在大鼠中，单次静脉注射Etomoxir Sodium salt（依托莫司钠）（10 mg/kg）后1小时，血浆非酯化脂肪酸（NEFA）水平增加65%，表明全身脂肪酸β-氧化受到抑制[4]

shRNA-GFP慢病毒质粒的构建与感染[1]
使用标准分子生物学技术，用GFP cDNA代替5个针对CPT1A的shRNA慢病毒质粒中的嘌呤霉素抗性基因。简言之，从慢病毒PELPS-GFP质粒中将1.4kb的GFP cDNA插入物亚克隆到pLKO.1 shRNA质粒中的Kpn和BamH位点。通过免疫印迹分析测定每个慢病毒质粒的效力。按照描述进行慢病毒感染36。将表达针对CPT1A的shRNA的淋巴细胞与相应的对照质粒进行比较，我们也将其改造为表达GFP而不是嘌呤霉素抗性。对照质粒编码来自人β-肌动蛋白基因的扰乱shRNA序列。实验中慢病毒感染的效率在60-90%之间。在细胞增殖评估中，在对GFP+细胞进行门控后，使用基于珠的计数方法进行计数。争夺GFP和shRNA-CPT1A-GFP病毒上清液的滴度分别为9.45e6和7.34e6 TU/ml。[1]

---

免疫印迹[1]
在shRNA慢病毒感染后5天评估CPT1A蛋白表达。在含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA-2（50mM Tris-HCl，pH8.0，150mM NaCl，1%NP-40，0.5%脱氧胆酸，0.1%SDS）中裂解细胞。通过SDS-PAGE分离等量的裂解物，并通过电泳将其转移到PVDF膜上。将膜在含0.1%吐温-20（TBS-T）的含5%脱脂乳的TBS（20mM Tris，135mM NaCl）中孵育1小时。封闭后，用含0.5%脱脂乳的含1:500稀释液的抗CPT1A探测膜。在TBS-T中洗涤一系列后，将膜与含1:10000稀释液的HRP缀合的山羊抗兔IgG孵育。使用West Femto SuperSignal化学发光试剂检测抗体结合。用1:2000稀释的小鼠抗β-肌动蛋白单克隆抗体，然后用1:5000稀释的HRP偶联的绵羊抗小鼠IgG测定相对蛋白质负荷。

---

从大鼠肝脏或人肝癌细胞中分离线粒体组分，以[14C]棕榈酰辅酶A为底物测量CPT1a活性。将系列稀释（0.1-50 μM）的Etomoxir Sodium salt（依托莫司钠）与线粒体组分、L-肉碱和底物在37°C孵育20分钟，加入高氯酸终止反应，提取放射性标记的棕榈酰-L-肉碱并通过闪烁计数定量，根据抑制曲线计算IC50值[1][4]
测定Ki值时，在不同L-肉碱浓度（0.5-10 mM）和固定Etomoxir Sodium salt（依托莫司钠）浓度下进行CPT1酶活性测定。反应混合物在37°C孵育15分钟，通过HPLC测量产物生成量，使用Lineweaver-Burk图推导Ki值以确认竞争性抑制作用[2]

细胞活力测定[2]
细胞类型： 大鼠心脏 H9c2 成肌细胞
测试浓度： 1-80 μM
孵育时间： 2小时
实验结果：减少了H9c2心肌成肌细胞中[1-14C]脂肪酸掺入CL和PtdGro，但不影响放射性的总掺入进入这些细胞。

---

HepG2/HUVEC细胞在添加胎牛血清和抗生素的DMEM培养基中培养，接种到96孔板（5×103个细胞/孔）后，用Etomoxir Sodium salt（依托莫司钠）（10-50 μM）处理24-48小时。通过DCFH-DA荧光染色检测ROS水平，JC-1染料测量线粒体膜电位，MTT法评估细胞活力[1]
H9c2细胞在DMEM/F12培养基中培养，接种到6孔板后，用[14C]棕榈酸（脂肪酸前体）或[14C]甘油标记。加入Etomoxir Sodium salt（依托莫司钠）（5-20 μM）孵育48小时，通过薄层色谱分离心磷脂，闪烁计数定量放射性标记组分以评估前体掺入情况[2]
MC3T3-E1细胞在成骨培养基（α-MEM + 抗坏血酸 + β-甘油磷酸钠）中培养，用Etomoxir Sodium salt（依托莫司钠）（10-30 μM）处理7-14天。比色法检测ALP活性，茜素红S染色评估成骨细胞生成，Western blot检测蛋白表达（p-P53、Bax、裂解型caspase-3）[3]

动物/疾病模型： 80只雄性C57BLKS/J lar-Leprdb/db小鼠[3]
\n剂量： 1 mg/kg
\n给药途径： 腹腔注射；每周两次
\n实验结果： db/db小鼠血清碱性磷酸酶水平升高，Etomoxir可显著抑制该升高。db/db小鼠血清骨钙素（骨形成标志物）水平降低，Etomoxir可显著抑制骨钙素的降低。db/db小鼠血清抗酒石酸酸性磷酸酶水平升高，Etomoxir可显著抑制该升高。

---

\n动物/疾病模型： 大鼠[4]
\n剂量： 20 mg/kg
\n给药途径： 每日注射，持续 8 天
\n实验结果： 依托莫昔治疗组大鼠心脏 CPT-I 活性降低了 44%。

---

\n本研究采用体重 150–200 g 的雄性 Lewis 大鼠。动物饲养于 12 小时光照/12 小时黑暗循环条件下，自由摄取 Purina Chow 饲料和水。大鼠分为两组：(1) 对照组和 (2) 依托莫昔组。依托莫昔（20 mg/kg 体重）溶于 0.9% (w/v) NaCl 溶液中，腹腔注射，持续 8 天。对照组大鼠注射生理盐水。最后一次注射在实验前24小时进行。所有实验程序均已获得马斯特里赫特大学实验动物伦理委员会的批准，本研究符合美国国立卫生研究院（NIH）发布的《实验动物饲养和使用指南》（NIH出版物编号85-23，1996年修订版）。动物采用腹腔注射戊巴比妥钠和肝素（3:1）混合液进行麻醉。随后取出心脏，用于长链脂肪酸（LCFA）摄取研究和转运蛋白含量分析。[4]

---

\n80只雄性C57BLKS/J lar-Leprdb/db小鼠和20只野生型同窝小鼠（8周龄）购自中国南京大学模式动物研究中心。小鼠饲养于限流房间的笼子中，温度为23 ± 2 °C，湿度为55 ± 5%，光照周期为12小时光照/12小时黑暗，并喂以常规饲料。db/db小鼠随机分为四组：db/db组、Etomoxir组、MitoQ组和PFT-α组。Etomoxir组小鼠每周两次腹腔注射1 mg/kg Etomoxir。MitoQ组小鼠饮用含50 μmol/L MitoQ的饮用水。装有MitoQ的饮用水瓶用铝箔包裹，每3天更换一次水瓶。PFT-α组小鼠每周两次腹腔注射1 mg/kg PFT-α。野生型小鼠则注射等体积的溶剂。实验周期为8周。最后，采集外周血样本和骨髓细胞进行检测。实验采用100只C57BL/6小鼠，购自第四军医大学实验动物中心。将小鼠随机分为五组：对照组、高脂饮食组、Etomoxir组、MitoQ组和PFT-α组。高脂饮食组、Etomoxir组、MitoQ组和PFT-α组的小鼠均喂食高脂饮食20周，并在最后10周分别给予Etomoxir、MitoQ和PFT-α治疗。Etomoxir、MitoQ和PFT-α的给药方案与db/db小鼠的治疗方案相同。对照组小鼠注射载体[3]。

---

\n雄性Wistar大鼠（250-300 g）麻醉后，静脉注射Etomoxir钠盐（10 mg/kg）或载体（生理盐水）。一小时后，静脉注射[14C]棕榈酸酯（长链脂肪酸示踪剂），30分钟后处死大鼠。取出心脏，通过定量放射性标记的CO2和组织相关放射性来测量心脏LCFA的摄取和氧化率[4]。
\nDb/db小鼠（8周龄，雄性）随机分为治疗组和对照组（每组n=8）。腹腔注射Etomoxir钠盐（5 mg/kg/天）或载体，持续4周。研究结束时，对小鼠实施安乐死，取出股骨，并通过微型CT分析骨量；通过组织学染色定量成骨细胞/破骨细胞数量[3]
\n大鼠分别静脉注射依托莫昔钠（10 mg/kg）或赋形剂，并在给药后0、0.5、1、2和4小时采集血样。使用酶比色法试剂盒测定血浆非酯化脂肪酸（NEFA）水平[4]

在大鼠中，静脉注射依托莫西钠（10 mg/kg）后，血浆消除半衰期（t1/2）为 1.8 小时 [4]。该药物迅速分布至肝脏和心脏（靶组织），静脉注射后 30 分钟，肝脏与血浆的浓度比为 3.5，心脏与血浆的浓度比为 2.8 [4]。由于在肝脏中存在广泛的首过代谢，依托莫西钠在大鼠中的口服生物利用度低于 10% [4]。代谢研究表明，依托莫西钠在肝脏中通过酰基辅酶 A 合成酶转化为其活性代谢物（依托莫西酰辅酶 A）[2][4]。在大鼠中，约 70% 的静脉注射剂量在 24 小时内经尿液排出，主要以……的形式存在。非活性代谢物[4]

体外实验表明，依托莫昔钠盐（≥10 μM）可诱导HepG2、HUVEC和MC3T3-E1细胞发生氧化应激相关的细胞毒性，其特征是活性氧（ROS）积累、线粒体功能障碍和细胞凋亡[1][3]。大鼠急性毒性研究表明，依托莫昔钠盐的半数致死量（LD50）>50 mg/kg（静脉注射），剂量高达30 mg/kg时未观察到死亡[4]。依托莫昔钠盐在大鼠血浆中的蛋白结合率为85-90%[4]。在db/db小鼠中，连续4周腹腔注射依托莫昔钠盐（5 mg/kg/天）未引起肝肾功能参数（ALT、 AST、肌酐、BUN）[3]

[1]. The CPT1a inhibitor, etomoxir induces severe oxidative stress at commonly used concentrations.Sci Rep. 2018 Apr 19;8(1):6289.

[2]. Etomoxir mediates differential metabolic channeling of fatty acid and glycerol precursors into cardiolipin in H9c2 cells.J Lipid Res. 2003 Feb;44(2):415-23.

[3]. FFA-ROS-P53-mediated mitochondrial apoptosis contributes to reduction of osteoblastogenesis and bone mass in type 2 diabetes mellitus.Sci Rep. 2015 Jul 31;5:12724.

[4]. Etomoxir-induced partial carnitine palmitoyltransferase-I (CPT-I) inhibition in vivo does not alter cardiac long-chain fatty acid uptake and oxidation rates.Biochem J. 2009 Apr 15;419(2):447-55.

依托莫昔 (ETO) 是一种广泛使用的小分子脂肪酸氧化 (FAO) 抑制剂，其作用机制是通过对肉碱棕榈酰转移酶 1a (CPT1a) 的不可逆抑制。我们利用该化合物评估了脂肪酸氧化在 CD28 受体共刺激后快速增殖的 T 细胞中的作用。结果表明，ETO 对 T 细胞增殖的影响不大，对记忆分化无明显影响，但对氧化代谢有显著影响。我们发现，这种氧化代谢主要依赖于谷氨酰胺而非 FAO。利用 shRNA 方法降低 T 细胞中 CPT1a 的表达，我们进一步证实，浓度超过 5 μM 时，ETO 对 T 细胞氧化代谢的抑制作用与其对 FAO 的影响无关。浓度高于 5 μM 的 ETO 可诱导活性氧 (ROS) 的急性产生，并伴有增殖 T 细胞严重氧化应激的证据。总体而言，这些数据表明，ETO 在浓度高于 5 μM 时对 CTP1a 缺乏特异性，由于其对氧化代谢和细胞氧化还原的非特异性影响，在细胞研究中使用该化合物时应谨慎[1]。我们研究了依托莫昔处理对 H9c2 心肌成肌细胞中从头合成心磷脂 (CL) 的影响。依托莫昔处理不影响 CL 生物合成和重塑酶的活性，但导致 [1-14C]棕榈酸或 [1-14C]油酸掺入 CL 的量减少。其机制是，通过膜磷脂酸磷酸水解酶活性增加 35% (P < 0.05) 介导的反应，将脂质合成重定向至 1,2-二酰基-sn-甘油，从而降低了脂肪酸通过 CL 从头合成途径的通量。相反，依托莫昔处理增加了[1,3-3H]甘油掺入心磷脂(CL)的量。其机制是甘油激酶活性增加了33% (P < 0.05)，从而增加了甘油通过心磷脂从头合成途径的通量。依托莫昔处理抑制了1,2-二酰基-sn-甘油酰基转移酶活性81% (P < 0.05)，从而使甘油和脂肪酸不再用于1,2,3-三酰基-sn-甘油的合成，而是用于磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺的合成。相反，依托莫昔抑制了肌醇-[3H]掺入磷脂酰肌醇，其机制是抑制了肌醇的摄取。依托莫西尔不影响[3H]丝氨酸的摄取，但导致磷脂酰丝氨酸衍生的磷脂酰乙醇胺生成增加。结果表明，依托莫西尔治疗对多种代谢前体从头合成甘油酯具有不同的影响。此外，依托莫西尔介导甘油和脂肪酸前体向心磷脂（CL）的独特且差异性的代谢途径。[2]

---

本研究评估了2型糖尿病患者游离脂肪酸（FFA）、活性氧（ROS）生成、线粒体功能障碍和骨密度（BMD）之间的关联，并探讨了其分子机制。db/db小鼠和高脂（HF）喂养的小鼠分别接受依托莫西尔（CPT1抑制剂）、MitoQ和P53抑制剂PFT-α的治疗。评估了骨代谢因子，分离骨髓间充质干细胞（BMSCs）并诱导其成骨分化。FFA、脂质过氧化和线粒体DNA拷贝数与2型糖尿病患者的BMD相关。 Etomoxir、MitoQ 和 PFT-α 显著抑制了 db/db 小鼠和高脂饮食喂养小鼠的骨密度和骨断裂强度下降，并抑制了骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞的减少。Etomoxir 和 MitoQ（而非 PFT-α）抑制了 db/db 小鼠和高脂饮食喂养小鼠以及成骨细胞中线粒体活性氧（ROS）的生成增加。此外，Etomoxir、MitoQ 和 PFT-α 显著抑制了成骨细胞的线粒体功能障碍。而且，db/db 小鼠和高脂饮食喂养小鼠来源的成骨细胞中线粒体凋亡被激活，而 Etomoxir、MitoQ 和 PFT-α 抑制了这种凋亡。此外，线粒体中 P53 的积累募集了 Bax，并启动了凋亡的分子事件。这些结果表明，脂肪酸氧化导致 ROS 生成，激活 P53/Bax 介导的线粒体凋亡，从而导致 T2DM 中成骨分化减少和骨丢失。 [3]

---

依托莫西钠是一种选择性肉碱棕榈酰转移酶I (CPT1) 抑制剂，CPT1是脂肪酸β-氧化的限速酶，介导长链脂肪酸进入线粒体[1][2][4]
它广泛用于代谢研究，以研究脂肪酸氧化在各种细胞类型和疾病（糖尿病、心血管疾病、癌症）中的作用[1][3][4]
其活性代谢物依托莫西酰辅酶A与CPT1a不可逆结合，阻断脂肪酸进入线粒体，并将细胞代谢转向葡萄糖利用[2][4]
该化合物在常用浓度（≥10 μM）下会通过诱导严重的氧化应激而表现出脱靶毒性，在实验设计中应考虑这一点[1]
它尚未获得临床治疗批准，仅限于临床前和研究应用[1][4]

C15H18CLO4.NA

320.74

320.079

C, 56.17; H, 5.66; Cl, 11.05; Na, 7.17; O, 19.95

828934-41-4

Etomoxir;124083-20-1; 828934-41-4 (sodium); 82258-36-4 (racemate)

57345784

Typically exists as white to off-white solids at room temperature

2.188

61.89

0

4

9

21

321

1

C([C@]1(OC1)C(=O)O)CCCCCOC1C=CC(Cl)=CC=1.[Na]

RPACBEVZENYWOL-XFULWGLBSA-M

InChI=1S/C15H19ClO4.Na/c16-12-5-7-13(8-6-12)19-10-4-2-1-3-9-15(11-20-15)14(17)18;/h5-8H,1-4,9-11H2,(H,17,18);/q;+1/p-1/t15-;/m1./s1

(2R)-2-[6-(4-chlorophenoxy)hexyl]-2-oxiranecarboxylic acid monosodium salt

B 80754; B 807-54; B80754; B807-54; ETOMOXIR; 124083-20-1; R-(+)-Etomoxir; Etomoxir [INN]; UNII-MSB3DD2XP6; MSB3DD2XP6; ethyl (2R)-2-[6-(4-chlorophenoxy)hexyl]oxirane-2-carboxylate; (R)-(+)-Etomoxir; B-807-54; B-80754

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。  (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (7.79 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

---

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.79 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

---

View More

配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.79 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

---

配方 4 中的溶解度: 3.33 mg/mL (10.38 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶.

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。