| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
Hsp90 (mitochondrial-localized)
TRAP-1 (mitochondrial Hsp90-related chaperone) [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
17-烯丙胺格尔德霉素 (17-AAG) 的 Hsp90 ATP 酶抑制模块和三醛结合的线粒体部分结合在小分子加米替尼 TPP (G-TPP) 中。 TPP 有效破坏线粒体，并且对细胞器外 Hsp90 的诱导没有影响。在暴露后 16 小时内，来自患者的和培养的细胞母细胞瘤细胞系被 15-20 μM 剂量的伽马替尼 TPP 不加区别地破坏。随着细胞器内膜电位的丧失、细胞质中细胞色素 c 的释放、启动子 caspase-9 和效应子 caspase-3 和 caspase-7 以及膜联蛋白 V 的激活，这种细胞死亡反应是线粒体的典型反应[1]。
在15–20 μM浓度下，Gamitrinib TPP hexafluorophosphate（G-TPP）可诱导胶质母细胞瘤细胞系（U87、LN229、U251）及患者来源胶质母细胞瘤细胞（GS620、GS48、AS515）发生线粒体凋亡，表现为线粒体内膜电位丧失、细胞色素c释放到胞质、caspase-9、-3、-7激活及膜联蛋白V（annexin V）阳性；对正常胎儿人星形胶质细胞（FHAS）无杀伤作用 [1] 在5–10 μM亚最佳浓度下，G-TPP可诱导胶质母细胞瘤细胞发生自噬，出现胞质空泡化（含线粒体，经COX-IV免疫金标记证实）、LC3蛋白脂化（LC3-I转化为LC3-II）及GFP-LC3点状荧光分布；使用自噬抑制剂（巴弗洛霉素A、3-甲基腺嘌呤）或基因沉默（atg5 siRNA）可增强G-TPP诱导的肿瘤细胞死亡 [1] G-TPP破坏线粒体蛋白折叠，导致不溶性（未折叠）线粒体蛋白积累及线粒体超氧化物歧化酶（SOD2）下调；在亚细胞毒性浓度（5–10 μM）下可上调未折叠蛋白反应（UPR）相关转录因子CHOP和C/EBPβ，而线粒体毒性浓度（10–20 μM）下无此效应 [1] G-TPP可完全抑制组成型及肿瘤坏死因子α（TNF-α）诱导的NF-κB依赖性基因表达，下调FLIP（长/短亚型）、RelB、Bcl-3等靶基因；对依托泊苷诱导的p53启动子活性无影响，无泛基因抑制作用 [1] 5 μM G-TPP与TRAIL联合使用时，可协同杀伤胶质母细胞瘤、乳腺腺癌（MCF-7）、前列腺腺癌（PC3）等肿瘤细胞，加速线粒体膜电位丧失、细胞色素c释放、膜联蛋白V阳性率升高，以及caspase-8、-9、-3、-7的激活 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
研究了 TRAIL 加加米替尼 TPP (G-TPP) 联合治疗的星状抗星形母细胞瘤作用的潜力。免疫功能低下小鼠的右脑纹状体含有含有荧光素酶的 U87 星形母细胞瘤细胞。这些细胞利用生物发光快速形成肿瘤。用载体、TRAIL 三维梯度下降或全身给药治疗这些动物并不理想。加米替尼 TPP 浓度对体内肿瘤发展没有影响。同样，原位星形细胞肿瘤的生长不受伽米替尼 TPP 全身单一疗法的影响，其剂量可减少小鼠皮下异种移植物中的肿瘤生长（20 mg/kg，每日腹膜内注射）。另一方面，两轮颅内肿瘤生长没有产生结果。 TRAIL 与全身性加米替尼 TPP 联合使用，在治疗过程中不会显着降低动物体重，从而抑制已形成的星形母细胞瘤的生长 [1]。
在裸鼠颅内U87-Luc胶质母细胞瘤模型中，Gamitrinib TPP hexafluorophosphate 全身给药（10 mg/kg，腹腔注射，第6、7、9、10天）与TRAIL颅内注射（2 ng，第7、10天）联合使用，可抑制肿瘤生长（经生物发光成像证实）、延长小鼠生存期（联合用药组35天 vs 单药/溶媒组24–27天），且无明显体重下降，提示毒性轻微 [1] 联合用药组肿瘤组织中CHOP表达升高（提示线粒体UPR激活），细胞增殖（Ki67阳性细胞）减少，凋亡（TUNEL阳性细胞、活化caspase-3阳性细胞）增加；正常脑区（海马、皮质）无CHOP阳性反应 [1] 单独使用G-TPP（20 mg/kg，腹腔注射，每日）对原位胶质母细胞瘤生长无抑制作用 [1] 在人WHO IV级胶质母细胞瘤标本中，肿瘤细胞（尤其坏死区周围）核内CHOP高表达，而正常脑组织中无表达 [1] |
| 细胞实验 |
细胞活力检测：将各类肿瘤细胞或正常FHAS接种于96孔板（2×10³细胞/孔），加入G-TPP（0–20 μM）或与TRAIL（根据细胞类型调整为100–200 ng/ml）联合处理，最长培养24小时后，采用MTT比色法（405 nm吸光度）定量细胞代谢活性 [1]
凋亡检测：将1×10⁶肿瘤细胞用G-TPP单独或与TRAIL联合处理后，用膜联蛋白V和碘化丙啶（PI）染色，流式细胞术分析凋亡率；制备线粒体/胞质提取物，通过Western blot检测细胞色素c释放、caspase剪切及Bcl-2家族蛋白表达 [1] 自噬检测：将胶质母细胞瘤细胞转染LC3-GFP质粒，经G-TPP处理后，荧光显微镜观察GFP点状荧光（细胞内>10个点判定为自噬阳性）；Western blot检测LC3脂化；通过透射电镜（EM）及免疫电镜（COX-IV抗体）观察自噬空泡及线粒体定位 [1] 线粒体膜电位检测：用TMRM（0.1 μM）或JC-1染色U251细胞，经G-TPP单独或与TRAIL联合处理后，通过共聚焦显微镜或流式细胞术监测荧光比值（红/绿）变化，反映膜电位水平 [1] 线粒体蛋白折叠检测：用5 μM G-TPP处理LN229细胞16小时，用不同浓度NP40（0%–0.5%）提取线粒体蛋白，SDS-PAGE分离不溶性蛋白后银染显色 [1] 启动子活性检测：将NF-κB、p53或FLIP荧光素酶报告基因载体转染肿瘤细胞，经G-TPP（0–10 μM）或刺激物（TNF-α、CCCP、星形孢菌素）处理6小时后，通过发光仪检测β-半乳糖苷酶校正后的荧光素酶活性 [1] 基因沉默试验：将siRNA（CHOP、TRAP-1、caspase-8、atg5）或稳定shRNA（CypD、TAK1）转染胶质母细胞瘤细胞，Western blot验证蛋白敲低效率后，用G-TPP单独或与TRAIL联合处理，通过MTT法检测细胞活力、PI染色/流式细胞术分析凋亡率或检测NF-κB活性 [1] |
| 动物实验 |
颅内胶质母细胞瘤模型建立：将 U87-Luc 细胞 (1×10⁵) 悬浮于无菌 PBS 中，立体定向植入免疫缺陷裸鼠右侧大脑纹状体 [1]
联合治疗方案：将小鼠随机分为 4 组（每组 4 只小鼠），分别给予无菌载体（Cremophor）、单独给予 TRAIL、单独给予 G-TPP 或 TRAIL+G-TPP；TRAIL 立体定向注射至右侧大脑纹状体（植入后第 7 天和第 10 天 2 ng），G-TPP 全身给药（植入后第 6、7、9 和 10 天每天腹腔注射 10 mg/kg）；在第10天暂停治疗，每周通过生物发光成像（腹腔注射110 mg/kg D-荧光素）监测肿瘤生长，记录动物体重和存活率，并在研究结束时采集脑组织进行组织学分析[1] G-TPP单药治疗方案：用全身性G-TPP（每日腹腔注射20 mg/kg）治疗已建立颅内U87-Luc胶质母细胞瘤的裸鼠，通过生物发光成像监测肿瘤生长[1] 组织学分析：用H&E、Ki-67（增殖）、cleaved caspase-3、TUNEL（凋亡）或CHOP（UPR激活）抗体对脑组织切片进行染色；通过显微镜定量阳性细胞[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外实验表明，浓度高达 20 μM 的 Gamitrinib TPP 六氟磷酸盐不会杀死正常胎儿人星形胶质细胞 (FHAS) 或 SV40 转化的 FHAS，显示出肿瘤选择性细胞毒性 [1]。体内实验表明，G-TPP 与 TRAIL 联合治疗不会导致动物体重显著下降，表明其全身或器官毒性极低 [1]。裸鼠单药 G-TPP（20 mg/kg，每日腹腔注射）治疗未观察到明显的毒性 [1]。
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Gamitrinib TPP 六氟磷酸盐 (G-TPP) 是一种线粒体靶向的 Hsp90 抑制剂，由 Hsp90 ATPase 抑制模块 17-AAG 和线粒体靶向部分三苯基膦组成；它选择性地积累在线粒体中，不影响胞质Hsp90的稳态[1]。
其作用机制涉及双重效应：高浓度（15–20 μM）触发不依赖于Bcl-2的线粒体崩解和细胞凋亡，而亚细胞毒性浓度（5–10 μM）诱导线粒体UPR和自噬，抑制NF-κB依赖的生存信号通路，并使肿瘤细胞对TRAIL诱导的细胞凋亡更加敏感[1]。 G-TPP靶向线粒体Hsp90/TRAP-1，后者选择性地表达于肿瘤细胞线粒体而非正常组织中，这有助于其肿瘤选择性[1]。 人类胶质母细胞瘤标本显示，在坏死区域附近的肿瘤细胞中，核CHOP（线粒体UPR的标志物）表达较高，表明该通路在临床肿瘤中被激活，并支持其潜在的治疗应用。 [1] |
| 分子式 |
C52H65F6N3O8P2
|
|---|---|
| 分子量 |
1036.02575755119
|
| 精确质量 |
1035.415
|
| CAS号 |
1131626-47-5
|
| 相关CAS号 |
Gamitrinib TPP;1131626-46-4
|
| PubChem CID |
25232581
|
| 外观&性状 |
Pale purple to purple solid powder
|
| tPSA |
166
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
16
|
| 可旋转键数目(RBC) |
15
|
| 重原子数目 |
71
|
| 分子复杂度/Complexity |
1750
|
| 定义原子立体中心数目 |
6
|
| SMILES |
[P+](C1C=CC=CC=1)(C1C=CC=CC=1)(C1C=CC=CC=1)CCCCCCNC1C(C=C2C(C=1C[C@@H](C)C[C@@H]([C@@H]([C@@H](C)C=C(C)[C@@H]([C@H](C=CC=C(C)C(N2)=O)OC)OC(N)=O)O)OC)=O)=O.[P-](F)(F)(F)(F)(F)F |c:44,49,51|
|
| InChi Key |
NFIBTCZSRLMDOD-WLXHSWTPSA-O
|
| InChi Code |
InChI=1S/C52H64N3O8P.F6P/c1-35-31-42-47(54-29-18-7-8-19-30-64(39-22-12-9-13-23-39,40-24-14-10-15-25-40)41-26-16-11-17-27-41)44(56)34-43(49(42)58)55-51(59)36(2)21-20-28-45(61-5)50(63-52(53)60)38(4)33-37(3)48(57)46(32-35)62-6;1-7(2,3,4,5)6/h9-17,20-28,33-35,37,45-46,48,50,57H,7-8,18-19,29-32H2,1-6H3,(H3-,53,54,55,56,58,59,60);/q;-1/p+1/b28-20-,36-21+,38-33+;/t35-,37+,45+,46+,48-,50+;/m1./s1
|
| 化学名 |
6-[[(4E,6Z,8S,9S,10E,12S,13R,14S,16R)-9-carbamoyloxy-13-hydroxy-8,14-dimethoxy-4,10,12,16-tetramethyl-3,20,22-trioxo-2-azabicyclo[16.3.1]docosa-1(21),4,6,10,18-pentaen-19-yl]amino]hexyl-triphenylphosphanium;hexafluorophosphate
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~50 mg/mL (~48.26 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.41 mM) (饱和度未知) in 5% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: 2.5 mg/mL (2.41 mM) in 5% DMSO + 95% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.9652 mL | 4.8261 mL | 9.6522 mL | |
| 5 mM | 0.1930 mL | 0.9652 mL | 1.9304 mL | |
| 10 mM | 0.0965 mL | 0.4826 mL | 0.9652 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
