| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Chk1 (IC50 = 1.2 nM)
Checkpoint Kinase 1 (CHK1) [1] Checkpoint Kinase 1 (CHK1) [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：GDC-0575（也称为 ARRY-575、RG7741）是一种新型、有效、选择性的 CHK1 抑制剂，可特异性结合并抑制 CHK1，IC50 为 1.2 nM。这使得肿瘤细胞能够绕过 S 期和 G2/M 期的 CHK1 依赖性细胞周期停滞，从而允许细胞在进入有丝分裂之前进行 DNA 修复。 CHK1 是一种 ATP 依赖性丝氨酸-苏氨酸激酶，可磷酸化 cdc25 磷酸酶以响应 DNA 损伤。因此，CHK1 抑制可能会使肿瘤细胞对某些化疗药物的 DNA 损伤作用敏感。激酶测定：GDC-0575（也称为 ARRY-575、RG7741）是一种新型、有效、选择性的 CHK1 抑制剂，可特异性结合并抑制 CHK1，IC50 为 1.2 nM。细胞测定：在一组黑色素瘤细胞系中，GDC-0575 在促进 DNA 损伤、复制应激和细胞死亡方面比 V158411、LY2603618 和 MK-8776 更有效。 GDC-0575 消除 DNA 损伤诱导的 S 和 G2-M 检查点，加剧 DNA 双链断裂并诱导 STS 细胞凋亡。 GDC-0575与吉西他滨一起具有协同或相加作用。 CHK1 抑制剂 GDC-0575 与 AraC 组合可通过诱导细胞凋亡增强对原代急性髓系白血病细胞的体外杀伤。
与阿糖胞苷（AraC）联合使用时，GDC-0575 增强了AraC对多种急性髓系白血病（AML）细胞系的细胞毒性，与单独使用AraC相比，细胞代谢活性降低且凋亡率升高；当细胞系接种在照射后的MS5基质层上时，这种增强作用仍然存在[1] - 在原代AML样本中，GDC-0575 与AraC联合使用提高了AraC的杀伤效果，且不增加对L-LTC-ICs的耗竭作用；细胞周期分析显示其对G0期细胞比例有影响[1] - 部分黑色素瘤细胞系对 GDC-0575 诱导的细胞死亡高度敏感，该药物可在细胞不进入有丝分裂的情况下触发细胞死亡；GDC-0575 处理仅在高敏感黑色素瘤细胞中引起强烈的RPA2过度磷酸化和DNA损伤增加，这与S期细胞周期检查点缺陷相关[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
GDC-0575 是一种高选择性口服小分子 CHK1 抑制剂，可导致异种移植模型中的肿瘤缩小和生长延迟，单药剂量为 25 mg/kg 时即可发挥作用，但药物剂量较高时疗效会提高。 GDC-0575有效阻断D20和C002异种移植物中的肿瘤生长，并且在施用最终剂量后效果维持至少10天
在U937-Luc和HL60-Luc移植瘤小鼠模型中，AraC与 GDC-0575 联合治疗通过体内生物发光成像（BLI）检测显示可抑制肿瘤增殖，并降低移植小鼠骨髓中白血病细胞的比例[1] - 在移植了原代AML患者样本的小鼠中，无论在中植入（ME）还是高植入（HE）阶段开始治疗，AraC与 GDC-0575 联合使用均降低了骨髓中人源细胞的百分比；该联合治疗不影响正常长期造血干细胞/祖细胞，不会产生新的突变，且能消除AraC诱导的突变克隆[1] - 在AraC+GDC-0575 联合治疗基础上添加粒细胞集落刺激因子（G-CSF），在体内进一步增强了对AML的细胞毒性，减少了残留白血病细胞，提高了增殖期Ki67+CD45+细胞的比例，并降低了L-LTC-IC频率[1] - 在具有内源性复制应激升高的黑色素瘤移植瘤模型中，GDC-0575 在体内能有效抑制肿瘤生长[2] |
| 酶活实验 |
GDC-0575，也称为 ARRY-575 或 RG7741，是一种新型、强效、选择性的 CHK1 抑制剂，可与其特异性结合并抑制它，IC50 为 1.2 nM。
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| 细胞实验 |
在共培养研究中，在共培养开始前两天将饲养细胞接种到 I 型胶原蛋白包被的 96 孔或 6 孔板上，并使其达到汇合。更换培养基，并在共培养开始前一天接受 6.8 Gy 的辐射。首先，在共培养的第 0 天，使用适当的 AmL 培养基以 2 × 105 细胞/mL 的密度对 AmL 细胞进行铺板。在具有 5% CO2 和指定氧气浓度的培养箱中，细胞在 37°C 下培养。在短期培养 (STC) 期间，细胞在缺氧 (5% O2) 下维持一周，同时用 500 nM AraC 和/或 100 nM GDC-0575 处理[1]。
AML细胞系处理实验：四种AML细胞系分别用AraC单独处理或AraC+GDC-0575 联合处理1天，以未处理细胞为对照，检测细胞代谢活性和凋亡率，评估细胞毒性作用[1] - 基质层培养细胞实验：将AML细胞系接种在照射后的MS5基质层上，进行上述相同处理后，测定凋亡细胞比例[1] - 原代AML样本培养及分析实验：对原代AML样本在不同处理条件下进行短期培养（STC）和长期培养（LTC），通过计数珠计数并归一化到未处理组评估存活率；通过在甲基纤维素中培养细胞2周进行L-LTC-IC/LDA实验，检测L-LTC-IC频率[1] - 细胞周期分析实验：原代AML样本处理1周后，通过Ki67/DAPI表达检测细胞周期分布，重点关注G0期细胞[1] - 黑色素瘤细胞敏感性实验：用 GDC-0575 处理黑色素瘤细胞系，评估细胞死亡情况；在高敏感细胞系中，检测 GDC-0575 处理后RPA2磷酸化水平、DNA损伤情况及细胞周期进程，分析细胞对药物的应答[2] |
| 动物实验 |
将 1 × 10⁵-10⁶ 个 AmL 细胞和 1-3 × 10⁵ 个 hCB CD34⁺/hBM CD34⁺ 细胞静脉注射到 NSG 小鼠体内。在 9-11 周时通过 FACS 分析胫骨骨髓穿刺证实 AmL 细胞植入后，对小鼠进行为期 7 天的治疗方案。该方案包括每日皮下注射 10 mg/kg AraC，隔日灌胃 7.5 mg/kg GDC-0575 混悬液，和/或每日腹腔注射 300 μg/kg G-CSF，持续 5 天。末次给药一周后，小鼠因颈椎脱位死亡。解剖后，用 PBS 冲洗胫骨、骨盆和股骨。氯化铵可裂解红细胞。使用人特异性PE标记的抗CD33抗体、PE-FITC标记的抗CD19抗体、PE-Cy7标记的抗CD45抗体和PERCP标记的抗鼠CD45抗体对细胞进行染色。DAPI染色用于去除死细胞和碎片。使用BD LSR II流式细胞仪进行分析。流式细胞术分析采用FlowJo软件。收集了超过10万个DAPI阴性样本。如果仅存在一群 mCD45-hCD45+CD33+CD19- 细胞，且附近没有 mCD45-hCD45+CD33-CD19+ 细胞，则认为 AmL 已嵌入[1]。
U937-Luc 和 HL60-Luc 异种移植模型：将 Luc 标记的肿瘤细胞注射到小鼠体内，并根据特定方案用 AraC 和 GDC-0575 进行治疗。在细胞注射后 15 天（U937-Luc）和 30 天（HL60-Luc）进行体内生物发光成像 (BLI)，以量化肿瘤增殖动力学；治疗后3天（U937-Luc为D15）和30天（HL60-Luc为D30）检测骨髓中肿瘤细胞的比例[1] - 原发性AML患者样本异种移植模型：将原发性AML患者样本移植到小鼠体内，并分别在移植中等程度（ME）或高度移植（HE）时开始，用AraC、GDC-0575单独或联合治疗。治疗后1周处死小鼠，检测骨髓中人源细胞的百分比；监测AML6注射小鼠的体重变化，当体重下降20%时处死小鼠；收集注射AML6的小鼠在治疗后1周的hCD45/CD33+细胞用于二次移植[1] - 正常造血干细胞移植模型：将人脐带血CD34+细胞移植到小鼠体内，并用AraC和GDC-0575联合治疗。在治疗后1周和8周检测骨髓中人源细胞、HSPC（Lin−CD34+CD38−）和HPC（Lin−CD34+CD38+）的百分比；收集小鼠在治疗后1周的hCD45+细胞用于二次移植[1] - 三联疗法模型：将原发性AML样本移植到小鼠体内，在移植成功后开始用AraC+GDC-0575+G-CSF治疗，并在治疗后1周检测骨髓中人源细胞的百分比；对于AML7移植小鼠，采用苏木精-伊红（H&E）染色和免疫荧光法检测残留白血病细胞，并分析Ki67+CD45+细胞的比例；收集AML7注射小鼠的hCD45+细胞用于L-LTC-IC检测，收集AML8注射小鼠的hCD45+细胞用于二次移植[1] - 人骨髓移植模型：将人骨髓细胞移植到小鼠体内，并用G-CSF治疗，分别在治疗后1周和8周检测骨髓中人源细胞的百分比[1] - 黑色素瘤异种移植模型：将黑色素瘤细胞移植到小鼠体内建立异种移植瘤，然后用GDC-0575治疗，观察其对肿瘤生长的抑制作用[2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
AraC 与 GDC-0575 的联合用药不影响正常的长期造血干细胞/祖细胞，也不诱发新的突变[1]
- 在治疗期间监测注射 AML6 的小鼠的体重变化，当小鼠体重下降 20% 时，对小鼠实施安乐死[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
GDC-0575 与 G-CSF 联合使用可克服人类急性髓系白血病中的阿糖胞苷耐药性，其机制可能与抑制 DNA 修复有关；持续存在的残留白血病细胞处于静止状态，而 G-CSF 可促使这些细胞进入细胞周期，从而增强三联疗法（AraC+GDC-0575+G-CSF）的疗效，为临床上的 AML 治疗提供了一种更有效的选择 [1]
- 内源性复制应激是黑色素瘤对 GDC-0575 敏感的标志；GDC-0575 通过增加复制应激和 DNA 损伤诱导敏感黑色素瘤细胞死亡；未经治疗的肿瘤中 pRPA2 Ser4/8 灶的数量和强度可作为体内复制应激的有效标志物，用于预测黑色素瘤对 GDC-0575 的敏感性 [2] |
| 分子式 |
C17H23BRCL2N4O
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|---|---|
| 分子量 |
450.200721025467
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| 精确质量 |
449.038
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| CAS号 |
1657014-42-0
|
| 相关CAS号 |
GDC-0575;1196541-47-5;GDC0575 hydrochloride;1196504-54-7
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| PubChem CID |
131749450
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid
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| LogP |
0
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| tPSA |
87
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| 氢键供体(HBD)数目 |
5
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
25
|
| 分子复杂度/Complexity |
460
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
C1C[C@H](CN(C1)C2=C3C(=CNC3=NC=C2Br)NC(=O)C4CC4)N.Cl.Cl
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| InChi Key |
OYMHZTORKRPOBI-YQFADDPSSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C16H20BrN5O.2ClH/c17-11-6-19-15-13(14(11)22-5-1-2-10(18)8-22)12(7-20-15)21-16(23)9-3-4-9;;/h6-7,9-10H,1-5,8,18H2,(H,19,20)(H,21,23);2*1H/t10-;;/m1../s1
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| 化学名 |
N-[4-[(3R)-3-aminopiperidin-1-yl]-5-bromo-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-3-yl]cyclopropanecarboxamide;dihydrochloride
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| 别名 |
ARRY-575 2HCl; ARRY-575; ARRY575; RG7741; RG-7741 2HCl; RG 7741; GDC-0575; GDC 0575 2HCl; GDC0575; AK 687476 2HCl; AK-687476; AK687476 dihydrochloric acid
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.17 mg/mL (4.81 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 21.7 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.17 mg/mL (4.81 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 21.7 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.17 mg/mL (4.81 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 10 mg/mL (22.16 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2212 mL | 11.1062 mL | 22.2124 mL | |
| 5 mM | 0.4442 mL | 2.2212 mL | 4.4425 mL | |
| 10 mM | 0.2221 mL | 1.1106 mL | 2.2212 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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CHK1-IN-14
MA203
XL-844
Prexasertib-d4
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COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
