Endogenous Metabolite

在用二十碳五烯酸（EPA；100 μM；24 小时）处理的细胞中，C/EBPβ 的磷酸化形式明显可见，而在对照和 OA 或 LA 处理的 U937 细胞中几乎不明显 [1]。 H-Ras 和 N-Ras mRNA 水平在 1、3 和 24 小时后显着增加，并在 1 至 3 小时后持续增加。二十碳五烯酸对 K-Ras mRNA 水平没有影响 [1]。

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先前的研究表明，饮食中的α-亚麻酸（ALA）会增加体内ω-3长链多不饱和脂肪酸（ω-3 LC-PUFAs）的水平，但其转化过程和相关基因仍知之甚少。在本研究中，我们设计了含有不同浓度ALA和二十碳五烯酸（EPA）的饮食来喂养小鼠。膳食ALA以线性方式增加了体内的ALA水平，也增加了ω-3 LC-PUFA浓度，但较高的ALA摄入量（超过5%）对体内ω-3 LC-FUFA水平没有额外影响。中等水平的膳食ALA增加了Fads1、Fads2和Elovl5等基因的表达，但较高水平的膳食丙氨酸（超过5%）抑制了它们在肝脏中的表达。进一步的研究表明，转化的EPA还可以以浓度依赖的方式抑制这些基因的表达，这表明Fads1、Fads2和Elovl5是参与ALA转化为ω-3 LC-PUFAs的关键基因。ALA内源性ω-3 LC-PUFA的生物合成受到底物水平、基因表达和产物抑制的影响[1]。

确定了241项研究，其中28项符合上述纳入标准，因此被纳入随后的荟萃分析。使用随机效应模型，与安慰剂相比，补充omega3-LC-PUFA后，总体标准化平均抑郁评分降低（标准化平均差异=-0.291，95%CI=-0.463至-0.120，z=-3.327，p=0.001）。然而，存在显著的异质性和发表偏倚的证据。荟萃回归研究显示，基线抑郁水平较高和补充DHAEPA比例较低对治疗效果有显著影响。亚组分析显示，对以下方面有显著影响：（1）诊断类别（双相情感障碍和重度抑郁症，与轻度至中度抑郁症、慢性疲劳和非临床人群相比，补充omega3-LC-PUFA后有显著改善）；（2） 治疗性干预而非预防性干预；（3） 与单一疗法相反的辅助治疗；（4）补充类型。在使用纯DHA的3项研究中（标准化平均差0.001，95%置信区间-0.330至0.332，z=0.004，p=0.997），或在使用含有超过50%DHA的补充剂的4项研究中。相比之下，在13项使用含有超过50%EPA的补充剂的研究中（标准化平均差异=-0.446，95%CI=-0.753至-0.138，z=-2.843，p=0.005），以及在8项使用纯乙基EPA的研究中，抑郁症症状显著减轻（标准化平均差异=-0.396，95%CI=-0.650至-0.141，z=-3.051，p=0.002）。然而，进一步的元回归研究表明，疗效与研究方法质量、研究样本量和持续时间之间存在显著的负相关，从而限制了这些发现的置信度。结论：目前的荟萃分析提供了证据，表明EPA在治疗抑郁症方面可能比DHA更有效。然而，由于所纳入研究的局限性，需要更大、设计良好、持续时间足够长的随机对照试验来证实这些发现[1]

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近视是全球视力受损和失明的主要原因。然而，目前还没有一种安全可行的近视控制和预防方法。在这里，我们研究了ω-3多不饱和脂肪酸（ω-3 PUFA）膳食补充剂对动物模型近视进展的治疗作用，以及对近距离工作引起的脉络膜血液灌注（ChBP）减少的治疗作用。近距离工作是年轻人近视的危险因素。我们证明，每天灌胃ω-3 PUFA（300mg二十二碳六烯酸[DHA]加60mg二十碳五烯酸[EPA]）可显著减轻豚鼠和小鼠的形觉剥夺性近视的发展，以及豚鼠的晶状体诱导性近视。球周注射DHA也抑制了形态剥夺豚鼠的近视进展。豚鼠近视的抑制伴随着“ChBP减少巩膜缺氧级联反应”的抑制。此外，DHA或EPA治疗拮抗了培养的人巩膜成纤维细胞中缺氧诱导的肌成纤维细胞转分化。在人类受试者中，口服ω-3 PUFA部分缓解了近工作引起的ChBP下降。因此，这些动物和人类研究的证据表明，ω-3 PUFA是控制近视的潜在和现成的候选者[2]。

C/EBPβ和H-Ras-CpG岛的DNA分离和定量DNA甲基化分析[4]
使用FlexiGene DNA试剂盒提取对照U937细胞或用100µM OA或100µM二十碳五烯酸/EPA生长24小时的U937细胞的基因组DNA。EMBOSS和MethPrimer在线软件程序用于识别C/EBPβ、N-Ras和H-Ras基因的潜在CpG岛。使用Methyl Profiler qPCR引物分析定量人C/EBPβ（MePH25981-3A）和H-Ras（MePH14574-1A）的DNA甲基化水平。qRT-PCR程序按照手册说明进行。如前所述，使用限制性酶切（DNA甲基化酶试剂盒MeA-03）对CpG岛的DNA甲基化状态进行分析，然后进行基于SYBR Green的实时PCR检测。使用ΔCt法计算每个DNA组分（甲基化和非甲基化）的相对量。

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亚硫酸氢盐修饰基因组DNA和测序[4]
使用FlexiGene DNA试剂盒从U937细胞、对照细胞或用100µM OA或100µM二十碳五烯酸/EPA培养24小时的细胞中获得基因组DNA。如前所述，进行亚硫酸氢盐反应以确定DNA甲基化状态。使用以下引物通过PCR扩增覆盖N-Ras-CpG岛（-29/+171）和H-Ras-CpG-岛B（640/882）的DNA片段。N-Ras：为5′-AAAGTTTTTGTGTGTGTGAGATTAGTAA-3′；修订版，5′-TTAAACAATTTAAACCACACC-3′。H-Ras：为5′-AGTTTTTTTGGTTGAAAGATGT-3′；rev，5′-ACACCCAAATTAACATAATC-3′。将PCR产物克隆到pCR2.1 TOPO中，并在Genechron Ylichron实验室使用T7引物对从两个独立PCR中随机挑选的六个克隆进行测序。

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染色质免疫沉淀[4]
使用EZ-ChIP试剂盒对U937细胞（约106个）进行ChIP检测，对照或用100µM OA或二十碳五烯酸/EPA培养24小时。细胞被交联，细胞裂解物被超声处理，直到染色质片段的大小变为200-1.000 bp。使用小鼠RNAPII 8WG16单克隆抗体MMS-126R或兔p53抗体#928进行免疫沉淀。小鼠或兔IgG用作阴性对照。免疫沉淀后，用Brilliant SYBR Green qPCR Master Mix对回收的染色质样本进行qRT-PCR。在RNAPII检测中，扩增的H-Ras序列位于i）外显子1（1/+135），ii）内含子1区域C（+136/+639），iii）CpG岛B（+640/+882），iv）内含子一区域D（+883/+1167）和v）外显体2（+1168/+1331）内。使用了以下引物。i） 外显子1：为5′-TGCCCCTGCCCGCAACCGAG-3′；修订版，5′-CGTTCACAGGGCGACTGCC-3′。ii）内含子1区C：为5′-GTGAACGGGTGAGGGCA-3′；修订版，5′-CGCGCGCGCGTATTGCTGC-3′。iii）CpG岛B：为5′-CCGTTTCTGGAGAGCGGTAA-3′；修订版，5′-GTCGGAGAAGGCTAAAGG-3′。iv）内含子1区D：5′-TCAGATGGCCCTGCCAGAG-3′；rev，5′-TTCCTACAGGGTCTCCTG-3′。v） 外显子2:for，5′CAGGAGACCTGTAGAGGA-3′；5′-GGATCAGCTGGATGGTCAGC-3′。在p53检测中，使用以下引物扩增含有CpG岛B p53元件的序列：for，5′-CGCTCAAAAATACTTGTCGG-3′；版次：5′-TTACCGTCCAGACAGG-3′。根据公式2-Δ[C（IP）-C（输入）]-2-Δ[C（对照IgG）-C（输出）]对数据进行定量分析。

本研究使用6周龄雄性C57BL/6J小鼠。小鼠在自由摄取标准小鼠饲料（商业饲料，脂肪供能比为17.14%，5.05 g/100 g）和水一周后，随机分为9组，每组6只，分别喂饲ALA系列饲料（1、2.5、5或7.5 wt%）、5% ALA和EPA系列饲料（0.25、0.5、1 wt%）、EPA饲料（2 wt%）或对照饲料（Ctl饲料：ω-3多不饱和脂肪酸缺乏），持续7周。饲料成分见ESI表S1和S2。†所有动物均饲养于屏障笼中，并喂饲相应的特殊饲料，每只小鼠每日限量10 g。[3]

代谢/代谢物
二十碳五烯酸已知的人体代谢物包括杜松酸。

[1]. Martins, J.G., EPA but not DHA appears to be responsible for the efficacy of omega-3 long chain polyunsaturated fatty acid supplementation in depression: evidence from a meta-analysis of randomized controlled trials. J Am Coll Nutr, 2009. 28(5): p. 525-42.

[2]. Dietary ω-3 polyunsaturated fatty acids are protective for myopia. Proc Natl Acad Sci U S A. 2021 Oct 26;118(43):e2104689118.

[3]. Endogenous omega-3 long-chain fatty acid biosynthesis from alpha-linolenic acid is affected by substrate levels, gene expression, and product inhibition. RSC Adv., 2017, 7, 40946-40951.

[4]. Eicosapentaenoic acid activates RAS/ERK/C/EBPβ pathway through H-Ras intron 1 CpG island demethylation in U937 leukemia cells. PLoS One. 2014 Jan 13;9(1):e85025.

全顺式-5,8,11,14,17-二十碳五烯酸（All-cis-5,8,11,14,17-icosapentaenoic acid）是一种在5、8、11、14和17位具有五个顺式双键的二十碳五烯酸。它具有多种功能，包括作为营养保健品、微量营养素、抗肿瘤药、抗抑郁药、水蚤（Daphnia galeata）代谢物、小鼠代谢物、降胆固醇药物和真菌代谢物。它是一种二十碳五烯酸，也是一种ω-3脂肪酸。它是全顺式-5,8,11,14,17-二十碳五烯酸酯（All-cis-5,8,11,14,17-icosapentaenoate）的共轭酸。
它是鱼油中一种重要的多不饱和脂肪酸，也是前列腺素-3和血栓素-3家族的前体。富含二十碳五烯酸（EPA）的饮食可降低血脂浓度，减少心血管疾病的发生率，预防血小板聚集，并抑制花生四烯酸转化为血栓素-2和前列腺素-2家族。
据报道，二十碳五烯酸存在于高山毛霉（Mortierella alpina）、盾状托纳贝藻（Tornabea scutellifera）和其他有相关数据的生物体中。
二十碳五烯酸（EPA）的游离脂肪酸（FFA）形式为二十碳五烯酸（Icosapent）。二十碳五烯酸是一种存在于鱼油中的多不饱和长链脂肪酸，具有20个碳原子和5个双键，具有潜在的补充、抗炎、抗血栓、免疫调节、抗血管生成和化学预防活性。服用二十碳五烯酸后，游离形式的二十碳五烯酸会掺入细胞膜磷脂中，并取代花生四烯酸。它能抑制花生四烯酸转化为血栓素和前列腺素E2 (PGE2)。口服二十碳五烯酸后，EPA-FFA可通过尚未完全阐明的机制预防和抑制结肠肿瘤，并减少息肉的形成和生长。
二十碳五烯酸是一种重要的多不饱和脂肪酸，存在于鱼油中。它是前列腺素-3和血栓素-3家族的前体。富含二十碳五烯酸的饮食可降低血脂浓度，减少心血管疾病的发生率，预防血小板聚集，并抑制花生四烯酸转化为血栓素-2和前列腺素-2家族。
另见：二十碳五烯酸乙酯（活性成分）；鱼油（活性成分）。二十碳五烯酸（亚类）……查看更多……

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药物适应症
EPA 可用于降低高甘油三酯血症患者的甘油三酯水平。此外，EPA 可通过减轻囊性纤维化患者的疾病严重程度发挥治疗作用，并可能在 2 型糖尿病患者中发挥类似作用，延缓糖尿病肾病的进展。
FDA 标签
家族性腺瘤性息肉病的治疗

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作用机制
EPA 的抗炎、抗血栓和免疫调节作用可能与其在二十碳酸类物质的生理和生物化学中的作用有关。大多数二十碳酸类物质是由 ω-3 脂肪酸（特别是花生四烯酸）代谢产生的。这些二十碳酸类物质，如白三烯B4 (LTB4) 和血栓素A2 (TXA2)，可刺激白细胞趋化、血小板聚集和血管收缩，具有促血栓形成和致动脉粥样硬化的作用。另一方面，EPA代谢为白三烯B5 (LTB5) 和血栓素A3 (TXA3)，这两种二十碳酸类物质可促进血管舒张，抑制血小板聚集和白细胞趋化，具有抗动脉粥样硬化和抗血栓形成的作用。EPA降低甘油三酯的作用源于其抑制脂肪生成和促进脂肪酸氧化。EPA的脂肪酸氧化主要发生在线粒体中。 EPA是前列腺素内过氧化物合酶1和2的底物。它似乎还会影响碳水化合物反应元件结合蛋白（ChREBP）的功能并与其结合，以及与一种称为GP40的脂肪酸受体（G蛋白偶联受体）结合。

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药效学
二十碳酸类物质是源自20碳多不饱和脂肪酸的化学信使，在免疫和炎症反应中发挥着关键作用。20碳ω-6脂肪酸（花生四烯酸）和20碳ω-3脂肪酸（EPA）均存在于细胞膜中。在炎症反应期间，花生四烯酸和EPA经环氧合酶和脂氧合酶代谢生成二十碳酸类物质。增加ω-3脂肪酸的摄入量会提高细胞膜中EPA的含量，降低花生四烯酸的含量，从而导致EPA衍生的二十碳酸类物质比例升高。花生四烯酸衍生的二十碳酸类物质与EPA衍生的二十碳酸类物质引起的生理反应不同。一般来说，EPA衍生的二十碳酸类物质诱导炎症、血管收缩和凝血的能力弱于花生四烯酸衍生的二十碳酸类物质。

C20H30O2

302.451

302.224

10417-94-4

Eicosapentaenoic Acid-d5;1197205-73-4;Eicosapentaenoic acid ethyl ester;86227-47-6;Eicosapentaenoic Acid sodium;73167-03-0

446284

Colorless to light yellow liquid

0.9±0.1 g/cm3

439.3±24.0 °C at 760 mmHg

-54--53ºC(lit.)

336.0±18.0 °C

0.0±2.3 mmHg at 25°C

1.513

6.23

37.3

1

2

13

22

398

0

CC/C=C\C/C=C\C/C=C\C/C=C\C/C=C\CCCC(O)=O

JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N

InChI=1S/C20H30O2/c1-2-3-4-5-6-7-8-9-10-11-12-13-14-15-16-17-18-19-20(21)22/h3-4,6-7,9-10,12-13,15-16H,2,5,8,11,14,17-19H2,1H3,(H,21,22)/b4-3-,7-6-,10-9-,13-12-,16-15-

(5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-icosa-5,8,11,14,17-pentaenoic acid

EPA. Icosapent, Eicosapentaenoic acid; Timnodonic acid; Icosapent; 10417-94-4; Icosapentaenoic acid; EPA; cis-5,8,11,14,17-Eicosapentaenoic acid; Icosapento; Eicosapentaenoic acid, Timnodonic acid, Vascepa, Epadel, EPAX

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

Ethanol :≥ 100 mg/mL (~330.63 mM)
DMSO : ≥ 30 mg/mL (~99.19 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.27 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清乙醇储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: 2.08 mg/mL (6.88 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: 2.08 mg/mL (6.88 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 4 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.88 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，您可以将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。