Topo II (MCF-7 cells) ( IC50 = 3.3 ng/mL ); Multicellular spheroids ( IC50 = 7.9 ng/mL )
Topoisomerase II (Topo II) [3]

伊达比星对多细胞球体具有显着的细胞毒活性，与对单层细胞的抗增殖作用相当。 Idarubicin 抑制 CYP450 2D6。伊达比星的活性分别比阿霉素和表柔比星高约 57.5 倍和 25 倍。 Idarubicin 能够克服 P-糖蛋白介导的多药耐药性。 Idarubicin 抑制 PMN 超氧自由基的形成。伊达比星可以与单克隆抗体（抗 Ly-2.1、抗 L3T4 或抗 Thy-1）偶联，同时保留蛋白质溶解度和抗体活性。 Idarubicin 抑制 NALM-6 细胞的增殖，IC50 为 12 nM。 激酶测定：使用每个亚型的分离人 CYP450 蛋白来完成 CYP450 同工酶 3A4、2D6、2C8、2C9 和 1A2 对 Idarubicin 代谢的评估。高通量 P450 抑制测试方法用于这些评估。代谢实验旨在研究每种药物的以下特性：（1）伊达比星是否是 CYP450 3A4、2C8、2C9、1A2 或 2D6 同工酶的底物； (2) 代谢是否受到每种同工酶已知抑制剂的影响； (3)如果伊达比星是CYP450同工酶的抑制剂； (4) 卡泊芬净或伊曲康唑是否抑制伊达比星的 CYP450 代谢。二苄基荧光素 (DBF) (CYP3A4、CYP2C8、CYP2C9)、3-cyano-7-ethoxycoumarin (Cyp1A2) 和 7-methoxy-4-(aminomethyl)-coumarin (MAMC) (CYP2D6) 是用作对照以确认的已知底物各自的同工酶活性并评价伊达比星对同工酶活性的影响。此外，酮康唑、槲皮素、磺丙苯唑、呋拉茶碱和奎尼丁分别用作 3A4、2C8、2C9、1A2 或 2D6 同工酶的对照 CYP450 抑制剂。将所示的底物、抑制剂加伊达比星添加到每个蛋白质样品中，按照制造商的建议，在 37°C 下孵育 20 分钟至 60 分钟。用有机溶剂溶液终止反应，然后适当地通过荧光板读数器分析样品。对于每个实验，在不存在同工酶的情况下，制备具有已知量底物和合成代谢物的对照样品以进行定性比较。所有实验均一式三份进行。细胞测定：通过测量[3H]胸苷摄取的抑制，将缀合物中伊达比星的抗增殖活性与游离药物的抗增殖活性进行比较。简而言之，将 NALM-6 细胞 (1.5 × 106/mL) 添加到平底微量滴定板 (100 μL/孔) 中，并在 37°C 下孵育 1 小时。游离伊达比星和伊达比星-mAb缀合物通过过滤灭菌并在无菌PBS中稀释；将不同浓度的孔（100 μL/孔）一式两份添加到孔中，并将板在 37°C、7% CO2 下孵育 24 小时。孵育后，将含有 1 μCi [3H]胸苷的 50 μL 培养基添加到每个孔中，并将板再孵育 4 小时。将细胞收获到玻璃纤维滤纸上，干燥并在闪烁计数器中计数。使用相同的技术进行特异性研究，其中将伊达比星-抗 CD19 缀合物杀死 CD19 + 细胞的能力与不相关的伊达比星-JGT 缀合物的细胞毒性进行比较。将 NALM-6 细胞（1.5×106/mL，300 μL 管）与不同浓度的伊达比星-抗 CD 19 或伊达比星-JGT 缀合物在冰上孵育 30 小时。在冰冷的 RPMI-1640 培养基中洗涤 3 次（4 mL/洗涤）后，将细胞重悬于新鲜培养基中并转移至 96 孔板（100 μL/孔）。每管设置一式两份，每管铺两个孔（每种药物浓度总共 4 个孔）。 24小时后用[3H]胸苷脉冲细胞并收获。

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盐酸伊达比星（Idarubicin HCl） 对人急性髓系白血病（AML）细胞系（HL-60和U937）具有强效抗增殖活性。处理72小时后，HL-60和U937细胞的IC50值分别为0.08 μM和0.12 μM。流式细胞术分析显示G2/M期细胞周期阻滞及凋亡诱导，0.1 μM浓度下HL-60细胞的凋亡率达35%[2]
- 用 盐酸伊达比星（Idarubicin HCl） 处理人膀胱癌细胞系（T24和5637），呈现剂量依赖性细胞毒性。在0.05 μM、0.1 μM和0.2 μM浓度下，T24细胞的存活率分别为82%、56%和31%。免疫印迹分析显示γ-H2AX（DNA双链断裂标志物）和切割型PARP的表达增加[3]
- 盐酸伊达比星（Idarubicin HCl） 在体外可抑制人T淋巴细胞增殖。0.01 μM浓度下，它可使植物血凝素（PHA）诱导的淋巴细胞增殖减少42%；0.1 μM浓度下，抑制率达78%[6]

伊达比星的还原依赖于酮还原酶，并且比大多数酮更具立体选择性，几乎完全产生 (13S)-差向异构体。伊达比星还原的高立体特异性可能是由于伊达比星羰基附近存在不对称中心而导致的手性诱导。

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在携带人膀胱癌异种移植物（T24细胞）的裸鼠中测试 盐酸伊达比星（Idarubicin HCl） 的药效。药物以3 mg/kg剂量静脉注射，每周1次，持续4周。它显著抑制肿瘤生长，与对照组相比，肿瘤重量减少率为63%。治疗期间未观察到明显的恶病质或器官损伤[3]
- 在小鼠急性白血病模型中，盐酸伊达比星（Idarubicin HCl） 以2 mg/kg剂量腹腔注射，隔天1次，共5次。它使白血病小鼠的存活时间延长45%，并使骨髓中的原始细胞数量减少58%[2]

使用每种亚型的分离人 CYP450 蛋白完成，评估 CYP450 同工酶 3A4、2D6、2C8、2C9 和 1A2 对伊达比星的代谢。该评估是使用高通量 P450 抑制测试方法进行的。每种药物的以下特性旨在通过代谢实验进行检查：（1）伊达比星是否是CYP450 3A4、2C8、2C9、1A2或2D6同工酶的底物； (2) 每种同工酶的代谢是否受到已知抑制剂的影响； (3)如果伊达比星是CYP450同工酶的抑制剂； (4)如果伊达比星的CYP450代谢被卡泊芬净或伊曲康唑抑制。用作验证相应同工酶活性并评估伊达比星对同工酶活性影响的已知底物是二苄基荧光素 (DBF) (CYP3A4、CYP2C8、CYP2C9)、3-cyano-7-ethoxycoumarin (Cyp1A2) 和 7-methoxy -4-(氨甲基)-香豆素 (MAMC) (CYP2D6)。此外，3A4、2C8、2C9、1A2或2D6同工酶的对照CYP450抑制剂依次为槲皮素、奎尼丁、呋拉茶碱、酮康唑或舒拉芬唑。在制造商建议的 37°C 孵育时间 20 至 60 分钟内，将底物、抑制剂和伊达比星添加到每个蛋白质样品中。需要时，用有机溶剂溶液停止反应后，使用荧光板读数器检查样品。制备对照样品用于每个实验的定性比较，其中含有已知量的底物和合成代谢物，不含同工酶。每个实验一式三份进行。

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拓扑异构酶II活性测定采用纯化的人Topo II和超螺旋pBR322 DNA。反应体系包含不同浓度的 盐酸伊达比星（Idarubicin HCl）、Topo II和DNA，在37°C下孵育60分钟。加入SDS和蛋白酶K终止反应后，通过1%琼脂糖凝胶电泳分离DNA产物。根据解连环DNA产物的减少程度评估 盐酸伊达比星（Idarubicin HCl） 对Topo II的抑制作用，其IC50为0.03 μM[3]

[ 3 H]胸苷摄取的抑制用于比较缀合物伊达比星与游离药物的抗增殖活性。总之，添加 100 μL/孔含有 1.5 × 10 6 /mL NALM-6 细胞的平底微量滴定板，然后将板在 37°C 下孵育 1 小时。将过滤后的游离伊达比星和伊达比星-mAb 缀合物用无菌 PBS 稀释，并以不同浓度（100 μL/孔）一式两份添加到孔中；然后将板在 37°C、7% CO₂ 下孵育 24 小时。孵育 4 小时后，每孔加入 50 μL 含有 1 μCi [ 3 H]胸苷的培养基，并将板再孵育 4 小时。使用玻璃纤维滤纸收集细胞，干燥，并使用闪烁计数器计数。使用相同的方法，进行特异性研究，其中将微不足道的伊达比星-JGT缀合物的细胞毒性与伊达比星-抗CD19缀合物对CD19 + 细胞的杀伤能力进行对比。将 NALM-6 细胞（1.5 x 10 6 /mL，300 μL 管）与不同浓度的伊达比星-抗 CD 19 或伊达比星-JGT 缀合物一起孵育 30 次冰雨。经过三个冰冷 RPMI-1640 培养基循环（4 mL/循环）后，将细胞在新培养基中重建并放入 96 孔板（100 μL/孔）中。每个重复管中铺有两个孔，每种药物浓度总共有四个孔。两天后，将[ 3 H]胸苷脉冲注入细胞中，并收获细胞。

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AML细胞抗增殖及凋亡测定：将HL-60和U937细胞以1×10⁴个细胞/孔接种到96孔板中，过夜孵育。用系列浓度的 盐酸伊达比星（Idarubicin HCl）（0.01-1 μM）处理细胞72小时，MTT法检测细胞活力，碘化丙啶（PI）染色后流式细胞术分析细胞周期分布，Annexin V-FITC/PI双染色检测凋亡[2]
- 膀胱癌细胞毒性测定：将T24和5637细胞以5×10⁵个细胞/孔接种到6孔板中，培养24小时。用 盐酸伊达比星（Idarubicin HCl）（0.05-0.2 μM）处理细胞48小时，台盼蓝排斥法评估细胞活力。蛋白质表达分析时，裂解细胞后通过SDS-PAGE分离蛋白质，转移至膜上，并用γ-H2AX和PARP抗体进行探针杂交[3]
- 淋巴细胞增殖抑制测定：分离人外周血淋巴细胞，以2×10⁵个细胞/孔接种到96孔板中。加入PHA诱导增殖，并加入0.01 μM、0.05 μM和0.1 μM浓度的 盐酸伊达比星（Idarubicin HCl）。孵育72小时后，加入[³H]-胸腺嘧啶核苷，通过测量放射性评估DNA合成[6]

大鼠、兔、小鼠、犬

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人膀胱癌异种移植模型：将T24细胞（5×10⁶个细胞/只）皮下接种到裸鼠体内，建立肿瘤异种移植模型。当肿瘤体积达到150-200 mm³时，将小鼠随机分为对照组和治疗组。盐酸伊达比星溶于生理盐水中，以3 mg/kg的剂量每周静脉注射一次，连续4周。每2天用游标卡尺测量一次肿瘤体积，每周记录一次体重[3]
- 小鼠急性白血病模型：将白血病细胞（2×10⁶个细胞/只）静脉注射到小鼠体内，诱导白血病。接种三天后，小鼠接受溶于磷酸盐缓冲液（PBS）的盐酸伊达比星治疗，剂量为2 mg/kg，每隔一天腹腔注射一次，共5次。记录存活时间，并采集骨髓样本进行原始细胞计数[2]

大鼠静脉注射5 mg/kg盐酸伊达比星后，血浆消除半衰期（t₁/₂β）为12.8小时。该药物广泛分布于组织中，肝脏、脾脏和骨髓中的浓度最高[7]。盐酸伊达比星主要经肝脏代谢，其主要代谢产物为伊达比星醇。约30%的给药剂量在72小时内经胆汁排泄，15%经尿液排泄[7]。

在以 5 mg/kg 静脉注射盐酸伊达比星的大鼠中，观察到短暂的骨髓抑制，给药后第 7 天白细胞计数下降 40%，至第 14 天恢复正常。未检测到肝肾功能指标的显著变化 [7]
- 盐酸伊达比星在小鼠中表现出剂量依赖性的心脏毒性。累积剂量为 20 mg/kg（4 周内给药）时，30% 的受试小鼠观察到轻度心肌纤维化 [1]
- 盐酸伊达比星在人血浆中的血浆蛋白结合率为 94-96% [1]

[1]. J Chemother . 2005 Dec;17(6):663-7.

[2]. Hematology . 2004 Jun;9(3):217-21.

[3]. Eur Urol . 1997;31(3):365-70.

[4]. J Leukoc Biol . 1990 Mar;47(3):224-33.

[5]. Transplantation . 1988 Jul;46(1):126-31.

[6]. Cancer Immunol Immunother . 1993 Aug;37(3):195-202.

[7]. Xenobiotica . 1991 Apr;21(4):473-80.

根据州或联邦政府的标签要求，盐酸伊达比星可能引起发育毒性和男性生殖毒性。
盐酸伊达比星是一种蒽环类抗生素。
盐酸伊达比星是蒽环类抗肿瘤抗生素伊达比星的盐酸盐。伊达比星可嵌入DNA并抑制拓扑异构酶II，从而抑制DNA复制，最终干扰RNA和蛋白质的合成。由于其高亲脂性，伊达比星比其他蒽环类抗生素化合物更有效地穿透细胞膜。
口服蒽环类抗肿瘤药物。该化合物已显示出对乳腺肿瘤和淋巴瘤的活性；以及白血病。
另见：伊达比星（具有活性部分）。

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盐酸伊达比星是一种蒽环类化疗药物，它通过抑制拓扑异构酶II发挥抗肿瘤作用，导致DNA双链断裂，进而引起细胞周期阻滞和凋亡[3]
- 由于其对白血病细胞具有强大的抗增殖活性，盐酸伊达比星已被用于治疗急性髓系白血病（AML）[2]
- 盐酸伊达比星对T淋巴细胞的免疫抑制作用提示其在器官移植中具有潜在的应用价值，可用于预防移植物排斥反应[6]

C26H27NO9.HCL

533.95

533.145

C, 58.49; H, 5.29; Cl, 6.64; N, 2.62; O, 26.97

57852-57-0

58957-92-9

636362

Orange to red solid powder

725.4ºC at 760 mmHg

183-185ºC

392.5ºC

2.522

176.61

6

10

3

37

912

6

OC(C(C(C1=CC=CC=C21)=O)=C3C2=O)=C4[C@H](C[C@@](C(C)=O)(O)CC4=C3O)O[C@@](O[C@@H](C)[C@H]5O)([H])C[C@@H]5N.Cl

JVHPTYWUBOQMBP-RVFAQHLVSA-N

InChI=1S/C26H27NO9.ClH/c1-10-21(29)15(27)7-17(35-10)36-16-9-26(34,11(2)28)8-14-18(16)25(33)20-19(24(14)32)22(30)12-5-3-4-6-13(12)23(20)31;/h3-6,10,15-17,21,29,32-34H,7-9,27H2,1-2H3;1H/t10-,15-,16-,17-,21+,26-;/m0./s1

(7S,9S)-9-acetyl-7-[(2R,4S,5S,6S)-4-amino-5-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-6,9,11-trihydroxy-8,10-dihydro-7H-tetracene-5,12-dione;hydrochloride

4-demethoxydaunorubicin (NSC256439, 4-DMDR) HCl; IMI30; NSC256439; IMI-30; NSC-256439; IMI 30; NSC 256439; 4-DMDR; IDA; 4-Demethoxydaunomycin; brand name: Idamycin; IDAMYCIN PFS

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.90 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.90 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。