GLS1 (IC50 = 31 nM)
IPN-60090 targets glutaminase 1 (GLS1), a crucial enzyme for the synthesis of metabolic energy. GLS1 catalyzes the conversion of glutamine to glutamate, a key step in glutaminolysis. By inhibiting GLS1, IPN-60090 reduces the production of glutamate and downstream metabolites, thereby affecting cancer cell metabolism and growth. It is selective for GLS1 over GLS2.

GLS-1（又称肾型或KGA）和GLS-2（又称肝型或LGA）是已知的两种谷氨酰胺酶同工酶。GLS-2的表达似乎主要局限于肝脏，而GLS-1则广泛表达。IPN60090对GLS-2无抑制作用，IC50值大于50000 nM，但在双偶联酶活性测定中，其对纯化的重组人GLS-1（GAC同工酶）的抑制作用IC50值为31 nM[2]。IPN60090的IC50值为26 nM，并能抑制A549细胞增殖[2]。体外实验表明，IPN-60090是GLS1的强效抑制剂，对GAC同工酶的IC50值为31 nM。它对 GLS-2 无活性（IC50 >50 µM），并且在 10 µM 浓度下对 80 种离子通道和受体以及 97 种激酶均无显著活性。其高选择性使其成为研究谷氨酰胺酶生物学的宝贵工具。

IPN60090（静脉注射 3 mg/kg；口服 10 mg/kg）具有优异的药代动力学特征，包括 CL=4.1 mL/min/kg、t1/2=1 小时、Cmax=19 μM 和 F%=89%[2]。口服 IPN-60090（100 mg/kg；每日两次；疗程 30 天）与口服 CB-839（250 mg/kg，每日两次）具有相当的疗效和靶点结合率。此外，在即将开展的模型研究中，IPN-60090 的耐受剂量为 100 mg/kg，每日两次[2]。IPN-60090（口服；100 mg/kg；每日两次；疗程 30 天；单药治疗或与 TAK228 联合治疗）可抑制肿瘤生长。 IPN-60090 以剂量依赖的方式单独表现出强大的体内靶点结合能力。给药后 4 小时，第 4 天和第 28 天的谷氨酸/谷氨酰胺比值和 IPN-60090 的游离血浆浓度均较低[2]。此外，IPN-60090 单独使用可抑制体内肿瘤生长 28%，而 IPN-60090 与 TAK228 联合使用则可显著抑制肿瘤生长 85%[2]。
在体内，IPN-60090 是一种口服生物利用度高的 GLS1 抑制剂，具有潜在的抗肿瘤和免疫刺激活性。它可用于 GLS1 介导疾病（包括癌症）的研究。其良好的口服生物利用度和选择性使其成为癌症治疗领域极具潜力的候选药物。

GLS-1 酶活性测定。[2]
谷氨酰胺酶双偶联荧光测定在 384 孔黑色 Greiner 非结合板（Greiner，货号 784900）中进行，测定缓冲液由 50 mM HEPES（pH 7.4）、250 μM EDTA（pH 8）和 0.12 mM Triton-X 100 组成。所有最终浓度均指 20 μL 的体积。测试化合物的储备液用 100% DMSO 配制，并用 100% DMSO 进行 1:3 系列稀释。化合物再用测定缓冲液稀释 1:50，取 5 μL/孔加入测定板。将 4 倍浓度的谷氨酰胺酶和磷酸氢二钾三水合物储备液用测定缓冲液稀释后，在室温下预孵育 10 分钟。将 5 μL/孔的谷氨酰胺酶和磷酸氢二钾三水合物溶液（终浓度分别为 2 nM 和 50 mM）加入微孔板中，室温孵育 10 分钟。偶联反应体系包含谷氨酸氧化酶、Amplex UltraRED、谷氨酰胺和辣根过氧化物酶。将 5 μL/孔的谷氨酸氧化酶和 Amplex UltraRED 溶液（用检测缓冲液稀释，终浓度分别为 100 mU/mL 和 75 μM）以及 5 μL/孔的谷氨酰胺和辣根过氧化物酶溶液（用检测缓冲液稀释，终浓度分别为 1 mM 和 100 mU/mL）在弱光下加入微孔板中，室温孵育 20 分钟。使用 PerkinElmer Envision 酶标仪测量试卤灵信号：激发波长 535 nm，发射波长 590 nm。使用 Genedata Screener 软件，通过四参数逻辑曲线拟合计算 IC50 值。[2]

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GLS-2 酶活性测定。[2]
GLS-2 双偶联荧光测定在 384 孔黑色 Greiner 非结合板中进行，测定缓冲液由 50 mM Hepes (pH 7.4)、250 μM EDTA (pH 8) 和 0.12 mM Triton-X 100 组成。所有最终浓度均指 20 μL 的体积。测试化合物的储备液用 100% DMSO 配制，并用 100% DMSO 进行 1:3 系列稀释。化合物再用测定缓冲液稀释 1:50，取 5 μL/孔加入测定板。将 4 倍浓度的 GLS-2 储备液和磷酸氢二钾三水合物用测定缓冲液稀释后，在室温下预孵育 10 分钟。将 5 μL/孔的 GLS-2 与磷酸氢二钾三水合物混合溶液（终浓度分别为 33 nM 和 50 mM）加入微孔板中，并在室温下孵育 10 分钟。偶联反应体系包含谷氨酸氧化酶、Amplex UltraRED（Molecular Probes，货号 A36006）、谷氨酰胺和辣根过氧化物酶。在弱光条件下，将 5 μL/孔的谷氨酸氧化酶和 Amplex UltraRED（用检测缓冲液稀释，终浓度分别为 100 mU/mL 和 75 μM）以及 5 μL/孔的谷氨酰胺和辣根过氧化物酶（用检测缓冲液稀释，终浓度分别为 3 mM 和 100 mU/mL）加入微孔板中。使用 PerkinElmer Envision 酶标仪连续测量试卤灵信号 20 分钟：激发波长 535 nm，发射波长 590 nm。使用 Genedata Screener 软件，通过四参数逻辑曲线拟合计算 IC50 值。[2]

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微粒体稳定性。[2]
微粒体稳定性测定在 Beckmann Biomek FXp 实验室自动化系统上进行。肝微粒体孵育混合物由肝微粒体（0.5 mg 微粒体蛋白/mL）、待测化合物（1 μM）、MgCl2（3 mM）和 EDTA（1 mM）组成，溶于磷酸钾缓冲液（100 mM，pH 7.4）。咪达唑仑和酮色林用作测定对照底物。加入 NADPH 再生溶液（1.3 mM NADPH）启动反应，并在 37 °C 下振荡维持反应。在 0 至 45 分钟的五个时间点，取出 50 μL 样品，并用含有内标物（丙咪嗪）的乙腈（100 μL）终止反应。涡旋振荡和离心后，采用液相色谱-串联质谱法 (LC-MS/MS) 分析样品。体外半衰期和清除率的计算遵循文献指南。[2]

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血浆蛋白结合。[2]
采用快速平衡透析 (RED) 装置进行血浆蛋白结合 (PPB) 测定。以华法林和美托洛尔作为对照底物。在接收侧加入 350 μL 磷酸盐缓冲液（pH 7.4，1×）。在供体侧加入 200 μL 添加了待测化合物 (5 μM) 的血浆。回收样品也使用相同的血浆/待测化合物溶液 (50 μL)。用 Immunoware 密封胶带封住透析板，并在 37 °C 下以 100 rpm 的转速振荡孵育 5 小时。孵育后，分别从接收侧和供体侧取样 (50 μL)，并与另一侧相同体积的基质进行匹配。回收、供体和受体样品用含丙咪嗪作为内标的300 μL冷乙腈提取。涡旋振荡和离心后，取上清液（150 μL）进行LC-MS定量分析。PPB（结合百分比）计算公式为：%Bound = 100 × ([供体]-[受体])/[供体]。[2]

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CYP抑制试验。[2]
在人肝微粒体中进行研究（CYP 1A2/2C9/2D6/3A4：0.1 mg/mL；CYP 2C19：0.5 mg/mL）。肝微粒体购自BD Gentest。将化合物储备液分装后用乙腈稀释至4 mM，然后加入肝微粒体（0.2 mg/mL）进一步稀释。取30 μL稀释后的测试化合物溶液与15 μL底物溶液混合。将反应板预热至37 °C，然后加入15 μL预热至37 °C的8 mM NADPH溶液。反应板在37 °C下孵育以下时间：3A4为5分钟，1A2/2C9/2D6为10分钟，2C19为45分钟。在指定时间点加入乙腈终止反应。将反应板置于振荡器（IKA，MTS 2/4）上振荡10分钟（600 rpm），然后在5,594 g下离心15分钟（Multifuge × 3R）。取上清液等分试样，用蒸馏水以1:3的比例稀释，并通过LC-MS/MS分析代谢物浓度，并与内标进行比较。所用底物分别为：1A2使用非那西汀（30 μM），2C9使用双氯芬酸（10 μM），2C19使用S-美芬妥英（35 μM），3A4使用咪达唑仑（10 μM）或睾酮（80 μM），以及2D6使用布呋洛尔（10 μM）。测定的代谢物分别为：1A2使用对乙酰氨基酚，2C9使用4'-羟基双氯芬酸，2C19使用羟基美芬妥英，3A4使用1-羟基咪达唑仑或奥沙米德，以及2D6使用1-羟基布呋洛尔。所用的阳性对照抑制剂分别为：CYP1A2 的 α-萘黄酮、CYP2C9 的磺胺苯唑、CYP2C19 的奥美拉唑、CYP2D6 的奎尼丁和 CYP3A4 的酮康唑。在所需时间点，将测试化合物样品中代谢物与代谢物内标的峰面积响应比 (PARR) 与对照样品中的 PARR 进行比较，以确定每个时间点的对照样品百分比 (% 对照)。抑制率 (% 抑制) 的计算方法为 100 - % 对照。
IPN-60090 的体外酶抑制试验用于测定其抑制 GLS1 酶活性的能力。该试验使用纯化的 GLS1 酶（GAC 同工酶）和谷氨酰胺作为底物进行。谷氨酸的生成量通过偶联酶法测定或检测 NADH 向 NAD+ 的转化来测定。IC50 值由剂量-反应曲线计算得出。通过对 GLS2 和其他酶进行测试来评估选择性。

A549细胞活力检测。[2]
A549细胞常规培养于添加10%透析胎牛血清（FBS）的过滤RPMI培养基中，置于加湿培养箱（37℃，5% CO₂，氧气）内。进行活力检测前，收集细胞并重悬于添加10%透析FBS的过滤RPMI培养基中。将细胞以1000个/孔的密度接种于384孔黑色PerkinElmer组织培养板中，每孔40 μL。将组织培养板置于37℃、5% CO₂和氧气条件下培养24小时。将测试化合物配制成100% DMSO的储备液，并用100% DMSO进行1:3系列稀释。化合物再用培养基稀释1:40，取10 μL/孔加入组织培养板中。加入化合物后，将微孔板在 37 °C 下孵育 72 小时。向微孔板中加入 10 μL Promega 公司的 CellTiter-Fluor 试剂（GF-AFC 底物，用检测缓冲液稀释），使其最终浓度为 1 倍。分别使用 0.5% DMSO 和 20 μM 依托泊苷作为对照，以定义 100% 和 0% 的细胞活力。然后将微孔板在室温下以 300 rpm 的转速在轨道摇床上振荡 15 分钟，随后在 37 °C 下孵育 30 分钟。使用 PerkinElmer Envision 酶标仪测量 CellTiter-Fluor 信号：激发波长 400 nm，发射波长 505 nm。使用 Genedata Screener 软件，通过四参数逻辑曲线拟合计算 IC50 值。[2]

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A549 靶标结合分析。 [2]A549细胞常规培养于添加10%透析胎牛血清（FBS）的过滤RPMI培养基中，并置于加湿培养箱（37℃，5% CO₂，氧气）内。为进行靶标结合实验，收集细胞并重悬于添加10%透析FBS的过滤RPMI培养基中。将细胞以15,000个/孔的密度接种于96孔组织培养板中，每孔100 μL。将组织培养板置于37℃、5% CO₂和氧气条件下培养24小时。将测试化合物配制成100% DMSO的储备液，并用100% DMSO进行1:3系列稀释。化合物再用培养基稀释1:200，取200 μL/孔加入组织培养板中。加入化合物后，将微孔板在 37 °C 下孵育 24 小时。然后使用 YSI 2900 生化分析仪测定培养基中 L-谷氨酰胺和 L-谷氨酸的水平。使用 Genedata Screener 软件，通过四参数逻辑曲线拟合计算 IC50 值。[2]

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肝细胞稳定性。[2]
将测试化合物配制成 10 mM 的 DMSO 储备液。取等分储备液，用 DMSO 稀释至 200 μM，然后用 KHB 缓冲液进一步稀释至 2 μM。具体步骤如下：计数肝细胞，然后将细胞悬液稀释至适当的浓度（活细胞密度 = 2 × 10⁶ 个细胞/mL）。向指定时间点的孔中加入 50 μL 预热至 37 °C 的 2 μM 测试化合物。在 0 分钟时，向孔中加入 100 μL 含有内标 (IS) 的乙腈 (ACN)，随后加入 50 μL 肝细胞溶液，然后封孔。向分别标记为 15 分钟、30 分钟、60 分钟和 120 分钟的孔中加入 50 μL 预热的肝细胞溶液，并开始计时。将反应板置于 37 °C 的培养箱中。在 15 分钟、30 分钟、60 分钟和 120 分钟时，分别向孔中加入 100 μL 乙腈 (ACN)，然后封孔。反应结束后，将反应板超声处理 5 分钟，然后在 5594 × g 下离心 15 分钟（Thermo Multifuge × 3R）。将每个孔中的 50 μL 上清液转移至含有 120 μL 超纯水的 96 孔样品板中，用于 LC/MS 分析。将化合物在 15 分钟、30 分钟、60 分钟和 120 分钟时的峰面积响应比 (PARR) 与 0 分钟时的 PARR 进行比较，以确定各时间点剩余的测试化合物百分比。使用 Excel 软件，通过拟合单相指数衰减方程计算半衰期。[2]

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Caco-2 细胞渗透性。[2]
Caco-2 细胞购自美国典型培养物保藏中心 (ATCC)。细胞在含有 10% 热灭活胎牛血清 (FBS) 和 1% 非必需氨基酸的改良 Eagle 培养基 (MEM) 中，于 37 °C、CO2 条件下培养。将细胞接种于聚碳酸酯滤膜插片上。在转运实验前，细胞培养 21-28 天。在实验前后检测跨上皮电阻 (TEER) 和 Lucifer Yellow 渗透性。将化合物溶解于 DMSO 中，浓度为 10 mM，然后用含 25 mM HEPES、pH 7.4 的 Hank's 平衡盐溶液 (HBSS) 进行稀释。化合物浓度为 10 μM，分别沿顶端至基底外侧 (AB) 和基底外侧至顶端 (BA) 方向进行测试，并在 37 °C 下孵育 90 分钟。孵育结束后，将供体样品用检测缓冲液稀释 10 倍，然后将 60 μL 受体样品和稀释后的供体样品与 60 μL 乙腈混合，并通过 LC-MS/MS 分析浓度，并与标准曲线进行比较。
体外细胞研究使用依赖于谷氨酰胺分解的癌细胞系进行。用不同浓度的 IPN-60090 处理细胞。使用 MTT 或 CellTiter-Glo 检测评估细胞活力。测量谷氨酰胺消耗量和谷氨酸生成量。评估ATP水平和线粒体功能。通过Annexin V/PI染色或caspase-3活性检测来测量细胞凋亡。

雌性CD-1小鼠[2]
静脉注射3 mg/kg；口服10 mg/kg（药代动力学分析）
静脉注射和口服给药

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体内药代动力学[2]
小鼠：本研究使用体重20-30 g的雌性小鼠。所有动物均可自由摄取食物和水。分别通过尾静脉（静脉注射）或灌胃（口服）给药。在给药前以及给药后0.083、0.25、0.5、1、2、4、8和24小时，从所有动物采集血样至含有抗凝剂K2EDTA的试管中（每个时间点3只动物，每只动物采集3个时间点的血样）。将血液在4℃下离心分离血浆，并储存于-70℃直至分析。采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）定量分析血浆中受试物浓度。
大鼠：本研究使用体重200-300 g的雄性大鼠。动物禁食过夜，给药后4小时喂食。所有动物均可自由饮水。受试物通过足背静脉（静脉注射）或灌胃（口服）给药。分别于给药前及给药后0.083、0.25、0.5、1、2、4、8和24小时，从所有动物的尾静脉采集血样，置于含有抗凝剂K2EDTA的试管中。将血样在4℃下离心分离血浆，并储存于-70℃直至分析。采用液相色谱-串联质谱法 (LC-MS/MS) 定量分析血浆中受试物浓度。
犬：本研究使用体重 7–10 kg 的雄性比格犬。动物禁食过夜，给药后 4 小时喂食。受试物通过头静脉（静脉注射）或灌胃（口服）给药。分别于给药前和给药后 0.083、0.25、0.5、1、2、4、8 和 24 小时，从所有动物的隐静脉或头静脉采集血样，置于含有抗凝剂 K2EDTA 的试管中。将血液在 4 °C 下离心分离血浆，并储存于 −70 °C 直至分析。采用液相色谱-串联质谱法 (LC-MS/MS) 定量分析血浆中受试物浓度。
猴子：本研究使用体重 3–5 kg 的雄性食蟹猴。动物禁食过夜，给药后 4 小时喂食。受试物通过头静脉（静脉注射）或鼻腔灌注（口服）给药。在给药前以及给药后 0.083、0.25、0.5、1、2、4、8 和 24 小时，从所有动物的隐静脉或头静脉采集血样，置于含有抗凝剂 K2EDTA 的试管中。将血液在 4 °C 下离心分离血浆，并储存于 −70 °C 直至分析。采用液相色谱-串联质谱法 (LC-MS/MS) 对血浆中受试物浓度进行定量分析。[2]

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体内模型。[2]
所有实验均按照机构指南进行。
H460 异种移植模型中谷氨酰胺和谷氨酸水平。[2]
将 H460 细胞（5×10⁵ 个细胞/只，用 Matrigel 1:1 稀释）植入 NSG 雌性小鼠体内。小鼠年龄为 6-10 周。所有动物均自由摄取 LabDiet 5053 饲料。待肿瘤生长至 300-400 mm³ 后，用化合物 27（双盐酸盐）治疗动物，该化合物配制于 0.5% 甲基纤维素的无菌水中。单次灌胃给予化合物 27 后 8 或 24 小时，用二氧化碳处死动物，并收集肿瘤组织。每组包含6只动物。肿瘤称重后速冻。将肿瘤组织切片置于OmniBEAD Ruptor 24匀浆器中，在含有¹³C₅-L-谷氨酰胺和¹³C₅-L-谷氨酸作为内标的甲醇/水（80:20）混合溶液中，组织浓度为100 mg/mL。匀浆液在4℃下以15,000 rpm离心10分钟。取10 μL上清液，加入190 μL 0.1%甲酸乙腈/水（50:50）溶液稀释，涡旋振荡15秒，然后在4℃下以15,000 rpm离心5分钟。使用安捷伦1290 Infinity液相色谱系统（与安捷伦6460三重四极杆质谱仪联用，正离子模式（ESI+））分析样品。采用Waters XBridge Amide色谱柱（3.5 μm；4.6 × 100 mm）进行分析物分离。HPLC流动相A为95% (v/v)水/乙腈溶液，其中含有20 mM氢氧化铵和20 mM乙酸铵。HPLC流动相B为100%乙腈。梯度洗脱程序为：80% B (0–1 min)，80–10% B (1–3 min)，10% B (3–5 min)，10–80% B (5–5.3 min)，80% B (5.3–10 min)。柱温为40 °C，流速为0.5 mL/min。进样量为2 μL。质谱仪的检测条件如下：毛细管电压4000 V，雾化器压力35 psi，加速池电压4 V，鞘气温度400 °C，鞘气流速11 L/min，离子源温度300 °C，离子源气流速11 L/min，碎裂器电压80 V，碰撞能量分别为26 V（谷氨酸）和14 V（谷氨酰胺）。代谢物通过化合物特异性多反应监测（MRM）和保留时间（RT）进行检测：谷氨酰胺（m/z 147>84，RT 4.93 min），¹³C₅-谷氨酰胺（m/z 152>88，RT 4.93 min），谷氨酸（m/z 148>84，RT 4.78 min），¹³C₅-谷氨酸（m/z 153>88，RT 4.78 min）。该方法在乙腈/水 (1:1) 混合溶剂中，对谷氨酰胺和谷氨酸的分析范围为 10 – 5000 ng/mL，并进行了验证。使用 GraphPad Prism 软件绘制图表，数据以平均值 ± 标准差表示。
在 Ru337 PDX 模型中的疗效。[2]
将 8 周龄 NSG 雌性小鼠右侧腹部皮下植入 Ru337（纪念斯隆-凯特琳癌症中心）患者来源的异种移植瘤 (PDX)。使用游标卡尺测量肿瘤体积，使其生长至平均 100 mm³。然后将动物随机分为 8 只一组。所有动物均可自由摄取饲料。小鼠按 5 天用药/2 天停药的方案接受化合物治疗。化合物 27 配制于 0.5% 甲基纤维素的无菌水中，剂量为 100 mg/kg，口服，每日两次（每次给药间隔约 8 小时，分别为 8:00 和 16:00，两次给药间隔约 16 小时）。TAK-228 配制于 5% 蔗糖和 0.5% 甲基纤维素的无菌水中，剂量为 1 mg/kg，口服，每日一次。每周监测两次体重。肿瘤体积采用公式 V=l²*L/2 计算（l=长度；L=宽度）。使用 GraphPad Prism 软件绘制图表，数据以均值 ± 标准差表示。联合用药组的标准差非常低（柱状图小于数据点的大小）。
体内动物实验在异种移植瘤模型中进行。将荷瘤小鼠通过灌胃法给予不同剂量的IPN-60090。随时间推移测量肿瘤体积，终点指标包括肿瘤生长抑制和生存率。药效学研究评估肿瘤组织中GLS1抑制、谷氨酸水平及其下游信号通路。

化合物 27 (IPN60090) 在大鼠和犬体内表现出比小鼠和猴更好的药代动力学特性，其体内清除率更低，半衰期在大鼠和犬体内延长 5-6 倍。由于所有物种的分布容积均较低，除非清除率极低（如在大鼠和犬中），否则半衰期较短。各物种的清除率与体外代谢稳定性的定性评估结果一致。鉴于化合物 27 (IPN60090) 在人微粒体和肝细胞中的体外清除率极低（与大鼠和犬相似或更低），我们预期其在人体内具有更低的体内清除率和更长的半衰期，更接近于大鼠和犬，而非小鼠和猴。[2] 化合物 27 (IPN60090) 还进行了小鼠、大鼠和犬的递增单剂量口服药代动力学研究（图 6）。在测试剂量范围内（小鼠最大剂量为 200 mg/kg，大鼠为 100 mg/kg，犬为 10 mg/kg），最大浓度和总暴露量均随剂量增加而持续升高，所有物种均达到高暴露水平。
IPN-60090 的分子式为 C24H27F3N8O3，分子量为 532.52 g/mol【32†16】。它可溶于 DMSO（31.43 mg/mL）。储存时，应置于 -20°C，避光防潮。该化合物以高纯度供应，仅供研究用途。体内给药时，应使用合适的制剂。它是一种口服生物利用度高的化合物。

作为一种强效且选择性的GLS1抑制剂，IPN-60090不适用于人体研究用途。其毒理学特性尚未完全明确。操作时应遵循标准的实验室安全预防措施。其作用机制与其作为谷氨酰胺酶抑制剂的作用机制相关，这可能对癌细胞代谢产生显著影响。

[1]. Gls1 inhibitors for treating disease. WO2016004404A2.

[2]. Discovery of IPN60090, a Clinical Stage Selective Glutaminase-1 (GLS-1) Inhibitor with Excellent Pharmacokinetic and Physicochemical Properties. J Med Chem. 2020 Nov 12;63(21):12957-12977.

IACS-6274 是一种谷氨酰胺酶-1抑制剂，具有口服生物利用度，可抑制代谢酶谷氨酰胺酶-1 (GLS1)，并具有潜在的抗肿瘤和免疫刺激活性。口服后，IACS-6274 可选择性地靶向、结合并抑制人 GLS1，GLS1 是一种将氨基酸谷氨酰胺转化为谷氨酸所必需的酶。阻断谷氨酰胺代谢可抑制快速生长的肿瘤细胞增殖并诱导细胞死亡。与正常健康细胞不同，谷氨酰胺依赖性肿瘤高度依赖于内源性和外源性谷氨酰胺转化为谷氨酸及其代谢物，以提供能量并生成细胞生长和存活所需的大分子构建模块。
IPN-60090 也称为 IACS-6274。它是一种新型、高效、口服生物利用度高且选择性的 GLS1（肾型谷氨酰胺酶）抑制剂。 IPN-60090 对 GAC 亚型的 IC50 值为 31 nM，具有潜在的抗肿瘤和免疫刺激活性。它被用于 GLS1 介导的疾病和癌症代谢的研究。

C24H27F3N8O3

532.518194437027

532.22

C, 54.13; H, 5.11; F, 10.70; N, 21.04; O, 9.01

1853164-83-6

IPN60090 dihydrochloride;2102101-72-2; IPN60090;1853164-83-6; 2102101-78-8 (mesylate); 2102101-77-7 (sulfate); 2102101-80-2

118627280

Light yellow to yellow solid powder

1.6

137

2

11

11

38

804

1

CC1=CC(=CC(=N1)CC(=O)NC2=NN=C(C=C2)CC[C@H](CN3C=C(N=N3)C(=O)NC)F)OC4CC(C4)(F)F

GEHZIZWHNLQFAS-OAHLLOKOSA-N

InChI=1S/C24H27F3N8O3/c1-14-7-18(38-19-10-24(26,27)11-19)8-17(29-14)9-22(36)30-21-6-5-16(31-33-21)4-3-15(25)12-35-13-20(32-34-35)23(37)28-2/h5-8,13,15,19H,3-4,9-12H2,1-2H3,(H,28,37)(H,30,33,36)/t15-/m1/s1

1-[(2R)-4-[6-[[2-[4-(3,3-difluorocyclobutyl)oxy-6-methylpyridin-2-yl]acetyl]amino]pyridazin-3-yl]-2-fluorobutyl]-N-methyltriazole-4-carboxamide

IACS-6274; IACS6274; IACS 6274; IPN60090; CHEMBL4741924; 1-[(2R)-4-[6-[[2-[4-(3,3-difluorocyclobutyl)oxy-6-methylpyridin-2-yl]acetyl]amino]pyridazin-3-yl]-2-fluorobutyl]-N-methyltriazole-4-carboxamide; IACS6274; O6ZT4D087I; IPN 60090; IPN-60090

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO: 5~31.4 mg/mL (9.4~59.0 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 3.14 mg/mL (5.90 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 31.4 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。