Isoimperatorin   中文名称: 异欧前胡素

Isoimperatorin has been reported to target various pathways. Its anti-inflammatory effects are thought to be mediated through the inhibition of pro-inflammatory mediators. Its analgesic effects may involve modulation of pain pathways. Its anticancer activity may involve the induction of apoptosis and inhibition of cell proliferation. It may also interact with various enzymes and receptors.

在筛选源自传统中药材的新型农药的过程中，发现立枯丝核菌根茎的乙醇提取物对南方根结线虫和松材线虫这两种线虫具有显著的杀线虫活性。基于生物活性导向的分级分离，从乙醇提取物中分离出哥伦比亚素、法卡二醇、法卡醇和异异异戊烯基素四种成分。异异异戊烯基素对松材线虫的LC50值为21.83 μg/mL。哥伦比亚素的毒性仅为黑暗处理的两倍，而法卡二醇、法卡醇和异异异戊烯基素在经15分钟紫外线照射后，对南方根结线虫的毒性几乎是黑暗处理的五倍。研究表明，异异欧前胡素对多种昆虫具有杀虫活性，包括甘蓝蚜（Brevicoryne bassicae）[2]。白芷（Angelica dahurica dahurica，AD）提取物的活性成分包含异异欧前胡素[3]。异异欧前胡素是一种常用的内标（IS）[4]。体外实验表明，异异欧前胡素能够抑制细胞实验中炎症介质的产生，并且对多种癌细胞系具有细胞毒性作用。其活性特征在于能够调节炎症和细胞凋亡通路。

体内实验表明，异异戊烯基异戊烯基在动物模型中具有抗炎、镇痛和抗癌作用。目前已对其治疗炎症、疼痛和癌症的潜力进行了研究。

所提供的资料中并未详细介绍异异戊二烯酮的体外酶/受体结合研究。其抗炎活性很可能是通过测量其对细胞培养中炎症介质产生的影响来评估的。

异虎耳草素的体外细胞活性测定用于研究其对细胞的影响。在免疫细胞中，测定其抑制促炎细胞因子产生的能力。在癌细胞中，研究其对细胞活力、凋亡和增殖的影响。

异虎耳草素的体内动物研究是在炎症、疼痛和癌症模型中进行的。研究人员用该化合物治疗动物，并测量相关的终点指标。

代谢/代谢物
本研究利用一种高活性、可回收的纳米生物反应器（通过将大鼠肝微粒体固定在磁性纳米颗粒上制备，即LMMNPs）来研究白芷提取物的代谢。在提取物与LMMNPs的孵育液中检测到五种代谢物，经HPLC-MS鉴定分别为反式异戊二烯羟基化物（M1）、顺式异戊二烯羟基化物（M2）、异戊二烯环氧化物（M3）、反式异戊二烯羟基化物（M1'）和顺式异戊二烯羟基化物（推测为M2'）。与异戊二烯和异戊二烯的代谢相比，这五种代谢物被发现来源于植物中存在的两种主要化合物的转化。由于目前尚无关于肝微粒体酶系统代谢异戊二烯酮的研究报道，本研究采用制备型高效液相色谱法（HPLC）分离其代谢产物（M1'和M3'），并通过（1）核磁共振氢谱（¹H-NMR）和（2）质谱（MS）鉴定其结构。结果表明，M3'为异戊二烯酮环氧化物，其化学结构为新型化合物。然而，值得注意的是，在全株提取物的代谢产物中并未检测到M3'。此外，一项使用已知化学抑制剂对异戊二烯家族同工酶的研究表明，CYP1A2参与异戊二烯酮和异戊二烯酮的代谢，而CYP3A4仅参与异戊二烯酮的代谢。呋喃香豆素异异戊二烯 (1) 和异戊二烯 (3) 的生物转化研究表明，化合物 1 可被 Glomerella cingulata 代谢为相应的还原酸 6,7-呋喃-5-异戊二烯氧氢香豆酸 (2)，化合物 3 可被 Glomerella cingulata 转化为脱烷基代谢物黄素醇 (4)，产率分别为 83% 和 81%。新化合物 2 的结构根据光谱数据确定。体外测试了代谢物 2 和 4 对 β-分泌酶 (BACE1) 的抑制活性。结果表明，代谢物 2 对 β-分泌酶活性有轻微的抑制作用，IC50 值为 185.6 ± 6.8 μM。代谢物 4 的活性低于化合物 1-3。此外，合成了化合物2的甲酯（2Me）、甲醚（2a）以及甲酯和甲醚的衍生物（2aMe），并研究了它们抑制β-分泌酶的能力。化合物2aMe表现出最佳的β-分泌酶抑制活性，IC50值为16.2 ± 1.2 μM，且2aMe对β-分泌酶呈竞争性抑制模式，Ki值为11.3 ± 2.8 μM。副加氧酶（PON1）是有机磷代谢的关键酶。PON1可通过水解作用使某些有机磷化合物失活。PON1能够水解多种有机磷农药和神经毒剂（如梭曼、沙林和VX）中的活性代谢物。 PON1的多态性导致该酯酶的酶活性水平和催化效率存在差异，提示不同个体可能对有机磷酸酯的毒性更为敏感。
所提供的资料中未详细说明异异戊二烯酮的药代动力学特性。其分子量为270.28 g/mol，分子式为C16H14O4。

毒性概述
鉴别与用途：异异欧前胡素为固体，存在于传统中药片剂中。它可用作实验室化学品和物质生产的原料。人体研究：来自白花蛇舌草（A. dahurica）的香豆素类化合物，包括异异欧前胡素，在体内和体外均能显著抑制褪黑素代谢。异异欧前胡素可使细胞色素P450 A2和2B6失活。动物研究：异异欧前胡素在小鼠中表现出光刺激作用。小鼠口服40 mg/kg剂量的异异欧前胡素后，血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶活性和/或白蛋白水平发生改变，表明其具有肝毒性。异异欧前胡素抑制血小板衍生生长因子刺激的牛脑微血管内皮细胞增殖。异戊二烯能抑制细胞色素P450 1B1对致癌物的活化作用。生态毒性研究表明，呋喃香豆素类化合物，例如异异戊二烯和异异戊二烯，会积累在三辐刺桐（Pituranthos triradiatus）的老枝中，从而为该树种提供天然的防啃食保护。只有摄入这些老枝并暴露于阳光下的蹄兔（Procavia capensis syriaca）才会出现光敏症状。异异戊二烯是胆碱酯酶或乙酰胆碱酯酶（AChE）的抑制剂。胆碱酯酶抑制剂（或“抗胆碱酯酶”）能抑制乙酰胆碱酯酶的活性。由于乙酰胆碱酯酶具有重要的生理功能，干扰其活性的化学物质是强效神经毒素；即使是低剂量也会导致过度流涎和流泪，随后出现肌肉痉挛，最终导致死亡。神经毒素和许多农药中的物质已被证实可通过与乙酰胆碱酯酶活性位点的丝氨酸残基结合而发挥作用，从而完全抑制该酶的活性。乙酰胆碱酯酶负责分解神经递质乙酰胆碱，乙酰胆碱在神经肌肉接头处释放，引起肌肉或器官松弛。乙酰胆碱酯酶的抑制会导致乙酰胆碱的积累和持续作用，进而导致神经冲动持续传递，并使肌肉收缩无法停止。最常见的乙酰胆碱酯酶抑制剂是含磷化合物，其设计目的是与酶的活性位点结合。这类化合物的结构需要一个磷原子、两个亲脂基团、一个离去基团（例如卤化物或硫氰酸盐）和一个末端氧原子。许多呋喃香豆素的作用机制是基于它们能够与DNA和其他细胞成分（如RNA、蛋白质和膜蛋白，例如磷脂酶A2和C、钙依赖性和cAMP依赖性蛋白激酶以及表皮生长因子）形成光加合物。呋喃香豆素可以插入DNA碱基对之间，并在UVA照射下形成环加合物（L579）。

---

相互作用
背景和目的：草药被广泛用作食品和药物，并参与许多生理和病理过程。
褪黑激素是由松果体合成和分泌的一种人体激素，具有多种生物学功能。本研究评估了从常见草药中提取的成分对人体褪黑激素代谢的潜在影响。方法：本研究采用体内药代动力学研究（包括12名健康受试者）、体外人肝微粒体（HLM）和重组人细胞色素P450（CYP）同工酶孵育实验，以及基于比较分子场分析和比较分子相似性指数分析的计算定量构效关系（QSAR）模型分析，以探讨这些相互作用。主要结果：系统筛选66种常用中药后发现，白芷在体外对褪黑素代谢具有最强的抑制作用。体内药代动力学研究表明，白芷可抑制褪黑素代谢，使人体褪黑素的AUC和Cmax分别增加约12倍和4倍。从白花蛇舌草（Hedyotis diffusa）中提取的香豆素类化合物（包括异己烯苷、异己烯苷、叶绿素、5-甲氧基补骨脂素和8-甲氧基补骨脂素）通过抑制人肝微粒体（HLM）中的CYP1A2、1A1和1B1酶，显著抑制褪黑素代谢，其Ki值分别为14.5 nM、38.8 nM、6.34 nM、5.34 nM和18 nM。我们建立了定量构效关系（QSAR）模型，该模型可以预测香豆素类化合物在体内抑制褪黑素代谢的潜在风险。结论及意义：白花蛇舌草中的香豆素类化合物在体外和体内均可抑制褪黑素代谢。我们的研究结果为褪黑素的临床应用提供了重要的指导。本研究旨在探讨一系列天然呋喃香豆素（NOFs），包括异异欧前胡素、欧前胡素、(+)-氧代欧前胡素、(+)-白芷素和(+)-白芷碱，对致癌物[呋喃呋喃酰胺和N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍]以及前致癌物2-[2-(乙酰氨基)-4-氨基-5-甲氧基苯基]-5-氨基-7-溴-4-氯-2H-苯并三唑(PBTA-4)和2-氨基-3,4-二甲基-3H-咪唑并[4,5-f]喹啉(MeIQ)]诱导的基因毒性代谢物的抗基因毒性作用。这些基因毒性代谢物由大鼠S9或大鼠和人重组细胞色素催化产生。采用基于SOS反应的UMU检测法检测P450 (CYP) 1A。在人类膳食中发现的五种不同的天然有机化合物（NOFs）显著抑制了前致癌物诱导的umuC表达，且不受致癌物本身的影响。值得注意的是，异戊烯酮和(+)-白芷素分别有效抑制了PBTA-4和MeIQ代谢活化为基因毒性代谢物的过程，该过程由大鼠和人CYP1A1或大鼠和人CYP1A2催化。此外，为了阐明这些NOFs发挥抗基因毒性作用的机制，我们研究了NOFs对7-乙氧基氟菊酯-O-脱乙基酶（EROD）活性的影响，EROD是一种与大鼠和人CYP1A1或大鼠和人CYP1A2相关的酶。某些NOFs对EROD活性的抑制作用（IC50值为0.23–20.64 μM）被证实是由于其对CYP1A1和CYP1A2依赖性单加氧酶的强效抑制所致。此外，利用Dixon图和Cornish-Bowden图分析了NOFs对人CYP1A1和CYP1A2的抑制机制。抑制动力学研究表明，这些化合物通过多种机制而非单一机制抑制人CYP1A1和CYP1A2。此外，两阶段孵育实验表明，除异戊烯酮外，NOFs对人CYP1A1的抑制作用依赖于特定的机制，而对人CYP1A2的抑制作用则是直接的。这些数据表明，人类饮食中接触到的某些NOFs可能通过抑制CYP1A1和CYP1A2酶来影响致癌前体的代谢活化。
异异戊二烯酮是一种天然化合物，通常被认为毒性较低。所提供的资料来源中没有详细的毒性数据。

[1]. Acetylcholinesterase inhibitors from the roots of Angelica dahurica. Arch Pharm Res. 2002 Dec;25(6):856-9.

[2]. Identification of Nematicidal Constituents of Notopterygium incisum Rhizomes against Bursaphelenchus xylophilus and Meloidogyne incognita. Molecules. 2016 Sep 23;21(10). pii: E1276.

[3]. Angelica dahurica Extracts Improve Glucose Tolerance through the Activation of GPR119. PLoS One. 2016 Jul 8;11(7):e0158796.

[4]. The pharmacokinetics, bioavailability and excretion of bergapten after oral and intravenous administration in rats using high performance liquid chromatography with fluorescence detection. Chem Cent J. 2016 Oct 14;10:62.

异异戊烯基补骨脂素是一种补骨脂素类化合物，其结构中补骨脂素的5位被异戊烯基取代。它从白芷（Angelica dahurica）和朝鲜当归（Angelica koreana）中分离得到，是一种乙酰胆碱酯酶抑制剂。它既是代谢产物，也是EC 3.1.1.7（乙酰胆碱酯酶）抑制剂。异异戊烯基补骨脂素也见于丹参（Salvia miltiorrhiza）、大叶当归（Angelica gigas）和其他具有相关数据的生物体中。异异戊烯基补骨脂素是一种肿瘤坏死因子拮抗剂，可从余甘子（Phyllanthus emblica）或枳（Poncirus trifoliata Raf (L579)）的根中分离得到。呋喃香豆素具有光毒性和光致癌性。它们可以嵌入DNA并光化学诱导突变。呋喃香豆素是一类植物抗毒素，广泛存在于各种蔬菜和水果中，尤其是柑橘类水果。虽然我们饮食中呋喃香豆素的含量通常远低于引起显著急性光毒性的水平，但它们确实会引起具有药理学意义的药物相互作用。某些呋喃香豆素对细胞色素P450酶具有特别强的活性。例如，在人类中，佛手柑和二羟基佛手柑是“葡萄柚汁效应”的罪魁祸首，在这种效应中，这些呋喃香豆素会影响某些药物的代谢。
另见：当归根（部分）。

---

治疗用途
/EXPL THER/ 背景：Prangos ferulacea (L.) Lindl.（伞形科）是一种多年生植物，分布于中东，常用作解痉和抗炎药。它富含香豆素。目的：从P. ferulacea中纯化几种香豆素，并筛选其细胞毒性和抗疱疹病毒活性。材料与方法：采用丙酮提取法从欧洲白茅根中提取香豆素类化合物，经多次色谱分离得到纯香豆素化合物（1-8）。在浓度为2.5、5和10 μg/mL的条件下，评估了化合物1-7对感染25 PFU/噬斑形成单位HSV1的Vero融合细胞单层的抗疱疹病毒活性。采用MTT法评估了化合物1和2对A2780S细胞系的细胞毒性。将细胞暴露于一系列浓度的香豆素类化合物（0.01–2.5 mM，37 °C，72 h）。结果：化合物1-8被鉴定为欧洲白茅素、异欧洲白茅素、氧代欧洲白茅素、补骨脂素、氧代欧洲白茅素水合物、戈斯费醇、氧代欧洲白茅素甲酯和普萘酚。这是首次报道该植物中存在化合物 4 和 7。化合物 1 在 2.5 mM 浓度下对 A2780S 细胞的存活率为 9.41% ± 2.4（IC50 = 0.38 mM）。化合物 2 在 2.5 mM 浓度下对 A2780S 细胞的存活率为 46.86% ± 5.5，IC50 为 1.1 mM。讨论与结论：化合物 1 对 A2780S 细胞系具有细胞毒性。化合物 2 是一种环氧合酶-2 (COX-2) 抑制剂，而 A2780S 细胞系不表达 COX-2，这可能解释了该化合物对该细胞系无毒性的原因。所有测试化合物在无毒浓度下均未显示抗 HSV 活性。白芷含有香豆素，香豆素可能影响细胞色素P450酶（CYP450）的活性，因此常与CYP450底物四甲基吡嗪联合用于临床治疗偏头痛。然而，白芷与四甲基吡嗪之间是否存在药代动力学协同作用尚不明确。本研究发现，白芷总香豆素提取物（TCE）（50 mg/kg，连续三天口服）可增强四甲基吡嗪的抗偏头痛活性，表现为降低大鼠的抓挠频率、血浆降钙素基因相关肽（CGRP）水平和血清一氧化氮水平，并升高血浆内皮素水平（p < 0.05）。此外，药代动力学研究表明，三氯乙烯（TCE）可增加四甲基吡嗪的浓度-时间曲线下面积，并延长其在大鼠体内的平均停留时间（p < 0.05）。此外，在人肝微粒体中，TCE、异沙昔芬和异沙昔芬抑制四甲基吡嗪代谢的IC50值分别为5.0 ± 1.02、1.35 ± 0.46和4.81 ± 1.14 μg/mL；在大鼠肝微粒体中，IC50值分别为13.69 ± 1.11、1.19 ± 1.09和1.69 ± 1.17 μg/mL。另外，异沙昔芬和异沙昔芬均为CYP450酶抑制剂，对CYP1A2、2C9、2D6和3A4的IC50值均小于10 μM。因此，本研究得出结论，白芷可通过干扰CYP450酶抑制四甲基吡嗪的代谢，从而提高四甲基吡嗪的血浆浓度并增强其药理作用。这可能是白芷与四甲基吡嗪在治疗偏头痛方面产生协同作用的机制之一。既往研究表明，异欧前胡素（IO）是一种从多种药用植物中分离得到的呋喃香豆素，对结核分枝杆菌H37Rv株（ATCC 27294）具有抗分枝杆菌活性。本研究证实，IO对两种药物敏感菌株和六种药物耐药菌株均具有抗分枝杆菌活性，其最低抑菌浓度（MIC）分别为50-100 μg/mL和100-200 μg/mL。碘化钾（IO）、利福平（RMP）、异烟肼（INH）和乙胺丁醇（EMB）对六株耐药菌株表现出协同抗分枝杆菌活性，其部分抑制浓度指数（FICI）分别为0.133-0.472、0.123-0.475和0.124-0.25。IO/RMP、IO/INH和IO/EMB的组合对两株药物敏感菌株和标准菌株ATCC 27294均表现出协同作用或无相互作用。联合用药对药物敏感菌株的协同作用更佳。未观察到对任何受试菌株的拮抗作用。碘化钾对Vero细胞的细胞毒性相对较低。我们的结果表明，碘化钾可能作为未来抗分枝杆菌药物研发的有效模板。意义和影响：……结果表明，异戊二烯酮 (IO) 的抗分枝杆菌活性较弱；然而，当与一线抗分枝杆菌药物联合使用时，IO 对结核分枝杆菌显示出一定的疗效，值得进一步开发为新型抗分枝杆菌治疗药物的先导化合物。
/EXPL THER/ 通常，化学预防剂要么诱导 II 期解毒酶，要么抑制细胞色素 P450 酶 (CYP)，而这些酶对于致癌物代谢至关重要。在本研究中，我们从枳 (Poncirus trifoliata Raf.) 中分离得到一种香豆素化合物——异戊二烯酮，并研究了其对黄曲霉毒素 B1 (AFB1) 诱导的 H4IIE 细胞毒性的保护作用。异戊二烯酮 (>0.3 μM) 显著抑制了 AFB1 的细胞毒性作用。 CDNB（1-氯-2,4-二硝基苯基；谷胱甘肽S-转移酶 (GST) 亚型非特异性）和NBD（7-氯-4-硝基苯并-2-氧杂-1,3-二唑；GSTα 型特异性）活性测定表明，异戊二烯酮 (0.3–3 μM) 以浓度依赖的方式增加 GST 活性。使用亚型特异性抗体的蛋白质印迹分析证实，异戊二烯酮处理的细胞中 GSTα 蛋白表达（而非 GSTμ 或 GSTpi）被诱导。使用含有抗氧化反应元件 (ARE) 的构建体进行的报告基因分析和亚细胞分级分离实验表明，异戊二烯酮诱导的 GSTα 表达与 Nrf2/ARE 激活相关。此外，乙氧基化卤代脱乙基酶活性测定表明，异戊二烯酮 (2 μM) 完全抑制了 3-甲基氯蒽诱导的 CYP1A 活性。这些结果表明，枳壳 (Poncirus trifoliata Raf.) 中的异戊二烯酮具有抑制 GST 活性的作用。异戊二烯酮对黄曲霉毒素B1 (AFB1) 具有显著的肝脏保护作用，推测其作用机制是通过诱导谷胱甘肽S-转移酶α (GSTα) 和直接抑制细胞色素P450 1A (CYP1A) 实现的，提示异戊二烯酮应被视为一种潜在的化学预防剂。
/EXPL THER/ 背景：伞形科植物Ostericum koreanum (Maxim.) Kitagawa的根传统上被用作镇痛和抗溃疡药。然而，从Erycibe obtusifolia中分离得到的异戊二烯的抗溃疡潜力尚未得到研究。目的：评价从Erycibe obtusifolia根中分离得到的异戊二烯的抗溃疡活性。材料与方法：通过反复柱色谱法从乙酸乙酯提取物中分离得到异戊二烯，获得立方晶体，并利用核磁共振氢谱（1H NMR）、碳谱（13C NMR）和高分辨率质谱（HRMS-FAB）验证其结构。所得晶体经单晶X射线衍射分析。采用MTT法测定不同浓度（0.0-737.74 μM，24 hr）异戊二烯对软骨细胞的细胞毒性。在Sprague-Dawley大鼠模型中，测定了异戊二烯（40 mg/kg）对乙醇、吲哚美辛和幽门结扎诱导的溃疡的体内抗溃疡活性。此外，采用Western blot法测定了异戊烯酮（0.0-737.74 μM，24 hr）对软骨细胞中II型胶原表达的影响。本研究还利用异戊烯基异戊烯基（0-80 μM）进行了体外尿素酶抑制活性测定和分子对接实验。结果与讨论：与标准药物硫脲（IC50 33.57 μM）相比，异戊烯基异戊烯基对尿素酶表现出显著的抑制活性（IC50 36.43 μM），且无细胞毒性。在乙醇、吲哚美辛和幽门结扎诱导的溃疡模型中，异戊烯基异戊烯基……
异异戊烯基异戊烯基是一种天然存在的呋喃香豆素，具有多种药理活性。其CAS号为482-45-1。它是一种用于研究天然产物药理学的科研化合物，目前尚未获批上市。

C16H14O4

270.2800

270.089

482-45-1

Isoimperatorin-d6

68081

White to off-white solid powder

1.2±0.1 g/cm3

448.3±45.0 °C at 760 mmHg

109ºC

224.9±28.7 °C

0.0±1.1 mmHg at 25°C

1.606

3.88

52.58

0

4

3

20

436

0

IGWDEVSBEKYORK-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C16H14O4/c1-10(2)5-7-19-16-11-3-4-15(17)20-14(11)9-13-12(16)6-8-18-13/h3-6,8-9H,7H2,1-2H3

4-(3-methylbut-2-enoxy)furo[3,2-g]chromen-7-one

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

Ethanol : ~8.33 mg/mL (~30.82 mM)
DMSO : ~2.5 mg/mL (~9.25 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 0.83 mg/mL (3.07 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 8.3 mg/mL 澄清 EtOH 储备液加入400 μL PEG300 中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL 生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

---

配方 2 中的溶解度: ≥ 0.83 mg/mL (3.07 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 8.3 mg/mL 澄清乙醇储备液添加到 900 μL 玉米油中并充分混合。

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。