| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
GPX4/glutathione peroxidase 4
JKE-1674 targets glutathione peroxidase 4 (GPX4). GPX4 is a key enzyme that protects cells from lipid peroxidation. Inhibition of GPX4 leads to ferroptosis, a form of regulated cell death. JKE-1674 is an active metabolite of ML-210 and an analog of ML-210. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在细胞靶点结合实验中，JKE-1674 和 ML210 表现出相同的作用，包括在细胞内生成相同的 +434Da GPX4 加合物。与 ML210 类似，JKE-1674 可杀死 LOX-IMVI 细胞，但铁死亡抑制剂可完全阻止这种细胞死亡。在细胞内，JKE-1674 生成氧腈亲电体。JKE-1674 脱氢形成氧化腈亲电体，该亲电体可与 GPX4 结合。与氯乙酰胺抑制剂相比，JKE-1674 具有更高的稳定性 [1]。体外实验表明，JKE-1674 可降低 LOX-IMVI 癌细胞的活力，EC50 为 0.03 µM，并且在多种其他癌细胞系中也观察到类似结果。其作用可被铁死亡抑制剂 ferrostatin-1 阻断。它是一种口服有效的 GPX4 抑制剂。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在口服（50 mg/kg；口服）药物的小鼠血清中可检测到 JKE-1674 [1]。
在体内，JKE-1674 是一种口服有效的 GPX4 抑制剂，用于在动物研究中诱导铁死亡。然而，现有文献中并未详细描述其在动物模型中的具体体内疗效数据。 |
| 酶活实验 |
GPX4活性测定。[1]
基于质谱的GPX4酶活性测定方法参考了先前报道的方法4。将LOX-IMVI细胞用指定化合物（10 μM）或DMSO在37 °C下处理1小时。用PBS洗涤细胞，并在GPX4反应缓冲液（137 mM NaCl、2.7 mM KCl、10 mM Na2HPO4、1.8 mM KH2PO4、1 mM EDTA、0.1 mM DFO；pH 7.4）中通过冻融法（×3）裂解细胞。裂解液经离心（10分钟，20000 × g，4 °C）澄清，并将总蛋白浓度调整至1.67 mg/mL。典型的酶活性测定混合物制备如下：200 μL 裂解液（GPX4 反应缓冲液中浓度为 1.67 mg/mL），2 μL PCOOH 的甲醇溶液，以及 20 μL GSH 溶液（100 mM；终浓度约为 5 mM）。反应体系短暂涡旋混匀后，于 37 °C 孵育 15 分钟。然后用 250 μL 2:1 氯仿/甲醇 (v/v) 溶液萃取反应混合物。萃取液在氮气流下干燥，并用甲醇复溶后进行分析。[1] 采用与 Xevo G2XS QToF 质谱仪联用的 Acquity RP UPLC 系统进行 LC-MS 分析。复溶后的萃取液在 Waters Acquity RP UPLC BEH-C18 色谱柱（2.1 × 50 mm；1.7 μm 粒径；45 °C）上进行分离。流动相由10 mM乙酸铵水溶液（溶剂A）和95:5乙腈/10 mM乙酸铵混合溶液（溶剂B）组成。总运行时间为8分钟。UPLC洗脱液通过正离子模式电喷雾电离导入质谱仪。离子源设置如下：锥孔温度120 °C，锥电压50 V，毛细管电压1 kV，脱溶剂温度500 °C，脱溶剂气流速1100 L/h。质谱实验在灵敏度模式下进行，分辨率为20,000，质量精度<1 ppm。锁定质量（Leu-Enk，m/z 556.2771）以5 μL/min的流速连续注入，每15秒采样一次。使用MassLynx和TargetLynx软件进行质谱分析、PCOOH鉴定和化学式确认分析。 细胞热位移分析 (CETSA)[1] 对于完整细胞的 CETSA 实验，细胞预先用 10 μM 化合物或 DMSO 对照 (0.1%, v/v) 在 37 °C 下处理 1 小时。然后吸出培养基，并用 PBS (pH 7.4) 洗涤细胞。用胰蛋白酶-EDTA 将贴壁细胞从培养瓶中消化下来，并通过离心 (500 × g，5 分钟) 收集细胞沉淀。将细胞分装到 PCR 管中（50 μL 体积，每个条件约 100 万个细胞），在 PCR 仪中于不同温度（通常为 40–67 °C，以 3 °C 为增量）加热 3 分钟。样品冷却至室温后再放置 3 分钟。细胞裂解方法有两种：一是液氮中经三次冻融循环；二是加入 Triton X-100 溶液（终浓度 1%，PBS，pH 7.4），冰上孵育 20 分钟，期间偶尔涡旋振荡。裂解后，细胞经离心（20,000 rcf，4℃，20 分钟）去除不溶性物质。可溶性部分经仔细分离后，用 6× SDS 上样缓冲液稀释，用于 SDS-PAGE 和蛋白质印迹分析。 JKE-1674 的体外酶活性测定包括测量其对 GPX4 活性的抑制作用。GPX4 催化脂质氢过氧化物的还原。抑制作用通过测量酶活性的降低来评估。 |
| 细胞实验 |
细胞活力实验中，将1000个细胞/孔（30 μL体积）接种于不透明的白色384孔板中。细胞贴壁培养24小时后，用化合物处理72小时。使用CyBio Well Vario液体分配器将化合物的DMSO储备液加入细胞中。使用CellTiter-Glo测定细胞ATP水平，以此作为细胞活力的替代指标。在细胞接种时，加入ferrostatin-1 (fer-1; 1.5 μM)、liproxstatin-1 (lip-1; 1 μM)、去铁胺(DFO; 50 μM)或齐留通(10 μM)进行拯救实验。[1]
JKE-1674的体外细胞实验包括用该化合物处理癌细胞，并评估细胞活力和脂质过氧化水平。测定出降低LOX-IMVI细胞活力的EC50值为0.03 µM。用ferrostatin-1进行的挽救实验证实了铁死亡的诱导。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： SCID（重症联合免疫缺陷）小鼠[1]
剂量： 50 mg/kg（药代动力学/PK/PK 分析） 给药途径： 口服 实验结果： 口服该化合物的小鼠血清中可检测到该化合物。 JKE-1674 的体内动物研究可能涉及癌症异种移植小鼠模型。荷瘤小鼠将接受口服该化合物治疗，并监测肿瘤生长抑制情况。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
所提供的文献中未详细描述JKE-1674的药代动力学性质。该化合物可口服，且溶于DMSO。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
所提供的文献中没有关于JKE-1674的具体毒性数据。该化合物仅供研究使用。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
我们近期报道了谷胱甘肽过氧化物酶4 (GPX4) 是一种通过铁死亡途径杀伤耐药癌细胞的潜在靶点。对多种疗法的耐药性会导致细胞进入一种稳定状态，其特征是多不饱和脂质水平升高以及对GPX4的依赖性增强。然而，目前所有GPX4抑制剂均通过活性烷基氯部分以共价方式发挥作用，导致选择性和药代动力学性质较差。在此，我们报道了一项新发现：此前未用作共价细胞探针的亲电掩蔽腈氧化物在细胞内发生显著的化学转化，为选择性靶向GPX4提供了一种高效策略。我们新型的GPX4抑制剂表现出出乎意料的蛋白质组范围选择性，并且在某些情况下，与现有的基于氯乙酰胺的GPX4抑制剂相比，其理化性质和药代动力学性质显著改善。这些特性使其成为研究铁死亡生物学机制的优秀工具化合物，并为开发更有效的GPX4抑制剂奠定了基础。 [1] GPX4抑制诱导的铁死亡有望用于杀死耐药癌细胞，但目前的GPX4抑制剂缺乏选择性。掩蔽的腈氧化物亲电试剂作为GPX4选择性前药抑制剂的发现，为化学诱导铁死亡提供了一条极具吸引力的途径。[2] JKE-1674是一种GPX4抑制剂，也是ML-210的活性代谢物。它能诱导铁死亡。它能降低LOX-IMVI细胞的存活率，EC50值为0.03 µM。该化合物仅供研究使用。其CAS号为2421119-60-8。
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| 分子式 |
C20H20CL2N4O4
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|---|---|
| 分子量 |
451.303202629089
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| 精确质量 |
450.086
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| 元素分析 |
C, 53.23; H, 4.47; Cl, 15.71; N, 12.41; O, 14.18
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| CAS号 |
2421119-60-8
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| PubChem CID |
145865941
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
595.5±60.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
313.9±32.9 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.8 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.651
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| LogP |
3.35
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| tPSA |
102
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
30
|
| 分子复杂度/Complexity |
599
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C1CN(CCN1C(C2=CC=C(C=C2)Cl)C3=CC=C(C=C3)Cl)C(=O)/C(=N/O)/C[N+](=O)[O-]
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| InChi Key |
XIOHKIAPXVDWCP-PTGBLXJZSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H20Cl2N4O4/c21-16-5-1-14(2-6-16)19(15-3-7-17(22)8-4-15)24-9-11-25(12-10-24)20(27)18(23-28)13-26(29)30/h1-8,19,28H,9-13H2/b23-18+
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| 化学名 |
(2E)-1-[4-[bis(4-chlorophenyl)methyl]piperazin-1-yl]-2-hydroxyimino-3-nitropropan-1-one
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| 别名 |
JKE-1674; (E)-1-(4-(bis(4-chlorophenyl)methyl)piperazin-1-yl)-2-(hydroxyimino)-3-nitropropan-1-one; 2421119-60-8; (2E)-1-[4-[bis(4-chlorophenyl)methyl]piperazin-1-yl]-2-hydroxyimino-3-nitropropan-1-one; SCHEMBL25854799; JKE1674;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~221.58 mM)
Ethanol :≥ 50 mg/mL (~110.79 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 5 mg/mL (11.08 mM) in 10% EtOH + 90% PEG400 (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.54 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.54 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2158 mL | 11.0791 mL | 22.1582 mL | |
| 5 mM | 0.4432 mL | 2.2158 mL | 4.4316 mL | |
| 10 mM | 0.2216 mL | 1.1079 mL | 2.2158 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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