| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
GPX4/glutathione peroxidase 4
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| 体外研究 (In Vitro) |
在细胞靶标参与实验中，JKE-1674 和 ML210 显示出相同的作用，包括在细胞中产生相同的 +434Da GPX4 加合物。与 ML210 类似，JKE-1674 杀死 LOX-IMVI 细胞，但铁死亡抑制剂完全阻止了这种死亡。在细胞中，JKE-1674 产生氧腈亲电子试剂。 JKE-1674 脱氢酶形成结合 GPX4 的氧化腈亲电子试剂。与氯乙酰胺抑制剂相比，JKE-1674具有更高的稳定性[1]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
JKE-1674 可以在口服药物（50 mg/kg；口服）的小鼠血清中找到[1]。
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| 酶活实验 |
GPX4活性测定。[1]
基于质谱的GPX4酶活性测定改编自之前描述的程序4。LOX-IMVI细胞在37°C下用指定化合物（10μM）或DMSO处理1小时。用PBS洗涤细胞，并在GPX4反应缓冲液（137 mM NaCl、2.7 mM KCl、10 mM Na2HPO4、1.8 mM KH2PO4、1 mM EDTA、0.1 mM DFO；pH 7.4）中通过冻融法（x3）裂解细胞。通过离心（10分钟，20000×g，4°C）清除裂解物，并将总蛋白浓度调节至1.67mg/mL。典型的酶活性测定混合物制备如下：200μL裂解物（在GPX4反应缓冲液中为1.67mg/mL），2μL甲醇中的PCOOH，以及20μL谷胱甘肽溶液（100mM；终浓度约5mM）。将反应物短暂涡旋，并在37°C下孵育15分钟。然后使用250μL 2:1氯仿/甲醇（v/v）溶液提取反应混合物。提取物在氮气流下干燥，并在分析前在甲醇中复溶。 [1] 使用Acquity RP UPLC系统与Xevo G2XS QToF质谱仪进行LC-MS分析。在Waters Acquity RP UPLC BEH-C18柱（2.1×50 mm；1.7μm粒径；45°C）上分离重构提取物。流动相由10mM乙酸铵水溶液（溶剂A）和95:5乙腈/10mM乙酸铵（溶剂B）组成。总运行时间为8分钟。通过正模式电喷雾电离将UPLC洗脱液引入质谱仪。源设置为120°C、50 V锥电压、1 kV毛细管电压、500°C脱溶剂温度和1100 L/h脱溶剂气体流量。质谱实验在灵敏度模式下进行，分辨率为20000，质量精度<1ppm。以5μL/分钟的速度连续输注锁块（Leu-Enk，m/z 556.2771），每15秒取样一次。MassLynx和TargetLynx软件用于质谱分析、PCOOH鉴定和化学式确认分析。 细胞热位移测定（CETSA）。[1] 对于完整细胞CETSA实验，细胞在37°C下用10μM化合物或DMSO对照（0.1%，v/v）预处理1小时。然后抽吸培养基，用PBS（pH 7.4）洗涤细胞。用胰蛋白酶-EDTA将粘附细胞从烧瓶中分离出来，并通过离心（500×g，5分钟）制成颗粒。将细胞等分到PCR管（50μL体积，约100万个细胞/条件）中，在热循环仪中以不同温度（通常为40-67°C，增量为3°C）加热3分钟。让样品再冷却至室温3分钟。细胞在液氮中通过三次冻融循环或加入Triton X-100溶液（1%最终TX-100体积，PBS pH 7.4）进行裂解，随后在冰上孵育20分钟，偶尔涡旋。裂解后，将细胞离心（在20000 rcf、4°C下离心20分钟）以去除不溶性物质。仔细分离可溶性部分，并用6x SDS负载缓冲液稀释，用于SDS-PAGE和蛋白质印迹分析。 |
| 细胞实验 |
通过在不透明的白色384孔板中接种1000个细胞/孔（30μL体积）进行细胞存活率实验。允许细胞粘附24小时，之后将其暴露于化合物72小时。使用CyBio-Well Vario液体分配器将化合物的DMSO储备溶液加入细胞中。使用CellTiter Glo作为存活率的替代物来测量细胞ATP水平。在接种时，使用添加到细胞中的fer-statin-1（fer-1；1.5μM）、liproxstatin-1（lip-1；1μM），去铁胺（DFO；50μM）或齐留通（10μM）进行救援实验。[1]
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| 动物实验 |
动物/疾病模型： SCID（严重联合免疫缺陷）小鼠[1]
剂量： 50 mg/kg（药代动力学/PK/PK 分析） 给药途径： 口服 实验结果： 可在口服该化合物的小鼠血清中检测到。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
我们近期报道了谷胱甘肽过氧化物酶4 (GPX4) 是一种有前景的靶点，可通过铁死亡途径杀死耐药癌细胞。多种治疗方法导致的耐药性会使细胞进入一种稳定的状态，其特征是多不饱和脂质水平升高以及对GPX4的依赖性增强。然而，目前所有GPX4抑制剂均通过活性烷基氯部分以共价方式发挥作用，这导致其选择性和药代动力学性质较差。在此，我们报道了我们的一项新发现：此前未被用作共价细胞探针的掩蔽腈氧化物亲电试剂在细胞内会发生显著的化学转化，从而为选择性靶向GPX4提供了一种有效策略。我们描述的新型GPX4抑制剂展现出意想不到的蛋白质组范围选择性，并且在某些情况下，与现有的基于氯乙酰胺的GPX4抑制剂相比，其理化性质和药代动力学性质得到了显著改善。这些特性使它们成为研究铁死亡生物学机制的优良工具化合物，并为开发更有效的GPX4抑制剂奠定了基础。[1]
GPX4抑制诱导的铁死亡有望用于杀死耐药癌细胞，但目前的GPX4抑制剂缺乏选择性。掩蔽的腈氧化物亲电试剂作为GPX4选择性前药抑制剂的发现，为化学诱导铁死亡提供了一条极具吸引力的途径。[2] |
| 分子式 |
C20H20CL2N4O4
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|---|---|
| 分子量 |
451.303202629089
|
| 精确质量 |
450.086
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| 元素分析 |
C, 53.23; H, 4.47; Cl, 15.71; N, 12.41; O, 14.18
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| CAS号 |
2421119-60-8
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| PubChem CID |
145865941
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
595.5±60.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
313.9±32.9 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.8 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.651
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| LogP |
3.35
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| tPSA |
102
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
30
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| 分子复杂度/Complexity |
599
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C1CN(CCN1C(C2=CC=C(C=C2)Cl)C3=CC=C(C=C3)Cl)C(=O)/C(=N/O)/C[N+](=O)[O-]
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| InChi Key |
XIOHKIAPXVDWCP-PTGBLXJZSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H20Cl2N4O4/c21-16-5-1-14(2-6-16)19(15-3-7-17(22)8-4-15)24-9-11-25(12-10-24)20(27)18(23-28)13-26(29)30/h1-8,19,28H,9-13H2/b23-18+
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| 化学名 |
(2E)-1-[4-[bis(4-chlorophenyl)methyl]piperazin-1-yl]-2-hydroxyimino-3-nitropropan-1-one
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| 别名 |
JKE-1674; (E)-1-(4-(bis(4-chlorophenyl)methyl)piperazin-1-yl)-2-(hydroxyimino)-3-nitropropan-1-one; 2421119-60-8; (2E)-1-[4-[bis(4-chlorophenyl)methyl]piperazin-1-yl]-2-hydroxyimino-3-nitropropan-1-one; SCHEMBL25854799; JKE1674;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~221.58 mM)
Ethanol :≥ 50 mg/mL (~110.79 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 5 mg/mL (11.08 mM) in 10% EtOH + 90% PEG400 (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.54 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.54 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2158 mL | 11.0791 mL | 22.1582 mL | |
| 5 mM | 0.4432 mL | 2.2158 mL | 4.4316 mL | |
| 10 mM | 0.2216 mL | 1.1079 mL | 2.2158 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
AOH-1996
hMAO-B-IN-3
Flupyrimin
阿曲库铵
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