ML323

别名: ML-323; ML 323; ML323.

目录号: V1330 纯度: ≥98%

COA 产品数据产品说明书 SDS

ML323 (ML-323; ML 323) 是一种新型、有效、高选择性的 USP1-UAF1 抑制剂，具有潜在的抗肿瘤活性。

ML323 CAS号: 1572414-83-5
产品类别: DUB

产品仅用于科学研究，不针对患者销售

规格	价格	库存	数量
10mg
25mg
50mg
100mg
250mg
500mg
Other Sizes

加入购物车结帐大包装询价

020-31522723 sales@invivochem.cn

点击了解更多

与全球5000+客户建立关系
覆盖全球主要大学、医院、科研院所、生物/制药公司等
产品被大量CNS顶刊文章引用

InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用

Nature 2021, 597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022: 8, eabm9427.

Nature 597, 119–125 (2021)

Cell Stem Cell 2020,26(6):845-861.e12.

Science Trans Med 2023,15(701):eadd7872.

STTT 2023,8(1):91.

Cell Reports 2023,42(4):112313

Science Trans Med 2023, 15: eadd7872.

Cancer Cell 2021,39(4):529-547.e7.

Cancer Discov 2022,12(4):1106-1127.

Immunity 2023,56(3):620-634.e11.

J Am Chem Soc 2022,144:21831-21836.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022:8,eabm9427.

Nature 2021,597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

PNAS Nexus 2022,1(3):pgac063.

ACS Nano 2023,17(10):9110-9125.

Biomaterial 2023 Sep16:302:122333.

纯度/质量控制文件

批次：

纯度: ≥98%

COA

MSDS

产品说明书

产品描述
生物活性&实验参考方法
化学信息
溶解度数据
计算器
生物数据图片
相关产品

产品描述

ML323 (ML-323; ML 323) 是一种新型、有效、高选择性的 USP1-UAF1 抑制剂，具有潜在的抗肿瘤活性。它抑制 USP1-UAF1，IC50 为 76 nM。 ML323 抑制 USP1-UAF1 去泛素酶复合物，对人 DUB、deSUMOylase、deneddylase 和不相关的蛋白酶具有出色的选择性。 ML323 将去泛素化与 DNA 损伤反应联系起来。 ML323 增强顺铂对非小细胞肺癌和骨肉瘤细胞的细胞毒性。 USP1-UAF1 是 DNA 损伤反应的关键调节因子，也是克服铂类抗癌药物耐药性的靶点。

生物活性&实验参考方法

靶点

USP1-UAF1, in Ub-Rho assay(IC50=76 nM);USP1-UAF1(Ki= 68 nM)

体外研究 (In Vitro)

体外活性：ML323 通过抑制 H596 细胞中的 USP1-UAF1 活性来抑制 PCNA 和 FANCD2 的去泛素化。此外，ML323 通过靶向两种主要的 DNA 损伤反应途径（TLS 和 FA），增强顺铂对 NSCLC H596 细胞和 U2OS 骨肉瘤细胞的细胞毒性。激酶测定：对于 HTS，使用泛素-罗丹明 110 作为底物监测 USP1-UAF1 活性，其中泛素 C 端甘氨酸和罗丹明之间的酰胺键水解导致荧光增加。该测定在 1,536 孔格式中小型化至 4 μL 体积，用于在定量 HTS 模式下筛选大约 402,701 种化合物，每种化合物在四到五个浓度范围内进行测试。该测定显示出稳健的性能，整个屏幕的平均 Z' 因子为 0.8。细胞测定：对于集落形成测定，细胞以每孔 300-500 个细胞的密度接种在六孔板中并生长过夜。然后用指定浓度的单独 ML323、单独顺铂或顺铂和 ML323 组合（1:1 或 1:4）处理细胞。用等体积的DMSO和盐水处理的细胞用作对照。处理 48 小时后，添加新鲜生长培养基，并将细胞再培养 5-10 天，以形成集落。对于 UV 组合处理，用指定浓度的 ML323 或等体积的 DMSO 处理细胞。 48小时后，除去培养基，并以指定剂量在254 nm处照射细胞。添加新鲜的生长培养基，并将细胞再培养 5-10 天，以形成集落。将未经UV照射但用ML323或等体积DMSO处理的细胞作为对照并指定为100%。集落形成后，用甲醇固定细胞并用0.5%结晶紫染色。对由 >50 个细胞组成的集落进行评分。菌落数由一式三份的平板确定。使用 GraphPad Prism 生成剂量反应曲线，并使用 CalcuSyn 进行分析以计算组合指数，该指数是针对添加固定比例的顺铂和 USP1-UAF1 抑制剂后受影响的细胞分数确定的。

酶活实验

ML-323 以 10 μM 单剂量重复测试，用于 DUB 分析。作为底物，Ub-7-amido-4-methylcoumarin (AMC) 用于追踪 DUB 活性。斜率的初始线性部分（信号/分钟）是随时间分析的游离 AMC 荧光信号增加的唯一部分。当酶不含化合物时，其活性为 100%。 ML-323 从 20 μM 开始针对 70 种蛋白酶进行三倍系列稀释，以进行蛋白酶分析。在添加适当的酶底物之前，将化合物与蛋白酶预孵育五到十五分钟。通过分析荧光标记肽的荧光信号，可以确定酶的活性[1]。

细胞实验

使用 CCK-8 溶液，细胞计数试剂盒 (CCK) 测定可确定细胞的活力。在六孔板中，细胞以每孔 300-500 个细胞的密度接种，用于集落形成测定，并在那里生长一整晚。然后，在指定浓度下，用单独的 ML-323、单独的顺铂或顺铂和 ML-323 的组合（1:1 或 1:4）处理细胞。作为对照，使用用相同体积的 DMSO 和盐水处理的细胞。为了实现集落形成，处理 48 小时后添加新鲜的生长培养基，然后将细胞再孵育 5-10 天。使用推荐浓度的 ML-323 或等体积的 DMSO 处理细胞以进行 UV 组合治疗。 48小时后除去培养基，并对细胞施加规定剂量的254 nm辐射。为了形成集落，添加新鲜的生长培养基，并将细胞再培养五到十天。作为对照，未暴露于紫外线但用 ML-323 或等量 DMSO 处理的细胞表示为 100%。集落形成后，用甲醇固定细胞并用 0.5% 结晶紫染色。细胞数超过 50 个的集落会被评分。一式三份的板用于计算菌落数。使用 GraphPad Prism 创建剂量反应曲线，并使用 CalcuSyn 进行分析以确定组合指数，该指数基于添加固定的后受影响细胞的百分比顺铂和 USP1-UAF1 抑制剂的比例[1]。

动物实验

参考文献

[1]. A selective USP1-UAF1 inhibitor links deubiquitination to DNA damage responses. Nat Chem Biol. 2014 Apr;10(4):298-304.

[2]. Discovery of ML323 as a Novel Inhibitor of the USP1/UAF1 Deubiquitinase Complex. National Center for Biotechnology Information; 2010-2012 Oct 23.

*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性

化学信息 & 存储运输条件

分子式

C23H24N6

分子量

384.480

精确质量

384.21

元素分析

C, 71.85; H, 6.29; N, 21.86

CAS号

1572414-83-5

相关CAS号

1572414-83-5

外观&性状

white solid powder

SMILES

CC1=CN=C(C2=CC=CC=C2C(C)C)N=C1NCC3=CC=C(N4N=NC=C4)C=C3

InChi Key

VUIRVWPJNKZOSS-UHFFFAOYSA-N

InChi Code

InChI=1S/C23H24N6/c1-16(2)20-6-4-5-7-21(20)23-24-14-17(3)22(27-23)25-15-18-8-10-19(11-9-18)29-13-12-26-28-29/h4-14,16H,15H2,1-3H3,(H,24,25,27)

化学名

N-(4-(1H-1,2,3-triazol-1-yl)benzyl)-2-(2-isopropylphenyl)-5-methylpyrimidin-4-amine

别名

ML-323; ML 323; ML323.

HS Tariff Code

2934.99.9001

存储方式

Powder -20°C 3 years

4°C 2 years

In solvent -80°C 6 months

-20°C 1 month

运输条件

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

溶解度数据

溶解度 (体外)	DMSO : 49~76 mg/mL ( 127.44~197.66 mM ) Ethanol : ~38 mg/mL
溶解度 (体内)	Solubility in Formulation 1: ≥ 2.5 mg/mL (6.50 mM) (saturation unknown) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution. For example, if 1 mL of working solution is to be prepared, you can add 100 μL of 25.0 mg/mL clear DMSO stock solution to 400 μL PEG300 and mix evenly; then add 50 μL Tween-80 to the above solution and mix evenly; then add 450 μL normal saline to adjust the volume to 1 mL. Preparation of saline: Dissolve 0.9 g of sodium chloride in 100 mL ddH₂ O to obtain a clear solution. Solubility in Formulation 2: ≥ 2.5 mg/mL (6.50 mM) (saturation unknown) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution. For example, if 1 mL of working solution is to be prepared, you can add 100 μL of 25.0 mg/mL clear DMSO stock solution to 900 μL of 20% SBE-β-CD physiological saline solution and mix evenly. Preparation of 20% SBE-β-CD in Saline (4°C，1 week): Dissolve 2 g SBE-β-CD in 10 mL saline to obtain a clear solution. View More Solubility in Formulation 3: ≥ 2.5 mg/mL (6.50 mM) (saturation unknown) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution. For example, if 1 mL of working solution is to be prepared, you can add 100 μL of 25.0 mg/mL clear DMSO stock solution to 900 μL of corn oil and mix evenly. 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

溶解度 (体外)

DMSO : 49~76 mg/mL ( 127.44~197.66 mM )
Ethanol : ~38 mg/mL

溶解度 (体内)

Solubility in Formulation 1: ≥ 2.5 mg/mL (6.50 mM) (saturation unknown) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution.
For example, if 1 mL of working solution is to be prepared, you can add 100 μL of 25.0 mg/mL clear DMSO stock solution to 400 μL PEG300 and mix evenly; then add 50 μL Tween-80 to the above solution and mix evenly; then add 450 μL normal saline to adjust the volume to 1 mL.
Preparation of saline: Dissolve 0.9 g of sodium chloride in 100 mL ddH₂ O to obtain a clear solution.

Solubility in Formulation 2: ≥ 2.5 mg/mL (6.50 mM) (saturation unknown) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution.
For example, if 1 mL of working solution is to be prepared, you can add 100 μL of 25.0 mg/mL clear DMSO stock solution to 900 μL of 20% SBE-β-CD physiological saline solution and mix evenly.
Preparation of 20% SBE-β-CD in Saline (4°C，1 week): Dissolve 2 g SBE-β-CD in 10 mL saline to obtain a clear solution.

View More

Solubility in Formulation 3: ≥ 2.5 mg/mL (6.50 mM) (saturation unknown) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution.
For example, if 1 mL of working solution is to be prepared, you can add 100 μL of 25.0 mg/mL clear DMSO stock solution to 900 μL of corn oil and mix evenly.

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

制备储备液		1 mg	5 mg	10 mg
	1 mM	2.6009 mL	13.0046 mL	26.0092 mL
	5 mM	0.5202 mL	2.6009 mL	5.2018 mL
	10 mM	0.2601 mL	1.3005 mL	2.6009 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器

质量

浓度

体积

分子量*

计算重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度

参见示例

使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？

在分子量（MW）框中输入350.26
在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。

浓度 (起始)

体积 (起始)

浓度 (终)

体积 (终)

计算重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：

在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中

分子式

分子量

g/mol

计算重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4 c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：

要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。

分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：

分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。

配液体积

质量

配液浓度

计算重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
单击“计算”按钮
答案显示在体积框中

动物体内实验配方计算器（澄清溶液）

第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）

给药剂量 mg/kg

动物平均体重 g

每只动物给药体积 μL

动物数量

第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。

% DMSO

% Tween 80

% ddH₂O

计算重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH₂O，混匀澄清。

注意： (1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

生物数据图片

ML323 is a potent USP1-UAF1 inhibitor through a mixed inhibition mechanism. [1].A selective USP1-UAF1 inhibitor links deubiquitination to DNA damage responses. Nat Chem Biol. 2014 Apr;10(4):298-304.
Selective inhibition of USP1 by ML323 revealed by DUB profiling. [1].A selective USP1-UAF1 inhibitor links deubiquitination to DNA damage responses. Nat Chem Biol. 2014 Apr;10(4):298-304.
The effect of inhibiting USP1-UAF1 by ML323 in the TLS and FA pathways.[1].A selective USP1-UAF1 inhibitor links deubiquitination to DNA damage responses. Nat Chem Biol. 2014 Apr;10(4):298-304.