| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 体外研究 (In Vitro) |
MS402 能剂量依赖性地选择性抑制小鼠初始CD4+ T细胞分化为辅助性T细胞17 (Th17)（例如，在测试浓度范围内，IL-17+细胞百分比从18.6%降至8.0%）。它对Th1细胞分化有适度影响（IFN-γ+细胞从49.7%降至38.6%），对Th2（IL-4表达）或调节性T细胞（Treg，Foxp3表达）的分化几乎没有影响。
MS402 能剂量依赖性地抑制Th17特征基因（如 rorc, il17a）的mRNA表达，适度影响Th1基因（tbx21/T-bet, ifng），对Th2（gata3, il4）或Treg（foxp3, il10）基因影响甚微。 MS402 处理降低了 il17a/f 和 rorc 基因座上的Brd4和Cdk9占据以及RNA聚合酶II Ser2磷酸化水平，这些是转录延伸的关键。 MS402 不影响T细胞增殖。 基因组分析（ChIP-seq, RNA-seq）显示，与泛BET抑制剂JQ1相比，MS402 能有效降低Brd4在Th17特征基因位点和超级增强子上的占据并下调其转录，但对看家基因影响较小。[1] |
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| 体内研究 (In Vivo) |
用从 C57BL/6 小鼠淋巴结和脾脏获得的初始 CD4+CD45RBhi 细胞重建 4 周后，Rag1-/- 动物开始体重减轻。 MS402（10 mg/kg；腹腔注射，每周两次，持续 3 周）引起的体重减轻显着减少[1]。
在Rag1−/−小鼠的T细胞转移诱导性结肠炎预防模型中，腹腔注射 MS402（10 mg/kg，每周两次，持续7周，从第0周开始）显著减轻了体重下降，改善了结肠缩短和炎症，并导致更低的疾病组织病理学评分（0-1分，对照组为3分）。 在治疗模型中（在细胞移植后第5周结肠炎已形成时开始治疗），MS402（10 mg/kg，每周两次，持续3周）逆转了体重下降，改善了结肠病理，并降低了炎症评分。 结肠组织的流式细胞术分析显示，MS402 治疗显著降低了产生IL-17和IFN-γ的CD4+ T细胞比例，且在治疗模型中对Th17细胞的影响更为显著。 与疾病对照组相比，MS402 治疗组小鼠结肠中关键细胞因子（il17, il21, il22, il6, ifng）和转录因子（rorc, T-bet）的mRNA水平显著降低。[1] |
| 酶活实验 |
使用结合实验测定抑制常数 (Ki)。可能采用荧光偏振或类似的结合实验，测量了MS402与各种溴结构域（BRD4 BD1、BD2以及其他蛋白如BRD2、BRD3、CBP、PCAF等的溴结构域）的亲和力。报告的BRD4 BD1的Ki值为77 nM。基于这些测量结果计算了其对BD2和其他溴结构域的选择性。[1]
可能采用了热位移实验来评估化合物结合和蛋白稳定性，辅助表征结合选择性。[1] |
| 细胞实验 |
使用抗体包被的磁珠从小鼠脾脏和淋巴结中纯化初始CD4+ T细胞。
对于Th17分化，细胞在板结抗CD3和抗CD28抗体以及细胞因子IL-6和TGF-β存在下被激活。每天向培养基中添加指定浓度（例如，100 nM, 500 nM）的MS402或其他抑制剂。细胞培养3-3.5天。 对于细胞内细胞因子染色，分化后的细胞在布雷菲德菌素A存在下，用佛波酯 (PMA) 和离子霉素刺激5小时。细胞固定、透化，并用针对IL-17、IFN-γ和CD4的荧光标记抗体染色，随后进行流式细胞术分析。 对于mRNA表达分析，从分化的细胞中提取总RNA，进行逆转录，并使用基因特异性引物通过定量实时PCR (qPCR) 进行分析。表达水平以内参基因 (Actin/Gapdh) 进行标准化。 进行了染色质免疫沉淀 (ChIP) 实验。细胞用甲醛交联、裂解并超声处理以剪切染色质。用抗Brd4或其他蛋白的抗体对染色质提取物进行免疫沉淀。沉淀的DNA通过qPCR (ChIP-qPCR) 分析或用于测序文库制备 (ChIP-seq)。[1] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： C57BL/6 小鼠、Rag1-/- 小鼠、T 细胞转移诱导的结肠炎模型 [1]
剂量： 10 mg/kg 给药途径： 腹腔注射 (ip)，每周两次，持续 3 周 实验结果： 体重减轻显著减少。 T 细胞转移诱导的结肠炎模型：从供体小鼠 (C57BL/6) 的脾脏和淋巴结中分离出幼稚 CD4+CD45RBhi T 细胞。将约 5 × 10⁵ 个细胞溶于无菌 PBS 中，腹腔注射到每只 Rag1−/− 受体小鼠体内。 预防性研究：从 T 细胞转移当天（第 0 周）开始，每周两次腹腔注射 MS402（10 mg/kg，溶于 PBS），持续 7 周。对照组注射 PBS 溶剂。 治疗性研究：在 T 细胞转移后第 5 周，当小鼠出现结肠炎症状（例如体重减轻）时，开始腹腔注射 MS402（10 mg/kg，每周两次），持续 3 周。 每周监测小鼠的体重变化。在研究终点（第 7 或 8 周），处死小鼠。切取结肠组织，测量其大小，并固定用于组织病理学分析（H&E 染色）。由一位对治疗方案不知情的病理学家对切片进行炎症严重程度评分。 分离结肠固有层淋巴细胞进行流式细胞术分析，以确定IL-17+和IFN-γ+ CD4+ T细胞的频率。 结肠组织还用于RNA提取和qPCR分析，以检测细胞因子和转录因子mRNA的水平。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
MS402 是一种基于环戊酮的小分子抑制剂，旨在选择性靶向 BET 蛋白的第一个溴结构域 (BD1)。
MS402 与 BRD4 BD1 复合物的晶体结构（PDB：5ULA）显示，该化合物结合于 ZA 通道，形成特异性的氢键和范德华力。与 BD1 中 Gln85 和 Ile146 的关键相互作用使其对 BD2 具有选择性。 该研究提出，选择性抑制 BET 蛋白 BD1（主要通过破坏 Brd4 功能）是阻断致病性 Th17 细胞分化的有效策略，且不会广泛损害其他 T 辅助细胞谱系，为 Th17 介导的炎症性肠病（如结肠炎）提供了一种潜在的治疗方法。[1] |
| 分子式 |
C20H19CLN2O3
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|---|---|
| 分子量 |
370.8295
|
| 精确质量 |
370.108
|
| CAS号 |
1672684-68-2
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| PubChem CID |
90718189
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
3.6
|
| tPSA |
67.4
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
26
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| 分子复杂度/Complexity |
569
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
ClC1C([H])=C(C(N([H])C2C([H])=C([H])C(=C([H])C=2[H])OC([H])([H])[H])=O)C([H])=C([H])C=1N([H])C1=C(C([H])([H])[H])C(C([H])([H])C1([H])[H])=O
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| InChi Key |
VZTVTSICPINUNG-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H19ClN2O3/c1-12-17(9-10-19(12)24)23-18-8-3-13(11-16(18)21)20(25)22-14-4-6-15(26-2)7-5-14/h3-8,11,23H,9-10H2,1-2H3,(H,22,25)
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| 化学名 |
3-chloro-N-(4-methoxyphenyl)-4-[(2-methyl-3-oxocyclopenten-1-yl)amino]benzamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~269.67 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (6.74 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.74 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.6967 mL | 13.4833 mL | 26.9665 mL | |
| 5 mM | 0.5393 mL | 2.6967 mL | 5.3933 mL | |
| 10 mM | 0.2697 mL | 1.3483 mL | 2.6967 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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