| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
LPS (10 ng/mL)-stimulated cell migration was significantly inhibited by nociceptin (1 μg/mL), but addition on its own had no effect. Nociceptin (1 nM–10 μM) inhibits LPS-mediated cell migration in a concentration-dependent manner, with maximal effects occurring at 1 and 10 μM. Nociceptin has the ability to counteract the increase in IL-1β mRNA levels caused by LPS. In U87 cells, apoptosis is induced by NNC 55-0396 and nociceptin (1 μM). Through β-arrestin 2, nociceptin (1 μM) inhibits the rise in [Ca2+]i brought on by LPS in U87 cells. In U87 cells, nociceptin inhibits the phosphorylation of ERK and PKC brought on by LPS. The transcriptional activation of NF-kB and AP-1 reporter genes by LPS is inhibited by nociceptin [1].
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
LPS (10 ng/mL) 刺激的细胞迁移被痛敏肽 (1 μg/mL) 显着抑制,但单独添加没有效果。 Nociceptin (1 nM–10 μM) 以浓度依赖性方式抑制 LPS 介导的细胞迁移,在 1 和 10 μM 时效果最大。 Nociceptin 具有抵消 LPS 引起的 IL-1β mRNA 水平增加的能力。在 U87 细胞中,NNC 55-0396 和痛敏肽 (1 μM) 诱导细胞凋亡。通过 β-arrestin 2,伤害感受肽 (1 μM) 抑制 U87 细胞中 LPS 引起的 [Ca2+]i 升高。在 U87 细胞中,伤害感受肽抑制 LPS 引起的 ERK 和 PKC 磷酸化。 LPS 对 NF-kB 和 AP-1 报告基因的转录激活可被伤害感受素 (nociceptin) 抑制 [1]。
在伤口愈合实验中,N/OFQ (1 μM) 可拮抗脂多糖(LPS, 10 ng/ml)刺激的人胶质母细胞瘤U87细胞的迁移。该抑制作用可被NOPr拮抗剂 [NPhe¹]N/OFQ(1-13)NH₂ (10 μM) 阻断。[1] 通过[甲基-³H]胸苷掺入法测定,N/OFQ (1 μM) 可阻断LPS (10 ng/ml) 诱导的U87细胞增殖。该效应也可被NOPr拮抗剂 [NPhe¹]N/OFQ(1-13)NH₂ (10 μM) 阻断。[1] 通过实时定量RT-PCR检测,N/OFQ (1 μM) 可拮抗LPS (10 ng/ml) 诱导的U87细胞中IL-1β mRNA水平的升高。[1] 不依赖于LPS,N/OFQ (1 μM) 可诱导U87细胞凋亡,表现为annexin V/PI染色阳性和caspase-3/7活性增加。该促凋亡作用可被NOPr拮抗剂 [NPhe¹]N/OFQ(1-13)NH₂ (10 μM) 阻断。[1] 使用fura-2 AM通过比率微荧光法测定,N/OFQ (1 μM) 可拮抗LPS (10 ng/ml) 诱导的U87细胞内游离钙离子浓度([Ca²⁺]i)的升高。[1] 通过Western blot分析,N/OFQ (1 μM) 可拮抗LPS (10 ng/ml) 诱导的U87细胞中PKC和ERK 1/2的磷酸化。[1] 通过双荧光素酶报告基因检测,N/OFQ (1 μM) 可抑制LPS (10 ng/ml) 介导的U87细胞中NF-κB和AP-1报告基因的转录激活。[1] 使用[¹²⁵I]-N/OFQ对U87细胞膜进行的饱和结合实验测得NOPr的Bmax为213 ± 12.5 fmol/mg蛋白,Kd为0.97 ± 0.25 nM。[1] |
| 细胞实验 |
伤口愈合实验: 将U87细胞培养至汇合,用无菌移液器吸头在单层细胞上划出伤痕。洗涤后,加入含有测试化合物的无血清培养基。18小时后通过显微镜观察并利用分析软件量化细胞向划痕区域的迁移情况。[1]
细胞增殖实验: 铺板U87细胞并处理24小时。在最后5小时加入[甲基-³H]胸苷。随后收集细胞,用三氯乙酸沉淀DNA,并通过液体闪烁计数法测定掺入的放射性。[1] 实时定量RT-PCR: 从处理的U87细胞中提取总RNA,进行反转录,并使用IL-1β和NOPr的特异性引物进行扩增。L19核糖体蛋白基因作为内参。使用ΔΔCT法计算相对mRNA水平。[1] 细胞凋亡检测(流式细胞术): 处理后的U87细胞用藻红蛋白标记的annexin V和7-氨基放线菌素D(7-AAD)染色,通过流式细胞术分析以区分活细胞、早期凋亡细胞和晚期凋亡/坏死细胞群。[1] Caspase-3/7活性测定: 在96孔板中处理U87细胞。加入caspase-3/7底物试剂,孵育后测量荧光以确定caspase活性。[1] 钙微荧光测定法: 将生长在盖玻片上的U87细胞用钙离子指示剂fura-2 AM负载。使用荧光显微镜在单细胞水平上比率监测用测试化合物刺激后的细胞内钙离子浓度([Ca²⁺]i)。[1] Western blot印迹: 裂解处理后的U87细胞,蛋白质通过SDS-PAGE分离,转膜,并用抗磷酸化PKC、磷酸化ERK1/2、总ERK1/2和β-actin的抗体进行检测。使用增强化学发光法检测信号。[1] 双荧光素酶报告基因检测: 将U87细胞与含有NF-κB或AP-1应答元件的萤火虫荧光素酶报告质粒及海肾荧光素酶对照质粒共转染。处理后,依次测量萤火虫和海肾荧光素酶活性。[1] 饱和结合实验: 将U87细胞制备的膜与浓度递增的[¹²⁵I]-N/OFQ在有或无未标记竞争剂的情况下孵育。通过过滤分离结合的放射性配体,分析特异性结合以确定受体密度(Bmax)和平衡解离常数(Kd)。[1] N/OFQ放射免疫分析(RIA): 使用特异性RIA试剂盒分析处理后的U87细胞的培养基或细胞匀浆,以定量免疫反应性N/OFQ(ir-N/OFQ)的水平。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
N/OFQ (1 μM) 处理 24 小时后可诱导人胶质母细胞瘤 U87 细胞凋亡。[1]
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
伤害感受素是一种由苯丙氨酸(Phe)、甘氨酸(Gly)、甘氨酸(Gly)、苯丙氨酸(Phe)、苏氨酸(Thr)、甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、精氨酸(Arg)、赖氨酸(Lys)、丝氨酸(Ser)、丙氨酸(Ala)、精氨酸(Arg)、赖氨酸(Lys)、亮氨酸(Leu)、丙氨酸(Ala)、天冬酰胺(Asn)和谷氨酰胺(Gln)残基按顺序连接而成的十七肽。它既是人类代谢产物,也是大鼠代谢产物。它是一种有机分子实体,属于多肽。
它是一种促痛肽,可作为伤害感受素受体的特异性内源性激动剂。 N/OFQ 是一种十七肽,与阿片肽强啡肽具有序列同源性,但与经典阿片受体的结合效力极低。[1] N/OFQ 与 NOPr 的结合会影响神经胶质细胞功能,并可能拮抗促炎反应。 [1] U87 细胞长时间暴露于 LPS (10 ng/ml) (72-96 小时) 会下调 NOPr mRNA 的表达并降低细胞膜上 NOPr 蛋白的密度。因此,在这些条件下,N/OFQ 会失去其对 LPS 介导的细胞迁移、增殖和 IL-1β mRNA 增加的抑制作用。[1] N/OFQ 对 LPS 诱导的 U87 细胞反应的抑制作用是通过 β-arrestin 2 介导的,并涉及下游信号通路成分,例如 TRAF6、c-Src、PKC 和 ERK 1/2。[1] LPS 处理会增加 U87 细胞中 N/OFQ 的含量和释放,但这种自分泌/旁分泌效应并不导致 LPS 诱导的 NOPr mRNA 下调。[1] |
| 分子式 |
C79H129N27O22
|
|---|---|
| 分子量 |
1809.03727602959
|
| 精确质量 |
1807.98
|
| CAS号 |
170713-75-4
|
| PubChem CID |
16131448
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
|
| 折射率 |
1.657
|
| LogP |
-6.33
|
| tPSA |
831.4
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
30
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
27
|
| 可旋转键数目(RBC) |
64
|
| 重原子数目 |
128
|
| 分子复杂度/Complexity |
3720
|
| 定义原子立体中心数目 |
15
|
| SMILES |
C[C@H]([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(=N)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(=N)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)N)O
|
| InChi Key |
PULGYDLMFSFVBL-SMFNREODSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C79H129N27O22/c1-41(2)33-54(72(122)95-44(5)66(116)103-56(36-59(84)110)73(123)102-53(77(127)128)27-28-58(83)109)104-70(120)49(23-13-15-29-80)100-69(119)52(26-18-32-90-79(87)88)99-65(115)43(4)96-75(125)57(40-107)105-71(121)50(24-14-16-30-81)101-68(118)51(25-17-31-89-78(85)86)98-64(114)42(3)94-61(112)39-93-76(126)63(45(6)108)106-74(124)55(35-47-21-11-8-12-22-47)97-62(113)38-91-60(111)37-92-67(117)48(82)34-46-19-9-7-10-20-46/h7-12,19-22,41-45,48-57,63,107-108H,13-18,23-40,80-82H2,1-6H3,(H2,83,109)(H2,84,110)(H,91,111)(H,92,117)(H,93,126)(H,94,112)(H,95,122)(H,96,125)(H,97,113)(H,98,114)(H,99,115)(H,100,119)(H,101,118)(H,102,123)(H,103,116)(H,104,120)(H,105,121)(H,106,124)(H,127,128)(H4,85,86,89)(H4,87,88,90)/t42-,43-,44-,45+,48-,49-,50-,51-,52-,53-,54-,55-,56-,57-,63-/m0/s1
|
| 化学名 |
(2S)-5-amino-2-[[(2S)-4-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[2-[[2-[[(2S)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]acetyl]amino]acetyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]acetyl]amino]propanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]hexanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]propanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]hexanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]propanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-5-oxopentanoic acid
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~50 mg/mL (~27.64 mM)
H2O : ≥ 50 mg/mL (~27.64 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (1.38 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (1.38 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (1.38 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 50 mg/mL (27.64 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.5528 mL | 2.7639 mL | 5.5278 mL | |
| 5 mM | 0.1106 mL | 0.5528 mL | 1.1056 mL | |
| 10 mM | 0.0553 mL | 0.2764 mL | 0.5528 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。