Notoginsenoside Ft1

别名: 三七皂苷Ft1;甲基碳酸叔丁基苯二酰亚胺酯;三七皂甙FT1;三七皂苷FT1(标准品);三七皂苷FT1(三七皂甙FT1)
目录号: V32614 纯度: ≥98%
Notoginsenoside Ft1 (Notoginsenoside Ft1) 是一种植物分离的三七皂苷,可刺激血管生成。
Notoginsenoside Ft1 CAS号: 155683-00-4
产品类别: New2
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
Notoginsenoside Ft1 (Notoginsenoside Ft1) 是一种植物分离的三七皂苷,可刺激血管生成。
生物活性&实验参考方法
体外研究 (In Vitro)
在人脐静脉内皮细胞 (HUVECs) 中,三七皂苷Ft1 (0.25-2.5 µM) 在基质胶成管实验中呈浓度依赖性刺激管状结构形成。
它浓度依赖性地增加 HUVEC 活力,最小有效浓度为 1 µM。
用 10 µM Ft1 处理可时间依赖性地诱导细胞周期从 G1 期向 S 期进展,流式细胞术分析证实了其促增殖作用。
该化合物在伤口愈合实验中也能浓度依赖性地促进 HUVEC 迁移。
Ft1 (10 µM) 时间依赖性地增加细胞培养上清液中的 VEGF 分泌,并提高 VEGF mRNA 水平。
它时间依赖性地促进 HIF-1α 蛋白从细胞质向细胞核转位,并通过染色质免疫沉淀实验证实增强了 HIF-1α 与 VEGF 启动子的结合。
蛋白质印迹分析表明,Ft1 时间依赖性地诱导 PI3K/AKT/mTOR/p70 S6 激酶通路 (PI3K, AKT, mTOR, p70 S6 激酶) 和 Raf/MEK/ERK 通路 (c-Raf, MEK1/2, ERK1/2) 中关键蛋白的磷酸化(激活)。
使用 LY294002 或 wortmannin 抑制 PI3K,或使用 PD98059 抑制 MEK1/2,可减弱 Ft1 诱导的细胞增殖、成管、VEGF mRNA 表达、VEGF 分泌和 HIF-1α 核转位。
使用 siRNA 敲低 mTOR 可减少 Ft1 诱导的成管、细胞增殖、VEGF mRNA 表达和 HIF-1α 核转位。 [1]
体内研究 (In Vivo)
在 C57BL/6 小鼠的基质胶塞实验中,皮下植入含有 三七皂苷Ft1 (每塞 1, 5, 25 µM) 的基质胶塞,7天后比对照组更红,表明有功能性血管形成。塞中的血红蛋白含量呈剂量依赖性增加,内皮标志物 CD31 的免疫组化染色显示塞内血管的数量和大小呈剂量依赖性增加。
在小鼠耳部伤口愈合模型 (BALB/c 小鼠) 中,腹腔注射 Ft1 (0.25, 2.5, 25 mg/kg,每隔一天一次) 持续 28 天,与对照组相比加速了伤口闭合。Ft1 处理组的伤口孔径以剂量依赖性的方式显著减小。此外,在治疗小鼠耳部组织的伤口边缘愈合区域,VEGF mRNA 表达升高。 [1]
细胞实验
细胞活力通过比色法测定。将 HUVECs 接种于 96 孔板并贴壁。血清浓度降低后,用不同浓度的 三七皂苷Ft1 处理细胞 48 小时。加入四氮唑盐试剂,活细胞将其还原为甲臜。溶解甲臜结晶,在 570 nm 处测量光密度,参考波长为 630 nm,以量化细胞活力。[1]
通过流式细胞术进行细胞周期分析。处理 HUVECs 后,收集细胞并用乙醇固定。固定后的细胞用碘化丙啶和 RNase A 溶液染色、孵育,然后通过流式细胞仪分析,以确定处于 G0-G1、S 和 G2-M 期的细胞百分比。[1]
对于迁移实验,在明胶包被的板中生长的 HUVECs 汇合单层被划痕以制造损伤。清洗后,细胞在含有不同浓度 Ft1 的培养基中孵育。24 小时后使用倒置显微镜拍摄划痕区域的图像,以评估细胞向划痕区域的迁移情况。[1]
成管实验通过将 HUVECs 接种到铺有基质胶的 96 孔板中,并在含有 Ft1 的培养基中进行。孵育 4 小时后,使用倒置显微镜拍照。以盲法手动计数形成完整网络的管状结构,以量化血管生成活性。[1]
使用酶联免疫吸附测定 (ELISA) 定量 VEGF 分泌。培养 HUVECs 并用 Ft1 处理。收集细胞培养上清液并加入抗体包被的板中。经过孵育和洗涤步骤后,使用检测系统,并在 450 nm 处测量光密度。根据标准曲线确定 VEGF 浓度。[1]
对于基因沉默,根据制造商方案,使用基于脂质的转染试剂将 mTOR 特异性 siRNA 或对照 siRNA 转染到 HUVECs 中,以敲低 mTOR 表达。[1]
进行蛋白质印迹分析以检测蛋白表达和磷酸化。处理后,裂解细胞,蛋白质通过 SDS-PAGE 分离,转移到膜上,并用针对目标蛋白或其磷酸化形式的特异性一抗孵育,随后与辣根过氧化物酶标记的二抗孵育。使用适当的化学发光底物检测信号。[1]
使用基于酚的试剂从处理过的细胞中提取总 RNA。使用逆转录酶从 RNA 合成 cDNA。使用特异性引物通过 PCR 扩增 VEGF 和 GAPDH mRNA 水平。通过琼脂糖凝胶电泳可视化 PCR 产物。[1]
使用染色质免疫沉淀实验研究蛋白质-DNA 相互作用。处理 HUVECs 后,交联并分离染色质。将染色质剪切,并使用针对 HIF-1α 的抗体或对照 IgG 进行免疫沉淀。纯化沉淀的 DNA,并使用针对 VEGF 启动子区域的特异性引物通过 PCR 进行分析,以评估 HIF-1α 的结合情况。[1]
动物实验
在Matrigel胶塞实验中,将4°C的液态Matrigel与肝素和三七皂苷Ft1混合,最终浓度分别为1、5或25 µM。取0.5 ml该混合物皮下注射到C57BL/6小鼠的腹部。7天后,处死小鼠,取出Matrigel胶塞进行血红蛋白含量分析和免疫组织化学染色。[1] 在伤口愈合研究中,使用冲孔器在BALB/c小鼠双耳中央制作一个全层伤口(直径1.5 mm的孔)。每隔一天,小鼠腹腔注射0.25、2.5或25 mg/kg剂量的Ft1。在28天内定期使用游标卡尺测量伤口直径。实验结束时,处死小鼠,并收集伤口边缘的耳组织进行 VEGF mRNA 分析。[1]
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
在为期 28 天的小鼠耳部伤口愈合研究中,接受 Notoginsenoside Ft1 治疗(剂量高达 25 mg/kg,隔日一次)的小鼠与对照组小鼠的体重没有显著差异,这表明在实验条件下,这些剂量没有明显的全身毒性。[1]
参考文献

[1]. Notoginsenoside Ft1 promotes angiogenesis via HIF-1α mediated VEGF secretion and the regulation of PI3K/AKT and Raf/MEK/ERK signaling pathways. Biochem Pharmacol. 2012 Sep 15;84(6):784-92.

[2]. Platelet P2Y?? receptors are involved in the haemostatic effect of notoginsenoside Ft1, a saponin isolated from Panax notoginseng. Br J Pharmacol. 2014 Jan;171(1):214-23.

[3]. Notoginsenoside Ft1 activates both glucocorticoid and estrogen receptors to induce endothelium-dependent, nitric oxide-mediated relaxations in rat mesenteric arteries. Biochem Pharmacol. 2014 Mar 1;88(1):66-74.

[4]. p38 MAPK and ERK1/2 pathways are involved in the pro-apoptotic effect of notoginsenoside Ft1 on human neuroblastoma SH-SY5Y cells. Life Sci. 2014 Jul 17;108(2):63-70.

其他信息
已有研究报道在积雪草中发现了人参皂苷Ft1。
人参皂苷Ft1是从三七(Panax notoginseng)的叶片中分离得到的皂苷,三七是一种传统上用于东亚治疗创伤的草药。
该研究提出,Ft1通过增加HIF-1α的核转位来促进血管生成和伤口愈合,从而增强VEGF的转录和分泌。这一过程是通过激活PI3K/AKT/mTOR/p70 S6激酶和Raf/MEK/ERK信号通路介导的,其中mTOR是关键的整合点。
这些发现为三七在伤口治疗中的传统应用提供了一种潜在的机制解释,并提示Ft1有望开发成为一种血管生成治疗药物。[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C47H80O17
分子量
917.13
精确质量
916.539
CAS号
155683-00-4
PubChem CID
91973814
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.4±0.1 g/cm3
沸点
997.8±65.0 °C at 760 mmHg
闪点
557.2±34.3 °C
蒸汽压
0.0±0.6 mmHg at 25°C
折射率
1.607
LogP
8.22
tPSA
278
氢键供体(HBD)数目
11
氢键受体(HBA)数目
17
可旋转键数目(RBC)
12
重原子数目
64
分子复杂度/Complexity
1630
定义原子立体中心数目
24
SMILES
CC(=CCC[C@](C)([C@H]1CC[C@@]2([C@@H]1[C@@H](C[C@H]3[C@]2(CC[C@@H]4[C@@]3(CC[C@@H](C4(C)C)O[C@H]5[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O5)CO)O)O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O[C@H]7[C@@H]([C@H]([C@@H](CO7)O)O)O)C)C)O)C)O)C
InChi Key
LLXVPTXOKTYXHU-UGGLCNOCSA-N
InChi Code
InChI=1S/C47H80O17/c1-22(2)10-9-14-47(8,58)23-11-16-46(7)31(23)24(50)18-29-44(5)15-13-30(43(3,4)28(44)12-17-45(29,46)6)62-41-38(35(55)33(53)26(19-48)60-41)64-42-39(36(56)34(54)27(20-49)61-42)63-40-37(57)32(52)25(51)21-59-40/h10,23-42,48-58H,9,11-21H2,1-8H3/t23-,24+,25+,26+,27+,28-,29+,30-,31-,32-,33+,34+,35-,36-,37+,38+,39+,40-,41-,42-,44-,45+,46+,47+/m0/s1
化学名
(2S,3R,4S,5R)-2-[(2S,3R,4S,5S,6R)-2-[(2R,3R,4S,5S,6R)-4,5-dihydroxy-2-[[(3S,5R,8R,9R,10R,12R,13R,14R,17S)-12-hydroxy-17-[(2R)-2-hydroxy-6-methylhept-5-en-2-yl]-4,4,8,10,14-pentamethyl-2,3,5,6,7,9,11,12,13,15,16,17-dodecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl]oxy]-6-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxy-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxane-3,4,5-triol
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~6.67 mg/mL (~7.27 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 0.67 mg/mL (0.73 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 6.7 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 0.67 mg/mL (0.73 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 6.7mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20%SBE-β-CD生理盐水中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 0.67 mg/mL (0.73 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 6.7 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。


请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.0904 mL 5.4518 mL 10.9036 mL
5 mM 0.2181 mL 1.0904 mL 2.1807 mL
10 mM 0.1090 mL 0.5452 mL 1.0904 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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