| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
P62-mediated inducer of mitophagy (10 μM; 0, 1, 3, 6, 24 hours) stabilizes Nrf2, and increases P62 expression (10 μM; 9 hours) to initiate mitophagy [1]. In MEFs, PINK1/Parkin signaling pathway is downstreamly acted upon by P62-mediated mitophagy (10 μM; 24 hours) [1]. Polyubiquitination and conjugation within the mitochondria are positively impacted by P62-mediated mitophagy inducers [1].
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| 体外研究 (In Vitro) |
P62 介导的线粒体自噬诱导剂（10 μM；0、1、3、6、24 小时）可稳定 Nrf2，并增加 P62 表达（10 μM；9 小时）以启动线粒体自噬 [1]。在 MEF 中，PINK1/Parkin 信号通路下游受到 P62 介导的线粒体自噬（10 μM；24 小时）的作用 [1]。线粒体内的多泛素化和缀合受到 P62 介导的线粒体自噬诱导剂的积极影响 [1]。
PMI (10 µM) 稳定了小鼠胚胎成纤维细胞 (MEFs) 中的 Nrf2 蛋白水平，在处理后 6 小时达到峰值，并在 24 小时保持升高。[1] PMI (10 µM) 随时间增加小鼠 Hepatic1c7 细胞中 Nrf2 依赖性基因产物血红素加氧酶-1 (HO-1) 和 NAD(P)H 醌脱氢酶 1 (NQO1) 的表达，胞质 HO-1 在 6 小时达到峰值，NQO1 在 24 小时达到峰值。[1] PMI 诱导 NQO1 酶活性，其 CD (使活性加倍的浓度) 为 0.6 µM，在 10 µM 时最大诱导倍数为 3.7 倍。[1] PMI (10 µM) 处理 9 小时后，通过定量 RT-PCR 测量，显著增加了 MEFs 中的 p62 mRNA 水平。[1] PMI (10 µM, 24 小时) 通过蛋白质印迹显示，与未处理的对照组相比，使 MEFs 中的胞质 P62 蛋白水平增加了 1.8 倍。[1] PMI (10 µM, 24 小时) 在不存在或存在自噬抑制剂巴弗洛霉素 A1 的情况下，均未增加 MEFs 胞质部分中 LC3B-I 向 LC3B-II 的转化，表明它不触发一般的巨自噬。[1] PMI (10 µM, 24 小时) 通过线粒体 F1-FO-ATP 合酶 β-亚基的免疫荧光染色观察，减少了 MEFs 中线粒体网络的大小。[1] PMI (10 µM, 24 小时) 通过蛋白质印迹显示，降低了 MEFs 中线粒体内膜蛋白 MTCO1 (细胞色素 c 氧化酶亚基 I) 的水平。[1] PMI (10 µM, 24 小时) 通过蛋白质印迹显示，增加了野生型 (WT) MEFs 线粒体部分中 LC3-II 的水平，但在 p62-/- MEFs 中没有增加。[1] PMI (10 µM, 24 小时) 通过高分辨率共聚焦成像测量，在基础条件下显著增加了 WT MEFs 中 LC3B 与线粒体的共定位。这种增加在 Nrf2-/- MEFs 中被消除。[1] PMI (10 µM, 24 小时) 通过共聚焦成像测量，在基础条件下显著增加了 WT MEFs 中 P62 与线粒体网络的共定位。[1] PMI 未诱导 MEFs 中 Parkin 向线粒体的转位，这与线粒体解偶联剂 FCCP 相反。[1] PMI (10 µM, 24 小时) 在瞬时敲低 Parkin 的 MEFs 和缺乏 PINK1 的 SH-SY5Y 细胞 (pink1 敲除) 中，增加了 LC3 向线粒体的募集，表明其作用不依赖于功能完整的 PINK1/Parkin 通路。[1] PMI (10 µM, 24 小时) 增加了 MEFs 线粒体部分中的多聚泛素化水平。[1] PMI (10 µM, 24 小时) 通过 TMRM 荧光测量，增加了 MEFs 中的静息线粒体膜电位 (ΔΨm)。FCCP 诱导的去极化速率未受影响。[1] PMI (10 µM, 24 小时) 通过 MitoSOX 荧光测量，适度增加了 MEFs 中的线粒体超氧化物产生 (相对于对照 1.24 倍)，但未改变通过二氢乙锭 (DHE) 测量的胞质 ROS 水平。[1] |
| 酶活实验 |
NQO1 酶活性测定： 将 Hepatic1c7 细胞接种于 96 孔板中。12 小时后，用 PMI 或载体 (终 DMSO 浓度 0.1%) 处理细胞并孵育 24 小时。弃去培养基，用含有 0.1% Tween-20 和 2 mM EDTA (pH 7.5) 的裂解缓冲液裂解细胞。向每孔加入含有 Tris 缓冲液、BSA、Tween-20、FAD、葡萄糖-6-磷酸 (G6P)、NADP、G6P 脱氢酶、MTT 和甲萘醌的酶反应混合物。室温孵育 5 分钟后，加入终止液 (SDS)。测量 595 nm 处的吸光度。使用不含细胞的孔进行背景校正。计算光密度比值 (化合物处理/对照) 以确定 NQO1 活性的诱导程度。测定使对照活性加倍 (CD) 的浓度。[1]
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| 细胞实验 |
RT-PCR[1]
细胞类型： MEF 测试浓度： 10 µM 孵育时间： 9 小时 实验结果：p62 mRNA 水平显着增加。 免疫荧光[1] 细胞类型： MEF 测试浓度： 10 µM 孵育时间： 24 小时 实验结果： 证明 P62 线粒体募集的诱导与 Parkin 无关。 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型： MEF 测试浓度： 10 µM 孵育时间： 0、1、3、6、24 小时 实验结果：Nrf2 水平在 6 小时后达到最大值，并在24 小时。 线粒体膜电位 (ΔΨm) 测量： 将 MEFs 在记录培养基中用 100 nM TMRM 负载 30 分钟，温度 37°C。洗涤细胞并使用共聚焦显微镜成像。记录基础荧光后，加入 1 µM FCCP 诱导去极化。选择线粒体区域，计算 TMRM 荧光强度。[1] 活性氧 (ROS) 分析： 对于胞质 ROS，将细胞在记录培养基中用 5 µM 二氢乙锭 (DHE) 负载 30 分钟，温度 37°C。对于线粒体超氧化物，在相同条件下用 5 µM MitoSOX Red 负载细胞。洗涤细胞并使用共聚焦显微镜通过连续记录至少 10 分钟来测量荧光强度。选择线粒体区域进行荧光定量。[1] 亚细胞分级 (线粒体分离)： 细胞在冷的等渗蔗糖缓冲液中通过针头反复抽提裂解。通过 800 x g 离心 5 分钟 (4°C) 去除未裂解的细胞和细胞核。上清液在 10,000 x g 离心 10 分钟 (4°C) 以沉淀线粒体。所得上清液收集为胞质部分。线粒体沉淀用等渗缓冲液洗涤一次，再次离心，然后在含有 Triton X-100 的裂解缓冲液中裂解。[1] 蛋白质印迹： 定量蛋白浓度。等量蛋白质通过 SDS-PAGE 分离并转移至硝酸纤维素膜上。封闭膜后，在 4°C 与一抗 (例如，抗 LC3、抗 P62、抗泛素、抗 parkin、抗 MTCO1，以及抗 β-肌动蛋白/微管蛋白作为上样对照) 孵育过夜。洗涤后，膜与过氧化物酶偶联的二抗孵育。使用增强化学发光法显影，并使用 ImageJ 软件分析条带密度。[1] 免疫荧光与共定位分析： 将生长在盖玻片上的细胞固定、透化和封闭。在封闭液中与一抗 (例如，抗 β-亚单位用于标记线粒体，抗 P62，抗 LC3，抗 parkin) 在 4°C 孵育过夜。洗涤后，与荧光团偶联的二抗孵育。用含 DAPI 的封片剂封片。获取高分辨率共聚焦图像。使用适当的软件量化标记物之间的共定位程度 (例如，LC3 与线粒体)，计算共定位系数或归一化荧光值。[1] 定量实时 PCR (qRT-PCR)： 从培养细胞中提取并纯化总 RNA。从 1 µg 总 RNA 合成 cDNA。使用 SYBR Green 检测和基因特异性引物，在实时 PCR 系统上扩增基因转录本 (例如，p62/Sqstm1)。使用绝对定量法，根据已知量的 PCR 产物生成标准曲线。基因表达水平以拷贝数表示。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在实验所用浓度（例如 10 µM）下，未观察到对细胞的明显毒性作用。[1]
该化合物的设计旨在使其缺乏共价结合基序，从而降低其细胞毒性，使其低于共价 Nrf2 诱导剂（如萝卜硫素，其在 MEF 细胞中浓度高于 10 µM 时具有细胞毒性）。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
PMI 是一种线粒体自噬的药理学诱导剂，其作用机制是通过稳定转录因子 Nrf2 来上调自噬衔接蛋白 P62，而非通过破坏线粒体膜电位。[1]
其作用机制位于经典 PINK1/Parkin 通路的下游，并且可以独立于该通路发挥作用。[1] PMI 是一种原型工具化合物，可用于研究线粒体自噬机制，避免了 FCCP 等线粒体去极化剂带来的混杂性非特异性效应。[1] PMI 的化学名称为 1-(3-碘苯基)-4-(3-硝基苯基)-1,2,3-三唑。[1] |
| 分子式 |
C14H9IN4O2
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|---|---|
| 分子量 |
392.151334524155
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| 精确质量 |
391.977
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| CAS号 |
1809031-84-2
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| PubChem CID |
122190591
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| LogP |
3.5
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| tPSA |
76.5
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
21
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| 分子复杂度/Complexity |
379
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
N1(C2=CC=CC(I)=C2)C=C(C2=CC=CC([N+]([O-])=O)=C2)N=N1
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| InChi Key |
LSVWEYNSNZJEGB-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C14H9IN4O2/c15-11-4-2-5-12(8-11)18-9-14(16-17-18)10-3-1-6-13(7-10)19(20)21/h1-9H
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| 化学名 |
1-(3-iodophenyl)-4-(3-nitrophenyl)triazole
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~8.33 mg/mL (~21.24 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (3.19 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 12.5 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (3.19 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 12.5 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5500 mL | 12.7502 mL | 25.5004 mL | |
| 5 mM | 0.5100 mL | 2.5500 mL | 5.1001 mL | |
| 10 mM | 0.2550 mL | 1.2750 mL | 2.5500 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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