Cdk4/cyclin D3 (IC50 = 9 nM); Cdk4/cyclin D1 (IC50 = 11 nM); Cdk6/cyclin D2 (IC50 = 16 nM); DYRK1A (IC50 = 2000 nM); MAPK (IC50 = 8000 nM)

体外活性：PD 0332991 对 CDK4/6 表现出绝对选择性，而对其他 CDK 几乎没有或没有活性。 PD 0332991 可有效降低 MDA-MB-435 乳腺癌细胞中 Ser780 和 Ser795 的 Rb 磷酸化，IC50 分别为 66 nM 和 63 nM。 PD 0332991 是一种有效的细胞生长抑制剂，通过阻止细胞进入 S 期来抑制 DNA 复制。 PD 0332991 抑制胸苷掺入 Rb 阳性人乳腺癌（例如 MDA-MB-435、MCF-7）、结肠癌（H1299）、肺癌（Colo-205）以及人白血病（CRRF-CEM）的 DNA和 K562），IC50 值范围为 0.04-0.17 μM。 PD 0332991显着增加了G1期MDA-MB-453的百分比。 PD 0332991 抑制循环 CD138+ 原代骨髓瘤细胞、未转化的原代 B 细胞、MM1.S 和 CAG HMCL 细胞系中 Rb 的磷酸化，IC50 分别为 <0.1 μM、0.05 μM 和 60-70 nM。 PD 0332991 治疗还诱导 CD138+ 原代骨髓瘤和未转化的原代 B 细胞的 G1 期停滞。 PD 0332991 诱导 MM1.S G1 期阻滞，IC50 约为 0.05 μM。 PD 0332991 优先抑制管腔雌激素受体阳性（包括 HER2 阳性）人乳腺癌细胞系的增殖。 PD 0332991 在大多数敏感品系中增加 pRb 和细胞周期蛋白 D1 的基因表达，并降低 CDKN2A (p16) 的基因表达。 PD 0332991 增强对 ER 阻断具有条件抗性的细胞系对他莫昔芬的敏感性。激酶测定：用于 IC50 测定和动力学评估的 CDK 测定在 96 孔滤板中进行。所有CDK-细胞周期蛋白激酶复合物均通过杆状病毒感染在昆虫细胞中表达并纯化。检测的底物是与 GST 融合的 pRb 片段（氨基酸 792-928）（GST•RB-Cterm）。总反应体积为 0.1 mL，含有最终浓度为 20 mM Tris-HCl、pH 7.4、50 mM NaCl、1 mM 二硫苏糖醇、10 mM MgCl2 25 μM ATP（对于 CDK4-细胞周期蛋白 D1、CDK6-细胞周期蛋白 D2 和 CDK6- cyclin D3) 含有 0.25 μCi 的 [γ-32P]ATP、20 ng 酶、1 μg GST•RB-Cterm 和适当稀释的抑制剂。除[γ-32P]ATP 之外的所有组分均添加至孔中，并置于平板混合器上 2 分钟。加入[γ-32P]ATP开始反应，25℃孵育15分钟。加入0.1 mL 20%三氯乙酸终止反应，并将板在4℃下保持至少1小时以使底物沉淀。然后用 0.2 mL 10% 三氯乙酸洗涤孔五次，并用 β 板计数器测定放射性掺入。细胞测定：将细胞（人乳腺癌细胞 MDA-MB-435）以每孔 5,000 至 10,000 个细胞一式两份接种在 24 孔板中。电镀后第二天，添加不同浓度的 PD 0332991。没有药物的对照孔也被接种。孵育结束时，将细胞用胰蛋白酶消化并置于 Isotone 溶液中，并立即使用 Coulter Z2 颗粒计数器进行计数。

PD 0332991(150 mg/kg) 可快速消退 Colo-205 结肠癌异种移植物并延迟相应的肿瘤生长。 PD 0332991 (150 mg/kg) 可诱导 MDA-MB-435 乳腺癌完全肿瘤停滞和细胞死亡。 PD 0332991 (150 mg/kg) 还在携带 SF-295 胶质母细胞瘤异种移植物的小鼠以及 ZR-75-1 乳腺癌和 PC-3 前列腺肿瘤模型中诱导显着的肿瘤消退（完全抑制肿瘤生长）。 PD 0332991 (150 mg/kg) 在整个 24 小时内抑制 MDA-MB-435 乳腺癌中的 Rb Ser780 磷酸化。 PD 0332991 (150 mg/kg) 下调 Colo-205 癌异种移植物中四种 E2F 调节基因 CDC2、CCNE2、TK1 和 TOP2A 的表达。 PD 0332991 还可以快速抑制骨髓瘤肿瘤的生长。

CDK 测定在 96 孔滤板中进行，用于动力学分析和 IC50 计算。通过用杆状病毒感染昆虫细胞，所有 CDK-细胞周期蛋白激酶复合物都得到表达和纯化。与 GST 融合的 pRb 的一部分（氨基酸 792-928）用作测定的底物 (GST•RB-Cterm)。 20 mM Tris-HCl，pH 7.4，50 mM NaCl，1 mM 二硫苏糖醇，10 mM MgCl2，25 μM ATP（用于 CDK4-细胞周期蛋白 D1、CDK6-细胞周期蛋白 D2 和 CDK6-细胞周期蛋白 D3）、0.25 μCi [γ-32P ]ATP、20 ng 酶、1 μg GST•RB-Cterm 和适当稀释的抑制剂包含在 0.1 mL 的总反应体积中。将除 [γ-32P]ATP 之外的所有成分添加到孔中后，将它们放在平板混合器上两分钟。添加 [γ-32P]ATP 启动反应，然后在 25°C 下孵育 15 分钟。为了使底物沉淀，通过添加 0.1 mL 20% 三氯乙酸并将板在 4°C 下保持至少 1 小时来终止反应。用 0.2 mL 10% 三氯乙酸洗五次孔后，使用 β 板计数器测量放射性掺入。

在 24 孔板中，细胞一式两份接种，每孔 5,000-10,000 个细胞。电镀后第二天添加不同浓度的 PD 0332991。还接种无药物对照孔。孵育后，将胰蛋白酶处理的细胞添加到等酮溶液中，立即使用 Coulter Z2 颗粒计数器进行计数。

Human colon carcinoma xenografts Colo-205
150 mg/kg
o.p. injection every day

[1]. Mol Cancer Ther . 2004 Nov;3(11):1427-38.

[2]. Cancer Res . 2006 Aug 1;66(15):7661-7.

[3]. Breast Cancer Res . 2009;11(5):R77.

[4]. J Biol Chem . 2001 May 18;276(20):16617-23.

C26H35N7O6S

573.66

573.23695304

C, 54.44; H, 6.15; N, 17.09; O, 16.73; S, 5.59

827022-33-3

Palbociclib;571190-30-2;Palbociclib monohydrochloride;827022-32-2;Palbociclib dihydrochloride

Solid powder

CC1=C(C(=O)N(C2=NC(=NC=C12)NC3=NC=C(C=C3)N4CCNCC4)C5CCCC5)C(=O)C.C(CS(=O)(=O)O)O

LYYVFHRFIJKPOV-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C24H29N7O2.C2H6O4S/c1-15-19-14-27-24(28-20-8-7-18(13-26-20)30-11-9-25-10-12-30)29-22(19)31(17-5-3-4-6-17)23(33)21(15)16(2)32;3-1-2-7(4,5)6/h7-8,13-14,17,25H,3-6,9-12H2,1-2H3,(H,26,27,28,29);3H,1-2H2,(H,4,5,6)

6-acetyl-8-cyclopentyl-5-methyl-2-[(5-piperazin-1-ylpyridin-2-yl)amino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-one;2-hydroxyethanesulfonic acid

PD0332991 isethionate salt; PD-0332991; PD 0332991; Palbociclib isethionate salt; Trade name: Ibrance

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

Solubility in Formulation 1: ≥ 1 mg/mL (1.74 mM) (saturation unknown) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution.
For example, if 1 mL of working solution is to be prepared, you can add 100 μL of 10.0 mg/mL clear DMSO stock solution to 900 μL of 20% SBE-β-CD physiological saline solution and mix evenly.
Preparation of 20% SBE-β-CD in Saline (4°C，1 week): Dissolve 2 g SBE-β-CD in 10 mL saline to obtain a clear solution.

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Solubility in Formulation 2: Saline: 30 mg/mL (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one).
Preparation of saline: Dissolve 0.9 g of sodium chloride in 100 mL ddH₂ O to obtain a clear solution.

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。